DCC基因与卵巢肿瘤研究新进展

DCC基因即结直肠癌缺失基因，是目前发现的最长的肿瘤抑制基因，其结构复杂，经国内外许多研究者研究发现其在卵巢肿瘤发生中扮演重要角色，目前已受到诸多学者的关注。本文就此方面的研究现状予以综述。     

DCC基因与卵巢肿瘤研究新进展

DCC基因即结直肠癌缺失基因,是目前发现的最长的肿瘤抑制基因,其结构复杂,经国内外许多研究者研究发现其在卵巢肿瘤发生中扮演重要角色,目前已受到诸多学者的关注。本文就此方面的研究现状予以综述。     

Survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对化疗药物的增敏作用

目的观察survivin反义寡核苷酸（ASODN）对胃癌细胞的增殖、凋亡及对化疗药物敏感性影响。方法人工合成survivin硫代ASODN,通过脂质体转染胃癌细胞株MGC803后,用MTT法检测细胞毒作用,流式细胞术检测细胞的凋亡;RT-PCR、Western blot检测survivin mRNA及蛋白的表达。结果survivin ASODN抑制MGC803增殖,呈剂量依赖性;各survivin ASODN处理组MGC803细胞凋亡率显著高于对照组（P〈0.01）;survivin ASODN处理组MGC803细胞survivin蛋白及mRNA的表达水平显著下降（P〈0.01）;200nmol/Lsur-vivin ASODN和顺铂联合处理MGC803细胞株,其细胞抑制率为74.7%,显著高于单用survivin ASODN组的38.4%和单用顺铂组的33.6%（P〈0.01）。结论survivin ASODN能够抑制MGC803细胞增殖、诱导凋亡,并能增加MGC803细胞对化疗药物的敏感性。     

化疗对卵巢癌患者免疫功能的影响

目的;研究化疗对卵巢癌患者细胞免疫功能的影响及其临床意义。方法：应用间接免疫荧光法、MTT比色法、ELISA检测围手术期卵巢癌患者外周血淋巴细胞（PBL）T淋巴细胞亚群、自然杀伤（NK）活性及血清可溶性白介素2受体（rIL-2R),结果：卵巢癌患者PBL中CD3^ ,CD4^ ,CD4^ /CD8^ 均明显低于良性肿瘤组,而ac^ ,明显升高,化疗后患者CD3^ ,CD4^ 明显降低,而rIL-2R,NK活性无明显改变。结论;化疗可使卵巢癌患者细胞免疫功能明显受抑,且恢复困难,需选择适当免疫治疗以提高机体自身抗瘤活性。     

野生型p53基因转染卵巢癌SKOV-3细胞对化疗药物顺铂敏感性的影响

目的 研究野生型p53基因转染卵巢癌SKOV－3细胞对化疗药物顺铂敏感性的影响。方法 用脂质体介导的转染技术，将含有全长人野生型p53 cDNA的真核表达重组质粒分别导入受不同浓度顺铂作用的SKOV－3培养细胞中，观察p53不同状态下对肿瘤细胞化疗敏感性的差异。结果 转染p53基因后的SKOV－3细胞集落形成率与未转染的SKOV－3细胞相比，抑制率为56．4％。用0.5μg/ml顺铂分别作用24h、48h后，集落形成数分别下降了76．2％、84．1％；用1μg/ml顺铂分别作用24h、48h后，集落形成数分别下降了89．5％、93．7％。转染p53基因后，肿瘤细胞S期和G2／M期的比例下降，G1／G0期的比例增加，p53基因的转染使卵巢癌细胞发生G1期阻滞。结论 外源性野生型p53基因的转染增加了卵巢癌SKOV－3细胞对化疗药顺铂的敏感性。     

DCC基因与妇科肿瘤的研究

结直肠癌缺失基因 ,即 DCC基因 ,是近年来发现的大肠癌中一个重要的肿瘤抑制基因 ,其在妇科肿瘤中的作用也日益受到研究者的重视 ,但有关此方面的研究国内尚未见报道。本文就 DCC基因的分子生物学特性、作用机制、与妇科肿瘤关系的研究等方面作一简要综述     

