^32P照射对HL-60细胞增殖周期的影响

目的 观察^32P照射对HL-60细胞周期的影响。方法 不同剂量^32P体外照射HL-60细胞24、48和72h，流式细胞法检测细胞周期。结果 不同剂量^32P照射HL-60细胞对细胞周期有明显影响，首先发生G2/M期阻滞；随剂量增大，G2/M期和S期均发生阻滞，以G2/M期阻滞为主。结论 ^32P体外照射HL-60细胞对细胞周期有明显的干扰作用。     

己酮可可碱对人肝癌HepG2细胞的放射增敏作用及其作用机制

目的 研究己酮可可碱(pentoxifylline, PTX)对人肝癌HepG₂细胞的放射增敏作用并初步探讨其作用机制。方法 应用MTT法检测PTX药物毒性实验,用克隆形成实验观察PTX对放射敏感性的影响,用流式细胞仪(FCM)技术分析X射线照射对HepG₂细胞周期分布和PTX对放射引起的细胞周期阻滞的影响。结果 不同浓度的PTX作用于肝癌HepG₂细胞24 h后,其细胞毒性呈剂量依赖性,最适浓度为2 mmol/L。PTX能显著降低放射后HepG₂细胞的克隆形成率,其放射增敏比为1.31±0.16。单纯照射组照射可以导致HepG₂细胞G₂期阻滞,单纯照射组及照射6 Gy加2 mmol/L PTX组的细胞20 h G₂-M期比例分别为32.15%和19.52%,PTX能够去除放射引起的HepG₂细胞G₂期阻滞。结论 PTX对HepG₂细胞有放射增敏作用,其机制可能与PTX去除放射引起的G₂期阻滞等因素有关。     

电离辐射对Jurkat T细胞周期进程的影响

目的：探讨电离辐射诱导Jurkat T细胞损伤过程中细胞周期进程的变化规律。方法：采用流式细胞术 (FCM) 检测低剂量（0.075 Gy）和较大剂量（0.5、1.0、2.0、4.0及6.0 Gy）X射线照射后Jurkat T细胞周期进程变化的时间-效应关系和剂量-效应关系。结果：时间-效应关系研究发现,2.0 Gy X射线照射后Jurkat T细胞相继发生S期延迟和G₂期阻滞,S期细胞百分率于照射后立即增加(P<0.001),而G₂+M期细胞百分率照射后8 h开始显著增加（P<0.001）。剂量-效应关系研究发现,75 mGy低剂量X射线照射即可诱导Jurkat T细胞发生S期延迟（P<0.001）和G₂期阻滞（P<0.05）;0.5~6.0 Gy较大剂量X射线照射后,Jurkat T细胞发生S期延迟和G₂期阻滞。与假照组相比较,G₀/G₁期细胞百分率显著降低（P<0.001）,在0.5~6.0 Gy内具有剂量依赖性,而S期和G₂+M期细胞百分率显著升高（P<0.05或P<0.001）。结论：X射线照射可以改变Jurkat T细胞周期进程,诱导其相继发生S期延迟和G₂期阻滞,在0.5~6.0 Gy内具有剂量依赖性。     

X射线对Jurkat和EL-4细胞周期进程的影响

目的：探讨较大剂量X射线照射对Jurkat和EL-4 2种T淋巴细胞周期进程的影响。方法：采用碘化丙啶（PI）荧光标记及流式细胞术（FCM）分别检测2.0 Gy X射线照射后不同时间点（0、4、8、16、24和48 h）Jurkat与EL-4细胞周期进程变化的时间-效应关系和1.0、2.0和4.0 Gy不同剂量X射线照射后两者的剂量-效应关系。结果：与各时间点对应的假照组比较,2.0 Gy X射线照射后Jurkat细胞G₀/G₁期和S期细胞百分率降低（P<0.01）,G₂+M期细胞百分率增高（P<0.01）,于照射后24 h变化最为显著;EL-4细胞G₂+M期细胞百分率于照射后4 ~ 8 h增高（P<0.01）,G₀/G₁期细胞百分率于照射后8 ~ 48 h增高（P<0.05或P<0.01）,S期细胞百分率于照射后8 ~ 24 h降低（P<0.01）。1.0 ~ 4.0 Gy X射线照射后16 h,随着剂量的增加,与假照组比较,Jurkat细胞G₀/G₁期和S期细胞百分率降低（P<0.05或P<0.01）,G₂+M期细胞百分率增加（P<0.01）;随着剂量的增加,与假照组比较,EL-4细胞G₀/G₁期细胞百分率升高（P<0.01）,S期细胞百分率降低（P<0.01）,G₂+M期细胞百分率仅在4.0 Gy X射线照射后显著增高（P<0.01）。结论：1.0 ~ 4.0 Gy X射线照射可以改变Jurkat与EL-4细胞周期进程,诱导Jurkat细胞发生G₂期阻滞,EL-4细胞发生G₁期和G₂期阻滞。     

