HIF-2α、VEGF在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨HIF-2α、VEGF蛋白在胎盘中的表达与子痫前期发病的关系。方法应用免疫组化方法检测30例正常妊娠组,25例轻度子痫前期组及35例重度子痫前期组HIF-2α、VEGF蛋白表达。结果 HIF-2α、VEGF蛋白在正常妊娠组的表达低于子痫前期组,差异有显著性,两者在重度子痫前期组与轻度子痫前期组的表达差异无显著性(P0.05)。结论 HIF2α、VEGF可能参与子痫前期的发病过程。     

KiSS-1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1是否是子痫前期的发病机制。方法采用免疫组化SP法检测25例正常足月妊娠妇女(正常妊娠组)与40例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度子痫前期15例、重度子痫前期25例)胎盘组织中KiSS-1的表达。结果KiSS-1主要位于胎盘绒毛小叶的合体滋养细胞。子痫前期组胎盘组织中KiSS-1的平均光密度为(0.137±0.010),其中轻度子痫前期为(0.132±0.004),重度子痫前期为(0.140±0.012);均明显高于正常妊娠组的(0.124±0.010),P值分别为P<0.01、P<0.05(P=0.019)、P<0.01。结论胎盘组织中KiSS-1的表达水平随病情程度的加重而增高,可能与子痫前期的发病有关。     

TGF-β1／Smad信号转导通路在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其临床意义

目的检测子痫前期患者胎盘组织中TGF—β1／Smad的表达,探求TGF—β1／Smad信号转导通路在子痫前期发病中的作用。方法采用免疫组织化学法检测40例子痫前期（轻、重度）和正常孕妇15例正常妊娠妇女胎盘中TGF-β1以及Smad3、Smad4、Smad7的分布和表达,采用TUNEL法检测三组胎盘滋养细胞凋亡的情况。结果TGF-β以及Smad2、Smad3、Smad4、Smad7在正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞中均有表达,以滋养细胞表达为主。TGF-β1以及Smad3、Smad4在正常妊娠组、子痫前期轻度组和重度组的表达强度及范围均呈逐渐升高趋势,Smad7在正常妊娠组、子痫前期轻度和重度组表达强度及范围依次呈逐渐下降趋势。正常妊娠和子痫前期患者胎盘的滋养细胞、内皮细胞、基质细胞均存在凋亡,以滋养细胞凋亡为主。重度子痫前期组胎盘滋养细胞凋亡（1．02）％显著高于子痫前期轻度组（0．73）％,子痫前期轻度组显著高于正常妊娠组（0．38）％,P〈0．05。滋养细胞TGF—β1的表达与滋养细胞凋亡具有相关性（r=0．96,P〈0．05）。结论子痫前期患者胎盘组织中的TGF—β1可能是通过Smad信号转导蛋白抑制滋养细胞浸润,诱导细胞凋亡。     

基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的 检测子痫前期患者胎盘组织中RECK、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的基因表达,探讨它们与胎盘滋养细胞浸润过程的调控关系。 方法 采用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学检测120例妊娠足月剖宫产（正常妊娠、轻度子痫前期、中度子痫前期、重度子痫前期各30例）胎盘组织中RECK、MMP-9、VEGF的基因表达。结果 3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF的mRNA表达水平均显著低于正常妊娠组（P<0.05）;重度子痫前期组中RECK mRNA的表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）;3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF蛋白表达均显著低于正常妊娠组（P<0.05）,中度和重度子痫前期组中RECK蛋白表达显著高于正常妊娠组（P<0.05）。结论 子痫前期患者胎盘中RECK与MMP-9、VEGF之间存在负相关性,它们可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程的调控。     

