端粒酶逆转录酶基因在牙源性病损中的表达

目的 研究成釉细胞瘤（ameloblastoma,AB)和牙源性角化囊肿（odontogenic keratocyst,OKC)中hTERT mRNA的表达，探讨其在AB、OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法 采用mRNA原位杂交法对口腔颌骨内54例AB、16例OKC及7例口腔正常粘膜，进行了hTERT mRNA的检测。结果 94.4%(51/54)AB、87.5%(14/16)OKC及1／7正常口腔粘膜有hTERT mRNA表达，3组相比差异有显著性（P＜0.001)。hTERT与AB不同组织学类型、病损发生部位、单房与多房无关（P＞0.05)，在AB外周细胞及星网状多边形细胞中有表达，在角化退变样细胞及颗粒样细胞中缺乏表达。结论 ①hTERT活化在AB及OKC的发生、发展中起重要作用；②hTERT活性阳性率与病变中的细胞分化，临床生物学行为有关，随着组织学分级增高hTERT mRNA阳性率及信号强度均增高。     

人成釉细胞瘤中端粒酶与抑癌基因p53的表达

目的探讨端粒酶hTR、hTERT基因在人成釉细胞瘤(Ameloblastoma,AB)中的表达,并与p53蛋白相比较,探讨其临床生物学意义。方法用原位杂交及免疫组化技术,检测54例AB的hTR和hTERT的表达及49例AB的p53蛋白,将二者进行分析,同时以7例口腔黏膜为对照。结果94.4%(51/54)的AB有hTR、hTERTmRNA的表达,81.2%(13/16)和87.5%(14/16)的牙源性角化囊肿(Odontogenickeratocyst,OKC)及2/7和1/7例的正常口腔黏膜分别有hTR和hTERTmRNA表达,3组相比差异有显著性(P<0.001)。hTR与hTERT在AB中表达具有相关性(rs=1.000,P<0.001)。p53蛋白在85.7%(42/49)AB、44%(11/25)OKC、33.3%(1/3)正常口腔黏膜上皮的细胞核为阳性。hTERT与p53蛋白的rs=0.754,P<0.001,hTR与p53蛋白的rs=0.536,呈正相关,P<0.001。结论hTR和hTERT在AB中的检出率高于p53蛋白,其间具有一定相关性(P<0.001),并与AB的生物学行为有关。     

c-myc mRNA在成釉细胞瘤中的表达

目的:研究成釉细胞瘤(AB)和牙源性角化囊肿(OKC)中c-mycmRNA的表达,探讨c-myc在AB和OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法:使用原位杂交法检测54例AB、16例OKC和7例口腔正常黏膜(NOM)组织中c-mycmRNA的表达,并将AB按原发、复发、恶变分组,结果使用χ2检验进行统计分析。结果:AB、OKC及NOM组织中c-mycmRNA的阳性表达率分别为81.5%(44/54)、75.0%(12/16)和14.3%(1/7),3组比较有显著性差异(χ2=15.488,P<0.05)。原发组AB中c-mycmRNA的阳性表达率为71.0%,复发组为94.7%,恶变组为100.0%,伴随原发、复发、恶变,差异有显著性(χ2=16.912,P﹤0.05)。结论:c-myc表达在AB的发生、发展中有重要作用;c-mycmRNA的表达与AB的临床生物学行为有关,伴随其生物学行为变化,c-mycmRNA表达增强;提示c-myc有可能成为评价预后的有效指标。     

