芦荟粗多糖对体外培养人表皮细胞增殖活性及细胞周期的影响

目的研究芦荟粗多糖对体外培养人表皮细胞增殖活性及细胞周期的影响。方法在芦荟粗多糖(75、150、300、600、1200 μg／ml)的作用下,光镜观察表皮细胞形态及细胞融合时间,电镜观察细胞超微结构,MTT法以及[3H]-TdR渗入量观察细胞增殖状况,流式细胞仪检测细胞周期。结果与对照组比较,芦荟粗多糖作用后表皮细胞形态学变化不明显,但芦荟粗多糖组细胞融合时间明显缩短(P< 0．05);细胞超微结构观察发现,300、1200 μg/ml芦荟粗多糖组的细胞核内以常染色质为主,而对照组与 75μg／ml芦荟粗多糖组则以异染色质为主;从生长曲线上看,芦荟粗多糖作用2 d后细胞增殖明显增快; [3H]-TdR渗入量与对照组比较呈显著性上升(P<0．05);流式细胞分析显示,G0／G1期细胞所占百分率显著性减少,G2／M期和S期细胞所占百分率显著性增加(P<0．01)。结论芦荟粗多糖可通过影响表皮细胞的DNA合成及细胞周期来促进细胞增殖。     

ANP和CGRP对油酸型急性肺损伤家兔细胞因子的影响

目的:研究心钠素(ANP)和降钙素基因相关肽(CGRP)对油酸型急性肺损伤(AL I)家兔血及支气管肺泡灌洗液(BAL F)中TNF- α、IL- 8和ET- 1含量的影响。方法:观察油酸型AL I家兔ANP+CGRP治疗前、后不同时间静脉血和BAL F中上述3种细胞因子浓度的变化,并于实验结束后测定肺水质量分数。结果:油酸致伤后30、6 0和12 0 min血及BAL F中TNF- α、IL- 8和ET- 1浓度显著增高(P<0 .0 5～0 .0 1) ,尤其以TNF- α增幅最大,ANP+CGRP治疗后各因子浓度明显降低(P<0 .0 5～0 .0 1) ,肺水质量分数也显著降低(P<0 .0 5 )。结论:静脉注射ANP+CGRP可有效降低油酸致伤后血和BAL F中TNF- α、IL- 8及ET- 1含量,抑制肺内炎症反应,减轻肺损伤。     

过度训练诱导的细胞因子反应对免疫功能的影响

剧烈运动，尤其是长距离跑可以导致肌肉酸痛和损伤，这种运动后对组织损伤的应答类似于由感染所导致的炎症的急性应答阶段。剧烈运动可以诱导出炎症急性期反应中的一些细胞因子，例如肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1α/β(IL-1α/β)、白介素-6(IL-6)。这些细胞因子具有协同效应。同时．剧烈运动诱导出的炎症过程是有限的或可以通过几种产生抗炎性细胞因子如IL-1-receptor antagonist(IL-1ar)、IL-4、IL-10]和前列腺素E2而得到逆转。     

乌司他丁对全身炎症反应综合征的治疗作用

目的　探讨乌司他丁在阻断全身炎症反应综合征( SIRS)向多器官功能障碍综合征( MODS)发展中的作用及其机制。方法　60例符合SIRS诊断标准3项以上的患者随机分为试验组( n=3 0 )和对照组( n=3 0 ) ,并选取1 5名正常体检者作为正常组。试验组接受常规抗感染治疗,对照组在试验组用药基础上静脉注射乌司他丁1 0 0 k U,8h1次,连用5d。常规监测患者心率( HR)、呼吸频率( RR)、体温( T)、白细胞计数( WBC)、SIRS症状改善时间和病死率;并于治疗前和治疗后5d抽取静脉血检测血清白细胞介素6( IL 6)、IL 1 0、肿瘤坏死因子α( TNFα)、C反应蛋白( CRP)水平。正常组于体检时抽血检测的结果作为正常对照。结果　试验组T、RR、HR及WBC治疗后改善情况均明显优于对照组( P<0 .0 5或P<0 .0 1 )。SIRS患者入院时炎性细胞因子水平均明显高于正常组( P均<0 .0 1 ) ;两组患者治疗后5d的CRP、IL 6和TNFα水平均较治疗前明显下降( P<0 .0 5或P<0 .0 1 ) ,但试验组下降较对照组更为明显。试验组治疗后5d的IL 1 0较治疗前上升,治疗前后自身对照差异有显著性( P<0 .0 1 ) ;对照组治疗后5d的IL 1 0水平与治疗前比较差异无显著性( P>0 .0 5)。另外,试验组患者治疗后SIRS炎性指标超过3 d无明显改善者明显少于对照组( P<0 .0 1 ) ,转为     