DCC基因与妇科肿瘤研究新进展

结直肠癌缺失基因——DCC基因是近年来发现的一个重要的肿瘤抑制基因,其失活和表达异常与大肠癌的诊断、治疗及预后关系密切。DCC基因在妇科肿瘤的发生发展中所起的作用已受到国内外诸多学者的关注。本文就此方面的研究现状作一简要综述。     

大蒜素对人皮肤基底细胞癌A431细胞的放疗增敏作用研究

目的 探讨大蒜素(Allicin)是否能增加人皮肤基底细胞癌A431细胞的放疗敏感性及其作用机制.方法 MTT法检测Allicin对A431细胞的生长抑制率,筛选出半数抑制浓度(IC50);将细胞分为对照组、照射组(IR组)、Allicin组和IR+Allicin组.采用流式细胞仪检细胞自噬水平.结果 MTT结果显示大蒜素作用A431细胞24、48、72 h后IC50分别为35.47、18.64、6.56 mmol/L(F =22.54、18.94和21.63,P＜0.05).和对照组相比,Allicin组和Allicin+ IR组A431细胞的自噬水平均增加(F=30.15、28.36,P＜0.05),以Allicin+ IR组升高最显著.结论 Allicin通过上调人皮肤基底细胞癌A431细胞的自噬水平来增加其放疗敏感性.     

外源性P53基因转染的人肝癌细胞化疗药物敏感性的研究

目的探讨外源性P53基因转染对人肝癌细胞系HepG-2化疗敏感性的影响。方法将人野生型P53基因表达载体导入HepG-2细胞中，经筛选和鉴定后，采用MIT法观察其对甲氨蝶呤(MTX)和足叶乙甙(VP16)作用后的HepG-2细胞生长抑制及凋亡的影响。结果外源性P53基因在转染细胞中有效表达。增强了MTX和VP16对HepG-2细胞生长抑制并促进了药物诱导的细胞凋亡。结论外源性P53基因能增加肝癌细胞对化疗药物的敏感性。     

甲基硒酸对人三阴性乳腺癌细胞化疗增敏作用的机制探讨

 目的：观察甲基硒酸（methylseleninic acid,MSA）对人三阴性乳腺癌细胞的化疗增敏作用及其机制。方法：采用MSA联合紫杉醇、阿霉素与三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞株共培养,分别应用CCK-8实验检测化疗药物单药和联合MSA用药时细胞增殖抑制率,并通过计算合用指数,探讨MSA对化疗药物疗效的影响;用流式细胞术检测细胞周期的分布情况;应用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡变化。结果：不同浓度化疗药物联合MSA后细胞增殖率较单用化疗药物组均下降,呈明显的量－效关系,提示MSA与化疗药物具协同作用;紫杉醇联合MSA时G2/M期细胞较单药明显增多(P<005),阿霉素联合MSA时S期细胞较单药明显增多(P<005),提示MSA增强了抗肿瘤药物诱导的肿瘤细胞周期阻滞效应;与单用同一浓度的同一化疗药物相比,10 nmol/L紫杉醇联合35 μmol/L MSA后细胞凋亡率由41.1%上升至59.3%（P<005）,0.5 μmol/L阿霉素联合35 μmol/L MSA后细胞凋亡率由30.2%上升至51.9%（P<0.01）,提示MSA增强了抗肿瘤药物诱导肿瘤细胞凋亡的效应。结论：MSA能增强化疗药物阿霉素和紫杉醇对三阴乳腺癌细胞的抗肿瘤效果,其机制之一可能是增强了抗肿瘤药物诱导的肿瘤细胞凋亡和周期阻滞效应。     

一氧化氮对肿瘤细胞化疗增敏机制研究进展

一氧化氮化疗增敏是当前研究的热点,其机制包括调节NO/sGC/cGMP轴为中心的经典信号通路;调节NF-κB/Snail/YY1/RKIP/PTEN促肿瘤生长/抗凋亡环路;调节HIF-1α、干扰素(IFN-γ)免疫细胞因子水平;调节P53表达水平;介导释放细胞色素C;与其它分子反应产物结合等多种途径产生化疗增敏效应。阐明一氧化氮对肿瘤细胞化疗增敏机制,寻找关键靶点,进行多途径、多环节的联合干预,有望突破目前肿瘤化疗耐药的瓶颈。     

