体外培养人胚鼻咽上皮的生物学特性观察 Ⅰ人胚鼻咽上皮体外培养

本文报告作者建立人胚鼻咽上皮原代培养的方法,并描述培养物的形态学特点和生长方式。人胚鼻咽上皮原代培养物平均存活35.5天,组织块存活率为57±11％,培养物几乎全是上皮细胞,在一定的时间内呈指数增长,其群体倍增时间为2.64±0.49日。建立稳定的人胚鼻咽上皮原代培养物,为研究其生物学特性以及转化实验打下了基础。     

体外培养人胚鼻咽上皮的生物学特性观察 前言

鼻咽癌是一种严重危害我国南方数省人群的恶性肿瘤,有关鼻咽癌的病理、临床分型、鼻咽癌的病因发病等问题,均存在不同的甚至截然相反的看法。通常,鼻咽癌为分化较差的鳞状细胞癌,早期转移至局部淋巴结,在癌细胞内可以找到EB病毒的基因组,鼻咽癌病人血液中常可检出与EB病毒有关的各种抗体,有的抗体(VCA—IgA)甚至可作为早期发现鼻咽癌的辅助指标,有的抗体效价可能与病程和预后有关。在分化较高的鼻咽癌细胞内较难发现EB     

体外培养人胚鼻咽上皮的生物学特性观察——Ⅴ.生长动力学研究

本文报告用测定生长曲线和氚胸腺嘧啶核甙两次标记法研究人胚鼻咽上皮原代培养物的生长特性。培养物群体倍增时间为2.43±0.16天,DNA合成期为4.93±0.61 小时,标记指数为12.41±1.43％,细胞周期时间为1.75±0.23天。本文就这些细胞动力学参数的意义作了分析讨论。     

体外培养人胚鼻咽上皮生物学特性的观察——Ⅲ.原代培养人胚鼻咽上皮光镜和电镜研究

原代培养的人胚鼻咽上皮移植块和生长晕作原位包埋后观察,发现移植块的上皮大多发生鳞状上皮化生。在复层上皮细胞的胞浆内含有丰富的胞浆微丝和/或张力原纤维,表层细胞尤为明显;基底细胞的胞浆内除含张力原纤维外,尚有丰富的核蛋白体及少量扩张的内质网和数量不等的类粘原颗粒。生长晕的单层细胞形态多样,胞浆中多含数量不等的张力原纤维;有的同时含有扩张的内质网和类粘原颗粒。作者认为鳞状上皮化生是对环境变化的一种适应性反应。     

人鼻咽癌活检组织的细胞化学研究

收集两年来人鼻咽癌活检材料190 例,进行了三种酶的组化研究。结果表明:癌组织的乳酸脱氨酶活性增高,兰色颗粒在胞浆内,特别是未分化癌细胞显示清晰不规则的细胞核,有助于临床诊断;大部分癌组织酸性酯酶活性消失或减弱,仍有部分病例保持相当的酶活性;而β-葡萄糖醛酸酶活性则呈阴性反应。     

体外培养人胚鼻咽上皮的生物学特性观察——Ⅳ.用相差显微缩时摄影记录和观察生长与运动形式

本文观察发现,组织块接种 48 小时后先有数量不等的圆形细胞从组织块边缘游出,继之上皮细胞亦移出。上皮细胞持续进行移位和变形运动,但范围较小。上皮细胞的细胞周期是不一致的,其分裂期平均为33.0±5.7分。本文观察结果有助于对体外培养的人鼻咽上皮细胞生长形式和行为的了解。     

大鼠鼻咽三型上皮的组织化学研究

本文对新生、15,30、60天和成年组大鼠鼻咽上皮内 LDH 及其同功酶、ATPase、ALP、ACP、SDH 和 MDH 进行了组织化学研究。结果表明,鼻咽假复层纤毛柱状上皮中以纤柱细胞顶部酶活性最强,在不同年龄组酶活性呈递增趋势。复鳞上皮、中间型上皮内 LDH 及其同功酶、ATPase、ACP 以基部细胞呈阳性反应,SDH、MDH 则分别以表层细胞和中层细胞胞质内活性最强,这些酶的活性程度和分布特征均有年龄性变化。     

