Wnt/β⁃catenin信号通路参与马蹄内翻足畸形形成的研究

目的　探讨Sox9（sex determining region Y-box9）和β-catenin对先天性马蹄内翻足（congenital talipes equinovarus,CTE）的影响以及Wnt/β-catenin信号通路作用机制。 方法　将孕10 d的SD大鼠随机均分为实验组及对照组,以135 mg/kg全反式维甲酸溶于矿物油对实验组大鼠进行灌胃制作胎鼠CTE模型,对照组予以等量矿物油灌胃处理,取大鼠足踝部组织,通过免疫组化、RT-PCR、Western blot检测β-catenin、Sox9以及磷酸化β-catenin-S552的表达水平。 结果　与对照组相比,HE染色可见CTE模型组织中有较多的胶原组织沉积,免疫组化结果显示实验组标本Sox9与β-catenin表达增高,RT-qPCR表明实验组Sox9与β-catenin的mRNA水平显著增高,Western blot结果显示实验组Sox9与β-catenin的表达增高而磷酸化β-catenin-S552表达降低。 结论　CTE大鼠的足踝部组织中Sox9高表达受Wnt/β-catenin信号通路调控,该通路参与先天性马蹄内翻足畸形的形成。     

缺氧诱导因子1-血管内皮生长因子-Notch信号通路参与马蹄内翻足畸形的发生机制

目的　研究马蹄内翻足畸形发生的分子机制。 方法　采用HE染色观察两组胎鼠足踝部组织结构差异，免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot技术检测模型组和对照组大鼠足踝部组织缺氧诱导因子1（hypoxia inducible factor 1，HIF-1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）及Notch-1表达情况。 结果　光镜下观察，与对照组相比，实验组足踝部组织结构相对紊乱，组织间隙增大，软组织松散，局部软组织聚集挛缩。免疫组化染色、qRT-PCR和Western blot结果显示，实验组足踝部组织HIF-1表达水平下调，Vegf、Notch-1的表达减少。 结论　HIF-VEGF-Notch信号通路可能与马蹄内翻足畸形的发生相关。     

马蹄内翻足大鼠模型踝部骨骼、组织及脊髓蛋白质组学分析

目的应用全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)诱发Wistar大鼠马蹄内翻足模型为实验材料,应用蛋白质学技术探讨先天性马蹄内翻足发病机理。方法按135mg/kg体重经口给予孕10天Wistar大鼠ATRA,孕21天剖检胎鼠,提取畸形鼠和对照鼠脊髓、踝部组织(去除皮肤)及踝部骨骼总蛋白,双向电泳分离蛋白,考马斯亮蓝染色,PDQuest软件、质谱及生物信息学分析差异蛋白。应用半定量逆转录PCR检测马蹄内翻足畸形鼠和对照鼠脊髓、踝部骨骼和胫骨后肌群组织xiap、col2α1、tnnt1和ngfr基因表达。应用免疫组化染色检测Xiap蛋白表达。应用TUNEL法进行脊髓、踝部骨骼细胞凋亡检测。结果经双向电泳发现马蹄内翻足模型胎鼠多种蛋白质表达存在差异,质谱及生物信息学进一步分析发现Ⅱ型胶原蛋白等16种蛋白表达发生改变。逆转录PCR检测进一步证实xiap、col2α1在脊髓、踝部骨骼和胫骨后肌群组织表达下调,tnnt1在踝部骨骼和胫骨后肌群组织表达下调,ngfr在以上组织表达无异常。免疫组化染色进一步证实Xiap蛋白表达下调。神经、骨骼细胞凋亡发生率是对照组细胞凋亡发生率的5.4和10倍。结论马蹄内翻足大鼠模型踝部组织(去除皮肤)、踝部骨骼及脊髓多种蛋白质存在表达差异。Xiap、Col2α1和sTnT与马蹄内翻足相关,Ngfr与马蹄内翻足无关。ATRA可以诱导脊髓、骨骼凋亡发生率升高,与Xiap表达下调有关,在马蹄内翻足发生过程中发挥重要作用。     

先天性马蹄内翻足研究进展

马蹄内翻足是一种较常见的先天畸形。在神经、肌肉、骨骼、软骨及软组织等方面有病理表现。有研究认为其遗传方式是常染色体显性遗传而外显不全。环境因子、遗传背景在马蹄内翻足的发病中共同发挥作用。其致病基因可能存在于骨骼、软骨、肌肉、神经发育相关 ,特别是与足踝部发育相关的基因之中。     

