解毒化瘀方对脓毒症大鼠蛋白C mRNA表达及血浆蛋白C活性的影响

目的观察解毒化瘀方对脓毒症大鼠凝血调节蛋白C mRNA (PC mRNA)表达及血浆蛋白C(PC)活性的影响,并探讨中药解毒化瘀方治疗脓毒症的作用机制。方法将大鼠分为正常组、对照组（假手术处理）、模型组（脓毒症）、中药组（造脓毒症模型前后用解毒化瘀方治疗）,动态观察术后12、24、48h及正常组肝脏组织PC mRNA表达及血浆PC活性、内毒素（LPS）水平。采用盲肠结扎穿刺法复制脓毒症模型、实时荧光定量PCR法检测PC mRNA表达、血凝仪法检测血浆PC活性,动态浊度鲎试验法检测LPS水平。且动态观察解毒化瘀方对脓毒症大鼠生存率的影响。结果在脓毒症形成过程中,模型组PC-mRNA表达水平和血浆PC活性均显著低于正常组及对照组（P＜0.01）,而血浆LPS水平则显著高于正常组与对照组（P＜0.01）;经解毒化瘀方治疗的脓毒症大鼠,其PC mRNA表达及血浆PC活性均显著高于模型组（P＜0.01）,血浆LPS水平则显著低于模型组（P＜0.01）;经解毒化瘀方治疗的脓毒症大鼠,其生存率亦高于未治疗的脓毒症大鼠（P＜0.05）。结论解毒化瘀方能增强脓毒症大鼠PC mRNA表达,提高血浆PC活性,降低血浆LPS水平,提高了脓毒症大鼠的生存率。     

乌司他丁对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用

目的 探讨乌司他丁(ulinastatin,UTI)对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用.方法 63只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、脓毒症组(B组)和乌司他丁组(C组),检测脓毒症前及脓毒症后3、6、12和24 h大鼠血浆TNI、BNP水平和心肌MDA含量、SOD活性,以及UTI的影响,并观察心肌组织超微结构变化.结果 脓毒症后3、6、12和24 h大鼠血浆TNI、BNP水平以及心肌MDA含量均显著高于假手术组(P＜0.05).心肌SOD活性低于假手术组(P＜0.05);UTI组较脓毒症组血浆TNI、BNP、心肌MDA明显降低(P＜0.05).心肌SOD活性明显升高(P＜0.05);UTI组心肌组织超微结构的损害较脓毒症组明显减轻.结论 脓毒症大鼠早期即发生明显的心肌损伤,乌司他丁能够显著减轻脓毒症时心肌损伤的程度,对脓毒症大鼠的心肌损伤有显著的保护作用.     

参麦注射液对早期盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清IL-6、IL-8水平的影响

目的 研究参麦注射液(Shenmai,SM)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)脓毒症大鼠模型早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8水平的影响.方法 96只SD大鼠随机分为A组(假手术组,n=32)、B组(生理盐水组,n=32)和C组(参麦注射液组,n=32),分别于CLP造模后1/2、12、24和36 h向A组、B组大鼠皮下注射生理盐水(5 mL/kg),C组大鼠皮下注射参麦注射液(5 mL/kg),并于术后12、24、36和48 h测量3组SD大鼠血清中IL-6、IL-8的水平.结果 CLP造模后B、C两组血清IL-6、IL-8水平均明显升高,C组在各时点的IL-6、IL-8水平均显著低于B组(P<0.01).结论 参麦注射液可显著降低脓毒症大鼠早期促炎性细胞因子IL-6、IL-8的水平,对早期脓毒症大鼠具有保护作用.     

