抗链球菌溶血素O抗体及类风湿因子试验中液态弱阳性质控血清的研制

目的　研制抗链球菌溶血素 O抗体 ( Antistreptolysin- O antibody,ASO)、类风湿因子 ( Rheuma-toid factor,RF)胶乳凝集试验中液态弱阳性质控血清。方法　根据试验选定 ASO、RF胶乳凝集试验中液态弱阳性质控血清的稀释滴度 ,乙二醇防冻的最终浓度。用统计学处理 ,观察液态弱阳性质控血清的瓶间差。结果　 ASO、RF阳性血清稀释度分别为 1∶ 4和 1∶ 1 6,乙二醇防冻的最终浓度为 2 0 % ( v/v) ;室温、4℃、- 2 0℃存放时间分别为 2 mo、6mo和 1 y;各瓶间测定结果无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。结论　建立了ASO、RF胶乳凝集试验中室内质量控制用液态弱阳性质控血清的制备方法 ,同时按设计的方法制备不同浓度的质控血清可应用到室间质量评价活动 ,具有推广应用的前景。     

冻干质控血清复溶时间及葡萄糖值的变化

冻干定值质控血清(批号83-28)4瓶,同时加去离子水3.0ml,双手搓转混匀10分钟,室温静置30分钟;在GEMSTAR 生化分析仪上用GOD-POD 法测定葡萄糖,每瓶血清测10次共测40次。剩余血清贮于4℃冰箱内,至复溶后1、6、12、24、36、48小时     

β_2-微球蛋白血清质控物的制备及评价

目的制备β_2-微球蛋白(β_2-MG)质控血清并对其进行质量评价。方法收集病人混合血清样本制备β_2-MG质控物,并依据《能力验证样品均匀性和稳定性评价指南》和ISO Guide 35标准对其均匀性及稳定性进行评价。结果均匀性检验结果显示制备的2个浓度水平质控物样品内和样品间均匀性差异无统计学意义(F=0.699,2.091,均P0.05)。在室温条件下保存至少稳定5天(t=-1.76,-2.64,均P0.05);4℃储存条件下至少稳定28天(t=-1.86,-2.44,均P0.05);-20℃储存条件下至少稳定4个月(t=0.26,-2.68,均P0.05);-80℃储存条件下至少稳定1年(t=-0.96,0.01,均P0.05)。结论自制的β_2-微球蛋白质控血清制备方便,其均匀性、稳定性符合标准要求。     

介绍一种冻干质控血清复溶方法

冻于质控血清是临床实验室进行室内质控和室间质评常用的参考物之一,国内有报道每批质控血清瓶间差异较大,但都是使用传统的复溶方法。笔者根据实际工作经验,建立了一种减小其误差的方法,现予以报道。1方法①将冻于质控血清瓶中央的铝盖拉开,插入一只7号外头用于排气。②选用一个经水称重法校正合格的可调加液器,调刻度为3．0ml,瓶内盛重蒸馏水,在出液四套上一只16号外头,排除管道内的气泡,再将针头插入质控瓶中,位置比排气针头略低,准确加入3．0ml重蒸馏水,取出针头。③持质控血清完全溶解后,再打开铝盖和瓶塞,即可用于测定…     

DADE冻干质控血清瓶间差及复溶后稳定性测定

质控血清是临床化学质量控制的必备材料 ,其瓶间差及稳定性直接影响质控的结果。对质控血清的瓶间差及稳定性的评价 ,有助于我们更好地开展质控工作。 1 999年我省检验中心使用 DADE冻干质控血清作为室间质评质控物 ,选用时对其瓶间差及复溶后的稳定性进行测定 ,现将其测定结果介绍如下。1　材料和方法1 .1　质控血清　 DADE冻干质控血清 ,批号 EXI-1 0 9。1 .2　测定仪器　Beckman CX7型生化分析仪 ,全部使用原装试剂盒测定。1 .3　瓶间差测定方法　连续测定 2 0瓶质控血清结果的变异为批内总变异 ,连续 2 0次测定同一瓶质控血清结果…     