二甲基亚砜诱导HL-60细胞分化的细胞周期时相性研究

目的:探讨二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO)诱导分化的HL-60细胞周期变化,进一步揭示细胞分化在细胞周期中特定的时相。方法:以分化诱导剂DMSO(终浓度为2.5%,v/v)影响下不同时间点的HL-60细胞为检测对象,应用流式细胞术分析细胞的大小及细胞表面的分化标志;碘化丙啶染色后用激光共聚焦显微镜观察细胞形态,从而对已分化细胞进行确认;应用流式细胞术分析药物诱导的细胞周期变化;再应用流式分选术结合激光共聚焦显微镜观察各期细胞形态,进一步揭示药物诱导的细胞分化在细胞周期中的时相特异性;应用流式细胞术检测G₁期Ki67的表达水平。结果:随着药物诱导时间的延长,被诱导的HL-60细胞体积逐渐增大;48h后,被DMSO诱导细胞开始表达分化标志物CD11b,并出现细胞核型的变化。被诱导的HL-60细胞的细胞周期图出现G₀/G₁峰升高,S期水平下降。随着药物诱导时间的延长,G₁期Ki67的表达水平逐渐下降。只有在G₁期细胞中可见到已分化细胞。结论:DMSO可以诱导HL-60细胞周期的G₁早期→G₁晚期阻滞,并诱导HL-60沿着粒系方向分化,细胞分化完成于细胞周期中的G₁早期。     

大蒜素对人白血病HL-60细胞生长和凋亡的影响

目的: 探讨大蒜素对人白血病HL-60细胞生长抑制和诱导凋亡作用。方法: MTT比色分析法检测大蒜素对HL-60细胞生长的抑制作用,光镜观察细胞凋亡形态学变化,流式细胞术分析大蒜素对HL-60细胞凋亡的影响。结果: 20mg/L、40mg/L、60mg/L大蒜素均能抑制HL-60细胞生长,其抑制作用呈剂量-效应关系,40mg/L大蒜素能诱导HL-60细胞出现典型凋亡形态学变化。大蒜素诱导HL-60细胞有凋亡现象和阻滞细胞周期于G₂/M期。结论: 大蒜素对人白血病HL-60细胞生长有抑制作用,其抑制作用与诱导HL-60细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。     

流式细胞术分析不同剂量X射线对HL-60细胞周期的影响及其诱导的细胞凋亡

比较不同剂量X射线对HL-60细胞的影响,建立X射线诱导HL-60细胞凋亡的生物研究模型,探索细胞周期检测点对放射剂量的耐受性.采用对数生长期的HL-60细胞经2,5,10,15,20Gy的X射线照射后培养4h,用流式细胞仪分析HL-60细胞周期的改变.结果发现,不同剂量X射线照射均可诱导HL-60细胞凋亡,凋亡率有随照射剂量增大而增高的趋势.经2,5Gy剂量照射的HL-60细胞主要表现为S期细胞的比例减少,G2/M期细胞的比例增多,经15,20Gy剂量照射的HL-60细胞主要表现为S期细胞和G2/M期细胞的比例均减少.结果显示,以X射线照射HL-60细胞可建立理想的射线诱导的细胞凋亡模型,小剂量照射和大剂量照射可能引起不同时相的细胞发生凋亡,提示细胞对放射剂量的反应性与细胞周期检测点之间存在一定的关系.     

丁酸钠对前列腺癌PC-3M细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用

目的：研究丁酸钠对前列腺癌PC-3M细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。 方法：前列腺癌PC-3M细胞经不同剂量丁酸钠作用后,相差显微镜观察细胞形态变化,MTT测定丁酸钠对PC-3M细胞的增殖抑制率,吖啶橙/溴化乙锭染色检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡峰。 结果：丁酸钠对PC-3M细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖性;并使PC-3M细胞产生凋亡形态学变化;细胞周期被阻滞于G₁/G₀期和G₂/M 期,S期细胞减少,有亚G₁峰出现。结论：丁酸钠对PC-3M细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用。     