体外培养人胚鼻咽上皮生物学特性的观察——Ⅱ、人胚鼻咽上皮细胞分化的光镜、电镜研究

人胚鼻咽粘膜主要由假复层纤毛柱状上皮被覆,伴有少量过渡型上皮,未见典型的复层鳞状上皮。前者为鼻咽上皮的原基型,由纤柱细胞、杯状细胞、表面未分化细胞、中间细胞和基底细胞组成。纤柱细胞和杯状细胞均由基底细胞、中间细胞和表面未分化细胞分化而来。过渡型上皮由基底细胞向纤毛细胞和杯状细胞分化过程中不同分化阶段的中间细胞及表面未分化细胞所组成。基底细胞和中间细胞的胞浆内含有胞浆泡状系统和张力原纤维,具有双向分化的能力。过渡型上皮是演变为复层鳞状上皮或发生鳞状上皮化生的基础。     

化学致癌物对体外培养人胚鼻咽上皮的影响

用化学致癌物甲基硝基亚硝基胍(MNNG)处理人胚鼻咽上皮细胞组织培养物后可见生长曲线发生改变,同时有DNA合成期延长、标记指数增高等细胞动力学参数的变化;并可见非典型性上皮灶、甚至多层次生长。本文对MNNG引起的这些改变作了分析讨论。     

EB病毒对体外培养的人鼻咽上皮细胞感染途经的研究

用异硫氰酸荧光素(FITC)标记EB病毒(EBV)感染体外培养的人胚鼻咽上皮和鼻咽癌细胞株(CNE-1和CNE-2),对照为EBV受体阳性的Raji和Ramos细胞。在荧光显微镜下发现FITC-EBV 可与Raji和Ramos细胞结合,如事先经未标记的EBV处理则与 FITC-EBV 结合的阳性细胞数明显下降。贴壁生长的鼻咽上皮细胞不能与FITC-EBV 结合,而刮落的鼻咽上皮细胞则能与FITC-EBV 结合,结果提示鼻咽上皮细胞质膜微细损伤可能成为EBV 直接进入细胞的门户,受损的鼻咽癌细胞更易为EBV 侵入。     

β-萄葡糖醛酸酶、酸性磷酸酶及乳酸脱氢酶与胃癌关系的研究

测定胃癌患者胃癌与非癌组织、腹腔液及血清中β-葡萄糖醛酸酶活性,并检测了胃组织中酸性磷酸酶和乳酸脱氨酶活性。认为,此三种酶可做为生化指标用于辅助胃癌诊断,β-G可做为术前判定胃癌生物学行为的参考指标。     

人胎食管上皮NOS阳性表达的组织化学观察

目的　探讨人胎食管上皮NOS阳性表达的规律。方法　用NADPH d组织化学法对人胎食管上皮NOS阳性表达进行观察。结果　第 4个月龄时 ,食管上皮组织中可见到发育早期NOS阳性神经细胞群 ,该月龄后期食管上皮细胞内出现NOS弱阳性反应。随着胎龄的增加 ,NOS染色反应逐渐增强 ,至第 9个月龄时达到阳性表达的高峰。第 7个月龄时 ,食管上皮中层出现深染的NOS阳性细胞团 ,之后 ,逐渐向上皮表层移位 ,到第 10个月龄时基本消失。结论　胚胎发育时期食管上皮细胞合成NOS需要NOS阳性神经细胞的诱导和调节 ;食管上皮的发育与NOS阳性表达密切相关。     

卵巢交界性粘液上皮肿瘤的组织化学及超微结构观察

本文分别对147、13和15例卵巢粘液性上皮肿瘤进行了粘液组织化学、酶组织化学和超微结构的研究。结果表明交界性粘液上皮肿瘤的粘液组成、糖代谢方式及超微结构均介于良性瘤和恶性瘤间的中间状态,其性质属潜在恶性。本结果支持其为一种独立类型的肿瘤。     