端粒酶hTR和hTERT在人成釉细胞瘤中的表达

目的 探讨端粒酶hTR、hTERT基因表达在人成釉细胞瘤(ameloblastoma，AB)和牙源性角化囊肿(odontognic keratocysty，OKC)中的意义，探讨其在AB、OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法 采用mRNA原位杂交方法对口腔颌骨内54例AB、16例OKC及7例口腔正常粘膜，进行了hTR、hTERT mRNA的检测。结果94．4％(51／54)AB有h1、R、hTERTmRNA的表达，81．2％(13／16)、87．5％(14／16)OKC及2／7和1／7正常口腔粘膜分别有hTR、hTERTmRNA表达，3组相比差异有显著性。hTR与hTERT在AB中表达具有相关一致性。端粒酶表达与AB不同组织学类型、病损发生部位、单房与多房无关，在AB外周细胞及星网状多边形细胞中有表达，有角化退变样细胞及颗粒样细胞缺乏表达。结论 hTR、hTERT活化在AB和OKC的发生、发展中起重要作用，有可能成为判断AB预后的可靠指标。     

人端粒酶逆转录酶与c-myc和刺激蛋白1在成釉细胞瘤中的表达

目的　研究原癌基因转录因子c-myc和刺激蛋白1(SP1)在人成釉细胞瘤(AB)中的表达及与端粒酶逆转 录酶(hTERT)的关系。方法　选取54例AB(原发31例,复发19例,恶变4例)存档蜡块,采用原位杂交检测AB中 c-myc mRNA、hTERTmRNA的表达,采用免疫组化SP法,检测AB中SP1蛋白的表达。结果　c-myc mRNA在AB中 阳性率为81·5%(44/54),hTERTmRNA为94·4%(51/54),SP1为83·3%(45/54);伴随AB的复发与恶变,3者表达强 度上升;相关性分析得出hTERT与c-myc之间存在相关性(rs=0·853,P<0·001),hTERT与SP1之间存在相关 性(rs=0·900,P<0·001)。结论　hTERT在AB中明显增加的活性可能与转录因子c-myc和SP1有关,3者在AB中 的表达趋势与AB的临床生物学特性相关。     

人成釉细胞瘤中细胞周期素B1的异常表达

目的 :探讨人成釉细胞瘤 (ameloblastoma ,AB)中G2 /M期周期素B1临床生物学意义。方法 :采用免疫组化 (S P法 )对 73例AB(原发组 3 2例、复发组 3 3例、恶变组 8例 )进行了同期素B1检测 ,同时选取牙源性角化囊肿 (odontogenickeratocyst ,OKC) 19例 ,正常口腔黏膜 7例进行对比研究。结果 :cyclinB1(细胞周期蛋白B1)在正常口腔黏膜 2例中核阳性 ,7例OKC中的棘层细胞核为阳性。 46例AB核为阳性。三者相比P <0 .0 0 1。在AB中伴随复发与恶变核阳性表达增加 ,其中原发AB 13例 ,复发AB 2 5例 ,恶变AB 8例核为阳性 ,三者相比P <0 .0 5。结论 :cyclinB1与AB的发生复发及恶变的临床生物学行为相关 ,在G2 /M调控点上可能存在异常细胞周期进程。     

bcl-2和bax在成釉细胞瘤中的表达

目的:通过检测凋亡相关基因bcl-2和bax在成釉细胞瘤(am elob lastom a,AB)中的表达,探讨AB发生发展中细胞凋亡的作用及其与AB临床生物学行为的关系。方法:采取免疫组化法对75例AB(原发31例,复发37例,恶变组7例)进行BCL-2和BAX蛋白检测,正常口腔黏膜(norm al oralmucosa,NOM)和牙源性角化囊肿(odontogen ic keratocyst,OKC)做对照。同时采用原位杂交法检测了20例AB、12例OKC中的bcl-2和baxmRNA表达。结果:BCL-2蛋白阳性表达率在AB中为88.0%(66/75),OKC中为74.3%(26/35),NOM中为44.4%(4/9)(P<0.001),主要在AB外周层细胞和少数星网状层细胞中表达。BAX蛋白阳性率AB为74.7%(56/75),OKC为65.7%(23/35),NOM为77.8%(7/9)(P<0.001),BAX在AB的外周层和星网状层细胞都有强度相似的表达。伴随着AB的复发恶变BCL-2蛋白表达增强,而BAX蛋白表达则不同:复发组阳性率较原发组高,但恶变组低。BCL-2与BAX蛋白表达呈中度负相关(rκ=-0.331,P<0.001)。结论:AB中凋亡抑制蛋白表达多于凋亡促进蛋白表达,凋亡抑制在AB的发生、发展中起着重要作用。bcl-2和bax在不同组织及良、恶性AB中的表达方式及强度有差异。     

