Fas配体mRNA在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达

为明确Fas配体mRNA在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达情况，采用原位杂交，反转录PCR（RT－PCR）法检测正常睾丸组织8例Fas配体mRNA的表达，采用原位杂交法检测33例精原细胞瘤组织中的Fas配体mRNA的表达。结果RT－PCR方法证明正常人睾丸组织中有Fas配体mRNA的表达；原位杂交法证明8例正常睾丸组织中均有Fas配体mRNA的表达，且表达局限于睾丸Sertoli细胞，正常生殖细胞中无Fas配体mRNA的表达；原位杂交方法在33例精原细胞瘤组织中检测到Fas配体mRNA表达阳性11例，阳性率为33．33％，多呈现小片状或点状表达。提示Fas配体mRNA仅表达于人类睾丸的Sertoli细胞中，Fas配体mRNA在精原细胞瘤组织中的出现可能是精原细胞瘤形成及进展的原因。     

FasmRNA在增生性瘢痕中的表达

目的：探讨FasmRNA在增生性瘢痕中的表达情况,方法：原位杂交法检测42例增生性瘢痕和42例正常皮肤组织中FasmRNA的表达,采用逆转录PCR检测42例增生性瘢痕中FasmRNA的表达。结果：原位杂交法检出42例增生性瘢痕和42例正常皮肤组织中FasmRNA表达率分别为23％和64％,差异有显著性（P＜0．01）;RT－PCR法检出42例增生性瘢痕中FasmRNA阳性表达25例,阳性率为59．5％,阳性表达组中无缺失突变,结论：FasmRNA在增生性瘢痕中表达明显减少,可能是瘢痕形成的重要原因之一。     

nm23产物／NDPK表达与精原细胞瘤生物学行为

为了解ｎｍ２３在精原细胞瘤发生、进展过程中所起的作用，应用Ｓ－Ｐ免疫组织化学方法、兔抗ＮＤＰＫ多克隆抗体对精原细胞瘤及正常睾丸组织中ｎｍ２３产物／ＮＤＰＫ的表达进行了检测。结果：３８例肿瘤和５例正常睾丸生殖上皮组织中ｎｍ２３／ＮＤＰＫ均呈阳性表达。肿瘤组织中的表达强度明显高于正常生殖上皮组织，而与其组织病理类型无关，强表达缺失与肿瘤的转移行为有关。提示ｎｍ２３／ＮＤＰＫ在精原细胞瘤发生和转移抑制过程中可能起重要作用     

TGF-β1和N-cadherin在精原细胞瘤中的表达及二者的关系

目的检测转化生长因子-β1(TGF-β1)及神经-钙粘素(N-cadherin)在精原细胞瘤中的表达并探讨二者关系。方法采用SP免疫组化法检测34例精原细胞瘤及15例正常睾丸中TGF-β1、N-cadherin的表达水平。构建N-cadherin质粒载体,转染NCCIT精原细胞瘤细胞系,经外源性人重组TGF-β1干预,荧光法检测N-cadherin的表达。结果免疫组织化学染色结果显示,正常睾丸间质细胞、生精上皮细胞、长形精子及支持细胞间紧密连接处均可见TGF-β1表达,N-cadherin则表达于支持细胞间紧密连接处。精原细胞瘤中未见N-cadherin表达,但TGF-β1表达水平较正常睾丸显著增高,且差异有显著性(P0.05);TGF-β1可降低精原细胞瘤细胞株中N-cadherin的表达水平。结论精原细胞瘤中TGF-β1高表达,N-cadherin低表达,且重组TGF-β1可降低精原细胞瘤细胞系N-cadherin表达,提示TGF-β1可能通过下调N-cadherin在精原细胞瘤癌变过程中起重要作用。     

