组织微阵列技术分析妊高征胎盘组织中缺氧诱导因子-1α蛋白的表达

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中蛋白的表达情况.方法:应用组织芯片技术,通过免疫组织化学方法分别检测妊高征患者和健康孕妇胎盘组织中HIF-1α蛋白的表达.结果:与正常胎盘组织相比,妊高征胎盘组织中HIF-1α的蛋白表达明显增高 (P<0.05).结论:HIF-1α可能在蛋白水平上参与了妊高征发病及病理生理过程.     

缺氧诱导因子-1αmRNA和蛋白在妊高征胎盘组织中表达定位

目的 :探讨缺氧诱导因子 1α( HIF- 1α)在妊高征胎盘组织细胞中的定位。方法 :收取 1 0例妊高征孕妇的胎盘组织 ,应用免疫组织化学方法 ,观察 HIF- 1α蛋白在妊高征胎盘组织细胞中的定位表达 ;应用原位杂交的方法 ,观察 HIF- 1α m RNA在妊高征胎盘组织细胞中的定位表达。结果 :在妊高征胎盘中 ,HIF- 1α蛋白主要表达在合体滋养细胞、血管内皮细胞的胞核和胞浆中 ;HIF- 1 α m RNA主要表达在合体滋养细胞和血管内皮细胞的胞浆中。结论 :HIF- 1 α在妊高征胎盘组织中表达主要集中在胎盘的合体滋养细胞和血管内皮细胞。妊高征胎盘中合体滋养细胞和血管内皮细胞表达 HIF- 1 α,可能与妊高征的发病及病理生理有关     

妊高征胎盘组织表达flt1蛋白的研究

目的: 研究fm 样酪氨酸激酶1(thefms liketyrosinekinase,flt1)蛋白在妊娠高血压综合征(妊高征)胎盘组织中的表达,探讨其在妊高征发病机制中的作用.方法: 应用蛋白免疫印迹技术(WesternBlotting)检测18例妊高征胎盘组织(实验组)和18例正常孕妇胎盘组织(对照组)中flt1蛋白的表达量,并比较两者之间的差异.应用免疫组化技术对上述两组标本中flt1蛋白的表达进行定位.结果: flt1蛋白在妊高征胎盘组织和正常孕妇胎盘组织中均有表达,在妊高征胎盘组织中的表达量高于正常孕妇,两者比较有显著性差异(P 0. 01).免疫组化染色结果显示flt1蛋白的表达部位在滋养细胞和血管内皮细胞的胞质、胞核,两组的表达部位无明显差异.结论:flt1蛋白在妊高征胎盘组织中高表达,可能与妊高征发病密切相关,它既表达于内皮细胞,又表达于滋养细胞,可能从多个途径参与妊高征的病理生理过程.     

妊高征患者胎盘组织VEGF和bax的表达及其相互关系

目的　观察血管内皮生长因子 (VEGF)和促凋亡基因bax在妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )患者胎盘组织中的表达及两者之间的相关性。方法　用SP免疫组化染色法检测 4 5例妊高征胎盘组织 (妊高征组 )和 2 0例正常妊娠胎盘组织 (对照组 )中VEGF和bax的表达。结果　在中、重度妊高征胎盘组织中VEGF表达明显低于轻度妊高征组和正常对照组 (P <0 0 5 ) ;bax在中、重度妊高征胎盘组织中表达明显高于轻度妊高征组和正常对照组 (P <0 0 5 ) ;胎盘组织中VEGF的表达水平和bax的表达水平呈负相关。结论　妊娠期胎盘滋养层细胞的促凋亡基因bax表达上升和VEGF表达下调之间密切相关 ,并参与了妊高征的发生、发展。     

血管内皮生长因子在妊娠高血压综合征患者胎盘和蜕膜组织中的表达

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在正常妊娠及妊娠高血压综合征 (妊高征 )孕妇胎盘和蜕膜组织中的表达及意义。方法　采用免疫组织化学染色法检测 3 5例正常孕妇 (对照组 ) ,40例妊高征患者 (其中轻、中、重度妊高征患者分别为 12 ,17和 11例 )胎盘及蜕膜组织中VEGF的表达情况并记数微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)。结果　胎盘绒毛滋养叶细胞和蜕膜组织中均有VEGF阳性表达 ,胎盘组织的表达强度高于蜕膜组织。轻度妊高征与对照组比较 ,胎盘组织VEGF表达强度无显著性差异 ;而中度和重度妊高征与对照组相比 ,VEGF表达强度明显降低 ,差异具有统计学意义 (P <0 0 5 )。各组孕妇蜕膜组织中VEGF的表达强度无显著性差异。妊高征组胎盘组织MVD明显低于正常妊娠组 (P <0 0 5 )。结论　妊高征患者胎盘组织VEGF表达和MVD明显降低 ,可能在妊高征的发病中起着重要的作用     