血必净注射液对脓毒症大鼠Claudin4蛋白和辅助性T淋巴细胞1型表达的影响

目的探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肺组织Claudin4蛋白表达的影响。方法健康成年Sprague-Dawley大鼠100只,体重(250±25)g,随机分入4组,每组25只:假手术组大鼠只开腹、关腹和复苏,不行盲肠结扎穿孔术(CLP);脓毒症组大鼠行CLP;血必净3h组大鼠于CLP后3h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg;血必净12h组大鼠于CLP后12h腹腔内注射血必净注射液2mL/kg。每组随机留取8只大鼠进行生存率分析。假手术组、脓毒症组、血必净3h组大鼠在术后6、15和24h,血必净12h组大鼠在术后15和24h各随机处死5只,分别留取血液和肺组织标本,测定肺组织湿/干质量比(肺水肿指数),对肺组织进行病理学观察并进行肺损伤病理学评分,测定血清促炎细胞因子IL-6和TNF-α水平,采用免疫组织化学方法测定肺组织骨架蛋白Claudin4蛋白表达情况,采用流式细胞术检测辅助性T淋巴细胞1型(Th1)在外周血单核细胞中的表达情况。结果假手术组、脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠的术后72h存活率分别为8/8、0、1/8和0,血必净3h组显著高于脓毒症组(P<0.01),血必净12h组与脓毒症组的差异无统计学意义(P>0.05)。假手术组大鼠术后各项检测指标均基本不变。脓毒症组、血必净3h组和血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数,以及术后6、15和24h的肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6、15和24h,以及血必净12h组大鼠术后15和24h的肺水肿指数、肺损伤病理学评分、血清IL-6和TNF-α水平、肺组织Claudin4蛋白表达阳性率均显著高于血必净3h组同时间点(P值分别<0.05、0.01);脓毒症组与血必净12h组术后同时间点间上述指标的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。脓毒症组和血必净3h组大鼠术后各时间点的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于假手术组同时间点(P值均<0.01);脓毒症组大鼠术后6和15h的外周血单核细胞中Th1的表达率均显著高于血必净3h组同时间点(P值均<0.01),术后24h的外周血单核细胞中Th1的表达率显著低于血必净3h组同时间点(P<0.05)。结论早期使用血必净治疗可以有效地抑制脓毒症大鼠肺组织的炎性反应,减轻肺损伤,提高大鼠存活率,其可能机制与抑制肺组织Claudin4蛋白表达,降低肺泡通透性有关。     

肝素对脓毒症大鼠肺损伤的影响

目的研究肝素对内毒素(LPS)诱导的脓毒症大鼠肺损伤的影响及血清组织因子途径抑制物(TFPI)含量的变化。方法将健康、雄性Wistar大鼠24只,随机分为正常对照组、LPS 2 h组、LPS+肝素2 h组,每组8只。尾静脉注射LPS建立脓毒症模型。于不同时间点处理大鼠后获得肺部组织,光镜下观察肺组织病理变化,进行比较;同时检测血清TFPI水平的变化。结果与正常对照组相比,LPS 2 h组和LPS+肝素2 h组血清TFPI均显著升高(分别为P<0.05,P<0.01);LPS+肝素2 h组与LPS 2 h组相比血清TFPI升高,差异有统计学意义(P<0.05)。病理观察发现正常对照组大鼠肺组织结构清晰,肝素干预组大鼠肺组织病理损害较LPS 2 h组减轻。结论肝素的应用可使脓毒症大鼠血清TFPI水平升高,显著改善大鼠肺组织的损伤。     

脓毒症大鼠早期内皮细胞活化与损害的实验研究

目的研究脓毒症大鼠早期内皮细胞活化与损害,探讨其在脓毒症中可能作用机制。方法 72只SD大鼠随机分成3组:正常组(n=8),不作任何处理;假手术组(n=32),仅行盲肠探查术;脓毒症组(n=32)采用盲肠结扎加穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。假手术组和脓毒症组又分4组,分别在术后3、6、12和24h 4时点从腹主动脉采血,测量血清E-选择素,内皮素1(ET-1),一氧化氮(NO)水平,循环内皮细胞数量,电镜观察冠状动脉内皮细胞超微结构变化。结果血清NO、ET-1水平在CLP术后即明显高于正常与假手术组(P<0.01),在12h达到峰值,一直维持较高水平;NO/ET-1比值则随时间推移呈逐渐下降趋势,显著低于正常与假手术组。CLP术后3h血清E-选择素水平开始升高,明显高于正常与假手术组(P<0.05),在12h达到峰值,随后有下降趋势,但在24h点仍显著高于正常与假手术组(P<0.01);CLP后3h血液循环内皮细胞数量即升高,在12h达峰值,24h时点循环内皮细胞数量有所下降,但仍明显高于正常与假手术组;电镜下观察冠状动脉血管内皮细胞在脓毒症过程中损害逐渐加重。结论脓毒症大鼠早期血管内皮细胞活化、损害逐渐加重,内皮细胞损伤在脓毒症中可能发挥重要作用。     

