视网膜挫伤兔模型的病理学观察

目的:建立视网膜挫伤的动物模型,观察视网膜损伤后的形态特点。方法:选取40只健康成年无眼疾青紫蓝兔,随机分为挫伤后1,3h;1,3,7,14,30d及正常对照共8组,每组5只,选取右眼为致伤眼,以改良Allen重击法制备兔单眼挫伤性视网膜病变模型,挫伤后获取兔眼标本,以光镜及电镜观察视网膜神经感觉层的病理变化,目镜测微尺(0.01mm)对视网膜神经纤维层(nerve fiber layer,NFL)厚度、内核层(inner nucler layer,INL)厚度进行测量,并对视网膜神经节细胞(ganglion cell,GC)计数。结果:挫伤后1,3h组和1d组NFL明显增厚(P<0.05),而7d组和14d组NFL明显变薄(P<0.05),3d组和30d组NFL厚度与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05);各挫伤组GC计数明显少于正常对照组(P<0.05)。电镜显示挫伤后3h组;1,3d组视网膜神经感觉层均出现较多的,具有凋亡形态学与生化改变特征的凋亡细胞,其中在3d组视网膜神经感觉层凋亡细胞数量达到高峰,7d组显著下降。结论:视网膜水肿和神经感觉层细胞凋亡是挫伤性视网膜病变的一个重要机制。     

视网膜挫伤后神经感觉层细胞凋亡的实验研究

目的 了解实验性视网膜挫伤后神经感觉层细胞凋亡情况,并进一步探讨凋亡的发生机制,为临床治疗提供理论基础.方法 40只健康成年无眼疾青紫兰兔,随机数字表法分为挫伤后1 h、3 h、1 d、3 d、7 d、14 d、1个月及正常对照组8组,每组5只,选取右眼为致伤眼,以改良Allen重击法制备兔单眼挫伤性视网膜病变模型;分别于挫伤后1 h、3h、1 d、3 d、7 d、14 d、1个月获取兔眼标本,以电镜及TUNEL法观察视网膜神经感觉层细胞的凋亡情况.结果 视网膜挫伤后存在着神经感觉层细胞凋亡现象,正常对照组、14 d和1个月组几乎不见凋亡细胞,挫伤后3 h、1 d、3 d在视网膜各细胞层均出现较多的、具有凋亡形态学与生化改变特征的凋亡细胞,其中在3 d组视网膜感觉层凋亡细胞数量达到高峰.视网膜神经感觉层细胞数目在3 h、1 d、3 d组及7 d组之间两两比较均有显著统计学意义(P＜0.01);3 h、1 d、3 d组及7 d组与正常对照组、1 h、14 d、1个月组之间两两比较均有显著统计学意义(P＜0.01);正常对照组、1 h、14 d、1个月组之间两两比较无显著性意义(P＞0.05).结论 视网膜挫伤后,神经感觉层细胞凋亡的发生是视网膜功能恢复不良的重要原因.     

