大鼠胶原诱导性关节炎模型的制备及评价

目的:制备型胶原诱导性关节炎大鼠模型(CIA模型)。方法:将40只大鼠随机分为正常组和模型组。以酶联免疫吸附测定法(ELISA法)检测模型组和正常组大鼠血清中炎性细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,同时采用组织病理学和X线摄片的方法显示关节炎大鼠的发病程度和病理学特征。结果:与正常组相比,模型组在免疫后第36天关节肿胀达到最高峰。ELISA法检测结果显示模型组TNF-α的水平均较正常组大鼠明显增高(P<0.05)。组织病理学和X射线摄片结果显示,关节软骨组织、骨组织和滑膜组织呈典型的关节炎病变。结论:胶原诱导的大鼠关节炎模型,其病理特征和人类类风湿关节炎(RA)极为相似,为进一步深入研究人类RA的发病机制及其临床治疗提供了有价值的实验材料。     

新型免疫抑制剂FTY720对大鼠胶原诱导性关节炎的抑制作用

目的观察新型免疫抑制剂FTY720对大鼠胶原诱导性关节炎发生和发展的影响。方法以胶原诱导大鼠关节炎模型,从第1次免疫造模开始,大鼠分别予以FTY720(0.1、0.6mg·kg-1)和雷公藤多苷(6、12mg·kg-1)灌胃治疗,连续4周。观察记录大鼠活动和关节炎指数、体重、足底厚度和足爪肿胀;血常规分析大鼠外周血淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞变化;流式分析外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞变化;组织学及免疫组织化学分析炎性关节病理改变和滑膜组织中CD4+和CD8+T淋巴细胞的变化。结果 FTY720给药后能抑制大鼠关节炎的发生和发展,明显降低大鼠外周血淋巴细胞特别是CD4+T淋巴细胞数量和滑膜组织中CD4+T淋巴细胞数量。结论 FTY720可有效控制大鼠胶原诱导性关节炎的发生和发展,其作用机制可能是通过抑制外周血CD4+T淋巴细胞浸润到滑膜组织。     

强的松对胶原诱导性关节炎大鼠的疗效及机制

目的探讨强的松对胶原诱导性关节炎大鼠的疗效及机制。方法建立Ⅱ型胶原蛋白诱导的大鼠关节炎模型;造模成功后随机分为3组,模型对照组,雷公藤组,强的松组;评估各组大鼠关节炎指数;酶联免疫吸附试验检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α及白介素-1β水平;观察大鼠滑膜病理(包括炎性浸润、巨噬A型细胞增生、纤维组织增生)。结果给药16d后,强的松组AI较模型对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01),直至治疗结束,且优于雷公藤组(P<0.05);与正常对照组比较,模型对照组,雷公藤多甙组、强的松组血清TNF-α及IL-1β水平明显增高(均P<0.01);与模型对照组比较,雷公藤多甙组,强的松组血清TNF-α及IL-1β水平明显下降(均P<0.01);与模型对照组比较,强的松组滑膜炎性细胞浸润和巨噬A型细胞增生减低(P<0.05)。结论强的松可下调CIA大鼠血清TNF-α及IL-1β水平并抑制滑膜炎性细胞浸润和巨噬A型细胞增生,从而缓解CIA。     

蒙药文冠木提取物对胶原诱导性关节炎大鼠新生血管的影响

目的 研究蒙药文冠木提取物对胶原诱导性关节炎大鼠新生血管的影响.方法 用Ⅱ型胶原诱导建立关节炎大鼠模型.按照随机数表法将大鼠分为4组:正常组、模型组、雷公藤多苷片组(9.45 mg·kg-1)和文冠木提取物组(19.14 mg·kg-1),每组10只.初次免疫后21 d开始灌胃给药,连续4周.酶联免疫吸附法和蛋白印迹法...     

姜黄素对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞增殖的影响

目的探讨姜黄素对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠滑膜细胞的影响。方法将雄性Wistar大鼠皮内注射Ⅱ型胶原,建立CIA大鼠模型,取其滑膜组织用胶原酶消化后提取滑膜细胞进行原代培养,取3—5代的滑膜细胞进行后续实验。应用MTT比色法检测滑膜细胞的增殖水平。结果5、10、20、40、80、160μmol／L的姜黄素作用24、48和72小时,均能明显抑制CIA大鼠滑膜细胞的增殖（P〈0．05）,且具有时间、剂量依赖性。结论姜黄素能明显抑制CIA大鼠滑膜细胞的增殖并呈时间、剂量依赖性改变。     

