胚胎停育绒毛染色体培养与分析

目的探讨胚胎停育绒毛染色体分析在诊断流产病因的作用,以及原位培养法在实际工作中的可行性推广应用。方法对53例自然流产患者取无菌绒毛进行细胞培养和染色体制备及核型分析。结果 53例流产绒毛中培养成功51例(96.2%)。51例染色体中异常31例(60.8%),异常核型以数目异常为主,并以三体征最常见。结论胚胎染色体异常是导致早期自然流产的重要原因,流产绒毛染色体检查有利于查明本次流产的原因,并对下次妊娠有较好的指导意义,原位培养法在实际工作中可推广应用。     

佳木斯地区125例胚胎停育患者绒毛细胞染色体分析

目的探讨胚胎停育与绒毛细胞染色体异常的关系。方法收集佳木斯地区125例胚胎停育患者的绒毛细胞,通过对绒毛细胞染色体的培养和制备,对其染色体进行观察和分析。结果 125例胚胎停育患者,绒毛细胞培养失败7例,检出异常核型49例,染色体数目异常47例,染色体结构异常2例。结论胚胎染色体异常是胚胎停育的重要原因。     

温州地区110例早孕胚胎停育绒毛染色体核型分析

目的探讨早孕胚胎停育的原因及绒毛染色体核型分析在妊娠指导中的意义。方法对110例早孕胚胎停育患者取无菌绒毛进行细胞培养和染色体制备及核型分析。结果 110例胚胎停育绒毛组织中培养成功104例(94.5%),104例中检出异常核型37例(35.6%),其中常染色体三体17例(45.9%),三倍体9例(24.3%),四倍体2例(5.4%),嵌和体3例(8.1%),性染色体单体4例(10.8%),结构异常2例(5.4%);正常核型67例,其中男性核型28例(41.8%),女性核型39例(58.2%)。结论胚胎染色体异常是早孕胚胎停育的主要原因,绒毛染色体核型分析有利于查明胚胎停育的原因,合理指导下次妊娠。     

厦门地区64例胚胎停育绒毛染色体分析

目的探讨胚胎停育的发生与胎儿染色体核型异常的关系。方法取64例胚胎停育流产孕妇(孕8~12周)的胎儿绒毛组织,进行绒毛染色体制备和G显带并进行核型分析。结果 64例胚胎停育胎儿绒毛染色体核型培养成功62例,失败2例。核型异常10例,异常率为16.13%。其中数目异常9例,染色体结构异常1例。结论染色体异常是胚胎停育的重要原因之一,对胚胎停育胎儿绒毛进行染色体分析可为病因诊断以及优生指导提供重要的依据。     

105例胚胎停育绒毛细胞遗传学分析

目的探寻胚胎停育与绒毛细胞染色体异常的关系。方法收集2012年2014年2月佳木斯医学院105例胚胎停育患者,对其绒毛细胞进行培养和染色体核型分析。结果 105例胚胎停育患者,绒毛细胞培养失败6例,检出异常核型43例,染色体数目异常39例,染色体结构异常4例。结论胚胎绒毛细胞染色体异常是导致胚胎停育的重要原因。     

62例胚胎停育绒毛染色体核型分析

胚胎停育是指因孕卵缺陷或母体存在不利妊娠的因素，导致妊娠早期胚胎死亡的一种病理性妊娠。我们对62例胚胎停育患者进行了绒毛组织的细胞遗传学核型分析。     

血清代用品在绒毛膜细胞培养制备染色体中的应用

本文首次报道自行研制的血清代用品 (SS)替代小牛血清用于绒毛膜细胞培养制备染色体。通过 2 0 0例与常规方法的对比研究 ,结果表明 ,用血清代用品 (SS)替代大部分小牛血清进行绒毛膜细胞培养 ,其培养成功率及可分析的分裂相数与常规法比较均无显著性差异 (P >0 0 5 )。说明该代用品能用于绒毛膜细胞培养进行染色体分析     

绒毛组织染色体全培基培养制备法及其应用

目的探讨绒毛组织培养及染色体制备的最佳方法及临床意义.方法采用全培基进行绒毛组织培养20例,应用原位传代法进行收获和染色体制备.结果 20例标本中,19例获得成功,平均可供分析核型15～220个,检出异常核型3例.结论应用全培基进行绒毛组织培养和应用原位传代法进行染色体制备具有效率高,组织细胞生长快,收获的中期分裂相多,染色体形态良好等优点.此方法值得推广.     