子痫前期患者胎盘上HO-2及TNF-α表达的研究

目的探讨妊娠高血压疾病子痫前期患者胎盘中HO-2及TNF-α表达及其与妊高病发病机制之间的关系。方法采用免疫组织化学方法测定24例子痫患者和24例正常妊娠妇女(对照组)胎盘中HO-2、TNF-α表达水平,并分析两者相关性。结果 1.HO-2主要表达于血管内皮细胞、平滑肌细胞胞浆及胞膜上、而滋养细胞及间质细胞中表达较少。且HO-2在轻度及重度子痫前期患者表达均低于正常妊娠妇女,两者分别与正常晚孕组比较,轻度子痫前期与正常对照组相比差别无显著性,而重度子痫前期与正常对照组比较,差别有显著性。2.TNF-α主要表达于滋养细胞、血管内皮细胞胞膜中,而间质细胞内表达最少。且TNF-α在轻度及重度子痫前期患者表达均低于正常妊娠妇女,两者分别与正常晚孕组比较,差别均有显著性。3.正常组、PIH组HO-2及TNF-α存在负相关关系(r=-0.536、-0.574)。结论 HO-2可能是胎盘血管内皮细胞的保护性因素,而TNF-α可能引起胎盘血管内皮细胞损伤,可导致血管调节因子失衡,两者存在负相关关系,在妊高病发病过程中起一定作用。     

RECK、基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达

目的检测子痫前期患者胎盘组织中RECK、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)的基因表达,探讨它们与胎盘滋养细胞浸润过程的调控关系。方法采用RT-PCR、Western blotting、免疫组织化学检测120例妊娠足月剖宫产(正常妊娠、轻度子痫前期、中度子痫前期、重度子痫前期各30例)胎盘组织中RECK、MMP-9、VEGF的基因表达。结果 3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF的mRNA表达水平均显著低于正常妊娠组(P0.05);重度子痫前期组中RECK mRNA的表达显著高于正常妊娠组(P0.05);3组子痫前期患者胎盘组织中MMP-9及VEGF蛋白表达均显著低于正常妊娠组(P0.05),中度和重度子痫前期组中RECK蛋白表达显著高于正常妊娠组(P0.05)。结论子痫前期患者胎盘中RECK与MMP-9、VEGF之间存在负相关性,它们可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程的调控。     

生长分化因子15在子痫前期胎盘滋养细胞中的表达及意义

目的探讨生长分化因子-15（GDF-15）在子痫前期患者胎盘滋养细胞中的表达,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法选择2009年12月至2010年10月在青岛市市立医院住院分娩的子痫前期孕妇140例,其中早发型轻度子痫前期孕妇35例（早发轻度组）,晚发型轻度子痫前期孕妇35例（晚发轻度组）,早发型重度子痫前期孕妇35例（早发重度组）,晚发型重度子痫前期孕妇35例（晚发重度组）;另选同期健康孕妇35例为对照组。采用RT—PCR检测胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA的表达量;采用免疫组化方法检测胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白的表达。结果RT—PCR显示子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15mRNA表达水平均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。免疫组化显示GDF-15表达于胎盘滋养细胞的细胞浆和细胞外基质中,并在各组胎盘滋养细胞中均表达。子痫前期各组胎盘滋养细胞中GDF-15蛋白表达水平均高于对照组组,差异有统计学意义（P〈0．05）;但子痫前期各组间分别比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GDF-15在子痫前期胎盘滋养细胞中表达升高,GDF-15的表达水平变化可能与子痫前期发病有关。     

尾加压素Ⅱ与GPR14 mRNA在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的研究子痫前期患者胎盘组织尾加压素Ⅱ（UⅡ）及G蛋白偶联受体14（GPR14）mRNA的表达变化及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法对25例子痫前期（子痫前期组,其中轻度15例,重度10例））患者和20例正常足月孕妇（正常妊娠组）和胎盘组织中UⅡ和GPR14 mRNA表达水平进行检测。结果胎盘组织UⅡmRNA表达水平在轻度子痫前期组,重度子痫前期组均明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义（P均〈0.05）。重度子痫前期组孕妇胎盘GPR14mRNA表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论子痫前期患者胎盘UⅡ及其受体基因表达升高,可能在子痫前期胎盘缺血缺氧动脉粥样硬化的发生中发挥重要作用。     