缺血后适应对视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用

背景研究证明,缺血后适应（IPC）对多种组织器官的缺血缺氧损伤均有一定的抵抗作用,但其对视网膜缺血缺氧的作用仍受到关注。目的探讨IPC对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤（RIRI）后视网膜结构和功能的保护作用。方法将36只健康雄性Wistar大鼠以随机数字表法分为正常对照组、伪手术组、缺血-再灌注组、IPC组。利用前房灌注生理盐水升高眼压至100mmHg（1mmHg=0．133kPa）维持60min的方法制备RIRI大鼠模型,实施IPC处理鼠亚分为再灌注后即刻、1min、10min组（即IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组）,分别于实验后1d、7d行大鼠视网膜电图（ERG）检测,然后用过量麻醉法处死大鼠并制备视网膜切片,行苏木精-伊红染色,对各组大鼠视网膜厚度的变化和视网膜形态进行观察。采用SPSS13．0统计学软件的单因素方差分析对各组大鼠ERG各波振幅恢复率和视网膜厚度值的差异进行比较。结果实验后1d,与正常对照组大鼠比较,伪手术组大鼠视网膜结构接近正常,而缺血-再灌注组及IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠视网膜均出现水肿,可见空泡变性,主要在内丛状层（IPL）及内核层（INL）。缺血-再灌注组及IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠视网膜全层、INL、IPL及视网膜外层厚度值均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。再灌注后7d,缺血-再灌注组大鼠视网膜全层厚度值明显低于正常对照组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）,尤以INL、IPL显著。IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠视网膜全层、INL、IPL及视网膜外层厚度值均明显高于缺血-再灌注组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。再灌注后7d,缺血-再灌注组、IPC各组大鼠ERG a波、b波和OPs振幅恢复率明显低于伪手术组和正常对照组大鼠,差异均有统计学意义（均P〈0．05）;而IPCⅠ组、IPCⅡ组、IPCⅢ组大鼠ERG a波、b波和OPs振幅恢复率明显高于缺血-再灌注组,差异均有统计学意义（均P〈0,05）。结论IPC对RIRI具有保护作用,在大鼠模型中,这种保护作用在再灌注后即刻至1min时最强。     

高原环境下兔眼球挫伤后视网膜脑红蛋白的表达调控研究

目的研究高原环境下兔眼球挫伤后视网膜脑红蛋白（NGB）的表达水平调控,探讨高原环境下眼球挫伤的损伤修复机制及救治。方法在高原环境用重击法造成2月龄健康北京青紫蓝兔眼球挫伤,随机分为吸氧组和非吸氧组,吸氧组动物模型在自制氧箱中以35％氧浓度每天持续给氧10h,于伤后12h、1d．3d,7d、14d分别摘取眼球,40g/L多聚甲醛固定．石蜡包埋切片,免疫组化检测NGB,比较吸氧组和非吸氧组NGB表达水平的不同。结果高原环境下兔眼球钝挫伤后吸氧组较非吸氧组NGB表达低,在3d和7d时差异有统计学意义（P〈0．05）。结论高原环境下兔眼球挫伤后通过吸氧可调控视网膜NGB的表达水平,伤后1d内视网膜处于应激期,吸氧等措施可减轻应激损伤,1～14d吸氧可大大促进视网膜损伤修复。     

光学相干断层扫描与视网膜电图检测大鼠视网膜光化学损伤

目的 比较频域光学相干断层成像（SD—OCT）检测与闪光视网膜电图（f-ERG）检测在蓝光诱导大鼠视网膜光损伤中的敏感性及其相互关系。方法 建立蓝光诱导大鼠视网膜光损伤模型,分别于照射后1d、3d、7d和14d,以SD—OCT测量视网膜外核层厚度,以f-ERG测量各波的反应振幅,分析大鼠外核层厚度与f-ERG各波反应振幅的关系。结果 蓝光照射后1d、3d、7d和14d大鼠平均视网膜外核层厚度依次为（36．54±3．82）μm、（27．07±2．70）μm、（25．37±2．32）μm和（19．54±1．79）μm,与对照组比较,在3d、7d和14d两组差异有统计学意义（F=8．992,8．838,9．183,P〈0．05）;ERG-a波振幅依次为（268．25±41．12）μv,（178．21±32．70）μv,（153．28±48．23）μv,（144．28±33．57）μv;ERG—b波振幅依次为（608．41±61．61）μv,（489．29±85．94）μv,（463．36±58．47）μv,（390．05±48．94）μv。与对照组相比,各波振幅明显降低,差异均有统计学意义（ERG-a波：F=a4．239,b9．443,b10．187,b10．872,aP〈0．05,bP〈0．01;ERG-b波：F=a3．976,b10．391,b10．787,b11．320,aP〈0．05,bP〈0．01;）。大鼠视网膜外核层厚度与f-ERG各波振幅均具有明显的正相关性（ERG-a：r=0．201,0．247,0．338,0．672,P〈0．05;ERG-b：r=0．131,0．278,0．345,0．578,P〈0．05）。结论 蓝光照射大鼠与对照组相比,f-ERG各波的反应振幅明显较对照组降低,可较早地反映光照导致视网膜功能受损;视网膜外核层厚度明显变薄,与前者具有明显相关性,两者分别从形态学及功能学共同揭示蓝光照射在活体大鼠视网膜中的改变。     