亚砷酸对大鼠类风湿关节炎模型作用机制的探讨

目的：研究亚砷酸在类风湿关节炎（RA）大鼠中的治疗作用.方法：40只大鼠随机分成4组：正常对照组（C组）、模型组（M组）、低剂量亚砷酸组（LSA 1.5 mg·kg^-1·d^-1）、高剂量亚砷酸组（HSA 3.0 mg·kg^-1·d^-1）.原位杂交检测各组核因子-κB（NF-κB）、细胞核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）mRNA的表达.结果：与C组比较,M组NF-κB、RANKL mRNA大量表达（P＜0.01）;与M组比较,LSA组及HSA组NF-κB、RANKL mRNA表达降低（P＜0.01）,且HSA组更明显.结论：RANKL、NF-κB在类风湿关节炎发生发展中具有重要作用,亚砷酸对类风湿关节炎有治疗作用.     

紫雪散对大鼠胶原诱导性关节炎的治疗作用及其机制研究

目的研究紫雪散对大鼠胶原诱导性关节炎的治疗作用及其机制研究。方法 Wistar大鼠随机分为5组,分别为对照组、模型组、吲哚美辛片(2 mg/kg)组以及紫雪散0.5、1.0 g/kg组,每组10只。建立大鼠Ⅱ型胶原诱导性关节炎模型。大鼠初次免疫后第12天开始灌胃给药,给药容量10 m L/kg,1次/d。对照组、模型组均灌胃给予同体积生理盐水。各组均持续给药3周。测量大鼠左后足踝宽度、厚度和周长,计算关节炎指数。观察大鼠踝关节病理。采用ELISA法测定血清炎症因子血小板活化因子(PAF)水平、环氧合酶-2(COX-2)活性、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,采用比浊法测定血清循环免疫复合物(CIC)水平。结果给药7 d,紫雪散组踝关节宽度、厚度显著低于模型组并能持续到给药21 d。紫雪散组滑膜细胞增生明显减轻,滑膜组织充血水肿明显减轻。与模型组比较,紫雪散组全身表现评分、关节肿胀指数和关节炎指数均显著降低(P0.05、0.01、0.001)。与模型组比较,紫雪散0.5、1.0 g/kg组血清PAF水平显著减少,COX-2活性显著降低(P0.001)。与模型组比较,紫雪散0.5、1.0 g/kg组血清TNF-α、CIC水平显著减少(P0.05、0.01、0.001)。结论紫雪散对大鼠胶原诱导性关节炎损伤具有治疗效果,其机制可能与紫雪散的抗炎和抗氧化作用有关。     

泼尼松对Ⅱ型胶原诱导性关节炎大鼠股骨微结构及生物力学的影响

目的应用骨生物力学和micro-CT技术,探讨泼尼松对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠股骨微结构及生物力学的影响。方法 40只8周龄Lewis♂大鼠,随机分为正常对照(CON)组6只、其余34只用来建立CIA模型。免疫3周后筛选出CIA大鼠随机分成CIA组、CIA加泼尼松4.5mg·kg-1·d-1组和CIA加泼尼松9 mg·kg-1·d-1组。CON和CIA组给予溶剂对照溶液,其它2组给予泼尼松4.5、9 mg·kg-1·d-1。连续给药90 d后处死,取左股骨进行生物力学测定,然后进行micro-CT扫描及三维重建。结果与CON组比较,CIA组骨小梁厚度、骨小梁数量、骨体积分数、骨密度明显减小,而骨小梁分离度、结构模型指数明显增加,骨生物力学参数(弹性载荷、最大载荷、断裂载荷、刚度)均明显减小。与CIA组比较,泼尼松2个剂量组骨体积分数与骨小梁数量均增加,骨小梁分离度均减小,而骨生物力学参数均无明显变化。结论泼尼松治疗CIA大鼠3个月后,对股骨松质骨微结构破坏有所改善,但对股骨生物力学性能和骨密度没有明显改变。     