先天性马蹄内翻足研究进展

马蹄内翻足是一种较常见的先天畸形。在神经、肌肉、骨骼、软骨及软组织等方面有病理表现。有研究认为其遗传方式是常染色体显性遗传而外显不全。环境因子、遗传背景在马蹄内翻足的发病中共同发挥作用。其致病基因可能存在于骨骼、软骨、肌肉、神经发育相关，特别是与足踝部发育相关的基因之中。     

不同材料矫形器的生物学性能

背景：矫形器通过力的作用以预防、矫正畸形,达到治疗骨骼、关节、肌肉和神经疾患并补偿其功能的效果。 目的：介绍了矫形器的分类,不同材料矫形器的性能及应用效果。 方法：以“矫形器,生物学性能,先天性马蹄内翻足,婴幼儿”为中文关键词,以“orthosis,Congenital Club Foot” 为英文关键词,采用计算机检索中国期刊全文数据库、PubMed数据库(1996-01/2010-12)相关文章。纳入与矫形器材料、以及先天性马蹄内翻足治疗相关内容的文献,排除重复研究或Meta分析类文章,共入选20篇文章进入结果分析。并回顾性分析应用低温热塑板或高温热塑板,根据3点力作用原理设计制作静态足踝矫形器或动态足踝矫形器,结合手法推拿等综合治疗婴幼儿先天性马蹄内翻足96例(106足)临床效果。 结果与结论：文章重点从矫形器的分类、矫形器的材料、矫形器的基本作用及临床验证几方面进行了叙述。目前常用的矫形器材料主要有金属材料(钢材和铝合金)、皮革、橡胶、塑料及各种纤维等。临床验证结果：随访1年优86例(93足);良8例(10足);可2例(3足)。提示选用高温热塑板制作成静态踝足矫形器或动态踝足矫形器治疗婴幼儿先天性马蹄内翻足早期效果满意。     

GLI3基因在单纯性马蹄内翻足发病机制中的作用

目的 探讨GLI3基因与单纯性马蹄内翻足(idiopathic congenital talipes equinovarus,ICTEV)的相关性.方法 应用变性梯度凝胶电泳技术检测GLI3基因编码区的突变.用逆转录-PCR方法研究GLI3基因在1CTEV患者下肢的表达情况.构建ICTEV大鼠模型,应用实时定量PCR、免疫组织化学染色和蛋白质免疫印迹(Western blotting)方法研究Gli3基因在ICTEV模型鼠下肢肌肉组织中的表达.结果 在84例ICTEV患者外周静脉血中未发现GLI3基因第1～8外显子以及第13外显子存在突变.在ICTEV患者及正常人下肢拇长屈肌中均未检测到GLI3基因的表达.不论在mRNA水平还是在蛋白质水平,Gli3基因在ICTEV模型胎鼠下肢组织中的表达均明显高于正常对照胎鼠.结论 GLI3基因的编码区突变可能不是ICTEV发病的主要原因,但GLI3基因的表达异常与马蹄内翻足的发病可能有关.     

先天性马蹄内翻足胎鼠脊髓组织的蛋白质组学分析

目的 在构建动物模型的基础上,运用蛋白质组学实验方法,寻找马蹄内翻足畸形相关蛋白。方法 提取单纯性马蹄内翻足畸形胎鼠及正常对照胎鼠脊髓总蛋白,进行双向电泳;经PDQuest软件分析,选择差异点进行质谱鉴定,采用生物信息学方法分析结果。结果 经双向电泳分离后,畸形胎鼠与正常对照相比,脊髓组织的烯醇化酶没有表达,微管蛋白表达下调,载脂蛋白表达上调,ATP合酶F1复合体组装因子2(ATP12P)额外表达。结论 畸形胎鼠脊髓组织与正常对照比较,存在蛋白质组差异,畸形胎鼠微管蛋白、ATP12P表达改变,可能与马蹄内翻足畸形相关。     