水通道蛋白亚型3在脓毒症肺血管通透性中的作用及SS-31对其的影响

目的 探讨水通道蛋白亚型3(aquaporin 3,Aqp3)在脓毒症肺血管通透性中的作用及SS-31对其的影响.方法 采用SD大鼠盲肠结扎穿孔复制脓毒症模型.在整体动物水平上分为假手术组,脓毒症6、12 h组,在离体细胞水平分为空白对照组,LPS刺激6、12 h组,分别观察脓毒症和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激6、12 h后肺静脉Aqp3的表达和血管通透性的变化,以及干扰Aqp3后内皮细胞通透性的变化.进一步观察抗氧化剂SS-31对Aqp3的表达与血管通透性的作用.结果 脓毒症和LPS刺激内皮细胞后Aqp3表达和肺血管通透性均明显增加,与假手术组和空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).用RNAi抑制Aqp3的表达,可明显拮抗由LPS刺激引起的内皮细胞通透性增加,与LPS刺激组相比差异有统计学意义(P＜0.05).在整体动物和离体细胞水平应用抗氧化剂SS-31均可降低由脓毒症和LPS刺激引起的Aqp3表达和血管通透性的增加,与脓毒症和LPS刺激组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Aqp3参与了脓毒症肺血管通透性的调节,抗氧化措施可降低脓毒症肺血管通透性及下调Aqp3的表达.     

盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO与CGRP变化及其相关性研究

目的通过观察盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血清DAO、CGRP水平变化及相关性分析,探讨CGRP在肠黏膜损害中的作用。方法将60只SD大鼠随机分成脓毒症组和假手术组,每组30只,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型,假手术组仅行盲肠探查术。各组均于术后3、6、12、24与48 h时点,采集腹主动脉血通过双抗体夹心酶标免疫分析法检测血清DAO、CGRP水平,并做相关性分析。结果脓毒症组中的DAO水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显升高(P0.05),呈持续上升趋势,在CLP术后48 h血清DAO水平明显高于假手术组(P0.05)。脓毒症组中的CGRP水平与假手术组比较,CLP术后3 h明显降低(P0.05)呈持续降低趋势,虽随时间推移有所回升,但在CLP术后48 h仍低于假手术组(P0.05)。血浆CGRP、DAO含量的变化,经相关分析,CGRP与DAO具有高度正相关,相关系数为0.904,(P0.01)。结论盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠DAO明显高于正常水平、CGRP呈现持续降低状态,CGRP的释放减少可能是导致肠缺血缺氧和肠黏膜损伤的因素之一。     