基于PPAR-γ/NF-κB信号通路探究芍甘附子汤对胶原诱导性关节炎大鼠的干预作用及作用机制

目的观察芍甘附子汤对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的干预作用并探讨其作用机制。方法 Wistar大鼠随机选取12只为正常组,其余大鼠制备CIA大鼠模型。于首次免疫后第14日,依据分层分配原则将造模成功的大鼠分为模型组,芍甘附子汤低(1.05 g·kg-~1)、中(2.1 g·kg-~1)、高(4.2 g·kg-~1)剂量组,雷公藤多苷片组(9 mg·kg-~1),每组15只。于首次免疫后第15日各组按相应剂量进行药物干预,正常组及模型组灌胃同等量生理盐水,连续4周。分别于首次免疫后第14、21、28、35、42日进行关节炎指数(AI)评分。于末次给药24 h后麻醉大鼠,收集血清,并取踝关节,采用HE染色和Micro-CT扫描观察其病理及影像学改变。检测血清PGE_2、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO含量,免疫组织化学法检测踝关节组织PPAR-γ、NF-κB p65、p-NF-κB p65、COX-2、iNOS蛋白表达。结果同正常组相比,模型组大鼠足跖出现明显肿胀,血清PGE_2、TNF-α、IL-1β、IL-6、NO水平升高(P<0.01),踝关节滑膜增生,炎细胞浸润,骨质破坏,踝关节NF-κB p65、p-NF-κB p65、COX-2、iNOS蛋白表达上调,PPAR-γ蛋白表达显著降低。同模型组相比,芍甘附子汤可不同程度降低AI,降低血清PGE_2、NO、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,改善踝关节病理损害,降低病理评分,下调踝关节NF-κB p65、p-NF-κB p65、COX-2、iNOS蛋白表达,上调PPAR-γ蛋白表达。结论芍甘附子汤对CIA大鼠关节肿胀及病理损害具有改善作用,作用机制可能与其调节PPAR-γ/NF-κB信号通路有关。     

蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白对胶原诱导性关节炎大鼠的影响

目的 探究蕲蛇Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的作用.方法 按照体重将Wistar成年雄性大鼠随机分为6组:正常组、模型组、阳性对照组(塞来昔布36μg·g-1)和高、中、低3个剂量实验组(蕲蛇CⅡ:20,10,5μg·mL-1),每组10只.用牛Ⅱ型胶原-弗氏完全佐剂乳剂注射法构建CIA模型.致炎...     

青风藤醇提物与青藤碱治疗胶原诱导关节炎大鼠药效的比较研究

目的:以胶原诱导关节炎大鼠为研究对象,比较青风藤醇提物与青藤碱单体对类风湿性关节炎的疗效。方法:乙醇回流法提取青风藤干燥藤茎中包括青藤碱在内的成分,治疗Ⅱ型胶原酶诱导关节炎大鼠,以青藤碱治疗组为阳性对照组,并设立模型组与对照组,进行关节评分/体重记录,以及实验结束后各组大鼠血清中白介素-17、NF-κB配位体受体活化剂以及可溶性蛋白骨保护素水平测定。结果:青藤碱与青风藤醇提物均能有效缓解胶原诱导的关节肿胀,与模型组相比显著降低关节评分(P<0.05);与模型组相比,青风藤醇提物能够显著降低白介素-17的水平(P<0.05),然而青藤碱组白介素-17与模型组相比无显著差异(P>0.05);青风藤醇提物与青藤碱均能有效提高骨保护素水平(P<0.05);与模型组相比,青藤碱不能有效降低血清中NF-κB配位体受体活化剂水平(P>0.05),然而青风藤醇提物却能显著抑制NF-κB配位体受体活化剂的分泌(P<0.05)。结论:青藤碱能够提高骨保护素水平,而青风藤对NF-κB配位体受体活化剂、白介素-17分泌的抑制作用优于青藤碱,提示青风藤醇提物中可能存在其他青藤碱类似物,亦能发挥抗炎抗骨破坏的作用。     

金骨莲胶囊对炎症模型大鼠的抗炎作用及机制研究

目的:研究金骨莲胶囊对炎症模型大鼠的抗炎作用及机制.方法:将48只大鼠随机分为空白对照组、模型组、金骨莲胶囊低、中、高剂量组(0.66、1.32、2.64 g/kg)和地塞米松组(阳性对照,0.945 mg/kg),每组8只.空白对照组和模型组大鼠灌胃等体积水,其余各组大鼠灌胃相应药物,每天给药2次,连续3天.末次给药...     