CCAAT/增强子结合蛋白β在系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中CCAAT/增强子结合蛋白(CCAAT/enhancer binding proteinsβ,C/EBPβ)的表达及其意义。方法从SLE患者血液中分离血浆和PBMC。通过定量PCR(quantitative PCR,q PCR)和Western blot方法检测SLE患者和健康对照PBMC中C/EBPβm RNA及其功能活性形式LAP(liver-enriched activating protein)蛋白表达水平。诱导THP-1细胞成为单核巨噬细胞,再分别用SLE患者血浆和健康对照血浆刺激24 h后,通过q PCR和Western blot方法检测C/EBPβm RNA和LAP蛋白表达水平。结果 SLE患者外周血PBMC中C/EBPβm RNA及LAP蛋白水平高于正常对照(P0.05)。SLE患者外周血PBMC中C/EBPβm RNA表达水平及LAP蛋白灰度值与SLE疾病严重程度评分(SLEDAI评分)正相关(P0.05,r0)。与正常对照血浆相比,SLE患者血浆刺激THP-1细胞诱导成的单核巨噬细胞24 h后C/EBPβm RNA和LAP蛋白水平显著升高(P0.05)。结论 SLE患者外周血PBMC中C/EBPβ表达显著升高,尤其是在单核巨噬细胞中,提示C/EBPβ表达升高参与SLE炎症发生的过程。     

先天性马蹄内翻足的遗传学研究进展

先天性马蹄内翻足是一种常见的先天畸形，常聚集发生于家族中但不符合典型的孟德尔遗传方式。遗传流行病学研究和复合分离分析提示先天性马蹄内翻足的发生存在着遗传因素的作用，因此探讨马蹄内翻足发生的分子机制将为提高遗传咨询、治疗的水平以及更好的理解足部的发育提供理论基础。     

产前超声诊断先天性马蹄内翻足的应用价值

目的　探讨产前超声诊断先天性马蹄内翻足的应用价值。 方法　选取2016-2019年于我院就诊的38例（44只患足）先天性马蹄内翻足患儿作为观察组,筛查时间为孕周20～26周,另选取同期于我院检查正常的胎儿35例（70只足）作为对照组。应用彩色超声诊断仪分别测量2组足长(FL)及足宽(FW),并计算FL/FW值;采用Dimeglio法评估患儿病情严重程度,并分析其与FL、FW及FL/FW的相关性,采用ROC法分析FL、FW及FL/FW诊断先天性马蹄内翻足的临床价值。 结果　与对照组比较,观察组患儿FL及FL/FW值较小,而FW值较大,且均有统计学差异（P<0.05）;不同Dimeglio分级的FL、FW及FL/FW比较差异显著（P<0.05）,FL及FL/FW值随Dimeglio分级升高而逐渐减小（P<0.05）,而FW值随Dimeglio分级升高而逐渐增大（P<0.05）;Spearman分析显示,FW与 Dimeglio评分呈正相关,而FL和FL/FW与 Dimeglio评分呈负相关（P<0.05）;ROC分析显示,FL、FW及FL/FW诊断先天性马蹄内翻足的曲线下面积分别为0.723（95%CI：0.591～0.926,P =0.005）、0.661（95%CI：0.522~0.849,P =0.017）、0.835（95%CI：0.709~0.984,P<0.001）,最佳诊断截断值依次为4.01、2.49、1.92,诊断灵敏度和特异度分别为80.73和81.26、81.07和78.93、90.13和90.74,经分析,FL/FW对先天性马蹄内翻足的诊断价值最大。 结论　产前超声对临床准确诊断先天性马蹄内翻足具有重要参考价值。     

肺泡Ⅱ型上皮细胞CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)的161位赖氨酸存在小泛素化修饰

目的明确人肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)中CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)能否发生小泛素相关修饰物(SUMO)修饰,并进一步鉴定其修饰位点。方法采用免疫荧光双标法检测C/EBPα和SUMO1在人AECⅡ中的表达情况。免疫共沉淀(Co-IP)检测C/EBPα和SUMO1在AECⅡ中的相互作用,明确人AECⅡ中C/EBPα能否发生SUMO化修饰。利用SUMOsp软件预测人C/EBPα的SUMO化修饰位点为C/EBPα上第161位赖氨酸(即K161),构建野生型GFP-C/EBPα质粒和突变型GFP-K161R质粒并转染AECⅡ,采用Co-IP鉴定C/EBPα的SUMO化位点。结果免疫荧光双标发现AECⅡ中SUMO1和C/EBPα存在共定位现象,且主要定位于细胞核中; C/EBPα和SUMO1的Co-IP结果出现C/EBPα-SUMO条带,提示C/EBPα能与SUMO1相互作用。野生型GFP-C/EBPα转染的AECⅡ中,可检测到C/EBPα-SUMO特异性条带,而突变型GFP-C/EBPα转染的AECⅡ中,不能检测到C/EBPα-SUMO特异性条带,提示C/EBPα的SUMO化修饰位点为C/EBPα第161位赖氨酸。结论人AECⅡ中C/EBPα能发生SUMO化修饰且其修饰位点为C/EBPα第161位赖氨酸。     