体外稳定转染的重组质粒pEgr-hp53联合辐射对人卵巢癌SKOV-3 细胞周期进程及增殖的影响

目的：探讨体外稳定转染的pEgr-hp53重组质粒联合辐射对人卵巢癌SKOV-3 细胞周期及增殖的影响，阐明其抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法：脂质体包裹重组质粒pEgr-hp53和pcDNA3.1 体外转染SKOV-3 细胞所表达的SKOV-3-hp53和SKOV-3-vect分别接受0、0.5、2.0和5.0 Gy X射线照射，即8个实验组，通过绘制生长曲线评价肿瘤细胞增殖速度，流式细胞术检测肿瘤细胞周期进程的变化。结果：与0 Gy组比较，体外稳定转染的SKOV-3-hp53经不同剂量X射线（0.5、2.0和5.0 Gy）照射后2 d细胞数均明显降低（P<0.05 或 P<0.01），并随照射剂量的加大和照后时间的延长下降更为明显；与0 Gy组比较，G₀/G ₁期细胞百分数均明显增高（P<0.001），G₂/M期不同程度降低。SKOV-3-hp53照射组细胞数均明显低于其相应的SKOV-3-vect照射组，0.5 Gy照后4~8 d、2.0 Gy照后2 d和5.0 Gy照后6 d细胞数均明显降低（P<0.05 或 P<0.01）；G₀/G₁期细胞百分数明显增高（P<0.01），G₂/M期明显下降（P<0.01）。结论：体外稳定转染的pEgr-hp53联合辐射可使人卵巢癌SKOV-3细胞 周期阻滞于G₁期，并抑制肿瘤细胞增殖。电离辐射激活Egr-1启动子，使p53基因表达增强，加强了对肿瘤细胞生长的抑制作用。     

下调SUZ12抑制人宫颈癌细胞的增殖及作用机制

目的 探讨下调SUZ12表达对人宫颈癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法 通过RNAi（RNA干扰技术）下调SUZ12和Cdc25C蛋白的表达,通过慢病毒转染法对Hela细胞构建Cdc25C蛋白过表达及其对照细胞株,并用含嘌呤霉素培养基进行为期14 d的筛选,荧光拍照检测绿色荧光蛋白以及Western Blot法进行验证;MTT法检测下调SUZ12和Cdc25C蛋白对细胞增殖的影响;Western Blot法检测下调SUZ12表达后蛋白表达量的改变。结果 MTT结果显示,siSUZ12组中Hela及SiHa的增殖率远低于对照组,细胞增殖明显受到抑制,Hela的生存率为（60.65±7.64）%（P<0.01）, SiHa的生存率为（73.81±9.30）%（P<0.01）。时效研究结果显示,转染siSUZ12后,Hela细胞在转染第2天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为（56.13±7.78）%（P<0.01）;SiHa细胞在转染第1天后开始出现抑制,其中第5天最为明显,生存率为（70.50±3.15）%（P<0.01）。细胞周期结果显示,Hela细胞在siSUZ12作用48 h后,G₀/G₁期的比例明显增加（P<0.05）,细胞发生G₁/S期阻滞。SiHa细胞在siSUZ12作用60 h后,G₂/M期细胞数比例显著升高（P<0.01),细胞发生G₂/M期阻滞。Western Blot结果显示,下调SUZ12表达后,细胞内Cdc25C的表达明显被抑制。阻断Cdc25C的表达后能显著拮抗siSUZ12对Hela、SiHa细胞的抑制作用,而过表达Cdc25C能降低siSUZ12对细胞的抑制作用。结论 下调SUZ12能通过干扰Cdc25C的表达,产生抑制人宫颈癌细胞增殖的作用。     

131I-GMCSF诱导HL60/ADM细胞凋亡过程中对细胞周期的影响

目的观察131I-GMCSF在诱导HL60/ADM细胞凋亡过程中细胞周期的改变,进一步探讨凋亡与细胞周期改变的关系.方法采用体外放射免疫治疗模型,通过流式细胞术观察131I-GMCSF诱导HL60/ADM细胞凋亡情况及其对HL60/ADM细胞周期的改变.结果 Annexin V/PI双染色法证实一定放射性浓度的131I-GMCSF能明显诱导HL60/ADM细胞凋亡,且随着作用时间的延长,细胞凋亡率增加,流式细胞术显示作用24h后的细胞周期改变主要表现为S期阻滞和G2/M期阻滞,而作用48h后则主要引起细胞发生G2/M期阻滞.结论在放射免疫导向治疗中,辐射诱导的细胞凋亡与细胞周期发生阻滞,特别是与G2/M期阻滞有着密切的关系,细胞周期阻滞与放射敏感性可能存在正相关.     