细胞凋亡抑制基因bcl-2在牙源性病损中表达的研究

目的　观察凋亡相关基因bcl- 2在成釉细胞瘤 (Ameloblastoma,AB)和牙源性角化囊肿 (OdontogenicKeratocyst,OKC)中的表达 ,探讨其与AB和OKC的生物学意义。方法　应用免疫组化法 (S -P)检测 75例AB(原发 31例 ,复发 37例 ,恶变 7例 ) ,35例OKC及 9例口腔正常粘膜。同时采用原位杂交法检测了 2 0例AB(12例原发 ,8例复发 ) ,12例OKC中的bcl- 2mRNA。结果　 88% (6 6 / 75 )AB ,74.2 % (2 6 / 35 )OKC ,44 .4% (4 / 9)正常口腔粘膜有bcl- 2蛋白表达 ,三组间相比差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。同样在原发组AB 77.4% (2 4/ 31) ,复发组AB94.5 % (35 / 37) ,恶性组AB10 0 % (7/ 7)。bcl- 2阳性率及阳性强度随着组织学分级变化而增加 ,组间统计 (P <0 .0 5 )。在 2 0例AB及 12例OKC中bcl- 2mRNA表达趋势与bcl- 2蛋白的表达是相一致的 (P <0 .0 1)。bcl- 2阳性表达与AB不同组织学分型 ,病损发生部位 ,肿瘤生长方式 (单房与多房 )无关 (P >0 .0 5 )。bcl- 2在病变中表达的特征为AB的外周层细胞为强表达 ,星网状层有阳性表达 ,随着细胞增殖分化呈实性片状时bcl- 2表达增强 ,角化退变样细胞 ,颗粒性变细胞表达缺失。OKC中多在基底层细胞中表达。结论　①bcl- 2在AB及OKC的发生、发展及细胞分化与增殖中起着重要作用。     

p21WAF1、细胞周期蛋白E mRNA及p27KIP1蛋白在成釉细胞瘤中的表达

目的研究细胞周期蛋白E(cyclin E)、周期素依赖激酶抑制因子p21WAF1 mRNA和p27KIP1蛋白在人成釉细胞瘤(AB)中的表达,探讨其临床生物学意义.方法用原位杂交法分别检测了54例AB中cyclin E和 p21WAF1 mRNA,免疫组化SP法检测p27KIP1蛋白的表达.结果 cyclin E mRNA在AB浆核中有较强的表达,阳性率为66.7%(36/54),伴随AB的复发与恶变,cyclin E mRNA阳性率有所增加,原发AB、复发AB、恶性AB组间差异有统计学意义(P<0.05).牙源性角化囊肿(OKC)中cyclin E阳性率为50.0%(8/16).p21WAF1 mRNA在AB浆核中表达强度减弱且有较多的丢失,阳性率为22.6%(12/53),伴随AB复发与恶变阳性率表达下降.OKC p21WAF1阳性率为37.5%(6/16).p27KIP1蛋白在AB细胞核中大部分丢失,AB阳性率为16.7%(9/54),OKC 中p27KIP1阳性率为6.3%(1/16).AB中,cyclin E与p21WAF1 、p27KIP1均呈中度负相关(rk=-0.440, rk=-0.519, P=0.001).结论 AB的发生、浸润与细胞的增殖活性相关,且受cyclin E的高表达及p21WAF1 、 p27KIP1的低表达等多种因子共同调控.     

