IFN—B与恶性黑色素瘤细胞A375的关系

目的探讨恶性黑色素瘤细胞A375肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNFrelatedapoptosisinducedligand,TRAIL）诱导凋亡的敏感性。方法采用MTF法及流式细胞术分别检测不同浓度的可溶性TRAIL蛋白单独处理以及联合IFN-13处理后A375细胞的增殖率和凋亡率。采用western—blot、免疫组化方法检测TRML单独处理及联合IFN—B处理后A375细胞内TRAIL受体及凋亡相关蛋白的表达差异。结果TRAIL蛋白联合IFN-B处理的恶性黑色素瘤细胞A375中TRAIL受体DcRl、DcR2、DR4、DR5表达增高,肿瘤细胞抑制率,凋亡率增加。与单独处理相比,联合处理后A375细胞内凋亡相关蛋白caspase8、caspase9表达上调,NF—KB下调。结论IFN—B能通过上调黑色素瘤A375细胞内凋亡相关蛋白增加TRAIL受体的表达从而增强A375细胞对TRAIL的敏感性。     

表没食子儿茶素没食子酸酯联合TRAIL对黑素瘤A375细胞的凋亡作用

为探讨肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)与表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)联合应用对人恶性黑色素瘤A375细胞的抑制作用,采用以甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测TRAIL和EGCG作用组的抑制率,并以流式细胞仪检测各组凋亡率,流式检测EGCG单独作用后A375细胞表面死亡受体DR4、DR5的变化.亚毒剂量的TRAIL、EGCG及联合作用组致恶性黑素瘤细胞A375细胞凋亡率分别为12%、5.1%、60%.Caspase-3活性明显增强.单独应用组与联合应用组之间存在显著性差异(P<0.01).EGCG单独作用于A375细胞24 h后,死亡受体TRAIL-R1/DR4在细胞的表达明显(P<0.05).TRAIL-R2/DR5表达无明显变化.TRAIL和EGCG联合应用对A375细胞具有明显的协同杀伤效果,这一作用可能与EGCG上调DR4的表达及增强Caspase-3活性有关.     

IFN-β与恶性黑色素瘤细胞A375的关系

目的探讨恶性黑色素瘤细胞A375肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis induced ligand,TRAIL)诱导凋亡的敏感性。方法采用MTT法及流式细胞术分别检测不同浓度的可溶性TRAIL蛋白单独处理以及联合IFN-β处理后A375细胞的增殖率和凋亡率。采用western-blot、免疫组化方法检测TRAIL单独处理及联合IFN-β处理后A375细胞内TRAIL受体及凋亡相关蛋白的表达差异。结果 TRAIL蛋白联合IFN-β处理的恶性黑色素瘤细胞A375中TRAIL受体DcR1、DcR2、DR4、DR5表达增高,肿瘤细胞抑制率,凋亡率增加。与单独处理相比,联合处理后A375细胞内凋亡相关蛋白caspase8、caspase9表达上调,NF-κB下调。结论 IFN-β能通过上调黑色素瘤A375细胞内凋亡相关蛋白增加TRAIL受体的表达从而增强A375细胞对TRAIL的敏感性。     

尖锐湿疣组织中的细胞凋亡与TRAIL受体的表达

目的　探讨尖锐湿疣患者皮损中肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TRAIL)受体DR4,DR5的表达情况及其与细胞凋亡之间的相关性。方法　应用逆转录-聚合酶链反应 (RT PCR)检测 30例尖锐湿疣患者皮损中DR4,DR5mRNA的水平,并设 15例正常皮肤组织作对照;原位末端标记法(TUNEL)检测皮损中角质形成细胞的凋亡。结果　尖锐湿疣组织标本DR4,DR5mRNA的平均水平分别为 0. 98±0. 20, 1. 18±0. 16,与正常皮肤组织相比显著升高(P<0. 05);凋亡指数与DR4,DR5的水平有显著相关性(P<0. 05)。结论　DR4,DR5在尖锐湿疣组织中表达,并与病毒感染细胞的凋亡相关,可能在TRAIL/TRAIL R系统诱导病毒感染细胞凋亡中发挥重要作用。     