NF-kB靶向性哑铃形“圈套”寡核苷酸对体外肾小球系膜细胞细胞因子表达的影响

目的：设计合成靶向NF-kB的哑铃形“圈套”ODNs，并检测其对NF-kB转录活性和肾小球系膜细胞细胞因子(TNF-α和IL-6)表达的抑制效应。方法：以NF-kB顺式作用元件kB序列为模板，设计包含两个拷贝的kB序列，长度为58个碱基的环状ODNS，合成后部分序列做FAM标记，行转集效率鉴定实验。采用电泳迁移率改变实验(EMSA)体外检测哑铃形圈套ODNs对NF-kB转录活性的抑制效应。提取大鼠肾小球系膜细胞，随机分为正常对照组、LPS刺激组、哑铃形圈套0DNs处理组、无关圈套ODNs处理组和脂质体处理姐。采用阳离子脂质体将2、4、8mg／L不同剂量哑铃形圈套ODNs转染大鼠肾小球系膜细胞，6h后用LPS刺激，收集转染后8、12、18上清和细胞。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测上清细胞因子蛋白表达，逆转录PCR(RT-PCR)法检测细胞因子mRNA转录。结果：阳离子脂质体可将哑铃形圈套ODNs高效转集入肾小球系膜细胞，哑铃形圈套ODNs在体外能有效地抑制NF-kB与其顺式元件的结合；4、8mg／L剂量哑铃形圈套ODNs可明显抑制LPS诱导的大鼠肾小球系膜细胞TNF-α和IL-6转录与表达。结论：靶向NF-kB的哑铃形圈套ODNs在体外可抑制NF-kB的转录活性，从而对体外培养的肾小球系膜细胞细胞因子的表达具有抑制效应。     

纳洛酮与甲基泼尼松龙联用对急性肺损伤大鼠肺组织核转录因子-κB表达的影响

目的探讨联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮对内毒素(LPS)所致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子κB(NFκB)表达的作用。方法建立大鼠LPS吸入性ALI模型(LPS3mg/kg气管内注射)。85只大鼠随机分为5组:生理盐水对照组,LPS损伤组,甲基泼尼松龙组(LPS+甲基泼尼松龙),纳洛酮组(LPS+纳洛酮),联合用药组(LPS+甲基泼尼松龙+纳洛酮)。采用放射免疫法检测大鼠血清白细胞介素8(IL8)水平,并应用免疫组化法观察肺组织NF-κBp65蛋白表达的变化。结果经气道吸入LPS可致大鼠发生ALI。ALI大鼠肺组织NFκBp65蛋白表达明显升高(P<0.05或P<0.01),IL-8水平亦明显增高(P<0.05或P<0.01),单用甲基泼尼松龙或纳洛酮组肺组织NF-κBp65蛋白表达率及IL-8水平均较LPS损伤组明显降低,以联合用药组更为明显(P<0.05或P<0.01)。结论联合应用甲基泼尼松龙和纳洛酮可降低LPS吸入性ALI大鼠血清IL-8升高,并显著抑制肺组织NF-κBp65蛋白表达。     