人端粒酶逆转录酶与bcl-2在成釉细胞瘤中的表达

目的　研究成釉细胞瘤(AB)中人端粒酶逆转录酶(hTERT)和bcl-2的表达。方法　采用原位杂交或免疫组化方法对AB(分原发、复发和恶变组)中hTERTmRNA和bcl-2进行检测,并与正常口腔黏膜作对照。结果　 hTERTmRNA阳性表达率在AB中为94·4%,正常口腔黏膜中为14·3%(P<0·001);bcl-2蛋白阳性率在AB中为 88·0%,正常口腔黏膜中为44·4%(P<0·001)。从表达趋势看伴随着AB的复发与恶变,hTERTmRNA与bcl-2表达均增强(P<0·05)。结论　端粒酶和bcl-2可作为评价AB预后的有效指标。端粒酶的活化和bcl-2表达的增强在 AB的发生、发展中起着重要作用。     

人成釉细胞瘤中端粒酶活性与细胞周期素A的表达

目的　研究端粒酶hTERT基因在人成釉细胞瘤 (ameloblastoma,AB)中的表达及其与细胞周期素A (cyclinA)和相关因子 p53蛋白、增殖细胞核抗原 (proliferationcellnuclearantigen ,PCNA)的关系 ,探讨其临床生物学意义。方法　用免疫组化 (SP法 )和原位杂交技术分别检测了AB中细胞周期素A、p53蛋白和PCNA ,hTERTmRNA的表达 ,同时以正常口腔粘膜和牙源性角化囊肿(odontogenickeratocyst,OKC)为对照。 结果　在正常口腔粘膜中只有 1例hTERT阳性 (1 / 7) ,cyclinA、p53蛋白、PCNA三者之间表达有着相似共性。OKC中表达在基底或副基底层细胞核中 ,有1 4例hTERT阳性 (1 4 / 1 6) ,4例cyclinA阳性 (4/ 32 )、1 1例p53蛋白阳性 (1 1 / 2 5) ,5例PCNA阳性(5/ 9)。hTERTmRNA在AB中表达率为 94 4% (51 / 54) ,cyclinA为 66 7% (40 / 60 ) ,p53蛋白为85 7% (42 / 4 9) ,PCNA为 78 1 % (2 5/ 32 ) ,hTERT与cyclinA、p53蛋白、PCNA之间经Kendall相关分析 ,rs 分别为 0 91 4、0 848、0 80 4 ,P <0 0 5。结论　随着组织学分级增高 ,hTERTmRNA与cyclinA、p53蛋白、PCNA阳性率及信号强度均增高。在AB中端粒酶的活性表达与p53蛋白的蓄积有关 ,与细胞的增殖、分化有关 ,并受cyclinA调节 ,在S期中有较高表达     

口腔黏膜下纤维性变及其癌变组织中端粒酶逆转录酶表达

目的:探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)在口腔黏膜下纤维性变(OSF)癌变过程中的作用。方法:用免疫组织化学SP法检测10例正常口腔黏膜组织,46例OSF组织,14例OSF癌变组织以及10例相邻非癌变OSF组织中hTERT表达情况。结果:正常口腔黏膜组织上皮中无hTERT阳性表达,OSF癌变组织中hTERT阳性表达率(12/14)明显高于OSF组(7/46)(P<0.005),相邻非癌变OSF组织中hTERT阳性表达率(7/10)明显高于普通OSF组(7/46)(P<0.005)。结论:hTERT蛋白过度表达在OSF癌变过程中具有重要作用。     