自制雌二醇性激素室内免疫质控制品及其性能评价

目的自制雌二醇（E2）性激素免疫检测室内质控品,对其临床检验实际应用价值进行初步评价。方法收集日常检测标本中E2水平含量较高的患者血清,用正常血清稀释成低和高2种浓度,灭活,离心,加入5‰的叠氮钠,小量分装保存于-80℃。结果保存于-80℃的血清标本复融后常规测定,结果显示其有较好的重复性和稳定性,无明显的批内、瓶间差异。结论通过此方法制备的低、高浓度E2质控血清标本能满足临床E2检测室内质控要求,可以作为日常E2免疫检测的质控品使用。     

自制雌二醇性激素室内免疫质控制品及其性能评价

目的自制雌二醇(E2)性激素免疫检测室内质控品,对其临床检验实际应用价值进行初步评价。方法收集日常检测标本中E2水平含量较高的患者血清,用正常血清稀释成低和高2种浓度,灭活,离心,加入5‰的叠氮钠,小量分装保存于-80℃。结果保存于-80℃的血清标本复融后常规测定,结果显示其有较好的重复性和稳定性,无明显的批内、瓶间差异。结论通过此方法制备的低、高浓度E2质控血清标本能满足临床E2检测室内质控要求,可以作为日常E2免疫检测的质控品使用。     

自制异常值血脂复合质控品

目的 探讨利用临床血清标本自制血脂异常值复合质控品的方法。方法 采用体检健康者混合血清，通过聚乙二醇6000(PEG6000)沉淀法浓缩脂蛋白，依据所得各成分浓度，与健康人混合血清混合后得到异常值血脂复合质控品，加入保护剂和防腐剂。依据国家行业标准《生化分析仪用质控物》评价均匀性、复融开瓶稳定性、长期保存稳定性。结果 瓶间均匀性结果经F检验，P均>0.05;复融开瓶后4～8℃保存至少稳定14 d;-20℃冰冻保存可以稳定12个月。结论 利用临床血清标本制备血脂复合质控品，标本易得、方法简单、成本低廉，各项性能指标完全满足要求，不仅为临床自制异常值血脂质控品提供了一个新的方法，同时也为血脂质控品研制提供了一个新的思路。     

尿液中高香草酸(HVA)的简易比色测定法

收集24小时尿标本置于含10ml浓盐酸的瓶中,贮存于4℃在一周内进行测定.抽提是在两只50ml提取管中进行,每只测定管和测定空白管各加尿液3ml和H_2O 1.5ml;于每只标准管和标准空白管中加入10m mol/L HVA(在10mmol/L HCl中的)溶液0.01ml和H_2O4.5ml.向所有的各管加6mol/L HCl 0.5ml和NaCl 1g.     

自制C肽质控品及其性能评价

目的 应用化学发光法检测血液C肽时,实验室缺乏相应的质控品。探讨自制C肽混合血清质控品作为该法测定C肽室内质控品的可行性。方法 从糖尿病患者和健康体检血清中分别收集C肽低值血清(浓度在1.20 ng/ml左右)和高值血清(浓度在12.00 ng/ml左右),排除溶血、黄疸及脂浊血清,防止细菌污染,乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒指标均为阴性,然后分别进行混合、防腐、分装,-20℃保存。使用西门子公司化学发光C肽试剂盒进行测定,对自制C肽混合血清质控品进行性能评价。结果 低值、高值两个水平的血清C肽质控品的批内不精密度分别是4.46%和4.15%; 天间不精密度分别是6.00%,5.56%; -20℃保存稳定期至少6个月; 经单因素方差分析,每个月之间相比,低值和高值的F值分别是0.665,0.602,P值分别是0.471,0.568,均>0.05,差异无统计学意义; 瓶间无显著性差异。结论 -20℃保存的低值和高值两个水平自制C肽混合血清质控品能够符合室内质控品要求。     

自制糖化血红蛋白质控品及其临床应用

目的 利用血液标本制备低、中、高3个浓度水平糖化血红蛋白A1c(HbA1c)质控品。方法 收集健康体检者静脉血标本，离心去除血浆后的红细胞经洗涤后加入0.01 mol/L pH 6.8磷酸盐缓冲液溶解红细胞，在血红蛋白液中加入终浓度555.6 mmol/L葡萄糖，37℃水浴48 h,当HbA1c达到预期值后，4℃透析24 h去除葡萄糖。异常水平质控品(水平2、水平3)分别用水平1与37℃温育生成的高值HbA1c混合而成。结果 葡萄糖浓度≤55.5 mmol/L时，37℃温育24～72 h, HbA1c几乎没有变化；葡萄糖终浓度为555.6 mmol/L,温育48 h即可达到预期值(13.0%～16.0%)。-20℃冰冻保存的质控品，开瓶复融后至少稳定14 d,瓶间均匀性CV均<2.0%,反复冻融8次对结果无影响，-20℃冰冻保存1年结果稳定。结论 采用健康体检者静脉血标本制备HbA1c质控品，稳定性良好、标本易得、方法简单，便于推广使用。     