~(131)I-GMCSF诱导HL60/ADM细胞凋亡过程中对细胞周期的影响

目的观察131I-GMCSF在诱导HL60/ADM细胞凋亡过程中细胞周期的改变,进一步探讨凋亡与细胞周期改变的关系。方法采用体外放射免疫治疗模型,通过流式细胞术观察131I-GMCSF诱导HL60/ADM细胞凋亡情况及其对HL60/ADM细胞周期的改变。结果Annexin V/PI双染色法证实一定放射性浓度的131I-GMCSF能明显诱导HL60/ADM细胞凋亡,且随着作用时间的延长,细胞凋亡率增加,流式细胞术显示作用24h后的细胞周期改变主要表现为S期阻滞和G2/M期阻滞,而作用48h后则主要引起细胞发生G2/M期阻滞。结论在放射免疫导向治疗中,辐射诱导的细胞凋亡与细胞周期发生阻滞,特别是与G2/M期阻滞有着密切的关系,细胞周期阻滞与放射敏感性可能存在正相关。     

山萘黄素对人白血病细胞系HL-60体外增殖的抑制作用

目的 观察山萘黄素对HL-60细胞体外增殖的抑制作用及其对细胞周期的影响.方法 分别采用台盘蓝拒染法及流式细胞术,在不同条件下测定细胞增殖的抑制率及细胞周期的分布.结果 应用台盘蓝拒染法,山萘黄素能够显著地抑制HL-60细胞的体外增殖并且呈现时效及量效关系.流式细胞术的结果表明:山萘黄素作用2h可使HL-60细胞的细胞周期分别阻滞于G2/M期和G0/G1期.结论 山萘黄素能够明显抑制HL-60细胞体外增殖,影响其细胞周期分布.     

The influence of curcumin on the cell cycle of Hl-60 cells- and contrast study

Over the past years, the new research findingshave shown that cancer development depends onwhether normal cell cycle is permanently disturbed.Abnormal cell cycle may contribute to uncontrolledcell growth, ace urn "lating. mutat ion and fin al c arc ino-genesis instead of progammed cell death (PCD)[1]. Itis now widely accepted that curcumin possesses definite anticancer effects by inhibition of the cancer cellproliferation. In order 'to understand further themechanism of curcumin against acute…     

5-杂氮-2′-脱氧胞苷抗白

目的:研究甲基转移酶抑制荆5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞株HL-60生长、分化、凋亡的影响,初步探讨其抗白血病作用的可能机制.方法:不同浓度和时间的5-aza-2dC处理HL-60细胞后,采用MTT比色试验检测5-aza-2dC对HL-60细胞生长的影响;采用流式细胞术检测5-aza-2dC对HL-60细胞周期及分化的影响;采用Hochest33342染色和流式细胞术检测5-aza-2dC时HL-60细胞凋亡的影响;采用RT-PCR法检测药物处理对S100A8和S100A9基因mRNA表达水平的影响.结果:(1)5-aza-2dC呈剂量和时间依赖性地抑制HL-60细胞的生长,并使HL-60细胞周期阻滞于G2/M期;(2)5-aza-2dC处理使HL-60细胞的髓系分化抗原CD11b的表达增强,在低浓度(0.5 μmol/L)时其促分化作用最明显;(3)5-aza-2dC呈剂量和时间依赖性地诱导HL-60细胞凋亡,在高浓度(5.0μmol/L)时诱导凋亡的作用最明显;(4)5-aza-2dC能明显上调S100A8和S100A9基因mRNA的表达.结论:5-aza-2dC能抑制HL-60细胞生长,阻滞HL-60细胞于G2/M期,促进HL-60细胞分化和诱导其凋亡,并能上调S100A8和S100A9基因的表达,这些作用可能是5-aza-2dC抗急性髓系白血病的重要机制.     

细胞分裂周期素25A影响放射线照射后HEp-2细胞的G_2/M期阻滞及凋亡

目的:研究放射线照射后HEp-2细胞的G2/M期阻滞与细胞分裂周期素(CDC)25A表达的相关性及过表达CDC25A蛋白对细胞周期及凋亡的影响。方法:通过流式细胞仪和Western blot方法检测4Gy X线照射后在不同时间点细胞周期及CDC25A蛋白含量;经脂质体转染pEGFP-N1-CDC25A质粒的HEp-2细胞为CDC25A组,转染pEGFP-N1质粒的为空载对照组,通过实时荧光定量PCR法检测这两组细胞中CDC25A的mRNA含量以鉴定转染效率;通过流式细胞仪检测CDC25A组和空载对照组细胞经4Gy放射线照射后细胞周期和细胞凋亡率;通过MTT法检测两组细胞的存活曲线。结果:放射线照射后G2/M期在细胞周期中的比例与CDC25A蛋白含量成正相关;CDC25A组细胞的CDC25A mRNA含量为空载对照组的15倍;过表达CDC25A联合4Gy放射线照射可废除G1/S关卡阻滞,促进G2/M期聚集和提前进入有丝分裂,可导致细胞凋亡增加和细胞存活率降低。结论:CDC25A的含量与G2/M期的比例正相关,调控CDC25A的表达可影响放射线照射后肿瘤细胞的细胞周期和凋亡水平。     