hTERT、c-fos、c-jun在成釉细胞瘤中的表达及意义

目的:探讨c-fos、c-jun及hTERTmRNA在人成釉细胞瘤(AB)中的表达及其临床意义。方法:用原位杂交法检测AB中c-fos、c-jun和hTERTmRNA的表达,同时选取正常口腔黏膜7例、牙源性角化囊性瘤(KCOT)16例作为对照。采用SPSS10.0统计软件包进行χ2检验和Fisher确切概率法及Kendall相关分析。结果:正常口腔黏膜无c-fos、c-junmRNA的表达,hTERTmRNA仅在1/7例正常上皮中表达。c-fos、c-junmRNA和hTERTmRNA在KCOT上皮阳性表达率分别为72.7%(8/11)、35.7%(5/14)和87.5%(14/16)。AB中,c-fosmRNA阳性表达率为91.5%(43/47)、c-junmRNA阳性表达率较低,为26.7%(12/45),而hTERTmRNA高达94.0%(47/50)。c-fos和hTERTmRNA在正常口腔黏膜、KCOT及AB3组间的表达差异显著(P<0.001),而c-jun的表达在各组间未见显著差异。Kendall相关分析表明,c-fos与hTERTmRNA呈正相关(rk=0.024,P<0.05)。结论:c-fos基因在AB的发生、发展及细胞的增殖中起重要作用,且可能为构成AP-1的一个主要亚基,参与AB中端粒酶活性的调节。     

Survivin蛋白在人成釉细胞瘤中的表达及意义

目的:探讨survivin在成釉细胞瘤中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学S-P法检测70例成釉细胞瘤(ameloblastoma, AB)、 15例恶性AB、30例正常口腔黏膜中survivin的表达。采用SPLUS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:AB、恶性AB中survivin明显表达,恶性AB中阳性表达率最高,为100%,其次为AB(82.9%);正常口腔黏膜轻微表达,其阳性率为30%,各组间差异显著(P<0.05)。结论:AB中survivin高表达,且明显高于正常口腔黏膜。Survivin可能参与AB的发生与发展,AB的侵袭性增加和恶变与survivin的高表达相关。     

抑癌基因p16在成釉细胞瘤及牙源性角化囊肿中表达的研究

目的 研究成釉细胞瘤（Ameloblastoma,AB）中 p16蛋白及 p16 mRNA表达,探讨其生物学意义。方法 应用免疫组化方法（SP）检测40例 AB及牙源性角化囊肿（Odontogenic keratocyst,OKC）7例,基底细胞癌（Basal cell carcinoma,BCC）8例 p16蛋白的表达,同时用原位杂交法检测 p16 mRNA在20例 AB中表达。结果 40例AB,7例 OKC,8例 BCC,p16蛋白缺失表达分别为70％,85.7％,100％。p16mRNA缺失率80.5％,与蛋白缺失表达一致率53.8％。结论 （1）AB与 OKC的发生与p16蛋白缺失有关。（2）AB中原发与复发比,原发与恶变比 p16蛋白缺失率不同（P<0.05）。（3）AB及 OKC,BCC三种不同病变经统计学处理 P>0.05,末见明显相关性。（4）在 AB中p16蛋白与 p16 mRNA表达 P<0.05,具有一定相关性。     

成釉细胞瘤中基质金属蛋白酶及抑制剂表达的意义

目的研究基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)及其抑制剂(tissueinhibitorofmetalloproteinase,TIMP)在成釉细胞瘤(ameloblastoma,AB)中的表达,结合临床病理,探讨其与生物学行为的关系。方法用免疫组化SP法检测43例AB的MMP-2、MMP-9、TIMP-1的表达,同时以口腔黏膜8例、牙源性角化囊肿(odontogenic,keratocyst,OKC)10例为对照。结果MMP-2、MMP-9在正常黏膜为阴性或弱阳性表达,在OKC棘层细胞中强阳性表达2例,阴性或弱阳性8例,基底层细胞表达较弱或阴性。在AB的外周层及星网状层细胞中,强阳性表达28例和30例(在MMP-2中组间相比P<0.001)。MMP-9中AB与正常黏膜及OKC比较,P<0.05。MMP在AB间质细胞表达为阳性,且随组织学分级变化而增高,但与年龄、性别、部位、病理分型无关(P>0.05)。TIMP-1在正常黏膜、间质组织、AB及OKC中均为弱阳性或阴性表达。结论MMP-2和MMP-9蛋白的高表达与AB的复发有关,MMPs与TIMPs的蛋白表达失平衡,可能为AB侵袭性生长的重要因素之一;基质细胞产生的MMPs蛋白活性,也可能为AB利用且在侵袭性生长中起到重要作用。     