红芪多糖对糖尿病大鼠肾组织匀浆NO、NOS及过氧化脂质的影响

目的:探讨红芪多糖(HPS)对糖尿病(DM)大鼠肾脏保护作用的机制.方法:实验采用随机方法.左下腹腔注射链脲菌素(STZ)65 mg/kg制备DM大鼠模型,以72 h后空腹血糖>16.7 mmol/L为模型成功标志.将DM大鼠随机分为模型组、依那普利组及HPS大、小剂量组.依那普利灌胃剂量为7 mg/kg,HPS灌胃剂量为150和50 mg/kg,余灌胃等量生理盐水,均每日1次,连续8周.灌胃2周和8周末次给药后禁食12 h(不禁水),测血糖;分两批处死动物,取肾进行组织匀浆,测定一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)等指标.结果:HPS治疗后DM大鼠血糖显著降低,且随治疗时间的延长,降糖作用逐渐明显.DM大鼠肾组织NO和NOS活性呈明显的早期升高、晚期下降趋势;使用HPS2周时显著抑制了NO和NOS活性的过分升高,8周时显著抑制了NO和NOS活性的持续降低.随病程延长DM大鼠肾组织SOD活性呈逐渐下降、MDA呈逐渐升高的趋势;HPS治疗后肾组织SOD活性明显增强,8周时有显著下降;MDA则呈下降趋势.以上作用大剂量HPS组均优于小剂量组,呈明显的量-效关系;依那普利组作用不明显.结论:HPS能有效降低DM大鼠血糖,改善和调节肾组织过氧化反应指标,可能对DM肾脏损害有保护作用.     

雾化吸入氯胺酮对哮喘大鼠肺组织一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的通过建立大鼠支气管哮喘模型,观察不同浓度氯胺酮对哮喘大鼠肺组织iNOS活性及NO含量的影响。方法SD大鼠随机分成对照组(N组)、哮喘模型组(A组)、不同浓度氯胺酮预处理组(分别为K1组、K2组)和地塞米松组(D组),每组8只。A组大鼠用卵白蛋白辅以百日咳杆菌菌苗和氢氧化铝为佐剂注射致敏,2周后雾化吸入卵蛋白激发哮喘;氯胺酮处理组大鼠用同样方法致敏,但在激发前分别给予雾化吸入氯胺酮25 g/L(K1组)和50 g/L(K2组);D组在激发前给予雾化吸入0.01%地塞米松;N组用生理盐水替代卵蛋白进行注射和吸入。每组分别测定其肺组织NO2-/NO3-水平、肺组织诱导型NOS(iNOS)和原生型NOS(cNOS)活性水平,并用免疫组织化学法观察iNOS在大鼠哮喘模型肺组织中的分布。结果A组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平升高,iNOS和肺组织NO2-/NO3-水平呈高度正相关;K1、K2组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平低于A组(P<0.05);D组肺组织中NO2-/NO3-和iNOS水平亦低于A组(P<0.05)。结论25 g/L或50 g/L的氯胺酮雾化吸入可抑制哮喘大鼠肺组织iNOS活性,降低NO含量,减轻大鼠肺部炎症。     

失血性休克复苏时心肌损伤和一氧化氮的变化及灵芝多糖的干预作用

目的 :探讨失血性休克和复苏再灌注过程中心肌损伤和一氧化氮 (NO)浓度的变化及灵芝多糖的干预作用。方法 :复制家兔失血性休克再灌注模型 ,随机分成假手术组、生理盐水再灌注组和质量分数为 1%的灵芝多糖再灌注组 ;观察 3组动物平均动脉血压 (MAP)、心功能、血浆 NO浓度及心肌 NO含量和一氧化氮合酶(NOS)活性的变化。结果 :两个再灌注组动物在失血性休克 4 0 m in时左心室舒张末压 (L VEDP)比休克前及假手术组略有升高 ,但差异不显著 (P均 >0 .0 5 ) ,左心室内压最大变化速率 (± dp/dt max)则明显降低 (P均 <0 .0 5 ) ,血浆 NO浓度则显著升高 (P均 <0 .0 5 )。生理盐水再灌注组动物再灌注 4 0 min时 ,心功能较休克 4 0 m in时进一步降低 (P<0 .0 5 ) ,血浆 NO浓度进一步升高 ,心肌 NOS活性和 NO含量明显高于假手术组 (P均 <0 .0 5 )。灵芝多糖组再灌注 4 0 min时较生理盐水再灌注组、心功能明显改善 ,血浆 NO浓度、心肌 NO含量和心肌 NOS活性均明显降低 (P均 <0 .0 5 )。结论 :失血性休克再灌注过程中心肌 NOS活性、血浆 NO浓度、心肌NO含量均升高 ,而心功能降低 ,提示 NO在失血性休克再灌注心肌损伤中起重要作用 ;而灵芝多糖可通过抑制 NOS活性、降低 NO浓度对失血性休克再灌注心肌损伤起保护作用。     