人乳腺癌细胞化疗敏感性与相关基因表达的关系

目的探讨人乳腺癌细胞化疗敏感性与多药耐药相关基因和凋亡调控基因表达的关系。方法MTT法检测5株人乳腺癌细胞株Bcap37、MCF-7、T47D、MDA-MB-231和MDA-MB-435对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、卡氮芥(BCNU)的敏感性。流式细胞术检测多药耐药基因P-糖蛋白(P-GP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)等耐药相关基因和凋亡调控基因FAS、BCL-2、P53和P16的表达。结果不同人乳腺癌细胞株对同一药物敏感性差异较大。相关分析表明,细胞株对5-Fu的敏感性与P16表达呈正相关(P<0.01),对其余药物的敏感性与所检基因的表达水平无关。结论人乳腺癌细胞株对5-Fu的敏感性与P16表达有关。     

CD3AK细胞对人卵巢癌细胞系的体外杀伤作用

目的：研究卵巢癌盆腔引流淋巴结的淋巴细胞,经ＣＤ３单克隆抗体激活后的杀伤细胞ＣＤ３ＡＫ（ＣＤ３ａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒｃｅｌｓ）在体外的抗瘤作用。方法：采用卵巢癌病人盆腔引流淋巴结的淋巴细胞,在体外与ＣＤ３单抗和少量ｒＩＬ－２诱导并激活后,在两株人卵巢癌ＨＯ－８９１０、ＨＯ－８９１０ＰＭ细胞系上进行实验研究。将两株细胞各随机分成６组：（１）阴性对照组（Ａ组）：只加新鲜全培养液;（２）低浓度ＣＤ３ＡＫ组（Ｂ组）：５×１０５·Ｌ－１ＣＤ３ＡＫ培养液;（３）中浓度ＣＤ３ＡＫ组（Ｃ组）：１×１０９·Ｌ－１ＣＤ３ＡＫ培养液;（４）高浓度ＣＤ３ＡＫ组（Ｃ组）：２．５×１０９·Ｌ－１ＣＤ３ＡＫ培养液;（５）顺铂阳性对照组（Ｅ组）：含１０ｍｇ·Ｌ－１顺铂培养液;（６）顺铂＋ＣＤ３ＡＫ联合用药组（Ｆ组）：含１０ｍｇ·Ｌ－１顺铂＋１×１０９·Ｌ－１ＣＤ３ＡＫ培养液,分别用ＬＤＨ活性测定、自然杀伤率及台盼蓝活细胞计数法进行了观察。结果：ＣＤ３ＡＫ细胞对卵巢癌细胞有明显的杀伤作用,两株细胞均以中浓度ＣＤ３ＡＫ细胞就显示了较好的细胞毒活性作用（Ｐ＜０．０１）,统计学上差异有高度显著性。ＣＤ３ＡＫ细胞与顺铂联合用药时,无论在细胞增     

胃癌组织DCC,APC／MCC基因杂合性缺失研究

对胃癌组织中结直肠癌缺失基因（ＤＣＣ）腺瘤性息肉病基因／结直肠癌突变基因（ＡＰＣ／ＭＣＣ）基因杂合性缺失（ＬＯＨ）进行分析，以探讨其在胃癌发生发展中的作用。采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术，对４５例手术切除胃癌组织ＤＣＣ、ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ进行检测。结果表明ＤＣＣ基因ＬＯＨ率为３３．３％（１５／４５）、ＡＰＣ／ＭＣＣ为３０．０％（９／３０），ＬＯＨ率在肠型及胃型胃癌中无明显差异，与肿瘤大小、组织学分类、浸润深度、淋巴结转移无关。ＤＣＣ基因ＬＯＨ率在Ⅲ、Ⅳ期胃癌组（４８．０％）显著高于Ⅰ、Ⅱ期组（１５．０％）（Ｐ＜０．０５）．ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ在早期及进展期均可见到，与ＤＣＣ基因ＬＯＨ无相关性。结果提示ＤＣＣ、ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ对两型胃癌的发生发展均有一定作用。ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ在胃癌的早期发生及发展中起作用，而ＤＣＣ基因ＬＯＨ则是晚期改变，可能与临床预后相关。     