妊娠高血压综合征患者与正常妊娠妇女胎盘组织蛋白质双向凝胶电泳分析

目的：观察妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中蛋白质的差异表达，筛选出与该病相关的特异性表达的蛋白质分子，从而为阐明该病发病机制奠定基础。方法：应用双向电泳技术，对10例正常妊娠妇女及10例妊高征患者胎盘组织总蛋白质进行分离，得到蛋白质图谱。利用相关软件进行图像分析，筛选出妊高征患者差异表达的蛋白质，并利用质谱指纹对差异蛋白加以分析。结果：提取胎盘组织总蛋白，运用双向凝胶电泳方法展示了妊高征患者胎盘中的差异蛋白，电泳图谱显示共有505种蛋白质，其中，有16种蛋白从质和量上在妊高征患者胎盘组织中表达增高。结论：妊高征患者胎盘组织中存在一些差异蛋白，这些蛋白质分子与磷脂酶C有关，PLC介导的信号传导途径在妊高征的发生过程中可能有重要作用；双向电泳是适合筛选差异蛋白的技术。     

妊娠高血压综合征患者血清肿瘤坏死因子-α水平及胎盘组织缺氧诱导因子的表达

目的了解妊娠高血压综合征（妊高征）患者血清肿瘤坏死因子（TNF-α）的水平变化及胎盘组织缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）的表达情况,探讨二者在妊高征发病中的作用及相互关系。方法采用放射免疫法测定107例妊高征患者（轻度33例、中度34例、重度40例）及100例正常孕妇的血清TNF-α水平。胎盘娩出后取胎盘组织经过固定、切片,采用免疫组化法检测妊高征患者和正常孕妇胎盘组织中缺氧诱导因子-1α的阳性表达率。结果妊高征患者和正常孕妇血清TNF-α水平间差别有显著性意义（P〈0.01）,轻度妊高征患者与正常孕妇血清TNF-α水平间差别无显著性意义（P〉0.05）。妊高征患者与正常孕妇胎盘组织缺氧诱导因子-1α的阳性表达率间差别有显著性意义（P〈0.05）,且其阳性表达率随妊高征患者的病情加重而升高。结论（1）妊高征患者血清TNF-α水平及HIF-1α明显高于正常孕妇,且随妊高征患者病情的加重,TNF-α水平和HIF-1α阳性表达率明显升高,说明二者在妊高征发病中起重要作用。（2）血清TNF-α与胎盘组织缺氧诱导因子-1α呈正相关。     

妊娠高血压综合征患者血浆及胎盘绒毛组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达

目的探讨肿瘤坏死因子-α在妊高征发病机制中的作用.方法采用放射免疫测定方法检测59例妊高征患者和21例正常妊娠妇女血浆TNF-α的含量.用免疫组织化学法,检测妊高征患者及正常妊娠胎盘绒毛组织TNF-α的表达.结果妊高征组血浆TNF-α水平比正常妊娠组增高,P＜0.05.且随妊高征病情的加重呈上升趋势.但轻度妊高征与正常妊娠组之间差异无显著性,P＞0.05.中、重度妊高征与正常妊娠组比较差异显著,P＜0.05.胎盘绒毛合体滋养细胞有TNF-α的表达,且妊高征组胎盘绒毛组织合体滋养细胞TNF-α的表达明显高于正常对照组.结论TNF-α在妊高征的发病中起重要作用.     