E-cadherin、N-cadherin及β-catenin在精原细胞瘤中表达的变化

目的探讨上皮-钙黏素(E-cadherin)、神经-钙黏素(N-cadherin)及β-链蛋白(β-catenin)在精原细胞瘤中的表达及意义。方法采用S-P免疫组化法检测29例精原细胞瘤及10例正常睾丸E-cadherin、N-cadherin、β-catenin的表达水平,并进一步通过RT-PCR及蛋白免疫印迹技术(5例精原细胞瘤、5例正常睾丸)验证。结果免疫组化染色结果显示,正常睾丸细胞间连接处可见N-cadherin表达,而精原细胞瘤中未见N-cadherin表达;精原细胞瘤E-cadherin、β-catenin表达水平较正常睾丸显著下降,差异有显著性(P0.05);精原细胞瘤E-cadherin、β-catenin表达水平与肿瘤TNM分期相关性分析结果无显著性(P0.05,r1=0.2669,r2=-0.2280)。免疫印迹及PCR结果显示,精原细胞瘤E-cadherin、N-cadherin、β-catenin表达水平较正常睾丸显著下降,差异有显著性(P0.05)。结论精原细胞瘤中E-cadherin-β-catenin复合体及N-cadherin表达较正常睾丸显著下降,且与肿瘤TNM分期无显著相关,提示E-cadherin、β-catenin及N-cadherin的降低可能参与精原细胞瘤的癌变过程,但与肿瘤侵袭及转移过程无显著相关。     

组织芯片技术检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的表达

目的 探讨CMTM2在人睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其临床病理学意义.方法 运用组织芯片技术、免疫组织化学方法检测CMTM2在人睾丸肿瘤组织和正常组织中的表达.结果 15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)CMTM2蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中17例(65.4%)CMTM2蛋白表达为阳性;7例畸胎瘤中4例(57.1%)CMTM2蛋白表达为阳性;12例胚胎癌中3例(25.0%)CMTM2蛋白表达为阳性;10例卵黄囊瘤中4例(40.0%)CMTM2蛋白表达为阳性.胚胎癌、卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性意义(P<0.05).而精原细胞瘤实验组以及畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05).结论 CMTM2蛋白在胚胎癌,卵黄囊瘤中的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,CMTM2可能为睾丸肿瘤候选的抑癌基因.     

Fas在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达

采用免疫组化、原位杂交、反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法检测正常睾丸及精原细胞瘤组织中Ｆａｓ蛋白及ＦａｓｍＲＮＡ的表达,以明确Ｆａｓ在正常睾丸组织及精原细胞瘤中的表达情况。材料与方法　精原细胞瘤石蜡标本为１９８７年至１９９７年本所病理室存档蜡块,均经病理确诊。正常睾丸组织蜡块共７例,病理切片证明均有正常睾丸发育。正常新鲜睾丸组织１例,来源于意外伤亡的健康青年,液氮冻存。免疫组化方法检测Ｆａｓ蛋白表达所用的一抗为亲和纯化的兔抗人Ｆａｓ多克隆抗体,Ｆａｓ（Ｃ２０）（购自美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ生物技术…     

睾丸肿瘤组织HLA—I抗原表达与预后的关系

为探讨睾丸肿瘤组织ＨＬＡ－Ｉ抗原表达与预后的关系，采用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）对５５例睾丸肿瘤组织的石蜡切片进行检测，以观察其ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达情况。结果：正常睾丸组织、间质组织Ｌｅｙｄｉｇ细胞呈深棕黄染色，在曲细精管内Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞染色（＋＋）。５５例睾丸肿瘤组织中，精原细胞瘤Ｉ期的７２．０％，Ⅱ期的５４．６％染色；非精原细胞瘤仅Ⅰ期折７５．０％染色，ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达随肿瘤临床分期     

Survivin在睾丸生殖细胞瘤与无精子症患者睾丸组织中的表达

目的：探讨Survivin蛋白在睾丸生殖细胞瘤与无精子症患者睾丸组织中的表达情况及其临床意义。方法：采用免疫组织化学SABC法检测34例男性睾丸生殖细胞瘤和38例男性无精子症患者睾丸组织中Survivin蛋白的表达情况。结果：18例睾丸精原细胞瘤和16例非精原细胞瘤组织标本中Survivin蛋白的表达情况分别为88．9％和62．5％；在38例不同类型无精子症睾丸组织标本中，各组间Survivin蛋白的表达差异有统计学意义（P〈0．05），且表达情况与生精功能障碍严重程度呈负相关（r=-0．675，P〈0．05）。结论：在睾丸生殖细胞瘤和正常睾丸组织中可检测到Survivin蛋白的表达，Survivin蛋白可能是精子发生过程中的一个潜在标志物。     