DACM——一种荧光示踪的新标记物

DACM[N-(7-dimethylamino-4-methylcou-marinyl)-maleimide]可作为一种敏感的荧光标记物。实验证明 DACM 标记兔抗人 IgG 的结合物可用葡聚糖凝胶 G50胶滤法排除未反应物,而且此标记反应不影响抗体的免疫学活性。标记方法将兔抗人 IgG 免疫血清按一般方法提取并精制 IgG,用 pH 8.2的0.55M Tris-HCl 缓冲液配成8mg IgG/ml 溶液,于20℃用抽气法排气1小时。加入2-巯基乙醇(2-ME)到最终浓度为4mM,于20℃静置1小时。将 DACM 丙酮溶液加入到 IgG 液中使其浓度达4mM,于20℃静置1小时。在pH 7.4的5mM PBS 中透析过夜,通过葡     

自制糖化血红蛋白质控品及其临床应用

摘要:目的利用 血液标本制备低、中、高3个浓度水平糖化血红蛋白A1c(HbA1c)质控品。方法收集健康体检者 静脉血标本,离心去除血浆后的红细胞经洗涤后加入0.01mol/LpH6.8磷酸盐缓冲液溶解红细胞，在血红蛋白液中加入终浓度555.6 mmol/L葡萄糖,37℃水浴48h,当HbAlc 达到预期值后,4℃透析24h去除葡萄糖。异常水平质控品(水平2、水平3)分别用水平1与37 C温育生成的高值HbA1c混合而成。结果葡 萄糖浓度≤55.5 mmol/L时,37℃温育24~72 h,HbA1c几乎没有 变化;葡萄糖终浓度为555.6 mmol/L,温育48 h即可达到预期值(13.0%~ 16.0%)。-20℃冰冻保存的质控品,开瓶复融后至少稳定14d,瓶间均匀性CV均<2.0%，反复冻融8次对结果无影响,-20℃冰冻保存1年结果稳定。结论采用健康体检者 静脉血标本制备HbAle质控品,稳定性良好、标本易得、方法简单,便于推广使用。     

生化质控血清分装冷冻保存法

市售生化质控血清一般都是冻干品 ,临用时用重蒸馏水或去离子水复溶后使用。国产质控血清 (如上海生物制品研究所生产 )每瓶复溶后为 3ml,含成分较少 ;进口质控血清 (如宝灵曼生化质控血清 )每瓶复溶后为 1 0 ml。成分较多 ,含多种酶类 ,但价格较贵。复溶后的质控血清 ,最好在短时间内用完 ,因其中一些成分如葡萄糖 ( Glu)、胆固醇( Ch)、甘油三酯 ( TG)、酶类如谷丙转氨酶 ( ALT)、磷酸肌酸激酶 ( CK)等 ,放 4～ 8℃冰箱保存 ,几小时至数小时内会有较大的改变。基层医院或中、小型医院实验室作生化质控时 ,质控血清用量约为 0 .5～ 1 .…     

DADE Moni—Trol临床化学质控品的应用性能评价

目的 了解DADE Moni-Trol临床化学质控品的瓶间差和不同贮存条件下的稳定性，为实验室正确使用提供参考依据。方法 运用连续测定多瓶样品结果的变异表示的总不精密度与用同一瓶样品进行连续测定结果的变异表示的分析不精密度之差计算质控品的瓶间差。对贮存对4℃或－15℃的2种水平质控品的稳定性用t检验进行统计分析。结果 高浓度的水平2的平均瓶间差比低浓度的水平1要小，它们分别为1.0%和2.1%。2个水平的大部分评价项目在4℃和－15℃贮存条件下分别可以稳定7d和30d，但质控品水平1、水平2的TG在4℃保存条件下第4天起测定值有上升趋势，水平2的TBIL在－15℃贮存条件下第29天起测定值有下降趋势。结论 实验室在使用该冻干质控品时必须严格按照说明书复溶要求操作贮存。     