成釉细胞瘤及牙源性角化囊肿中ICAM-1和VCAM-1的表达

目的探讨细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在成釉细胞瘤(AB)及牙源性角化囊肿(OKC)中的表达及其与AB、OKC病理学特征的关系。方法对38例AB、10例OKC、7例正常口腔黏膜(NOM)组织进行免疫组织化学SP法检测,结合病例病理特征进行分析。结果ICAM-1和VCAM-1在AB、OKC和NOM3组表达组间比较,具有显著统计学差异(P<0.05)。ICAM-1在AB中的阳性率达65.2%,显著高于NOM(14.3%),OKC(60.0%)与NOM未见显著统计学差异。VCAM-1在AB中的阳性血管数也显著高于OKC和NOM。ICAM-1和VCAM-1表达与AB的组织病理分型、年龄、性别和发生部位无明显相关性(P>0.05)。结论细胞黏附分子ICAM-1和VCAM-1与AB及OKC的发生、发展及细胞分化与增殖有关。     

人成釉细胞瘤中pRb和E2F-1表达与端粒酶活性的关系

目的　研究 pRb、E2F 1和细胞周期素E(cyclinE)在人成釉细胞瘤 (ameloblastoma,AB)中的表达及其与端粒酶 (hTERT)的关系 ,探讨其临床生物学意义。方法　用原位杂交和免疫组化SP法分别检测了AB中 pRb、E2F 1、cyclinE及hTERTmRNA的表达。结果　pRb在AB细胞核中阳性率为2 0 4 % ( 11/ 5 4 )。E2F 1mRNA阳性率为 92 6 % ( 5 0 / 5 4 )。cyclinEmRNA阳性率为 6 6 7% ( 36 / 5 4 )。hTERTmRNA阳性率为 94 4 % ( 5 1/ 5 4 )。伴随AB的复发与恶变 ,hTERT、E2F 1、cyclinE的表达逐渐增高 ,pRb表达丢失。hTERT与E2F 1、cyclinEmRNA之间经Spearman相关分析 ,rs 均为 1 0 0 0 ,P =0 0 0 0 1,呈高度正相关。结论　pRb/E2F 1与AB细胞的增殖、去分化相关 ,端粒酶活性的释放激活与pRb的低表达及E2F 1的高表达可能相关 ,并在G1晚期受cyclinE调节有较高表达     

人牙源性病损中β-连环素的表达研究

目的　研究成釉细胞瘤 (Ameloblastoma ,AB)和牙源性角化囊肿 (Odontogenickeratocyst,OKC)中 β -连环素 (β-catenin ,β -cat)的表达 ,并探讨其在AB、OKC发生发展中的生物学意义。 方法　采用免疫组化法 ,分别对 72例AB(原发 34例 ,复发 31例 ,恶性 6例 )、2 1例OKC和 8例口腔正常粘膜中的 β -连环素的表达情况进行了研究。结果　在正常口腔粘膜上皮细胞膜上有 β -cat的完整表达 ,在OKC中主要表达于棘层细胞膜 ,出现胞浆和胞核中的异位表达。在AB的星网状层及外周层细胞中均有 β -cat的表达 ,表达强度无明显差异。在AB和OKC中的异位表达率分别为 71.4 % (15 / 2 1)和 87.5 % (6 3/ 72 )。三组中 β -cat的表达有差异 (P <0 .0 0 1)。另外 ,伴随着AB的复发和恶变 ,β -cat的胞膜表达强度下降和丢失 ,胞浆或胞核的异位表达增加 ,三者相比有差异 (P <0 .0 5 )。结论　β -cat的表达水平与AB的细胞分化程度成负相关 ,且与AB的生物学行为密切相关。