妊高征患者母血及胎盘组织中卵泡休止素水平变化的研究

目的 :研究妊高征患者母血及胎盘组织中卵泡休止素 (FS)水平变化的临床意义。方法 :采用固相双夹心酶联免疫吸附 (ELISA)法测定妊高征组 (轻度 4例、中度 4例、重度 12例 )及正常妊娠组 (34例 )孕妇血清以及胎盘组织 (两组各 10例 )FS含量。结果 :妊高征组血清FS水平低于正常妊娠组 (P <0 .0 0 1) ;重度妊高征组血清FS水平低于轻中度妊高征组 (P<0 .0 5 ) ;妊高征组胎盘组织FS含量低于正常妊娠组 (P<0 .0 0 1) ;两组血清FS水平与胎盘组织FS含量呈显著的直线相关关系 (P <0 .0 5 )。结论 :FS下降可能参与妊高征的发生、发展。血清FS值可与其它指标相结合用于胎盘功能的评价     

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中HIF-1α和HSP70的表达及其意义

目的：探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和热休克蛋白70（HSP70）在妊娠高血压综合征（妊高征）患者胎盘组织中的表达,阐明两者在妊高征患者胎盘组织中表达的临床意义。方法：收集妊高征患者胎盘组织22例（妊高征组）和正常孕妇胎盘组织18例（对组照）,采用免疫组织化学法检测2组孕妇胎盘组织中HIF-1α和HSP70的表达情况,分析两者阳性表达率在妊高征患者和正常孕妇胎盘组织中的差异及其在妊高征患者胎盘组织中的关系。结果：妊高征组患者和对照组正常孕妇胎盘组织中HIF-1α阳性表达率分别为81.8%和38.9%,妊高征组患者胎盘组织中HIF-1α阳性表达率明显高于对照组（χ²=7.785,P=0.005）;妊高征组患者和对照组正常孕妇胎盘组织中HSP70阳性表达率分别为90.9%和55.6%,妊高征组患者胎盘组织中HSP70阳性表达率明显高于对照组（χ²=6.599,P=0.010）。妊高征组患者中18例HIF-1α阳性表达的胎盘组织全部HSP70表达阳性（100.0%）,而4例HIF-1α阴性表达的胎盘组织有2例HSP70表达阴性（50.0%）,两者表达存在明显的正相关关系（r=0.671,P=0.001）。结论：妊高征患者胎盘组织中HIF-1α和HSP70呈高表达,且两者的表达呈正相关关系。     

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中血红素氧合酶的表达

目的:探讨血红素氧合酶(HO)的2种同工酶(诱导型HO1和组织型HO2)在正常妊娠晚期和妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中的基因及蛋白表达。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法测定正常妊娠和妊高症患者各30例胎盘组织中HO1mRNA及HO2mRNA的表达;并采用免疫组化方法进行HO蛋白半定量分析。结果:①妊高征组HO1mRNA的相对表达量为0.34±0.18,HO2mRNA为0.88±0.57,分别与正常妊娠组(0.46±0.30和0.87±0.28)比较差异均无统计学意义(P>0.05);2组均显示HO1mRNA的表达弱于HO2mRNA。②免疫组化显示HO1在妊高征组胎盘绒毛滋养细胞和血管内皮细胞的染色分数分别为8.1±2.6和1.9±0.5,分别与正常妊娠组(9.3±2.0和2.4±0.3)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。妊高征组HO2蛋白在胎盘血管内皮细胞的表达为4.5±2.6,明显低于正常妊娠组(6.9±3.7,P<0.05);HO2在滋养细胞的表达2组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胎盘血管内皮细胞HO2表达降低可能在妊高征胎盘血管灌注不足和胎盘组织损伤的病理中发挥重要作用。     

妊娠高血压综合征患者胎盘基质金属蛋白酶-9及其组织抑制物-1的表达及胎盘病理改变

目的　研究基质金属蛋白酶 (matrix metalloproteinases, MMP) 9 及其组织抑制物 (tissue inhibitor ofmetalloproteinases, TIMP) 1在妊娠高血压综合征 (妊高征) 患者胎盘中的表达, 探讨其与妊高征发病的关系。方法应用原位杂交法对 37例妊高征 (轻度17 例, 中、重度 20 例) 患者胎盘中 MMP- 9 及 TIMP- 1 mRNA进行检测。同时做苏木精 伊红染色观察妊高征时胎盘的病理改变。结果　MMP- 9、TIMP- 1 主要表达于滋养细胞、绒毛间质血管壁及蜕膜组织中; 中、重度妊高征组MMP- 9 mRNA, TIMP- 1 mRNA的表达为 (0 038±0. 074, 0 .080±0 018) 明显低于正常妊娠组的 (0 .065±0 012, 0 .097±0 .029) 及轻度妊高征组的 (0. 065±0 .015, 0. 093±0 .025), 分别比较差异均有显著性意义; 轻度妊高征组与正常妊娠组的 MMP 9 mRNA 表达差异无显著性意义 (P> 0 .05), 而TIMP 1 mRNA表达差异有显著性意义; 中、重度妊高征 MMP 9/TIMP 1 比值 (0. 455±0. 046) 明显低于正常妊娠组 (0 741±0 080) 和轻度妊高征组 (0 .679±0. 010), 差异均有极显著性意义 (均 P<0 .01); 中、重度妊高征组胎盘绒毛数、间质血管数 [ (7. 25±1. 74)、(15. 83±2. 04) 个/高倍视野] 均明显低于正常妊娠组 (均P<0. 01)。结论M     