116例绒毛细胞培养法制备染色体与核型分析

目的探讨培养法制备绒毛染色体在产前诊断与分析自然流产病因中的价值。方法对21例经腹穿刺绒毛标本与95例自然流产绒毛标本以培养法制备染色体核型并分析。结果腹穿绒毛培养成功率95.2%,检出5例异常;自然流产绒毛培养成功率92.6%,异常核型检出率48.9%,以常染色体三体与X单体多见。结论绒毛细胞培养法技术稳定、结果可靠,可用于胎儿染色体病的产前诊断与自然流产病因分析。     

厦门地区81例胚胎停育患者绒毛组织细胞遗传学分析

目的分析胚胎停育与绒毛组织细胞染色体异常的关系,为临床诊治提供可靠的依据。方法对81例胚胎停育患者无菌条件下取绒毛组织进行细胞培养及染色体核型分析。结果 81例胚胎停育绒毛组织中培养成功77例,失败4例。其中,检出染色体核型异常18例,检出率为23.38%。结论胚胎绒毛染色体异常是引起胚胎停育的重要因素,故绒毛组织细胞遗传学分析对查明流产原因,合理指导下次妊娠有重要意义。     

改良人颅咽管瘤原代细胞培养方法

目的　探索一种改良人颅咽管瘤细胞培养方法。 方法　根据文献报道和自己的经验,改良既往文献报道的颅咽管瘤细胞培养方法,对两种病理类型的人颅咽管瘤细胞进行原代培养,同时对其进行纯化与传代。通过观察细胞镜下形态、细胞免疫组织化学染色以及细胞增殖实验对原代细胞进行鉴定。 结果　改良后的培养方法培养出的颅咽管瘤细胞从组织块中爬出,排列紧密,透亮且折光性强。细胞免疫组化显示,两种病理类型的细胞均为颅咽管瘤细胞。增殖实验显示,细胞在体外仍具有较好的增殖和分裂的能力。 结论　本研究改良了人颅咽管瘤原代细胞的培养方法,具有简单、经济、成功率高等特点,为颅咽管瘤基础研究提供了良好的保证。     

一种简便的雪旺细胞培养方法

目的介绍一种简便的雪旺细胞培养方法。方法采用反复组织块种植法,进一步在2.5%胎牛血清条件下抑制成纤维细胞生长,进行雪旺细胞培养;以S-100抗体染色鉴定雪旺细胞。结果获得纯度在98%以上的大量高活性雪旺细胞。结论本方法可以简便的获得较高纯度的雪旺细胞,值得进一步推广。     

Crustacean primary cell culture: A technical approach

Crustacean cell culture has gained attention as a potent model to assist in the development of diagnostic reagents and probes for use in the shrimp, crayfish and lobster industries. The availability of such cellular tools is especially important to industries which use intensive aquaculture methods and thus have increased risk of disease problems. Indeed, crustacean cell cultures offer potential for studying the effects of pathogens in vitro and for increasing our knowledge on developmental and sexual maturation processes, or endocrine regulation in crustaceans. Although numerous attempts have been undertaken, no established cell line of marine crustaceans has been reported to date. However, primary cultures obtained from various organ sources are reported with increasing frequency. They represent the first steps towards the establishment of cell lines and they provide useful information concerning the most suitable cell culture conditions involved in the survival and proliferative capacity of the various tissues.     

改良植块贴壁法建立大鼠主动脉平滑肌细胞体外培养模型

目的：建立大鼠主动脉平滑肌细胞体外培养模型。 方法： 参照传统的主动脉平滑肌细胞培养方法，在动物体重、中膜的取材、植块贴壁过程、培养基选择、细胞传代等多个关键环节进行改进，成功建立了大鼠主动脉平滑肌细胞体外培养模型；用倒置相差显微镜对培养细胞进行形态学观察，用特异性α-SM-actin单克隆抗体免疫组织化学对培养细胞进行鉴定。 结果： 台盼蓝检查传代细胞的存活率大于96%；培养细胞排列呈梭形及“峰”“谷”状的结构特征；免疫组织化学染色鉴定培养细胞中的平滑肌细胞的纯度为97%。 结论： 此培养方法可作为研究血管平滑肌细胞生物学行为和移植血管再狭窄机制的有效模型。     

A method for the isolation of human gastric mucous epithelial cells for primary cell culture: A comparison of biopsy vs surgical tissue

We have developed a method for the isolation and growth of normal human gastric mucous epithelial cells using biopsies or surgically resected tissues as the source of the cells. The attachment and growth of cells were dependent upon: (1) cell planting density, 50,000 cells/cm²; (2) extracellular matrix (fibronectin); and (3) and the use of a porous filter. In all experiments we found better cells attachment and growth of human gastric mucous cells isolated from surgical specimens compared with those gastric mucous cells isolated from gastric biopsies. The initial cell viability (as measured by Trypan-blue) was the same in both populations of gastric mucous epithelial cells isolated from either gastric biopsies or surgical specimens. After 4–5 days in culture one could detect various amounts of mucin in all the cells using either periodic acid Schiff (PAS) staining or a specific anti-mucin antibody. A similar pattern of much straining was also found in primary cultures of guinea pig gastric mucous epithelial cells. Immunohistochemical staining for chief cells (anti-pepsinogen) or parietal cells (anti-H⁺/K⁺ ATPasc) in the gastric mucous cuboidal-like epithelial cells with tight junctions, desmosomes,short microvilli, a filamentous terminal web, mucous granules, and basal lamina-like structure. We could not detect the presence of fibroblasts during the 7–9 days that the primary cells were in culture. This cell culture method will prove useful in the isolation of normal human gastric mucous epithelial cells for in vitro studies of gastric mucosal injury and repair.     