bFGF对兔眼视网膜的影响挫伤Muller细胞Vimentin表达

目的研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对兔视网膜挫伤后Mtiller细胞的影响。方法26只白兔通过3J能量自由落体的方式制作兔眼挫伤性视网膜病变模型,随机分为bFGF实验组、生理盐水对照组、单纯挫伤组、正常对照组。其中正常对照组2只（4只眼）,单纯挫伤组4只（8只眼）,bFGF实验组和生理盐水对照组各10只（20只眼）。bFGF实验组每2d玻璃体腔内注射bFGF2μg（10μL）,生理盐水对照组注射生理盐水10μL。采用免疫组织化学染色检测视网膜挫伤后3h,1、3、7、14d各时间点Miiller细胞波形蛋白（Vimentin）的表达。结果bFGF实验组视网膜Muller细胞Vimentin的表达高于生理盐水对照组,且呈上升趋势,两组比较各时段差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论bFGF可以增强视网膜Muller细胞Vimentin的阳性表达,加速Muller细胞的活化,促进损伤修复。     

盐酸多奈哌齐对眼挫伤后大鼠视网膜Bcl-2和BaxmRNA表达的调节

目的：建造视网膜挫伤模型，探讨多奈哌齐对眼挫伤大鼠视网膜保护作用的可能机制。方法：选2mo龄SD雌性大鼠24只，随机分为为3组，每组8只，正常对照组（A组）、多奈哌齐处理组（B组）和蒸馏水组（C组）。A组不处理，B组和c组用重击法致左眼挫伤。伤后第2d，B组用1g／L的盐酸多奈哌齐5mL／kg灌胃，2次／d，C组用同体积的蒸馏水灌胃。连续给药7d，各组于第8d取材。应用RT—qPCR法检测视网膜组织中Bcl-2和BaxmRNA的表达变化。结果：多奈哌齐组视网膜组织内Bcl-2mRNA的表达水平在挫伤后7d有下降，与正常组相比有显著差性差异（P〈0．01），与蒸馏水组相比也有显著差性差异（P〈0．05）。与Bcl-2的表达相反，多奈哌齐组BaxmRNA的表达显著高于正常组（P〈0．01）但是低于蒸馏水组（P〈0．05）。结论：多奈哌齐有可能具有保护眼挫伤大鼠视网膜的功能。     

维拉帕米对兔眼挫伤后视网膜谷氨酸含量的影响

目的观察探讨Ca^2＋通道阻滞剂维拉帕米对兔眼挫伤后视网膜谷氨酸含量的影响及其在跟挫伤中的作用。方法60只兔（60眼）建立右眼挫伤模型,治疗组每日球结膜下注射维拉帕米,挫伤组每日球结膜下注射生理盐水,分别于30min、6h、1d、3d、7d、14d取材,高压液相色谱仪定量检测视网膜谷氨酸水平。另5只兔10眼为正常对照。结果兔眼挫伤后视网膜谷氨酸含量高于正常,并在6h、7d形成两个高峰。维拉帕米治疗可明显抑制6h高峰,并使7d高峰的峰值降低。结论提示维拉帕米可降低眼桦伤后视网膜谷铕西夸7k平。     