大鼠创伤性脑水肿一氧化氮及其合成酶的变化

目的：探讨脑损伤后一氧化氮（ＮＯ）及一氧化氮合酶（ＮＯＳ）与脑水肿的关系。方法：建立大鼠创伤性脑水肿模型,按不同时间点处死动物,测定其脑含水量及静脉血ＮＯ 和脑组织中ＮＯＳ。结果：脑创伤后脑含水量随静脉血ＮＯ的增加而增加,组织ＮＯＳ则随ＮＯ 的增加而下降。结论：创伤性脑水肿与血ＮＯ 有密切相关性,组织中ＮＯＳ则是该过程的可能催化剂     

脉络宁注射液对肢体缺血-再灌注损伤一氧化氮及一氧化氮合酶的影响

目的:探讨脉络宁注射液对肢体缺血-再灌注损伤一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的影响.方法:健康成年家兔20只,随机分为对照组和实验组,建立后肢缺血-再灌注损伤动物模型.在即将恢复血流灌注时,实验组家兔自耳缘静脉注射脉络宁注射液,对照组注射等量生理盐水.在缺血前、缺血后2 h、再灌注后1 h和4 h各自从术侧股静脉采血,分离血清,测定血清NO和NOS的含量;取胫前肌行电镜观察.结果:两组血清NO含量在缺血后2 h比缺血前均明显增高(P均<0.05),再灌注后均明显降低(P均<0.05).两组NOS活性在缺血后2 h比缺血前明显降低(P均<0.01),再灌注后比缺血后2 h均明显增高(P<0.05或P<0.01),且实验组明显高于对照组(P<0.01和P<0.05).电镜观察可见再灌注后对照组组织损伤严重,而实验组较轻.结论:脉络宁注射液能抑制肢体缺血-再灌注损伤NO的过量产生,提高NOS活性,对肢体缺血-再灌注损伤具有保护作用.     

NOS及NO在介导Aβ神经毒性和阿尔茨海默病发病机制中的作用

目的观察诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂胍氨酸(AG)及神经元型一氧化氮合酶(nNOS)抑制剂7-硝基吲哚(7-NI)对β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)在体神经毒性的干预,进一步探讨一氧化氮合酶(NOS)及一氧化氮(NO)在Aβ神经毒性和Alzheimer病(AD)发病机制中的介导作用。方法雄性SD大鼠35只,随机分为正常对照,生理盐水注射,Aβ1-40注射,AG+Aβ1-40,7-NI+Aβ1-40,花生油(Peanutoil,PO)+Aβ1-40、生理盐水+Aβ1-40共7组,每组5只。观察各组大鼠的Y迷宫学习记忆作业及局部神经元损伤情况。结果Aβ1-40海马组大鼠Y迷宫作业的获得和再现尝试次数均显著增加,分别是(27.8±2.3)和(19.7±4.7)次,与前两组比较有显著性意义(F获得=146.438,P获得=0.000;F再现=113.654,P再现=0.000)。海马齿状回颗粒细胞背侧带受损长度为(1.93±0.26)mm,局部胶质细胞反应明显。AG可逆转Aβ1-40导致的学习记忆和神经元损伤,其获得和再现尝试次数分别为(14.6±4.9)次和(8.5±2.1)次,与Aβ1-40注射组比较明显减少(F获得=146.438,P获得=0.000;F再现=113.654,P再现=0.000)。细胞带受损长度为(0.41±0.21)mm,胶质细胞反应减轻。7-NI则无干预作用。结论iNOS/NO参与了在体条件下对Aβ神经毒性的介导,在AD发病机制中具有重要作用。     