MMP-2、TIMP-2和PPARγ在子痫前期患者胎盘中的表达及意义

目的探讨MMP-2、TIMP-2和PPARγ在子痫前期患者胎盘中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测正常妊娠晚期、轻度子痫前期及重度子痫前期各30例患者胎盘底板中间型滋养细胞MMP-2、TIMP-2及PPARγ的表达。结果 MMP-2在正常妊娠晚期组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组的表达强度呈减弱趋势,在重度子痫前期组的表达明显低于正常妊娠晚期组及轻度子痫前期组(P0.05);TIMP-2、PPARγ在正常妊娠晚期组、轻度子痫前期组及重度子痫前期组的表达强度呈增强趋势,各组间差异有显著性(P0.05);子痫前期组患者胎盘组织中MMP-2、TIMP-2及PPARγ的表达呈负相关(P0.05)。结论子痫前期组患者胎盘组织中MMP-2表达下调,TIMP-2、PPARγ表达上调,提示MMP-2、TIMP-2和PPARγ的表达异常可能在滋养细胞的浸润过程中起主导作用;MMP-2、TIMP-2及PPARγ的表达呈负相关,提示三者可能在滋养细胞浸润过程中相互影响,共同参与子痫前期的发病。     

解整合素金属蛋白酶19/ADAM19在子痫前期胎盘组织中的表达及其对滋养细胞分泌MMPs的调节

目的通过对子痫前期及正常孕妇胎盘组织中解整合素金属蛋白酶19（ADAM19）的检测及ADAM19对绒毛滋养细胞分泌MMP2,9的调节,探讨ADAM19与子痫前期发病的关系。方法应用免疫组织化学（免疫组化）链霉素抗生物素-过氧化物酶法、免疫印迹技术和RT-PCR技术检测24例正常胎盘组织及46例子痫前期（其中26例为重度子痫前期,20例为轻度子痫前期）胎盘组织中ADAM19蛋白及mRNA的表达;用明胶酶谱方法检测抗ADAM19抗体作用后滋养细胞MMP2,9的分泌变化。结果胎盘组织中,ADAM19主要分布在多种滋养层细胞中,包括细胞滋养层细胞、合体滋养层细胞一和些绒毛间质结缔组织细胞、毛细血管中,其阳性信号不仅定位于细胞膜上,在细胞质中也有分布。正常胎盘中ADAM19的蛋白表达量为0.372±0.016,重度和轻度子痫前期组ADAM19蛋白定量分别为0.766±0.029和0.693±0.041,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。ADAM19mRNA在正常组胎盘中的量为0.205±0.084,在重度和轻度子痫前期组中分别为0.481±0.057和0.454±0.033,轻、重度子痫前期组分别与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）,轻度子痫前期与重度子痫前期比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。在体外培养的滋养层细胞中,100μg/L浓度的抗ADAM19抗体在作用12h即可以抑制滋养细胞MMP2,MMP9的分泌,其作用呈浓度依赖。结论子痫前期胎盘组织中ADAM19过表达可能与子痫前期的发生和发展有关;在子痫前期的发生中,ADAM19可能是在妊娠早期抑制滋养细胞的浸润而导致胎盘浅着床的。     

sFlt-1mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达

目的检测可溶性血管内皮生长因子受体-1（soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1）在子痫前期胎盘组织中的mRNA表达水平,探讨其在子痫前期发生发展中的作用。方法用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测25例子痫前期患者（轻度（n=8）,重度（n=17））和15例正常妊娠孕妇。结果（1）sFlt-1mRNA在正常孕妇、轻度和重子痫前期患者胎盘组织中均有表达。（2）sFlt-1mRNA的表达水平在轻度和重度子痫前期组均高于正常组,差别有显著性（P〈0.01）。结论胎盘组织中sFlt-1mRNA的过度表达可能与子痫前期的发病有关,并参与了子痫前期的病理生理过程。     