黄芪多糖对急性高眼压诱导大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

背景青光眼患者视神经保护的问题日益引起关注。黄芪多糖（APS）是黄芪的主要活性成分,可增加再生神经蛋白的表达并促进损伤的周围神经修复,但其对视网膜神经节细胞（RGCs）再生作用的研究少见报道。目的探讨APS对急性高眼压状态下RGCs的保护作用。方法采用抽签法将40只SPF级sD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、低剂量APS组和高剂量APS组,每组各10只。低剂量APS组和高剂量APS组大鼠自实验开始每日分别给予APS500mg／kg、2000mg／kg（均溶于2．5ml生理盐水）灌胃,模型对照组仅给予2．5ml生理盐水灌胃,正常对照组不做任何处理。用药2周后,除正常对照组外,其余3个组均抽取0．2ml房水继而单眼前房注射等体积甲基纤维素使眼压升高至22mmHg（1mmHg=0．133kPa）以上制作急性高眼压模型。造模后5d,过量麻醉法处死动物,摘除该眼球制作视网膜石蜡切片,常规组织病理学观察视网膜的形态结构变化,采用免疫组织化学法检测caspase-3蛋白在大鼠视网膜中的表达,采用TUNEL染色法观察和计算各组大鼠RGCs的凋亡率。ImageProPlus5．1软件测量各组大鼠视网膜厚度和神经纤维层厚度。结果大鼠成模后5d,模型对照组、低剂量APS组和高剂量APS组大鼠的眼压均明显高于正常对照组,差异均有统计学意义（t=-8．900、-10．700、-11．300,P〈0．01）。正常对照组大鼠视网膜形态正常;模型对照组大鼠视网膜水肿,细胞排列紊乱;低剂量APS组视网膜可见空泡样变性,但视网膜细胞排列较模型对照组整齐,视网膜水肿减轻;高剂量APS组视网膜水肿较明显。低剂量APS组视网膜厚度、外颗粒层及视神经纤维层厚度值均明显低于模型对照组,差异均有统计学意义（t=-23．700、-14．770、-11．640,P〈0．01）,但高剂量APS组外颗粒层及视神经纤维层厚度与模型对照组比较差异均无统计学意义（t=-0．780、-0．460,P〉0．05）。低剂量APS组大鼠caspase-3蛋白阳性RGCs百分比及RGCs凋亡百分率均明显低于模型对照组（caspase-3蛋白：F=87．710,P=0．001;RGCs凋亡：F=272．840,P〈0．01）,差异均有统计学意义（t=-11．700、-8．600,P〈0．01）,高剂量APS组与模型对照组比较caspase-3蛋白阳性RGCs百分比及RGCs凋亡百分率的差异均有统计学意义（t=-7．900、-6．400,P〈0．05）。结论500mg／kgAPS可有效抑制急性高眼压模型大鼠的视网膜水肿及RGCs的凋亡率,对急性高眼压大鼠的RGCs有保护作用。     

基质细胞衍生因子-1在氧诱导视网膜病变小鼠视网膜中的表达

背景早产儿视网膜病变（ROP）的进展与多种新生血管调控因子有关,而基质细胞衍生因子·1（SDF．1）在氧诱导视网膜病变（OIR）动物模型视网膜中的表达及其作用机制尚不明确。目的对SDF-1在OIR小鼠模型视网膜中的表达进行定位和定量分析。方法应用随机数字表法将动物随机分组。将20只7日龄C57BL／6J幼鼠暴露在体积分数（75±2）％浓度的高氧状态下5d,随后在正常氧环境下5d,作为OIR组;另20只同日龄幼鼠作为正常对照组。通过免疫组织化学染色和实时荧光定量聚合酶链反应（real-timePCR）法观察视网膜的SDF-1的蛋白表达以及SDF-1mRNA的变化。结果OIR组12日龄小鼠的视网膜神经节细胞层可见SDF．1蛋白呈阳性表达;OIR组17习龄小鼠的神经节细胞层、内层视网膜的血管内皮细胞、新生血管内皮细胞可见SDF-1蛋白呈强阳性表达;正常对照组12日龄小鼠SDF-1蛋白和正常对照组17日龄小鼠SDF-1蛋白微弱表达于内层视网膜及视网膜血管附近。OIR组17日龄小鼠的SDF-1mRNA表达水平明显高于OIR组12日龄小鼠（P〈O．01）及正常对照组17日龄小鼠（P〈0．01）;OIR组12日龄小鼠SDF-1mRNA表达水平明显低于正常对照组12日龄小鼠（P〈0．05）。OIR组17日龄小鼠的SDF-1mRNA表达水平明显高于OIR组12日龄小鼠（t=8．072,P〈0．05）和正常对照组17日龄小鼠（t=10．026,P〈O．05）;OIR组12日龄小鼠SDF-1mRNA表达水平明显低于正常对照组12日龄小鼠（t=4．336,P〈0．05）。结论SDF-1在相对低氧状态下的视网膜中表达明显上调,因而可促进OIR的视网膜新生血管形成。     