LPS/CD14结合位点模拟肽对内毒素性大鼠急性肺损伤的治疗作用

目的 观测LPS/CD14结合位点模拟肽(mimic peptides 12,MP12)对内毒素性急性肺损伤大鼠模型的治疗作用.方法 将30只Wistar大鼠按随机数字表法分为生理盐水对照组、LPS组和LPS+ MP12组(n=10).另将40只Wistar大鼠分为两组,分别接受与LPS组和LPS+ MP12组相同的处理方法,用于观测死亡率.采用LPS静脉注射法复制内毒素性急性肺损伤大鼠模型.LPS+ MP12组在接受LPS注射后立即予MP12静脉注射.2h后抽取静脉血用于检测血浆内毒素浓度.于12 h抽取动脉血,检测动脉血氧分压(PaO2).24h后处死各组大鼠,留取右下肺用于病理检查,右上肺匀浆检测TNF-α,留取左肺行支气管肺泡灌洗并分离肺泡巨噬细胞.采用荧光显微镜检测MP12对肺泡巨噬细胞与LPS结合的抑制作用.结果 LPS组及LPS+ MP12组的血浆内毒素浓度明显高于生理盐水对照组(P＜0.01),而LPS组与LPS+ MP12组间血浆内毒素浓度无显著差异(P＞0.05).LPS组及LPS+ MP12组PaO2显著低于生理盐水对照组(P＜0.01),但LPS+ MP12组PaO2显著高于LPS组(P＜0.01).LPS+ MP12组肺组织TNF-α浓度及病理学评分显著低于LPS组(P＜0.01).LPS+ MP12组肺泡巨噬细胞与LPS的结合率显著低于LPS组(P＜0.01).LPS+ MP12组的72 h死亡率显著低于LPS组(40％ vs 75％,P＜0.01).结论 LPS/CD14结合位点模拟肽(MP12)能通过阻断内毒素与肺泡巨噬细胞的结合,减轻内毒素导致的肺部炎症及病理损害,显著提高内毒素性急性肺损伤大鼠的动脉血氧分压、减少死亡率.     

盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血浆神经肽Y水平变化与肠黏膜屏障损害相关性研究

目的研究脓毒症大鼠血浆NPY水平变化与肠黏膜屏障损害相关性。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30),假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。2组术后即刻皮下注射生理盐水5ml。各组均于术后3、6、12、24、48 h时点,采集腹主动脉血液标本测NPY、DAO。结果血浆中NPY水平均高于正常值,在CLP术后3 h较正常对照组显著升高(P0.05),达最高值,以后逐渐降低,至48 h组仍高于正常组(P0.05);血浆二胺氧化酶(DAO)水平在CLP术后3 h开始升高,以后逐渐升高趋势,至48 h显著高于正常(P0.05)。NPY与DAO经过相关分析呈高度负相关(r=-0.974,P0.01)。结论脓毒症致急性肠道损伤后血浆中的NPY早期呈现高浓度状态,DAO亦高于正常水平,NPY升高可能是造成肠缺血缺氧的因素之一。     

脓毒症模型大鼠循环内皮细胞与肝功能状态间关系的相关性研究

目的 探讨大鼠脓毒症中循环内皮细胞(circulating endothelial cells, CEC)数量的变化及其与肝功能改变的关系.方法 利用盲肠结扎穿孔模型(CLP)在大鼠制作脓毒症模型.观察CEC数量、白细胞数量的变化、以及肝组织病理组织学、血天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的改变.并探讨CEC数量与AST和ALT的相关关系.结果 CLP 6 h后动物肝细胞明显肿胀,24 h组肝细胞大量空泡变性,乃至坏死.CLP 3 h组白细胞和CEC数量比对照组明显升高.而CLP 6 h后AST、ALT才出现明显增高.CEC数量与AST和ALT水平呈负相关,Pearson相关系数(r)分别为-0.774 和-0.734(P＜0.01).用非线性回归分析CEC数量与AST和ALT的关系,发现CEC数量对ALT的最佳拟合曲线为幂函数(P＜0.05),其方程为ALT=33.052 681 24.097 309 CEC -1.CEC数量对AST的最佳拟合曲线为对数函数,但无统计学意义(P=0.607).结论 在大鼠脓毒症模型中,比起常规肝功能指标,CEC数量更能敏感反映肝脏病理进程.当肝功能指标高于正常阈值时肝细胞已经出现了显著损伤.因此,早期监测CEC数量结合已有的肝功能指标有助于早期提示肝功能损害,及时针对治疗.     