大鼠胶原诱导关节炎模型的建立及评价

目的建立Ⅱ型胶原诱导关节炎（CIA）大鼠模型及评价方法。方法大鼠皮内注射鸡Ⅱ型胶原（CⅡ）与完全弗氏佐剂及不完全弗氏佐剂建立模型,监测动物体重、后足容积、关节炎指数（AI）以及热刺激缩足反射潜伏期（PWTL）和机械痛阈（MWT）,免疫后第四十二天行影像学检查并取材进行组织病理学检查;酶联免疫吸附法（ELISA）检测动物血清抗CⅡ抗体、IL-1β及TNF-α水平。结果 CIA大鼠体重增长缓慢,后足红肿明显,后足容积显著高于对照组,AI呈上升趋势,后足PWTL及MWT均显著降低,影像学检查发现关节腔狭窄,关节结构模糊,组织病理学检查可观察到明显炎症细胞浸润、关节结构的破坏及滑膜增生,ELISA结果显示CIA大鼠血清抗CⅡ抗体、IL-1β及TNF-α水平显著升高。结论本文成功建立了CIA大鼠模型及模型评价方法。     

藏药独一味抗类风湿关节炎的作用及其药效物质基础研究

目的:研究藏药独一味抗类风湿关节炎(RA)的作用及其药效物质基础.方法:将56只SD大鼠随机分为正常对照组(0.5％羧甲基纤维素钠溶液),模型组(0.5％羧甲基纤维素钠溶液),甲氨蝶呤组(阳性对照组,3 mg/kg),独一味水提液低、中、高剂量组(0.5、1、2 g/kg,以生药量计)和独一味总黄酮组(200 mg/k...     

Nerve growth factor promotes ASIC1a expression via the NF-κB pathway and enhances acid-induced chondrocyte apoptosis

Nerve growth factor (NGF) is a neurotrophic factor that is thought to have a broad role in the nervous system and tumors, and has recently been described as a mediator of inflammation. It is not clear whether or not NGF participates in apoptosis of articular chondrocytes. In this study, we determined if NGF affects ASIC1a expression and NF-κB P65 activation in rat chondrocytes, and measured the effectiveness of NGF on apoptotic protein expression in acid-induced chondrocytes. NGF was shown to up-regulate the level of ASIC1a in a dose- and time-dependent fashion. Simultaneously, NGF activated NF-κB P65 in chondrocytes. Additionally, the elevated ASIC1a expression induced by NGF was eliminated by the NF-κB inhibitor (PDTC) in chondrocytes. Moreover, NGF reduced cell viability and induced LDH release under the premise of acid-induced articular chondrocytes. Furthermore, NGF could enhance cleaved-caspase 9 and cleaved-PARP expression in acid-pretreated chondrocytes, and which could be inhibited by using psalmotoxin 1(PcTX1) or PDTC. Together, these results indicated that NGF may up-regulate ASIC1a expression through the NF-κB signaling pathway, and further promote acid-induced apoptosis of chondrocytes.     

余甘子提取物对尿酸钠诱导大鼠急性痛风性关节炎的作用研究

目的:研究余甘子不同提取部位提取物对大鼠急性痛风性关节炎的作用。方法:实验分为空白对照、模型、秋水仙碱和余甘子醇提物、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水相部位组,采用尿酸钠诱导大鼠痛风性关节炎模型,测定大鼠关节肿胀度、观察大鼠步态、测定关节组织前列腺素E(2PGE2)和血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,考察余甘子不同部位提取物对痛风性关节炎的作用。结果:与模型组比较,余甘子醇提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水相部位的踝关节肿胀度显著降低(P<0.05);各提取物组步态评分显著降低(P<0.05);醇提物、乙酸乙酯部位、石油醚部位、正丁醇部位的PGE2含量显著降低(P<0.01或P<0.05);正丁醇部位、乙酸乙酯部位、石油醚部位组大鼠血清的TNF-α含量显著降低(P<0.05)。结论:余甘子提取物正丁醇和乙酸乙酯部位对大鼠痛风性关节炎有明显的抗炎镇痛作用,其作用机制是通过抑制局部组织和血清炎症介质(PGE2和TNF-α)的释放而减轻炎症反应。     