子痫前期患者胎盘组织中尾加压素Ⅱ及一氧化氮的表达及意义

目的研究尾加压素Ⅱ（urotensin Ⅱ,UⅡ）及一氧化氮在子痫前期患者胎盘组织的表达情况及其与子痫前期发病的关系。方法采用RT-PCR方法检测45例子痫前期患者（轻度22例,重度23例）及20例正常晚期妊娠孕妇胎盘组织中UIImRNA的表达情况;同时用硝酸还原酶法检测子痫前期组孕妇与正常组孕妇胎盘组织中NO浓度。结果重度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.85±0.40）明显高于正常妊娠组（0.38±0.30）（P〈0.05）;轻度子痫前期患者胎盘组织UIImRNA（0.64±0.31）,与正常妊娠组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。轻、重度子痫前期患者胎盘组织NO浓度分别为114.42±6.52 u/mg、79.22±3.31 u/mg,均显著低于正常妊娠组241.36±13.24u/mg（P〈0.05）。结论子痫前期胎盘组织中尾加压素Ⅱ水平升高,NO浓度下降,可能在子痫前期的发病中起一定作用。     

滋养细胞自噬在重度子痫前期发病中的作用与分子机制

目的:研究重度子痫前期患者胎盘滋养细胞自噬的发生规律及其导致细胞受损的可能机制。方法:收集23例重度子痫前期患者及23例正常孕妇的胎盘组织,应用扫描电镜观察胎盘绒毛表面的变化;透射电镜观察滋养细胞超微结构及自噬体形成;免疫组化检测胎盘组织自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ的表达变化,并将其相对表达量与胎盘重量、新生儿体质量进行相关性分析。结果:与对照组相比,重度子痫前期患者胎盘组织在扫描电镜下见绒毛稀少、排列紊乱等结构异常;透射电镜下见细胞质中典型的自噬体形成;免疫组化提示Beclin-1、LC3Ⅱ等蛋白表达显著升高(P<0.01),其相对表达量与胎盘重量、新生儿体质量呈负相关,Beclin-1,LC3Ⅱ与胎盘重量、新生儿体质量的相关系数分别为-0.977、-0.930,-0.812、-0.849。结论:重度子痫前期患者滋养细胞Beclin-1、LC3Ⅱ等蛋白的表达增加,自噬活性增高,与胎盘重量、新生儿体质量呈负相关。     

Toll-like receptor-2 expression in normal and pathologic human placenta

Toll-like receptors (TLRs) are important components of the innate immune system and are expressed by trophoblast in normal full-term placenta. At present, not much is known about the role of TLRs during normal pregnancy and in pregnancy complicated by infection. In this study, we have used immunohistochemistry to investigate the expression of TLR2 in 58 placentas from second and third trimester with chorioamnionitis and 25 full-term placentas from uncomplicated pregnancies without chorioamnionitis. TLR2 was found to be localized to the cyto- and syncytio-trophoblast cell layer and to decidual stromal cells. The expression of TLR2 in placentas with chorioamnionitis was significantly lower than in placentas without chorioamnionitis. Furthermore, there was a significantly higher expression in placentas from liveborn children than in placentas from stillborn/aborted fetuses and also a higher expression in second- than in third-trimester placentas. These data suggest that TLR2 expression in the trophoblast could be involved in the response to infectious pathogens in the placenta.     

胎盘中HGF和IGF-1的表达及与妊娠期高血压疾病发病的关系

目的探讨肝细胞生长因子（Hepatocyte growth factor,HGF）与胰岛素样生长因子-1（Insu lin like growth fac-tor-1,IGF-1）在正常晚孕妇女及妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达以及在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法采用免疫组织学方法检测62例妊娠期高血压疾病患者（妊娠期高血压疾病组,其中妊娠期高血压21例。轻度子痫前期19例,重度子痫前期22例）及20例正常晚孕妇女（对照组）的胎盘组织中HGF及IGF-1的表达强度,同时HE染色,选取5个高倍视野,计数绒毛血管数。结果（1）HGF主要表达于绒毛间质细胞胞浆,蜕膜细胞有少量表达。重度子痫前期患者胎盘绒毛间质细胞HGF的表达强度显著低于对照组（H=8.548,P=0.003）,而妊娠期高血压及轻度子痫前期患者与对照组比较,差异无显著性（H=0.018,P=0.892;H=3.739,P=0.053）;（2）IGF-1主要表达于胎盘合体滋养细胞、细胞滋养细胞及蜕膜细胞的胞膜及胞质中。胎盘组织中IGF-1的表达,轻、重度子痫前期患者明显低于对照组（H=4.948,P=0.026;H=15.245,P=0.001）而妊娠期高血压与对照组比较,差异无显著性（H=0.118,P=0.731）;（3）不同程度妊娠期高血压疾病组胎盘绒毛血管密度均较对照组减少,重度子痫前期患者胎盘绒毛血管密度为（59.69±3.86）个/×400,与对照组（67.67±4.55）个/×400相比,差异有显著性（P〈0.01）;（4）相关性分析显示两组孕妇胎盘组织中HGF、IGF-1表达强度分别与绒毛血管密度、新生儿出生体重呈正相关（r=0.695,r=0.386;r=0.270,r=0.782）;对照组及妊娠期高血压患者胎盘组织中HGF与IGF-1的表达强度呈强正相关性（r=0.950,P〈0.01;r=0.864,P〈0.01）。结论胎盘组织中HGF、IGF-1分泌减少与妊娠期高血压疾病发病及病情发展有关,IGF-1可能参与了HGF水平的调节。     