手工法和机采法制备浓缩血小板质量的比较

输注血小板对血小板减少和功能异常引起的出血有较好的纠正作用 ,而浓缩血小板中血小板的数量和质量对临床输注效果十分重要。传统离心法(手工分离法 )制备的浓缩血小板与连续流动式血细胞分离机采集的浓缩血小板相比 ,质量上的差异有显著性。本文对两种方法制得浓缩血小板的主要质控指标进行比较。材料与方法1　手工法　 40 0 ml全血采集于 ACD- B抗凝血袋(上海市血液中心生产 )中 ,4h内离心 ( 2 2℃ ,30 0 0r/min,1 0 min,Sorvall RC- 3BP型离心机 ) ,将上层血浆分入浆袋 1 ,近白膜层约 30 ml血浆与约 60ml白膜层一起分入浆袋 2 ,再从…     

测定β_2—糖蛋白Ⅰ的ELISA法

β_2—糖蛋白Ⅰ的检测是肾小管损害的一个新的指标,本文作者认为以前的辐射状单向琼扩法对于健康人及轻微肾小管损害病人尿的检测缺乏灵敏性,因此建立了ELISA 法。方法:收集健康志愿者和各种不同肾损害病人的血清及随机尿标本(4小时内收集、不加防腐剂)保存于-20℃、-25℃条件下。1.用1∶500稀释的兔抗β_2—糖蛋白Ⅰ抗体包被微孔板,每孔加100ul室温,暗处放置2～6h。2.用洗液(含10g/LNaCl、1ml/L 吐温-20去离子水)洗板10次,每次200μl。     

前列腺特异抗原质控品的制备与评价

目的制备性能稳定的前列腺特异抗原(prostate specific antigen,PSA)质控品,用作PSA定量检测试剂临床检测的质量控制。方法将人源PSA蛋白以不同稀释配方稀释成低、中、高3个浓度,制备液体和干粉两种形式的质控品,用Abbott定量检测试剂进行活性检测,考察PSA质控品的稳定性能。结果 PSA液体质控品使用未灭活血清稀释,制备过程简单,瓶间差较低,冷藏保存可至少稳定8个月,冷冻保存可至少稳定18个月;PSA干粉质控品使用含有10%人血清、50 g/L甘氨酸和4g/L人血清清蛋白的PBS制备,冻干粉外观均匀,复溶后澄清透明,干粉在37℃和复溶后25℃可稳定放置4周,冷藏保存至少稳定12个月。结论制备的PSA液体质控品和干粉质控品使用方便,稳定性能够满足室内质控要求,具有较好的市场前景。     

HIV抗体外部对照质控血清的制备及评估

目的 制备HIV抗体弱阳性外部对照质控血清并进行评估.方法 利用HIV抗体试剂盒中的阳性对照与正常人血清按一定比例混合,制备质控血清.ELISA法进行质控效果和稳定性检验.结果 ①在室内质控方面:自制质控血清与万泰公司质控血清有相似的效果.②稳定性检验:质控血清在4℃保存至少稳定2 mo,室温保存稳定1 mo,-20℃冻存至少稳定1 y.③反复冻融和加入硫柳汞对检测结果没有影响.结论 质控血清制备方法简便,易于保存,从质控效果和稳定性两方面评估符合国家质控物要求,可用于HIV抗体检测的室内质控.     

用香红O染色的抗原微量凝集试验检测布氏菌抗体

本文介绍用番红O(Safranine O)染色的抗原微量凝集试验(MAT)来检测布氏菌抗体,并与试管凝集试验(TAT)作了比较。 TAT是检测人体抗布氏菌抗体的应用最广泛的试验方法。使用的抗原浓度是,将原液用0.5%石碳酸盐水作1∶50稀释。将血清在含0.85%盐水的试管内作2倍稀释,从1∶10稀释开始,至1∶5120为止,包括已知高、低滴度和阴性参考血清对照。每管含0.5ml稀释血清,加入等量的1∶50稀释抗原(0.5ml),混匀后置37℃水浴孵育48小时,观察结果。 MAT法系采用Ganltney等改良法使用的抗原浓度是将原液用pH7.2的磷酸盐缓冲盐水(含最终浓度为0.005%的番红O)作1∶50稀释。番红O-磷酸盐缓冲盐水稀释液是取1 ml 0.5%番红O水溶液