重度妊娠高血压综合征患者胎盘表皮生长因子受体的表达

测定 2 1例重度妊高征患者胎盘EGFR的表达 ,分 2组 ,其中重度妊高征合并胎儿宫内发育迟缓 (IUGR)组 9例和重度妊高征未合并IUGR组 12例 ,并与 15例正常妊娠者 (对照组 )比较。与对照组相比 ,重度妊高征患者胎盘EGFR蛋白及其mRNA的表达显著降低 (P <0 .0 1) ,重度妊高征合并IUGR组与重度妊高征未合并IUGR组之间胎盘EGFR的表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。胎盘滋养层细胞EGFR表达显著降低 ,可能是重度妊高征发病的重要因素     

β-A抑制素基因在妊高征胎盘中的表达

目的 :研究β A抑制素基因在妊高征患者胎盘中的表达及其在妊高征病因和发病机制中的作用 .方法 :采用RT PCR方法检测 10例中、重度妊高征患者、10例正常初产妇胎盘中β A抑制素基因mRNA的表达 .结果 :以 10例正常初产妇胎盘为表达参照 ,重度妊高征胎盘 β A抑制素基因表达明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) .结论 :β A抑制素基因在妊高征患者胎盘中高表达可能是引发妊高征一系列病理生理变化的环节之一 ,也可能作为评估妊高征高危因素的重要参考指标之一 .     

COX-2在妊高征胎盘中的表达及意义

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)在妊娠高血压综合征(妊高征)胎盘组织中的表达及讨论其在妊高征发病中的作用.方法 采用免疫组化方法和计算机图象分析系统检测60例妊高征患者胎盘组织中及20例正常孕妇胎盘组织中COX-2的表达.结果 COX-2 以胞浆表达为主.与正常孕妇胎盘组织相比,妊高征患者胎盘组织中COX-2表达显著增强(P<0.05),中、重度妊高征组COX-2与正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),中度组高于轻度组(P<0.01),重度组高于中度组(P<0.01).结论 COX-2在妊高征胎盘组织中表达增高,可能与妊高征的病因及病理生理有关,胎盘缺氧可能是妊高征发病机制的一个诱因.     

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中细胞凋亡与IGF-I表达的研究

目的:研究妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中细胞凋亡及胰岛素样生长因子—I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)表达水平的变化及IGFI与细胞凋亡的关系。方法:①采用流式细胞计量术检测52例妊高征患者胎盘组织标本(轻度16例,中度19例,重度17例)和30例正常妊娠胎盘组织标本的凋亡率;②应用免疫组织化学SP法对上述两组胎盘组织检测IGF-I的表达。结果:①妊高征组胎盘组织的凋亡率显著高于正常妊娠组(P<0.001);妊高征组中:中、重度妊高征显著高于轻度妊高征(P<0.01),重度妊高征显著高于中度妊高征(P<0.01);②IGF-I在妊高征组与正常妊娠组胎盘的合体滋养细胞、细胞滋养细胞及蜕膜细胞中均有表达,妊高征组均显著高于正常妊娠组(P<0.01),妊高征组间比较也有显著性差异(P<0.01);③妊高征组胎盘细胞凋亡率的增高与IGFI表达增高呈正相关。结论:妊高征与细胞凋亡增高有关,且妊高征病情随凋亡率的上升而加重。IGF-I的表达增加与妊高征的发生有关,与临床分度密切相关,即妊高征病情随IGF-I的上升而加重,可能通过对细胞凋亡的调节而对妊高征的演进过程产生影响。     