Morphometric and Microstructural Changes During Murine Retinal Development Characterized Using In Vivo Optical Coherence Tomography

PurposeThe purpose of this study was to develop an in vivo optical coherence tomography (OCT) system capable of imaging the developing mouse retina and its associated morphometric and microstructural changes.MethodsThirty-four wild-type mice (129S1/SvlmJ) were anesthetized and imaged between postnatal (P) day 7 and P21. OCT instrumentation was developed to optimize signal intensity and image quality. Semi-automatic segmentation tools were developed to quantify the retinal thickness of the nerve fiber layer (NFL), inner plexiform layer (IPL), inner nuclear layer (INL), and the outer retinal layers (ORL), in addition to the total retina. The retinal maturation was characterized by comparing layer thicknesses between consecutive time points.ResultsFrom P7 to P10, the IPL increased significantly, consistent with retinal synaptogenesis. From P10 to P12, the IPL and ORL also increased, which is coherent with synaptic connectivity and photoreceptor maturation. In contrast, during these periods, the INL decreased significantly, consistent with cellular densification and selective apoptotic “pruning” of the tissue during nuclear migration. Thereafter from P12 to P21, the INL continued to thin (significantly from P17 to P21) whereas the other layers remained unchanged. No time-dependent changes were observed in the NFL. Overall, changes in the total retina were attributed to those in the IPL, INL, and ORL. Regions of the retina adjacent to the optic nerve head were thinner than distal regions during maturation.ConclusionsChanges in retinal layer thickness are consistent with retinal developmental mechanisms. Accordingly, this report opens new horizons in using our system in the mouse to characterize longitudinally developmental digressions in models of human diseases.     

POAG患者视网膜各层厚度的OCT分析

目的利用RTVue OCT对POAG患者黄斑区视网膜各层厚度进行分析,尤其是视神经节细胞层,探讨其在原发性开角型青光眼诊断中的价值。方法前瞻性对照研究。临床诊断为POAG的病例76例（91眼）纳入本研究,分为早期30例（30眼）,中期25例（29眼）,晚期21例（32眼）;选择32例（32眼）年龄、性别构成相匹配的健康体检者作为正常对照组。采用RTVue OCT对受检眼黄斑区视网膜进行扫描,用自编程序图像处理软件将视网膜结构分为9层,早、中、晚期POAG与正常对照组黄斑区视网膜各层厚度比较采用LSD-t检验。结果早期POAG组视网膜神经纤维层（RNFL）、节细胞层（GCL）平均厚度分别为（31.6±9.2）μm、（33.9±5.0）μm,较对照组薄（P＜0.05）,中期POAG组RNFL、GCL平均厚度分别为（31.2±3.4）μm、（34.1±3.9）μm,较正常组薄（P＜0.05）;晚期POAG组RNFL、GCL、内丛状层（IPL）、锥杆细胞内节（IS）、全视网膜（TR）平均厚度分别为（18.8±7.6）μm、（24.2±7.9）μm、（38.0±6.4）μm、（22.8±4.4）μm、（299.5±15.1）μm,均较正常组薄（均P＜0.05）;INL平均厚度（39.1±6.6）μm,较正常组厚（P＜0.05）。结论POAG患者黄斑区视网膜厚度明显变薄,早期POAG对GCL的影响尤为突出,结合临床有助于POAG的早期诊断。     