先天性马蹄内翻足的个体化治疗方案对预后的影响

目的通过对先天性马蹄内翻足的治疗,进一步阐明个体化的治疗方案,是影响先天性马蹄内翻足预后的重要因素。方法选取8年间,可以随访的38例66足的先天性马蹄内翻足患儿,根据不同年龄,不同的足部体检结果,分别采取Ponseti治疗法、肌力平衡术、Mackay手术、Turco手术、三关节融合术,并统计治疗结果。结果本组38例66足获得随访,随访时间6月～3年,平均13个月,根据临床手术效果评定标准,优：46足;良：14足;一般：6足;差：0足。无并发症发生。结论马蹄内翻足的治疗是一个复杂的过程,不能以一种治疗措施概括,要根据不同的年龄、不同的个体状况,而采取不同的治疗方法,寻找马蹄足的发病原因依然是彻底治疗、防治并发症的关键。     

先天性马蹄内翻足的治疗现状

近先天性马蹄内翻足(congenital club foot,CCF)是儿童最常见的四肢畸形之一, 表现为足马蹄、后足内翻、前足内收、高弓.其发病率在0.1～0.45%,男:女=2:l,单侧稍多于双侧,马蹄内翻可单独存在,亦可伴有其他如多指等畸形.     

5′HOXD基因与单纯性马蹄内翻足的相关性分析

目的检测HOXD10、HOXD12、HOXD13基因内4个已知单核苷酸多态(single nucleotide poly-morphisms,SNP)rs2593778、rs847154、rs847151、rs13392701在单纯性马蹄内翻足核心家系中的分布情况,分析各个SNP位点及所构成单倍型与单纯性马蹄内翻足的相关性。方法应用限制性片段长度多态性技术结合测序,分析84个单纯性马蹄内翻足核心家系4个SNP位点基因型;应用ETDT软件统计分析各SNP位点基因型与单纯性马蹄内翻足的相关性;应用TRANSMIT软件构建单倍型并统计分析单倍型频率是否存在差异。结果位于HOXD12基因5′侧翼序列的SNP位点rs847154和位于HOXD13第1外显子的SNP位点rs13392701在单纯性马蹄内翻核心家系中存在传递不平衡(P<0.05);位于HOXD12基因第1外显子的SNP位点rs847151未检测到多态;位于HOXD10第1外显子的SNP位点rs2593778经ETDT分析无统计学意义。结论HOXD12基因5′侧翼序列的SNP位点rs847154和位于HOXD13第1外显子的SNP位点rs13392701与单纯性先天性马蹄内翻足有明显的相关性,提示HOXD12、HOXD13可能是单纯性马蹄内翻足重要的易感基因。     

5''HOXD基因与单纯性马蹄内翻足的相关性分析

目的检测HOXD10、HOXD12、HOXD13基因内4个已知单核苷酸多态（single nueleotide polymorphisins,SNP）rs2593778、rs847154、rs847151、rs13392701在单纯性马蹄内翻足核心家系中的分布情况，分析各个SNP位点及所构成单倍型与单纯性马蹄内翻足的相关性。方法应用限制性片段长度多态性技术结合测序，分析84个单纯性马蹄内翻足核心家系4个SNP位点基因型；应用ETDT软件统计分析各SNP位点基因型与单纯性马蹄内翻足的相关性；应用TRANSMIT软件构建单倍型并统计分析单倍型频率是否存在差异。结果位于HOXD12基因5’侧翼序列的SNP位点rs847154和位于HOXD13第1外显子的SNP位点rs13392701在单纯性马蹄内翻核心家系中存在传递不平衡（P〈0．05）；位于HOXD12基因第1外显子的SNP位点rs847151未检测到多态；位于HOXD10第1外显子的SNP位点rs2593778经ETDT分析无统计学意义。结论HOXD12基因5’侧翼序列的SNP位点rs847154和位于HOXD13第1外显子的SNP位点rs13392701与单纯性先天性马蹄内翻足有明显的相关性，提示HOXD12、HOXD13可能是单纯性马蹄内翻足重要的易感基因。     