腺病毒介导p27mt基因转移诱导恶性黑素瘤细胞凋亡的实验研究

目的:探讨突变型p27基因(p27mutant type gene;p27mt)对恶性黑素瘤A375细胞凋亡的调节作用。方法:利用重组腺病毒Ad-p27mt转染培养的人恶性黑素瘤A375细胞,用3H-TdR掺入法检测细胞增殖;流式细胞术、DNA片段分析法、TUNEL法检测细胞凋亡。结果:重组腺病毒Ad-p27mt在MOI≥50时,可达到100%的转导效率。Ad-p27mt转染恶性黑素瘤细胞A375后,3H-TdR掺入法检测发现细胞增殖抑制;流式细胞术检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞DNA抽提电泳后发现凋亡特征性梯带。TUNEL法检测凋亡指数分别为48.5±3.6(Ad-p27mt组)及4.2±0.8(空白对照组),差异有显著性(P<0.01)。结论:重组腺病毒介导的p27mt基因转移可诱导恶性黑素瘤A375细胞在Gl期阻滞并导致细胞凋亡。     

cFLIP与黑素瘤研究进展

cFLIP是近年来发现的一种凋亡抑制蛋白,通过抑制caspase-8的活化阻断死亡受体介导的凋亡信号.cFLIP还参与多种信号通路的传递.最近研究发现,cFLIPL还可以活化caspase-8.cFLIP的高表达与许多肿瘤相关,在黑素瘤组织及多种黑素瘤细胞系中存在cFLIP的高表达,向黑素瘤细胞引入cFLIP小干扰RNA,通过化疗药物或者UVB联合TRAIL阻断cFLIP的功能,能促进黑素瘤细胞的凋亡.     

TRP-1编码基因反义核酸对良恶性黑素细胞凋亡的影响

目的　观察TRP 1反义核酸对黑素细胞及恶性黑素瘤细胞凋亡的影响。方法　将TRP 1反义核酸真核表达载体转染至黑素细胞及恶性黑素瘤细胞 ,以透射电镜及流式细胞仪分别观察细胞的凋亡情况。结果　电镜下可见各期凋亡细胞及凋亡小体 ;流式细胞仪检测表明TRP 1反义核酸转染黑素细胞及空载体转染对照组黑素细胞的凋亡率分别为 2 4.4%及 1.2 % ,TRP 1反义核酸转染的恶性黑素瘤细胞及空载体转染对照组恶性黑素瘤细胞的凋亡率分别为7.0 %及 2 .2 %。结论　TRP 1基因在维持良、恶性黑素细胞生长方面发挥重要作用 ,其反义核酸能明显促进良恶性黑素细胞的凋亡。     

Lyn抑制剂Bafetinib对恶性黑素瘤细胞株UACC62增殖和凋亡的影响

目的：明确Lyn抑制剂Bafetinib对恶性黑素瘤细胞株UACC62增殖和凋亡的影响。方法：体外培养UACC62细胞，用不同浓度的Bafetinib处理，应用CCK-8实验和克隆形成实验检测细胞增殖能力，观察Bafetinib的效应以及是否具有剂量依赖性，并选择出合适的浓度进一步实验。Western blot检测Lyn、凋亡相关蛋白（Bax、Beclin、Bcl-2）及信号转导通路蛋白的表达。结果：Bafetinib能够抑制黑素瘤细胞UACC62的活力，并呈一定的剂量依赖性；Bafetinib处理组细胞的OD值为1.05±0.08，低于对照组的2.04±0.07 ( P＜0.05)；Bafetinib处理组细胞克隆数为49±8.53，低于对照组的288±7．68( P＜0.05)。Bafetinib处理组细胞中P-ERK、Beclin1、Bax、Bcl-2、Lyn蛋白的表达量分别是对照组的0.30，3.25, 2.23，0.53, 0.29倍( P＜0.05)。结论：Lyn抑制剂Bafetinib能够抑制恶性黑素瘤细胞UACC62的增殖，并通过ERK信号通路诱导细胞凋亡。     

姜黄素对人黑素瘤A375细胞增殖及凋亡的影响

目的 研究姜黄素抑制人黑素瘤A375细胞增殖及诱导凋亡的作用.方法 体外培养人黑素瘤A375细胞,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞增殖抑制作用;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡.结果 姜黄素可使A375细胞体积缩小,细胞变圆;姜黄素对人A375细胞的生长增殖有明显的抑制作用,并且这种作用呈时间和剂量依赖性;Annexin V/PI双染法证实姜黄素可以诱导A375细胞发生凋亡.结论 姜黄素对人黑素瘤A375细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用.     