硫化氢对脓毒症大鼠心肌损伤的作用及其机制探讨

目的 研究硫化氢（hydrogen sulfide,H₂S）对脓毒症大鼠心肌损伤的作用,并探讨其作用的可能机制。 方法 采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症（cecal ligation and puncture,CLP）模型,将SD大鼠随机分为6组:假手术组、假手术+外源性H₂S供体硫氢化钠（NaHS）组、假手术+H₂S合成酶胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase,CSE）抑制剂炔丙基甘氨酸（propargylglycine,PAG）组、CLP组、CLP+NaHS组、CLP+PAG组,每组各24只大鼠。分别于术后6 h、12 h、24 h处死各组大鼠（即各组分6 h、12 h、24 h亚组）取血和心肌标本,检测血清肌钙蛋白I（cTnI）水平,大鼠心肌组织HE染色观察病理变化,测定心肌组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-10（IL-10）含量,采用RT-PCR方法检测心肌组织CSE mRNA表达,Western blot检测大鼠心肌组织核转录因子NF-κB表达。 结果 假手术各组及不同时点各指标差异均无统计学意义。与假手术12 h及24 h组相比,CLP 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度以及心肌组织病理评分、心肌组织CSE mRNA、NF-κB表达、TNF-α及IL-10含量均升高（P均<0.05）;与CLP 12 h及24 h组相比,CLP+NaHS 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度以及心肌组织病理评分、NF-κB表达和TNF-α含量降低（P均<0.05）,CSE mRNA表达和IL-10含量升高（P均<0.05）;而CLP+PAG 12 h及24 h组血清cTnI质量浓度及心肌组织病理评分、NF-κB表达和TNF-α含量升高（P均<0.05）,CSE mRNA表达和IL-10含量降低（P均<0.05）。 结论 H₂S在脓毒症所致的心肌损伤中起保护作用,这种保护作用的机制可能是通过抑制心肌组织中NF-κB表达、降低心肌组织TNF-α含量和提高心肌组织CSE mRNA表达、IL-10含量而保护心肌组织。     

小剂量肝素对脓毒症大鼠早期的干预作用

目的采用大鼠盲肠结扎穿孔术(CLP)复制大鼠脓毒症模型,探讨应用小剂量肝素对脓毒症早期的干预作用。方法将72只Wistar大鼠随机分为三组,分别是假手术组(sham)、CLP组(CLP)和肝素组(heparin),每组24只。每组又按6、12、24 h三个时间点分为三个亚组,每亚组8只,分别对三个时间点各亚组大鼠抽血常规检测大鼠血液中血小板、活化部分凝血活酶时间(APTT),用ELISA法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,留取肺组织标本做HE染色,观察肺组织病理变化。结果CLP组与假手术组相比,血小板在12 h和24 h明显减少(P<0.01),肝素组在24 h也减少(P<0.01),但较CLP组增多(P<0.01),APTT在24 h时CLP组比假手术组明显延长(P<0.01),肝素组比假手术组也延长(P<0.01),但短于CLP组(P<0.01)。血浆中TNF-α含量各时间点CLP组、肝素组均高于假手术组(P<0.01),但肝素组在12 h和24 h均低于CLP组(P<0.01)。光镜观察肝素组肺组织充血及炎细胞浸润均较CLP组明显减轻。结论肝素能通过对脓毒症凝血-炎症网络的调节,降低血液中TNF-α的含量,从而减轻肺组织炎症损害,早期发挥干预作用,在一定程度上缓解脓毒症的发生发展。     

JAK抑制剂AG490对大鼠组织iNOS和NO合成的影响

目的 观察JAK/STAT通路对脓毒症大鼠组织和血清诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和一氧化氮(NO)合成的影响.方法 采用盲肠结扎穿孔术(cecal ligation puncture,CLP)制造大鼠脓毒症模型,将48只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、CLP脓毒症组和AG490处理组.分别采集正常对照组、假手术组以及CLP组和AG490组2、6、24 h的组织和血清,采用RT-PCR测定组织iNOS mRNA表达水平,NO检测试剂盒(酶法)检测组织和血清NO含量;同时分别监测上述各时间点的平均动脉压、脉搏.结果 正常组大鼠血清、肺和血管含有少量iNOS mRNA和NO,与正常组大鼠相比,假手术组iNOS mRNA和NO的含量均未见明显差别,CLP后各时间点肺、血管和血清iNOS mRNA、NO含量均升高明显;而MAP 严重下降、脉搏剧烈升高(P＜0.05,P＜0.01).AG490处理组与CLP组相应时间点相比,肺、血管和血清多个时间点iNOS mRNA表达和NO含量均显著下降;血压和脉搏均显著好转(P＜0.05,P＜0.01).相关分析显示:肺和血管组织NO与iNOS mRNA的相关系数分别是0.75和0.73;血清与NO与肺、血管组织iNOS mRNA的相关系数分别是0.68和0.62(P＜0.05),MAP与肺、血管和血浆NO的相关系数分别是-0.85、-0.86和-0.91(P＜0.05).结论 抑制JAK/STAT通路活化可抑制脓毒症大鼠血浆和组织iNOS mRNA和NO合成;并改善循环功能.     