淫羊藿苷对精神分裂症模型大鼠认知功能的改善作用及机制

目的:研究淫羊藿苷(ICA)对精神分裂症模型大鼠认知功能的改善作用及机制。方法:将SD大鼠分为空白对照组、模型组和ICA低、中、高剂量组(15、30、60 mg/kg),除空白对照组外,其余组大鼠均腹腔注射N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂MK-801(0.2 mg/kg)复制精神分裂症模型,每天1次,连续14天。造模成功后,ICA各剂量组大鼠灌胃相应药物,空白对照组和模型组灌胃等体积水,每天1次,连续28天。采用Morris水迷宫实验、旷场实验、强迫游泳实验和Y迷宫实验观察大鼠行为学变化;采用Nissl法染色观察大鼠海马组织病理变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠脑组织中胆碱能相关指标[乙酰胆碱(Ach)、胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)]的水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测大鼠脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的mRNA的表达水平;采用Western blot法检测大鼠脑组织中BDNF、ERK、CREB蛋白和凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)及其相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase-3)]的表达或磷酸化水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠逃避潜伏期、T1~T3时段活动路程长度、累积不动时间和脑组织中Caspase-3蛋白的表达水平均显著增加或升高(P<0.05);穿台次数、交替率、海马组织中Nissl染色阳性神经元数以及脑组织中Ach和ChAT水平、Bcl-2/Bax比值、BDNF m RNA和蛋白的表达水平、ERK和CREB mRNA的表达水平、ERK1/2和CREB磷酸化水平均显著减少或降低(P<0.05)。与模型组比较,ICA高剂量组大鼠逃避潜伏期、T1~T3段活动路程长度、累积不动时间、Nissl染色阳性神经元数、脑组织中AchE水平和Caspase-3蛋白的相对表达量均显著减少或降低(P<0.05);穿台次数、交替率,脑组织中Ach和ChAT水平、Bcl-2/Bax比值、BDNF m RNA和蛋白的表达水平、ERK和CREB mRNA的表达水平、ERK1/2和CREB的磷酸化水平均显著增加或升高(P<0.05)。ICA低、中剂量组大鼠上述部分指标较模型组显著改善(P<0.05)。结论:ICA可改善精神分裂症模型大鼠的认知功能,其作用机制可能与调节胆碱能系统、抑制神经元凋亡、促进BDNF/ERK/CREB信号通路的表达有关。     

IKK/NF-κB通路在类风湿性关节炎中的作用及相关药物研究进展

在类风湿性关节炎的病理过程中,炎症反应扮演着关键性角色。IKK／NF －κB 作为炎症中一个至关重要的信号通路,在很大程度上影响了类风湿性关节炎的发展过程。本文综述了 IKK／NF －κB 通路在类风湿性关节炎中的作用,机制和相关药物的研究。     

来氟米特对胶原性关节炎大鼠T细胞漂移的影响

目的 探讨来氟米特对胶原性关节炎大鼠中Th1和Th2细胞漂移的影响.方法 建立胶原性关节炎模型;来氟米特2mg/kg灌胃给药;HE染色行膝关节滑膜病理学检查并评分;称重大鼠体重和脾脏重量,计算脾脏指数;RT-PCR法检测脾淋巴细胞中T-bet mRNA和GATA-3 mRNA的表达.ELISA法检测Con A刺激的脾淋巴细胞分泌Th1和Th2型细胞因子IFN-γ和IL-4的量.结果 与模型组比较,来氟米特(2mg/kg,灌胃给药15天)明显降低CIA大鼠病理组织学评分,降低脾脏指数.与关节炎模型组比较,药物干预组GATA-3 mRNA的表达增高、IL-4的分泌增多,T-bet mRNA的表达降低、IFN-γ的分泌减少.结论 来氟米特对胶原性关节炎具有治疗作用,该作用可能和维持T细胞亚群的平衡有关.     

硼替佐米对佐剂性关节炎模型大鼠的免疫调节作用及其机制研究

目的:研究硼替佐米对佐剂性关节炎模型大鼠的免疫调节作用及其机制。方法:取大鼠随机分成正常对照组、模型组、阳性对照组(甲氨蝶呤0·5mg·kg-1,3d1次)和硼替佐米低、高剂量组(0·2、1·0mg·kg-1,每日1次),每组10只,后4组用完全弗氏佐剂建立佐剂性关节炎模型,建模给药后第16天开始尾静脉注射相应药物,给药15d。评价建模给药后各组小鼠关节炎指数(3d1次),检测建模给药30d后各组大鼠外周血CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞含量和CD4+T/CD8+T细胞比例,以及血清中γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-4、IL-17水平。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠关节炎指数评分更高,外周血CD4+T、CD4+T/CD8+T细胞比例及血清中IFN-γ、IL-4表达均明显增强(P<0·05)。与模型组比较,硼替佐米高剂量组和阳性对照组大鼠关节炎指数评分更低,外周血CD4+T、CD4+T/CD8+T细胞比例及血清中IFN-γ、IL-17表达均明显降低(P<0·05),仅硼替佐米高剂量组IL-4表达明显增加(P<0·05);硼替佐米低剂量组上述指标均无明显差异。结论:硼替佐米可能通过调节T细胞功能及其释放的细胞因子水平减缓佐剂性关节炎模型大鼠的关节肿胀程度。