三氧化二砷诱导Cloundman S91恶性黑素瘤细胞凋亡的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对小鼠黑素瘤CloundmanS91细胞系的作用。方法：四氮唑（MTT）还原法检测As2O3对S91黑素瘤细胞存活率的影响，通过形态观察、流式细胞仪分析、DNA凝胶电泳研究As2O3诱导S91细胞凋亡的情况。结果：S91细胞经As2O3处理后，存活率降低，并与药物浓度呈正相关；荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞；细胞周期G1期前出现凋亡峰；DNA凝胶电泳显示有规律的梯状条带。结论：3－5μmol/L的As2O3诱导S91黑素瘤细胞凋亡。     

Apoptosis in the hair follicle

Apoptosis plays an important role in many physiological processes, ranging from morphogenetic events to adult tissue homeostasis, and defects in its regulation contribute to many disorders. Here we review molecular mechanisms of apoptosis in the hair follicle (HF), whose cyclical growth pattern is repeatedly interrupted by apoptosis-driven involution (catagen). We review the common mechanisms underlying apoptosis in the HF during catagen, as well as differences in the regulation of apoptosis between distinct HF cell populations. An overview is provided on the expression and function of molecules involved in the control of various phases of the apoptotic process during catagen.     

干扰素γ/Fas介导的HaCaT细胞凋亡及8种人参皂甙的作用

目的体外诱导角质形成细胞凋亡并研究人参皂甙对细胞凋亡的影响。方法将IFN-γ,Anti Fas Ab作用于体外培养角质形成细胞HaCaT诱导细胞凋亡,并检测人参皂甙对细胞凋亡的影响。结果50 ng/mL IFN-γ和25 ng/mL Anti Fas Ab共同作用可以诱导21.5%角质形成细胞HaCaT凋亡。8种人参皂甙中,Mx,CK和Re可逆转Anti Fas Ab诱导的HaCaT细胞凋亡,逆转率分别为18.4%,14.5%和9.6%。结论IFN-γ和Anti Fas Ab共同作用可诱导HaCaT细胞凋亡。人参皂甙Mx,CK和Re对Anti Fas Ab诱导的HaCaT细胞凋亡有一定的抑制作用。     

银屑病与细胞凋亡

银屑病是一种以表皮角质形成细胞异常增生和角化不全为主要病理改变的慢性复发性炎症性皮肤病。表皮细胞凋亡在皮肤发育及更新平衡稳定中起着重要的作用,与表皮细胞增殖密切相关。银屑病中存在细胞凋亡异常。为此,综述近年来在银屑病细胞凋亡的特征、相关基因、信号传导及其理论的临床应用方面取得的一些进展。     

银屑病患者角质形成细胞凋亡以及维A酸与榄香烯的影响

目的 探讨银屑病患者角质形成细胞凋亡以及维A酸与榄香烯对体外培养的角质形成细胞凋亡的影响.方法 用TUNEL法测定28例银屑病患者角质形成细胞凋亡;流式细胞仪和DNA片段化观察维A酸与榄香烯对体外培养的角质形成细胞凋亡的影响.结果 28例银屑病患者中19例有大量凋亡细胞分布于表皮各层,另9例较少,分布于棘细胞层和颗粒层.浓度为1、5、10、20μg/mL的维A酸和浓度为20、40、60、80μg/mL的榄香烯可促进人角质形成细胞株Colo16细胞凋亡.结论 银屑病患者角质形成细胞凋亡异常增多,一定浓度的维A酸与榄香烯可在实验室内促进人角质形成细胞株Colo-16细胞凋亡.     

扁平苔藓中细胞凋亡研究

目的探讨细胞凋亡与扁平苔藓的关系.方法采用原位末端标记检测扁平苔藓中细胞凋亡,采用免疫组化ABC法、SABC法测凋亡相关Bcl-2、Fas和Fas-L、穿孔素.结果扁平苔藓中细胞凋亡较正常人增多.Bcl-2、Fas均阳性表达.结论细胞凋亡在扁平苔藓发病机理中有十分重要的意义.     

Apoptosis in lichen planus

A study of the degeneration of basal epidermal cells in lichen planus has confirmed the role of apoptosis. Lymphocytes were present in close proximity to all epidermal cells showing the early morphological features of apoptosis. This is further evidence implicating a cell-mediated immune reaction in the pathogenesis of lichen planus.     

Apoptosis, the dermatologist, the venereologist and the patient

Apoptosis is the genetically mediated process whereby individual cells determine their deletion from normal and diseased tissues. Deregulation of apoptosis occurs to a greater or lesser extent in malignant tumours and in certain skin diseases, and also largely accounts for the progressive depletion of CD4⁺ lymphocytes in HIV infection. Greater understanding of apoptosis modulation by oncogenes and tumour suppressor genes such as c-myc. Fas, p53, bcl-2, and abl will facilitate the development of new therapeutic strategies for cancer and other diseases.