脓毒症大鼠DAO与TNF-α变化研究

目的研究TNF-α在脓毒症大鼠肠道损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30)。假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。各组均于术后3、6、12、24与48 h时相点,经腹主动脉采血检测血清DAO、TNF-α水平。结果血清DAO水平逐渐升高,于48 h时达到最高值,高于假手术组(P0.05);血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于假手术组(P0.05),在24 h达峰值,随后虽有下降,但仍显著高于假手术组(P0.05)。TNF-α与DAO具有正相关(r=0.897,P0.05)。结论 TNF-α的异常升高,可能在脓毒症大鼠肠道损伤中具重要作用。     

脓毒症早期恒定自然杀伤T细胞活化对预后的影响

目的 探讨脓毒症早期外周血恒定自然杀伤T (iNKT)细胞活化对炎症及病情的影响.方法 取健康雄性C57BL/6小鼠随机分为3组,分别为假手术组、盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症模型组和CLP模型+CD1d阻断性抗体预处理组(抗-CD1d组).CLP术后24 h应用流式细胞术检测小鼠外周血、脾脏、胸腺iNKT细胞水平,ELISA法后检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、干扰素γ(IFN-γ)和IL-4等细胞因子水平,分析iNKT细胞与细胞因子的相关性,检测外周血和腹腔灌洗液中的细菌菌落数.观察各组小鼠CLP后10 d生存率.选取脓毒症确诊患者及健康志愿者各20例,年龄18～70岁,检测脓毒症患者及健康志愿者外周血iNKT细胞比例及细胞因子水平,分析iNKT细胞与细胞因子及急性生理和慢性健康(APACHEⅡ)评分的相关性.结果 脓毒症模型组小鼠的iNKT细胞和TNF-α、IL-6、IFN-γ、IL-4水平均高于假手术组(P＜0.05,P＜0.01),外周血及腹腔中细菌菌落数高于假手术组(P＜0.01),术后7d内小鼠全部死亡;与脓毒症模型组小鼠相比,给予抗-CD1d抗体预处理后,抗-CD1d组小鼠外周血、脾脏、胸腺的iNKT细胞比例下降(P＜0.05,P＜0.01),外周血TNF-α、IL-6、IFN-y和IL-4水平及外周血和腹腔液中细菌菌落数减少(P＜0.05,P＜0.01),术后第10天时小鼠仍存活4只.脓毒症患者的iNKT细胞及细胞因子TNF-α、IL-6、IFN-y和IL-4水平相比健康对照组增加(P＜0.05,P＜0.01),且iNKT细胞与IFN-γ、IL-4水平及APACHEⅡ评分呈正相关(P＜0.05).结论 脓毒症早期外周血iNKT细胞水平明显增加并与脓毒症病情严重程度及预后有一定关系,提示iNKT细胞可能在脓毒症炎症反应中起重要调节作用.     