人泪腺上皮细胞的体外培养及鉴定

目的　探讨人泪腺上皮细胞原代体外培养、鉴定、冻存和复苏的方法。方法　应用组织块培养法和混合消化液培养法对健康猝死成年人泪腺上皮细胞进行体外原代培养 ,应用免疫组织化学染色方法对培养有第 2代上皮细胞进行Pan keratin蛋白染色 ,以进行鉴定 ,取第 2、4代细胞进行冻存 ,1个月后取出复苏。结果　组织块培养法和混合消化液培养法均可获得较纯的泪腺上皮细胞 ,以组织块培养法接种的细胞早期生长较快 ,但第一代以后两种方法所获得的细胞生长无明显差别。两种方法所获取的泪腺上皮均为贴壁生长 ,未能形成生理状态下泪腺的囊腔结构 ,亦未见分泌小泡的形成。培养的泪腺上皮免疫组化染色Pan keratin蛋白染色阳性。经冻存和复苏 ,细胞保持良好活性。结论　组织块培养法和混合消化液培养法均可获得较纯的泪腺上皮细胞 ,但不能保持其泪腺束腔结构     

不同培养基对人脐静脉内皮细胞体外培养效果的影响

目的研究不同培养基对人脐静脉内皮细胞体外培养生长的影响,探讨内皮细胞的最佳体外扩增培养条件。方法取健康产妇分娩后脐带,用胶原酶Ⅰ消化后得脐静脉内皮细胞,进行原代培养,并用免疫荧光染色的方法对细胞进行鉴定,传代培养时则分别采用RPMI-1640培养基和EGM-2培养基,倒置显微镜观察两种培养条件下细胞的生长状态,同时利用流式细胞仪检测其生长周期,对比培养效果。结果 EGM-2组内皮细胞生长良好,2d后贴壁生长的细胞可达90%。EGM-2组S期细胞比例为（29.07±1.48）%,RPMI-1640培养基组S期细胞为（17.58±3.49）%,二者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 EGM-2培养基更适合人脐静脉内皮细胞的体外传代扩增培养。     

476例羊水细胞培养技术的应用探讨

目的简化羊水细胞培养过程,提高羊水细胞培养的准确性。方法探索新的羊水细胞培养技术;建立收获标准及改良收获方法。结果 476例羊水细胞培养中,462例羊水细胞一次培养成功,一次培养成功率达到97％。失败的14 例,二次培养成功率达到100％。平均培养周期9-14d。结论通过改良羊水细胞培养方法,提高了羊水产前诊断水平。     

旋转细胞培养系统培养的山羊软骨细胞

 目的 探讨用旋转细胞培养系统（RCCS）进行大动物软骨细胞扩增的可行性。方法 将单层培养的具有正常表型的中国山羊软骨细胞和Cytodex-3微载体放入RCCS的培养容器中,加入DMEM 培养基进行培养。在细胞培养的第3、6、9、12 天,于倒置显微镜下观察Cytodex-3微载体表面软骨细胞生长形态及增殖变化情况,并对收获的软骨细胞进行蕃红花"O"染色和Ⅰ、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色分析。结果 软骨细胞贴附于微载体表面生长,细胞初期呈球形、半球形凸起,逐渐向周围伸展,随时间的延长,贴附于微载体的细胞逐渐增多。收获的软骨细胞蕃红花"O"染色呈强阳性,Ⅰ型胶原染色呈阴性,Ⅱ型胶原染色则呈强阳性。结论 利用RCCS可简便快速地在体外扩增羊软骨细胞,培养的软骨细胞具有正常的表型,能特异性分泌软骨组织特有的基质成分。     

785例羊水细胞培养及染色体制备方法改良的探讨

目的探索一种简便、快速、稳定的羊水细胞培养和染色体制备的方法。方法2003年1月至2007年12月对785例16-30孕周有产前诊断指征的孕妇,抽取羊水,采取T型细胞瓶培养法T型,7-9d后用细胞刮刀分散细胞集落传代,换液培养1-2天,加入秋水仙素3h后,收获羊水细胞制片,G显带分析。结果785例羊水培养成功778例,成功率99%。平均每例分裂相〉100个,培养时间8-13d,平均9.5d。结论该方法染色体分裂相多,细胞破坏小,染色体形态及分散性好,成功率高,出报告时间短等优点,对异常胎儿能及早终止妊娠,有实用推广价值。