亚低温对急性创伤性脑水肿大鼠一氧化氮及其合成酶变化的影响

目的：探讨亚低温疗法对急性创伤性脑水肿后一氧化氮及其合成酶变化的影响机制。方法：建立大鼠创伤性脑水肿模型,测定伤后不同时间点常温下及亚低温后颈内静脉血一氧化氮、脑组织一氧化氮合成酶和脑含水量。结果：致伤后３０分钟大鼠即出现脑水肿,伤后８小时达高峰（从伤前７７．６３％±０．２１％升至７９．８３％±０．４１％）;一氧化氮具有同步效应〔从伤前（２．４４±０．１２）μｍｏｌ／Ｌ升至（７．８３±０．２７）μｍｏｌ／Ｌ〕;一氧化氮合成酶伤后３０分钟达高峰〔从伤前（３８．８９±４１．３０）μｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１升至（１０６．５８±５２．４６）μｍｏｌ·ｍｎ－１·ｇ－１〕,以后逐渐下降,伤后８小时〔（５８．２９±１９．４２）μｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１〕仍高于假手术组。而亚低温（３２～３３℃）能明显减轻脑水肿,减少一氧化氮含量及一氧化氮合成酶的表达〔伤后８小时分别为７９．５６％±０．２７％,（６．８４±０．３７）μｍｏｌ／Ｌ,（５１．０２±２４．５１）μｍｏｌ·ｍｉｎ－１·ｇ－１〕。结论：一氧化氮在创伤性脑水肿发生发展中起作用,而亚低温可能抑制一氧化氮合成酶的表达,减少一氧化氮含量,对创伤性脑水肿有一定保护作用。     

Effect of nitric oxide donors on endogenous dopamine release from rat striatal slices

Summary— Incubation of striatal slices with sodium nitroprusside (SNP) or hydroxylamine (HA) for 60 min caused a dose-dependent increase in dopamine (DA) release. This effect was inhibited completely by tetrodotoxin (TTX) (1 //M) if low concentrations of SNP (1 fiM) or HA (10 and 100 /JM) were tested. Although higher concentration of SNP (10 and 100 /JM) and HA (500 /JM) were still effective in stimulating DA release, increases observed under these conditions were less than the values found in the absence of TTX. Verapamil (10 /JM), but not co-conotoxin (100 nM), significantly reduced DA release stimulated by high concentrations of SNP or HA. When verapamil was combined with TTX, moreover, SNP and HA failed to stimulate DA release. If striatal slices were incubated in the presence of nomifensine (10 /JM), SNP and HA did not enhance DA release. SNP and HA-induced depletions in tissue DA levels were also protected by nomifensine. Inhibition of guanylate cyclase with 10 fjM of methylene blue could not reduce the effects of NO-donors. SNP and HA also failed to alter endogenous glutamate release from striatal slices. Similarly, SNP and HA-induced increases in DA release were not affected by kynurenic acid and MK-801. These results indicate that NO-donors SNP and HA stimulate DA release by facilitating reverse DA transport. This effect seems to be dependent on the activation of both voltage dependent sodium channels and L-type of calcium channels. Results presented here also indicate that neither endogenous glutamate nor guanylate cyclase activation plays an intermediary role in stimulatory effects of NO-donors on DA release from rat striatal slices.     

Low‐intensity ultrasound increases endothelial cell nitric oxide synthase activity and nitric oxide synthesis

Summary. Low‐intensity ultrasound (US) increases tissue perfusion in ischemic muscle through a nitric oxide (NO)‐dependent mechanism. We have developed a model to expose endothelial cells to well‐characterized acoustic fields in vitro and investigate the physical and biological mechanisms involved. Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) or bovine aortic endothelial cells (BAEC) were grown in tissue culture plates suspended in a temperature‐controlled water bath and exposed to US. Exposure to 27 kHz continuous wave US at 0.25 W cm^?2 for 10 min increased HUVEC media NO by 102 ± 19% (P < 0.05) and BAEC by 117 ± 23% (P < 0.01). Endothelial cell NO synthase activity increased by 27 ± 24% in HUVEC and by 32 ± 16% in BAEC (P < 0.05 for each). The cell response was rapid with a significant increase in NO synthesis by 10 s and a maximum increase after exposure for 1 min. By 30 min post‐exposure NO synthesis declined to baseline, indicating that the response was transient. Unexpectedly, pulsing at a 10% duty cycle resulted in a 46% increase in NO synthesis over the response seen with continuous wave US, resulting in an increase of 147 ± 18%. Cells responded to very low intensity US, with a significant increase at 0.075 W cm^?2 (P < 0.01) and a maximum response at 0.125 W cm^?2. US caused minor reversible changes in cell morphology but did not alter proliferative capacity, indicating absence of injury. We conclude that exposure of endothelial cells to low‐intensity, low‐frequency US increases NO synthase activity and NO production, which could be used to induce vasodilatation experimentally or therapeutically.