Mahoganoid蛋白及其mRNA在大鼠睾丸和附睾中的表达

目的:探讨M ahoganoid(Md)蛋白及其mRNA在成熟大鼠睾丸和附睾组织中的表达。方法:健康成年SD大鼠20只,取睾丸和附睾组织4%多聚甲醛固定,石蜡切片,用免疫组化SP法和原位杂交方法分别检测Md蛋白及其mRNA在睾丸和附睾组织中的表达。结果:免疫组化SP法显示:睾丸组织间质细胞、睾丸生精小管管周肌样细胞和各级生精细胞(精原细胞、初级精母细胞和精子细胞)、支持细胞呈阳性反应,Md蛋白主要表达于胞膜及胞质。在附睾组织,棕色免疫阳性反应物质可见于输出管的高柱状细胞、低柱状细胞的胞膜及胞质,以及附睾管的高柱状细胞、主细胞、基细胞的胞膜及胞质。其中,在附睾尾部的上皮细胞中仅见微弱的棕色免疫阳性反应物质。原位杂交方法显示:睾丸组织间质细胞、睾丸生精小管管周肌样细胞和各级生精细胞(精原细胞、初级精母细胞和精子细胞)、支持细胞上也均有Md mRNA阳性棕色颗粒杂交信号,主要表达于胞膜及胞质。在附睾组织,Md mRNA阳性棕色颗粒杂交信号也均可见于高柱状细胞、主细胞、基细胞的胞膜及胞质。结论:Md蛋白及其mRNA在成熟大鼠睾丸和附睾组织中均有表达,其生理功能尚有待阐明。     

Fas mRNA在泌尿系肿瘤组织中的表达

目的 了解Ｆａｓ ｍＲＮＡ在泌尿系肿瘤组织中的表达情况。方法 采用逆转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测３７例泌尿系恶性肿瘤组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达，其中肾癌２１例，膀胱癌１１例、肾盂癌４例，前列腺肉瘤１例；原位杂交法检测３４例肾癌和１９例癌旁正常肾组织中Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达。结果 ３７例肿瘤组织中检出Ｆａｓ ｍＲＮＡ阳性表达共２０例，阳性率为５４％，阳性表达组织中未发现有缺失突变的存在。其中肾     

Angiogenesis and lymphangiogenesis in stage 1 germ cell tumours of the testis

OBJECTIVE: To determine whether angiogenesis can be used as an additional prognostic indicator in patients with stage 1 germ cell tumours of the testis. PATIENTS AND METHODS: Paraffin sections were assessed immunohistochemically from 51 patients with clinical stage 1 germ cell tumours of the testis (28 seminoma, 23 teratoma) treated by orchidectomy and surveillance only. Sections were analysed for microvascular density (MVD), and expression of the angiogenic factors vascular endothelial growth factor (VEGF) and thymidine phosphorylase (TP). In addition, in the seminoma cases the presence of mRNA for the lymphangiogenic factor VEGF-C was examined by in situ hybridization, and its corresponding receptor VEGFR-3 by immunohistochemistry. RESULTS: Teratoma specimens had a significantly higher mean (range) MVD (85, 26-163; P < 0.01) than both seminoma (37, 16-91) and four normal specimens (26, 18-30). Teratoma specimens also had significantly higher VEGF expression than both seminoma and normal specimens (P < 0.01). Despite these differences between groups, and indeed individual tumours, there was no significant correlation between MVD and VEGF, or between either MVD or VEGF and relapse-free survival. TP expression was significantly greater in tumours than in normal specimens (P < 0.02) but with very little inter-tumour variation. VEGF-C mRNA and VEGFR-3 protein were detected in a third to a half of cases, with expression mostly around endothelial vessels. CONCLUSIONS: The marked differences between normal testis and tumours implicate angiogenesis in the biology of germ cell tumours of the testis. In addition, the detection of factors involved in lymphangiogenesis in some seminomas, tumours which initially metastasize primarily to lymph nodes, indicate that although not prognostic in this study, further studies are warranted in both these areas in the search for further prognostic indicators and therapeutic targets.     