TLR-4、TNF-α和IL-1在急性肺损伤中的表达及意义

目的 研究急性肺损伤大鼠Toll样受体4(TLR-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1(IL-1)表达变化的临床意义。方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术组与模型组, 假手术组采用仅无菌开腹与盲肠翻动, 模型组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制作急性肺损伤模型,分别于假手术及CLP术后6、12 h处死大鼠,ELISA检测血清中TNF-α和IL-1的水平,免疫组织化学法检测TLR-4和TNF-α在大鼠肺组织中的表达分布。结果 模型组在两个时间点中血清TNF-α和IL-1水平均高于假手术组,差异有统计学意义(P＜0.01);且CLP 12 h组在血清中TNF-α和IL-1水平显著高于CLP 6 h组,差异有统计学意义(P＜0.01);TLR-4和TNF-α在模型组两个时间点中肺组织中表达均增强,TLR-4 在肺巨噬细胞及血管内皮细胞表达,TNF-α主要分布在气道上皮细胞和巨噬样细胞表达。结论 TLR-4、TNF-α和IL-1水平可作为早期诊断急性肺损伤的指标。     

益赛普对脓毒症大鼠心肌损伤与炎症因子表达的影响

目的研究早期应用益赛普对脓毒症大鼠心肌损伤及炎症因子表达的影响,并就其对心肌损伤机制的影响进行初步探讨。方法108只雌性清洁级SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组与治疗组,假手术组行盲肠探查术,脓毒症组和治疗组两组行盲肠结扎穿孔术制作脓毒症模型,治疗组加用益赛普以干预,均在3、9、24、36、48、72 h时相点留取标本,每时相点6只大鼠。 ELISA法检测大鼠血清心肌肌钙蛋白(cTnI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)浓度,Western blot法检测心肌核转录因子-κB p65(NF-κB p65)的表达,数据结果采用析因设计方差分析。结果①脓毒症组与治疗组血清cTnI、TNF-α、IL-1、NF-κB p65水平均高于假手术组(P<0．05),两组浓度均于3 h达峰值,而后逐渐下降。治疗组每个时相点均低于脓毒症组;②血清 TNF-α、
　　IL-1浓度均与血清CTnI表达呈显著正相关性。结论脓毒症大鼠心肌早期发生损伤,应用益赛普能够降低血清TNF-α、IL-1的释放及心肌组织NF-κB p65的表达,减少机体炎症反应,起到保护心脏的作用。     

糖皮质激素对脓毒症大鼠肾细胞凋亡的影响

目的探讨糖皮质激素对脓毒症大鼠肾细胞凋亡的影响。方法将30只大鼠随机分为对照组、脓毒症组和地塞米松组,每组10只。其中脓毒症组和地塞米松组采用盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症模型,地塞米松组行盲肠结扎穿孔术后即给予地塞米松,测定各组大鼠肾功能及肾细胞凋亡的情况。结果与对照组相比,CLP术后血清尿素氮、肌酐水平及肾脏细胞凋亡指数明显升高(P<0.01);地塞米松组与脓毒症组比较血清尿素氮、肌酐水平以及肾脏细胞凋亡指数均降低(P<0.01)。结论在CLP所致的脓毒症早期,应用地塞米松对肾脏有一定的保护作用,其作用机制可能与其抑制肾细胞凋亡的发生有关。     

凉膈散、银翘散对早期脓毒症炎症因子干预作用比较研究

目的：观察凉膈散、银翘散对早期脓毒症炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-10的不同干预作用。方法将40只新西兰大耳白兔随机分成空白对照组、模型组、银翘散治疗组、凉膈散治疗组、地塞米松对照组,采用耳缘静脉注射大肠杆菌内毒素的方法建立脓毒症模型,造模0.5 h 后药物干预,4 h 后观察兔一般情况及体温,检测血浆内毒素、促炎因子IL-1β、TNF-α及抗炎因子IL-10水平。结果银翘散组兔全身情况好转,体温、血浆内毒素、IL-1β、TNF-α的水平均比模型组降低（P＜0.01 or 0.05）;凉膈散组兔全身症状加重,体温、血浆内毒素、IL-1β、TNF-α、IL-10与模型组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论银翘散能抑制早期脓毒症卫分证相关阶段促炎因子IL-1β、TNF-α的释放而减轻炎症反应、改善症状,但凉膈散不能抑制IL-1β、TNF-α释放、减轻炎症反应。