基质金属蛋白酶-9在胎儿宫内发育迟缓病人胎盘组织中的表达

①目的　检测胎盘绒毛滋养细胞基质金属蛋白酶 9(MMP 9)的表达 ,探讨MMP 9在胎儿宫内发育迟缓 (IUGR)发病中的作用。②方法　采用SP免疫组化法检测 37例妊娠高血压综合征 (妊高征 )并发IUGR病人和 30例非妊高征IUGR病人及 30例正常妊娠孕妇胎盘组织中滋养细胞MMP 9的表达。③结果　正常妊娠组滋养细胞MMP 9阳性表达明显强于妊高征并发IUGR组和非妊高征IUGR组 (H =13.32、16 .2 4 ,P <0 .0 1) ,而后两者差异无显著意义。而且随妊高征病情的加重 ,MMP 9的表达有递减的趋势。④结论　在妊高征并发IUGR及非妊高征IUGR病人胎盘组织中 ,滋养细胞MMP 9的表达均减少 ,与IUGR的发病关系密切     

妊娠高血压综合征患者胎盘组织中细胞凋亡与IGF-Ⅰ表达的研究

目的研究妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘组织中细胞凋亡及胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insu-lin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)表达水平的变化及IGF-Ⅰ与细胞凋亡的关系.方法①采用流式细胞计量术检测52例妊高征患者胎盘组织标本(轻度16例,中度19例,重度17例)和30例正常妊娠胎盘组织标本的凋亡率;②应用免疫组织化学SP法对上述两组胎盘组织检测IGF-Ⅰ的表达.结果①妊高征组胎盘组织的凋亡率显著高于正常妊娠组(P＜0.001);妊高征组中中、重度妊高征显著高于轻度妊高征(P＜0.01),重度妊高征显著高于中度妊高征(P＜0.01);②IGF-Ⅰ在妊高征组与正常妊娠组胎盘的合体滋养细胞、细胞滋养细胞及蜕膜细胞中均有表达,妊高征组均显著高于正常妊娠组(P＜0.01),妊高征组间比较也有显著性差异(P＜0.01);③妊高征组胎盘细胞凋亡率的增高与IGF-Ⅰ表达增高呈正相关.结论妊高征与细胞凋亡增高有关,且妊高征病情随凋亡率的上升而加重.IGF-Ⅰ的表达增加与妊高征的发生有关,与临床分度密切相关,即妊高征病情随IGF-Ⅰ的上升而加重,可能通过对细胞凋亡的调节而对妊高征的演进过程产生影响.     

脯氨酰-4-羟化酶基因在妊高征胎盘中的表达及其临床意义

目的 通过检测脯氨酰-4-羟化酶(P4H)基因在妊娠高血压综合征(妊高征)患者胎盘中的表达,了解其在妊高征病理生理机制中的作用. 方法 采用半定量RT-PCR技术检测10例正常妊娠妇女(对照组)及10例中、重度妊高征患者(妊高征组)胎盘组织P4H和β-actin mRNA水平. 结果 P4H与β-actin积分吸光度比值在对照组和妊高征组胎盘组织中分别为0.38682±0.07931; 0.45671±0.05803. 显示P4H mRNA在对照组和妊高征组胎盘组织中均有表达,妊高征组胎盘组织P4H基因的表达明显高于对照组,差异有显著性(P=0.037). 结论 妊高征患者胎盘组织中P4H基因的高表达, 可能是妊高征一系列病理生理变化的环节之一.     

妊娠高血压患者胎盘组织基质金属蛋白酶-α与肿瘤坏死因子-α的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在妊娠期高血压疾病（简称妊高征）发病机制中的作用。方法采用免疫组化法检测57例妊高征患者和24例正常妊娠产妇胎盘绒毛上皮组织中MMP-9、TNF-α的表达。结果轻度妊高征组MMP-9的阳性表达与对照组相比，差异无显著性（P〉0．05），而中、重度妊高征组阳性表达明显弱于正常妊娠组（P＜0.01），且中、重度妊高征组间比较差异也有显著性（P＜0．05）。对照组与轻、中、重度妊高征患者胎盘组织TNF-α表达水平比较，差异有显著性，（分别为P〈0．05、P〈0．01、P〈0．01），且妊高征组中不同程度组间比较，差异也有极显著性（P〈0．01）。对照组和轻度妊高征组，MMP-9与TNF-α表达无相关性（r=0．287、P〉0．05及r=0、382、P〉0.05）．但中、重度妊高征患者，MMP-9与TNF-α表达水平存在显著的负相关性（r=-0．563、P〈0．05及r=-0．681、P〈0．01）。结论妊高征患者MMP-9表达下降，胎盘不完全侵入，胎盘局部缺血、缺氧，TNF-α表达增多，可能是引发妊高征的原因之一。