Fas配体在泌尿生殖肿瘤细胞系及肾癌组织中的表达

目的 明确Ｆａｓ配体在泌尿生殖肿瘤细胞系及肾癌组织中的表达情况。方法 采用免疫细胞化学和反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）法检测膀胱癌（Ｔ２４、ＢＩＵ－８７、ＥＪ）、肾癌（ＧＲＣ－１、ＲＣＣ－９４９）、前列腺癌（ＰＣ－３Ｍ）及１０例肾癌组织上Ｆａｓ配体的表达。结果 免疫细胞化学方法检测细胞系中Ｆａｓ配体表达于ＢＩＵ－８７、ＲＣＣ－９４９和ＧＲＣ－１细胞,而以ＢＩＵ－８７和ＲＣＣ－９４９细胞系表达较强,在     

原发性肝癌组织生长激素受体mRNA的表达

目的探讨原发性肝癌组织与正常肝组织的生长激素受体(GHR)mRNA的表达情况。方法通过半定量的逆转录鄄多聚酶链式反应(RT鄄PCR)方法检测GHRmRNA在32例原发性肝癌组织与6例正常肝组织中的表达。结果癌组织GHRmRNA的表达率为90.6%(29/32),正常肝组织GHRmRNA的表达率为100%;半定量RT鄄PCR结果表明:GHRmRNA在正常肝组织、原发性肝癌组织的表达二者之间无显著性差异(P>0.05)。结论正常肝组织、原发性肝癌组织的GHR在蛋白表达水平上差异的原因与二者在mRNA水平上的表达量无明显相关性。     

内皮细胞表达孕酮受体的分子生物学证据

本研究检测孕酮受体在人内皮细胞上的基因表达。包括ＲＴ－ＰＣＲ检测分离的脐静脉内皮细胞以及用地高辛标记的ＲＮＡ探针进行原位杂交观察在周期子宫内膜及肌层中血管内皮细胞上的表达。结果显示脐静脉内皮细胞、子宫内膜及肌层血管内皮细胞均有孕酮受体ｍＲＮＡ的表达。     

组织芯片技术检测人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的表达

目的:探讨人睾丸基因TDRG1在睾丸肿瘤组织中的蛋白表达及其病理学意义。方法:运用组织芯片技术、免疫组化法检测人睾丸特异基因TDRG1在睾丸肿瘤组织和正常睾丸组织中的表达。结果:15例正常人睾丸对照组中11例(73.3%)TDRG1蛋白表达为阳性;26例精原细胞瘤中7例(26.9%)TDRG1蛋白表达为阳性,7例畸胎瘤中4例(57.1%)TDRG1蛋白表达为阳性。而12例胚胎癌中10例(83.3%)TDRG1蛋白表达为阳性,10例卵黄囊瘤中8例(80.0%)TDRG1蛋白表达为阳性。精原细胞瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有极显著性差异(P<0.01)。畸胎瘤实验组与正常人睾丸对照组相比较,两组间具有显著性差异(P<0.05)。而胚胎癌组和卵黄囊瘤组与正常人睾丸对照组相比较,没有显著性差异(P>0.05)。结论:TDRG1蛋白在精原细胞瘤和畸胎瘤的表达水平较正常对照睾丸组织显著降低,TDRG1可能为候选的抑癌基因。     

肾癌患者外周血中碳酸酐酶9 mRNA表达的临床意义

目的：探讨肾细胞癌患者外周血中碳酸酐酶9（MN）mRNA表达的临床意义。方法：应用RT－PCR技术，对30例肾细胞癌患者及30例非肾细胞癌患者外周血中肾癌细胞标志物MN mRNA进行检测。结果：非肾癌组外周血中均不表达MN mRNA。肾癌患者外周血MN mRNA阳性表达13例（43％），其中肾癌转移8例，局限性肾癌5例；肾透明细胞癌12例，混合型癌1例。外周血MN mRNA表达与肾癌的临床分期无相关性（P＞0．05）；而肾透明细胞癌阳性率（12／22）明显高于其他组织类型（P＜0．05）。结论：RT－PCR技术可较敏感地检测到血液中肾癌细胞，有助于早期诊断肾癌微小转移。MN可被视为透明细胞癌特异的相关蛋白。