Apoptotic Sensitivity to Irradiation Increased after Transfection of chk1 Antisense Chain to HL-60 Cell Line

Summary： The HL-60 cells were transfected with chkl antisense and sense chain, and 24 h later subjected to irradiation. Twenty-four h after irradiation, the changes in the chk1 protein expression was assayed by Western blot, and the cell cycles and apoptosis rate detected by FCM. The irradiated apoptosis sensitivity was increased by antisense blocking of chk1 gene in HL-60 cell line with the apoptosis rate being 26.31 %, significantly higher than that by the sense blocking （10.34 %, 0. 025〈P〈0.05）. In HL-60 cells transfected with chkl antisense chain, the G2/M phase arrest was attenua：ted and the cells in G2/M phase were accounted for 38.42 %, significantly lower than those of the cells transfected with chkl sense chain （54.64 %, 0. 005〈P〈0.01）. It was concluded that antisense blocking of chk1 gene could increase the apoptosis sensitivity to irradiation.     

Effects of arotinoid acid on induction of apoptosis and differentiation and telomerase activity and cell cycle in the HL～60 cell line

Objective To investigate the effects of arotinoid acid (Ro13-7410) on the morphological and functional alterations of leukemia HL-60 cell line and compared with those of RA.Methods Differentiation of HL-60 cells was assessed by morphology and by NBT reduction.Trypan blue exclusion was used to determine viability.Apoptosis was assessed by changes in cell morphology and by measurement of fragmented DNA using the PCD-assay-kit.Telomerase PCR ELISA-kit tested telomerase activity.The cell cycle was analyzed by flow cytometry.Results Incubation of the HL-60 cells with 10(-6)-10(-8) mol/L Ro13-7410 resulted in suppression of cell growth.Apoptotic cells were detected following exposure to 10(-6) mol/LRo13-7410 for 3 hours by measurement of the 'in situ' enzymatic labeling of DNA breaks with biotinylated dUTP.Ultrastructural examination of Ro13-7410-treated samples showed cells with chromatin compaction and cytoplasm condensation and the presence of 'apoptotic bodies'.Cells induced into apoptosis were accompanied by increase of intracellular free Ca[2+].Percentage of HL-60 cells reduced NBT following incubation with Ro13-7410 was lower than with all-trans retinoic acid (RA) (27% vas 85%).Telomerase PCR-ELISA assay showed that HL-60 cells cultured in the absence of inducing agents had significant telomerase activity.Telomerase activity declined gradually after 10(-6) mol/L Ro13-7410 treatment, and changes becoming evident at 1 day.The inhibition of telomerase activity at day 5 of treatment with Ro13-7410 was less effective than with RA.DNA flow cytofluorimetric analysis revealed that Ro13-7410 caused partial cell arrest in the G(2)/M phase after a 2-day treatment and the percentage of cells arrested in the G(2)/M phase increased after 4-days treatment.With RA-treated cells, a reduction in the percentage of cells in the G(2)/M phase was observed after 2-day of treatment.Conclusion Our study shows that Ro13-7410 suppresses HL-60 cells growth mainly via the induction of apoptosis and is less effective than RA in induction differentiation.Ro13-7410 dramatically inhibits telomerase activity during the course of induction and results in G(2)/M arrest within 2 days.These findings suggest that Ro13-7410 is worthy of further study for its effects on leukemic cells.     

8-硝基白杨素诱导HL-60细胞生长抑制和凋亡

目的:研究8-硝基白杨素(8-nitrochyrsin,NOChR)对HL-60细胞生长和凋亡的影响。方法:MTT法检测HL-60细胞增殖活性;台盼蓝染色细胞计数法测定细胞存活率,绘制细胞生长曲线;PI染色流式细胞术分析细胞周期和凋亡率。结果:NOChR呈浓度依赖性对HL-60细胞增殖具有抑制作用;NOChR显著抑制HL-60细胞生长;PI染色流式细胞术结果表明以浓度依赖方式诱导HL-60细胞凋亡,且使细胞周期阻滞于G1期。结论:NOChR具有诱导HL-60细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞周期G1期阻滞相关。