人胎视网膜血管发生方式的研究

目的：观察人胎视网膜血管的形成方式。方法：收集13～38周胎儿视网膜86例，免疫组织化学染色(ABC)法，光镜观察。结果：在胎儿12—13周时，间充质的梭形细胞从视盘处进入视网膜，并向锯齿缘迁移，同时分化、增殖为内皮细胞索，此索经管道化和改建成为节细胞层内的血管。第26周，节细胞层内已生成血管“出芽”，朝神经纤维层和内核层生长，分别在神经纤维层内和内核层的内、外缘各形成一层毛细血管网。结论：足月胎儿视网膜基本具有四层血管，分别由两种不同方式生成。 （中华眼底病杂志，1996，12：88-90）     

复方血栓通胶囊对糖尿病大鼠视网膜抗缺氧及抗氧化能力的影响

目的探讨复方血栓通胶囊对糖尿病大鼠视网膜组织抗缺氧及抗氧化能力的干预作用．并研究其作用机制。方法实验研究。雄性SPF级SD大鼠110只,适应性饲养7d后随机取30只作为正常组。余80只以链脲佐菌素（STZ）诱导制作糖尿病大鼠模型,造模成功66只,取其中60只,随机分成两组：30只大鼠不予处理,作为对照组;其余30只作为治疗组,给予复方血栓通胶囊按900mg／kg／d的剂量进行治疗。在第4、第12、第20周到达实验终点时,采用免疫组织化学、分光光度法和1α-PCR方法分别检测各组视网膜组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和铜锌超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）的阳性细胞数及mRNA水平表达量,以及视网膜组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活力。对相关数据行随机区组设计的方差分析。结果①实验第4、第12和第20周,对照组糖尿病大鼠视网膜节细胞层及内核层均可见大量HIF-α阳性细胞表达,而治疗组HIF-1α阳性细胞数较同时间点的对照组少（P〈0．051：在各时间点,治疗组HIF-10αmRNA的表达也较对照组低,差异均有统计学意义（P〈O．05）。②第4、第12和第20周时,治疗组CuZn-SOD阳性细胞数较对照组多,CuZn．SODmRNA的表达也较对照组高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。③第4周和第12周时,治疗组的总超氧化物歧化酶（T-SOD）和CuZn-SOD活力较对照组有显著提高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论复方血栓通胶囊可能是通过改善组织缺血缺氧状态,降低HIF-1α表达,提高SOD活力和CuZn-SOD蛋白表达水平,从而来提高早期糖尿病大鼠视网膜组织抗缺氧及抗氧化能力。     

挫伤性视网膜病变中光感受器细胞凋亡与相关基因表达的研究

目的探讨挫伤性视网膜病变中Bax、Bcl-2表达与光感受器细胞凋亡的关系。方法自由落体法制作视网膜挫伤模型,行HE染色观察大鼠视网膜组织的病变情况;末端脱氧核酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记(TUNEL)法检测感光细胞凋亡情况;PV免疫组织化学法检测视网膜组织中Bax、Bcl-2的表达。结果TUNEL染色显示挫伤后3d组视网膜内可见较多阳性表达的细胞,分布在外核层。余实验组未测到阳性着色细胞。Bax在挫伤后4h即有表达,随时间延长表达逐渐增加,至挫伤后3d达高峰,至7d、14d组表达阴性。Bcl-2的表达在各组均为阴性。结论细胞凋亡是挫伤性视网膜病变的重要机制之一,Bcl-2/Bax相对比值改变可能对细胞凋亡的发生起一定的诱导作用。     