Human trophoblast invasion and spiral artery transformation: the role of PECAM-1 in normal pregnancy, preeclampsia, and fetal growth restriction

During early human pregnancy extravillous cytotrophoblasts invade the uterus and spiral arteries transforming them into large vessels of low resistance. Failure of trophoblast invasion and spiral artery transformation occurs in preeclampsia and fetal growth restriction (FGR); these processes are not well understood. Recent studies have suggested that cytotrophoblasts that invade spiral arteries mimic the endothelial cells they replace and express PECAM-1. It was also reported that in preeclampsia, cytotrophoblasts fail to express PECAM-1 and that failure to express endothelial cell adhesion molecules may account for failed trophoblast invasion. Despite the possible importance of adhesion molecules in trophoblast invasion, no study has systematically investigated the expression of PECAM-1 in the placental bed throughout the period of invasion, particularly in the myometrial segments where the key failure occurs. There are no studies on PECAM-1 expression in the placental bed in FGR. We have examined the expression of PECAM-1 in placental bed biopsies and placentas from 8 to 19 weeks of gestation and in the placenta and placental bed in the third trimester in cases of preeclampsia, FGR, and control pregnancies. PECAM-1 was expressed on endothelium of vessels in the placenta and placental bed but not by villous or extravillous trophoblasts in normal or pathological samples. These findings do not support a role for PECAM-1 in normal invasion or in the pathophysiology of preeclampsia or FGR.     

Caspase-3 mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达及其意义

目的检测半胱天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达,以探求Caspase-3在子痫前期发病机制中的意义。方法用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测正常妊娠（10例）,子痫前期（22例）剖宫产后胎盘中Caspase-3基因在转录水平的表达。结果子痫前期组胎盘中Caspase-3 mRNA表达量较正常妊娠组显著升高（P〈0.01）。结论Caspase-3在子痫前期的发病中起着重要作用,可能与Caspase-3表达的增加有关。     

子痫前期患者胎盘组织中visfatin蛋白与mRNA表达及意义

目的:探讨内脂素(visfatin,VF)在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达及意义。方法:选择2011年8月至2013年12月在温州医科大学附属第一医院住院分娩的孕妇共计100例,根据病情轻重分为重度PE组、轻度PE组和正常妊娠组。采用苏木素-伊红染色法观察3组胎盘组织病理变化;免疫组化法及real-time PCR技术分别检测3组胎盘VF蛋白及mRNA的表达并分析其与子痫前期发病的关系。结果:PE的病理改变主要表现为细胞滋养细胞及合体滋养细胞结构紊乱且形态不完整;细胞滋养细胞增生,合体滋养细胞结节增多;绒毛毛细血管减少、淤血。免疫组化及real-time PCR结果显示胎盘组织中内脂素定位于合体及细胞滋养层细胞的胞浆,随着病情的加重,VF蛋白及mRNA表达量逐渐升高,重度PE组明显高于正常妊娠组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:PE患者存在绒毛血管内皮细胞损伤和功能紊乱。胎盘VF蛋白及mRNA在PE孕妇中高表达,表明VF与PE的发生具有一定关系。