榄香烯对人胶质瘤U251细胞的放射增敏机制

目的:探讨榄香烯对人胶质瘤U251细胞的放射增敏机制。方法:以U251细胞系为离体胶质瘤模型,用不同浓度榄香烯和不同放射剂量分别处理U251细胞,采用MTT实验检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,Western blot检测相关蛋白的表达水平。结果:榄香烯对U251细胞具有生长抑制及放射增敏作用;放疗联合榄香烯组U251细胞较放射组有更高的早期凋亡率、继发性坏死率和总死亡率;榄香烯能诱导U251细胞G₂/M期阻滞;榄香烯通过降低细胞分裂周期蛋白2(Cdc2)表达,导致放疗诱导的cyclin B1表达降低,从而抑制cyclin B-Cdc2复合物形成;同时抑制Cdc2蛋白第161位苏氨酸磷酸化,降低Cdc2的活性,从而诱导细胞G₂/M期阻滞;另外可能通过下调survivin表达,介导细胞凋亡。结论:榄香烯可能通过下调Cdc2蛋白、降低cyclin B1表达、抑制cylcin B-Cdc2复合物的形成、下调survivin表达等方面增强U251细胞对放疗的敏感性。     

CLOCK基因多态性与子宫内膜异位症相关性卵巢癌患者化疗敏感性的关系

目的 探讨CLOCK基因单核苷酸多态性（SNP）与子宫内膜异位症相关性卵巢癌（EAOC）患者化疗敏感性的关系。方法 选择2014年3月至2015年9月在我院接受治疗的EAOC患者129例,年龄38～67岁,平均年龄（46.32±8.96）岁。对患者进行铂类药物为基础的联合化疗,根据患者化疗敏感情况将129例患者分为敏感组（n=71）和不敏感组（n=58）,对比两组患者的一般资料和病理特征,采用PCR检测CLOCK基因SNP位点的基因分型及分布情况,探讨不同基因型与化疗效果的相关性,采用Hardy-Weinberg遗传平衡吻合度检验法计算各基因型的理论值。通过Logistic回归分析EAOC患者化疗敏感性的危险因素,分析不同病理特征及基因型对EAOC患者预后影响。结果 rs3749474位点等位基因C/T,分型CC、TT、CT;rs3817444位点等位基因C/A,分型为CC、AA、CA;rs12504300位点等位基因C/G,分型为CC、GG、CG;rs3805148位点等位基因C/A,分型为CC、AA、CA。与敏感组患者相比,不敏感组患者的FIGO分期多为晚期,分化程度主要为未分化-...     

Wip1基因沉默对结肠癌细胞化疗敏感性的影响

目的:观察靶向Wip1基因的特异性siRNA序列对结肠癌细胞Wip1基因的抑制效应,探讨Wip1基因沉默对结肠癌细胞化疗敏感性的影响。方法:将Wip1-811 siRNA转染入Wip1高表达的RKO结肠癌细胞株,采用real-time PCR法检测Wip1 mRNA的表达,采用Western blotting方法检测Wip1蛋白表达,采用MTS方法检测结肠癌细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期。结果:Wip1-811 siRNA明显抑制Wip1的表达。抑制Wip1基因表达后,转染组RKO结肠癌细胞对抗肿瘤药物的敏感性增加,5-氟尿嘧啶处理组RKO结肠癌细胞活力由(89.4±6.6)%降至(74.7±3.9)%(P0.05),奥沙利铂处理组细胞活力由(77.9±2.4)%降至(66.7±2.9)%(P0.05)。转染Wip1-811 siRNA后,5-氟尿嘧啶处理组细胞凋亡比例由(7.7±0.5)%升至(12.3±3.2)%(P0.05);奥沙利铂处理组细胞凋亡比例由(14.7±2.1)%升至(34.0±2.1)%(P0.05)。结论:沉默Wip1基因表达能增强结肠癌细胞的化疗敏感性。     