挫伤性视神经病变所致的单眼盲与图形视觉诱发电位振幅关系的研究

目的探讨挫伤性视神经病变患者图形视觉诱发电位（P—VEP）振幅下降百分比与客观判断单眼盲的关系。方法回顾性分析31例单眼挫伤性视神经病变病例,将患者按伤眼视力≥0．05与〈0．05分为两组,比较两组间伤眼较对侧健眼P—VEP振幅下降百分比的差异,通过ROC曲线寻找P—VEP振幅下降百分比在两组间的临界值。结果两组患者的P—VEP振幅下降百分比具有统计学显著差异（P〈0．05）。60′方格的P—VEP振幅下降百分比的受试者工作特征曲线（ROC）的曲线下面积（AUC）为0．804,敏感性与特异性最佳点为42．68％,30′方格的AUC为0．719,敏感性及特异性最佳点为67．4％。结论在发生挫伤性视神经病变时,当伤眼较对侧健眼P—VEP振幅下降百分比在60′方格及30′方格中分别达到42．68％与67．4％时,对客观判断单眼盲诊断具有参考价值。     

视网膜内不同亚层对大分子物质的通透性差异研究

目的 了解视网膜内不同亚层对大分子物质的通透性差异.方法 将新鲜猪眼视网膜铺于自行设计的通透性装置上,将Carboxyfluorescein(相对分子质量为376)和相对分子质量为4 400、9 300、19 600、38 900、71 200、150 000的FITC-葡聚糖RPMI 1640溶液置于视网膜的一侧,1 h后,将视网膜取下进行冰冻切片,荧光显微镜下观察荧光分布情况,切片观察后固定并行苏木精-伊红染色.结果 Carboxyfluorescein和不同相对分子质量的葡聚糖在正常猪眼视网膜的分布是不同的.无论Carboxyfluorescein接触视网膜内层还是外层,视网膜的内核层和外核层最亮;接触视网膜内层,相对分子质量为4 400葡聚糖组内核层最亮,相对分子质量为9 300～71 200 葡聚糖组内核层暗淡而内核层以前较亮,相对分子质量为150 000葡聚糖组内丛状层以前部分较亮;接触视网膜外层,相对分子质量为4 400葡聚糖组视网膜全层均明亮,但外核层以外最亮,而相对分子质量为9 300～150 000葡聚糖组则仅外核层明亮,其余层均暗淡.结论 内核层和外核层是视网膜内主要的大分子通透屏障,大分子通透上限排序(由小到大)依次为外核层＜内核层＜内、外丛状层＜神经纤维层和内界膜.     

N-乙酰半胱胺酸对大鼠挫伤性视网膜病变的保护作用

目的:研究凋亡相关基因Bcl-2/Bax在大鼠挫伤性视网膜病变中的表达,以及N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-cysteine,NAC)对其表达的影响。方法:自由落体法制作视网膜挫伤模型。将SD大鼠随机分为正常组6只、模型组24只及治疗组24只。每组按挫伤后不同时间段分为1,3,7,14d,每个观察时段6只大鼠。HE染色光镜观察视网膜组织学变化,应用SABC免疫组织化学法检测大鼠视网膜挫伤后视网膜组织Bcl-2/Bax蛋白表达的变化。结果:挫伤性视网膜病变的损害主要集中在神经纤维层。挫伤后视网膜组织水肿,细胞紊乱,胞浆空泡样变,视网膜组织变薄,细胞丢失。NAC治疗组视网膜水肿程度有所改善,细胞紊乱,胞浆空泡样变,细胞丢失有所恢复。正常组及NAC治疗组视网膜组织Bax均未见表达,Bcl-2低表达。视网膜挫伤后1d时Bax表达开始增多,3d强阳性表达,7d表达有所减少,14d时表达进一步减少。Bcl-2低表达,未见明显变化。NAC治疗组各观察指标变化趋势基本与视网膜挫伤组相似,但表达明显减弱,两组相比较,于挫伤后1,3d和7d时差异有统计学意义(P<0.05)。Bcl-2在各时段的表达均较模型组有所增强,两组相比较,于挫伤后1,3d和7d时差异有统计学意义(P<0.01)。结论:在大鼠挫伤性视网膜病变中,NAC能够改善视网膜组织病理学损害并通过调节Bcl-2/Bax蛋白表达而抑制细胞凋亡,对视网膜挫伤具有保护作用。