癌症患者血清中βG、LAP及LDH活力联合检测的诊断价值

测定正常人和肝癌、肺癌、胃癌、肠癌患者血清中的β-G,LAP及LDH活力。结果癌症患者血清中上述各酶活力均比正常人呈非常显著的差异,其中以肝癌患者三项酶活力数值升高最为显著。以正常组三项酶活力最高数值立方根之和为“55”作判定指数(discriminating index),凡超过此数值者判为恶变阳性。肝癌组阳性检出率为94%,肺癌组88%,胃癌组82%,肠癌组82%。结果提示应用三项酶综合数值其阳性检出率大于单项酶值阳性检出率。     

兔角膜上皮体外培养及其生物学特性的研究

应用组织培养技术对兔角膜上皮进行了研究,观察了其形态、生物学特性及超微结构,对影响上皮生长的某些因素进行了讨沦。结果表明:组织块培养及角膜基质对上皮的生长有促进作用。细胞群体平均倍增时间17.60±4.51h((?)±s),细胞平均直径24.20±3.85μm((?)±s),平均密度2174.10个/mm~2。光镜及电镜显示培养的细胞与正常活体内的细胞相似,可代替活体内的细胞用于多方面的研究。     

第七周人胚主要结构发育的研究

以组织学、组织化学PAS法、ATP酶法观察7周人胚标本的连续切片。7周胚胎体表可见脑泡、骨骼,头皮下可见皮下毛细血管丛。头、心脏、肝脏相对体积最大。软骨、消化和呼吸道上皮,血管上皮和平滑肌、心肌PAS阳性,肝细胞弱阳性。ATP酶除神经管周围间充质细胞阳性外,其余均阴性。     

体外培养人胚晶状体上皮细胞生长特性的研究

目的观察体外培养人胚晶状体上皮细胞的生物学特性。方法组织块贴壁法培养人胚晶状体上皮细胞,通过倒置相差显微镜、透射电子显微镜,采用免疫细胞化学法分析人胚晶状体上皮细胞的生长特性。结果体外培养的原代人胚晶状体上皮细胞在组织块贴壁48～72 h后从组织块边缘长出,具有上皮细胞的形态特点,第10天达到融合。第二代人胚晶状体上皮生长曲线近＂S＂形,经过1～2 d的潜伏期后进入对数生长期,需10 d左右达到融合,细胞形态呈六角形或椭圆形、超微结构保持正常,免疫细胞化学SABC法染色结果显示细胞浆内α-晶状体蛋白染色阳性。结论人胚晶状体上皮细胞具有增殖能力,第二代人胚晶状体上皮细胞是进行白内障相关研究的合适实验对象。     

南水北调东线工程能否使血吸虫病疫区北移的研究——Ⅱ 山东受水区钉螺生殖腺组织和酶组织化学观察

目的 了解放养在山东济宁的钉螺睾丸卵巢组织化学及酶组织化学变化情况。方法 采用组织化学及酶组织化学方法，检测钉螺生殖腺组织中细胞色素氧化酶(CCO)、乳酸脱氢酶(LDH)、5’-核苷酸酶(5’-NT)、萄葡糖-6-磷酸酶(G-6-Pase)和琥珀酸脱氢酶(SDH)。结果 北移钉螺睾丸卵巢的糖原、DNA和组蛋白含量减少；CCO、5-NT、LDH和G-6-Pase活性降低；睾丸内SDH活性增高。结论 北移钉螺睾丸卵巢代谢异常是导致生殖功能减退的重要因素。     

人肝细胞癌及癌周肝组织酶的组织化学研究——Ⅱ.碱性和酸性磷酸酶、5′-核苷酸酶、非特异性酯酶及琥珀酸脱氢酶

本文用碱性和酸性磷酸酶、5′-核苷酸酶、非特异性酯酶和琥珀酸脱氢酶的组织化学方法观察了10例人体肝细胞癌和癌周肝组织的变化。一般来说,肝细胞上述酶的活性明显减弱至消失,仅见一例碱性磷酸酶和另一例酸性磷酸酶呈现明显活性。而癌周肝组织无论是肝硬化或肝纤维化均显示正常肝细胞的酶活性。癌和癌周肝具有明显的酶的差异性。