Hax-1 siRNA对黑素瘤A375细胞化疗敏感性的影响

目的:探讨Hax-1 siRNA对黑素瘤A375细胞化疗敏感性的影响.方法:MTT法、 AnnexinV-FITC/PI染色、 Hoechst 33258染色、 Western blot检测Hax-1 siRNA联合顺铂或苦参碱对细胞增殖、凋亡和caspase-3活性形式表达的影响.结果:相同药物浓度作用下, Hax-1 siRNA转染组细胞抑制率、凋亡率及cleaved caspase-3表达明显高于未转染组和转染无关载体组(P＜ 0.05);荧光显微镜下观察, 相同药物浓度作用下, Hax-1 siRNA转染组细胞凋亡现象较明显.结论:Hax-1 siRNA增强顺铂或苦参碱对黑素瘤A375细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用, 该作用可能和caspase-3的活性形式表达增强相关.     

活性氧抑制剂 NAC 对人乳腺癌细胞化疗的增敏作用观察及机制初探

目的:观察活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对人乳腺癌细胞化疗的增敏作用,并初步探讨其调控机制。方法:人乳腺癌细胞株MCF-7培养至对数期后,分为5组,每孔5个复孔,多柔比星(Dox)组、低、中、高剂量组和对照组分别用0. 4μg/ml Dox、0. 4μg/ml Dox+(10、30、60 mmol/L) NAC、磷酸盐缓冲液(PBS)进行处理。对比48 h后细胞凋亡率及细胞内活性氧(ROS)水平,并对比48 h后含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)mRNA及蛋白相对表达量。结果:细胞凋亡率组间、时间及交互比较差异均有显著统计学意义(P0. 05);细胞凋亡率、Caspase-3、Bax mRNA及蛋白相对表达量组间比较,对照组最低,Dox组其次,低、高剂量组稍高,中剂量组最高;ROS荧光强度组间比较,对照组最低,中剂量组其次,低、高剂量组稍高,Dox组最高;Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量组间比较,对照组最高,Dox组其次,低、高剂量组稍低,中剂量组最低;细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量降低、高剂量组比较差异无统计学意义(P0. 05),其他每2组间比较差异有统计学意义(P0. 05);组内比较,除对照组细胞凋亡率随时间延长差异无统计学意义(P0. 05),其他各组细胞凋亡率均随时间延长显著增加(P0. 05)。结论:在一定范围,NAC可增强DOX的化疗敏感性,促进人乳腺癌细胞凋亡、调节细胞内ROS含量,其中30 mmol/L的NAC效果最佳,推测是通过降低Bcl-2mRNA及蛋白表达,增强Caspase-3、Bax mRNA及蛋白表达,且与Bcl-2/Bax信号通路有关。     

激素难治性前列腺癌细胞对化疗药物敏感性的比较

为临床选择激素难治性前列腺癌 (HRPC)的化疗方案提供参考 ,采用3 H -胸苷酸 (3 H -TdR)掺入法检测了 2 0例HRPC细胞对常用化疗药物的敏感性。HRPC对单药的敏感性依次为足叶乙甙 >阿霉素、5 -氟尿嘧啶、雌二醇氮芥 >长春花碱 >顺铂 ;两药联合可使敏感性进一步提高 ,依次为雌二醇氮芥 +足叶乙甙、5 -氟尿嘧啶 +阿霉素 >雌二醇氮芥 +长春花碱 >5 -氟尿嘧啶 +顺铂 ;三药联用抑瘤作用更强 ,雌二醇氮芥 +长春花碱 +阿霉素、5 -氟尿嘧啶 +阿霉素 +顺铂 >雌二醇氮芥 +长春花碱 +顺铂。对HRPC以联合化疗效果较好 ,　3 H -TdR掺入法体外检测化疗药物的敏感性有助于化疗方案的选择