GLI3基因与单纯性马蹄内翻足的关联分析及其突变筛查

目的对GLU基因与单纯性马蹄内翻足进行关联分析和突变筛查，探讨GLU基因与单纯性马蹄内翻足的相关性。方法应用限制性片段长度多态性分析技术，分析84个单纯性马蹄内翻足核心家系中GLI3基因内两个单核苷酸多态（single nucleotide polymorphisms, SNP）位点的基因型，并应用ETDT软伯统计分析各SNP位点基因型与单纯性马蹄内翻足的关联；应用变性梯度凝胶电泳技术对103例单纯性马蹄内翻足患者GLI3基因的第9至12外显子进行突变筛查。结果经ETDT分析，位于GLI3基因第4外显子的cSNP rs846266差异无统计学意义（χ^2=3．3582，P〉0．05）；第14外显子的cSNP rs929387差异有统计学意义（χ^2=7．2466，P〈0．05），在单纯性马蹄内翻足核心家系中存在传递不平衡；发现1例患者及其母亲的第9外显子有108（G→A）的同义点突变。结论GLI3基因与单纯性马蹄内翻足相关，其第9至12外显子可能并非该病的突变热点。     

β-catenin不同表达定位与胃癌临床病理特征的关系

目的探讨β-catenin不同表达定位在胃癌组织中的意义及与胃癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法检测120例胃癌组织及50例正常胃黏膜中β-catenin的表达情况。结果β-catenin在正常胃黏膜中的表达定位于细胞膜,阳性率为100. 00%。但其在胃癌组织中细胞膜表达缺失,出现细胞质、细胞核或质/核异位表达,异位表达率高达81. 67%(98/120),其异位表达与胃癌分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P 0. 05)。120例胃癌组织中,β-catenin细胞核异位表达率为36. 67%(44/120),并且其细胞核表达与胃癌TNM分期有关(P 0. 05),β-catenin细胞核阳性患者5年总体生存率明显低于细胞核阴性者(P 0. 05)。结论在胃癌的发生过程中β-catenin起重要作用,其不同表达定位与胃癌的进展有关,β-catenin有望成为胃癌诊断及治疗的潜在靶点。     

遗传性垂直距骨伴拇指内翻爪状畸形两家系18例

家系 1　先证者 ,男 ,13岁。因右足马蹄内翻畸形 5岁时在外院作跖腱膜松解、跟腱延长术 ,而后畸形复发入我院。查体 :发育良好 ,心、肺、腹正常 ,右足马蹄内翻畸形 ,左足呈舟形足畸形 ,双手呈拇指内翻爪状畸形 ,Froment征阳性。双侧拇收肌、拇短屈肌、骨间肌、小鱼际肌瘫痪但无感觉缺失。生理反射存在 ,病理反射未引出。 X线摄片示 :右足马蹄内翻畸形 ,左足先天性垂直距骨。结合家族史诊断为 :遗传性垂直距骨伴拇指内翻爪状畸形 ,家系调查见图 1。该家系中仅先证者右足为先天性马蹄内翻畸形 ,其余发病者均为双足垂直距骨 ,且双手畸形随年龄…     

北京市西城区34例先天马蹄内翻足流行学分析

目的了解近年来北京市西城区医院监测先天马蹄内翻足陷发生情况。方法对2005年10月1日～2010年9月30日间北京市西城区产科医院孕13周～产后7天的胎儿及新生儿进行出生缺陷监测,并对监测结果进行率及顺位等分析。结果①监测到马蹄内翻足患儿34例,发生率为8.76/万,发生例数逐年增多,女孩高于男孩,外地高于本市。②容易发生部位按例数多少依次为双足、左足及右足;容易合并其他畸形按合并畸形例数多少依次为左足、双足、右足。③单纯马蹄内翻足占67.65%,同时合并其他畸形占32.35%;合并的畸形最多的为肢体短缩,其次为先心、唇腭裂、肾畸形。④先天马蹄内翻足产前诊断率为44.12%,孕中期产前诊断率为44.12%,孕晚期产前诊断率为9.52%。合并其他畸形的先天马蹄内翻足产前诊断率为90.91%,单纯马蹄内翻足畸形的产前诊断率为21.74%。结论西城区先天马蹄内翻足外地多于本地,以单纯马蹄内翻足为主;同时合并其他畸形的先天马蹄内翻足容易在产前发现;若提高产前诊断率需提高孕晚期单纯马蹄内翻足的B超检测水平。