肠道杆菌耐药基因的研究

目的检测肠道杆菌对抗菌药物的敏感性及其耐药基因。方法选取16株临床分离的肠道杆菌,用纸片扩散法检测其对14种抗菌药物的敏感性。PCR法检测TEM型β-内酰胺酶基因、DHA和ACT-1型AmpC酶基因、aac(6′)-Ⅰb型氨基糖苷类修饰酶基因、qacEΔ1-sul1耐消毒剂和磺胺基因。结果多重耐药菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢噻吩全部耐药,其余药物显示不同程度的耐药。TEM型β-内酰胺酶基因检测均为阳性。对卡那霉素耐药的志贺菌和大肠埃希菌aac(6′)-Ⅰb基因检测阳性,大肠埃希菌qacEΔ1-sul1基因检测均为阳性而志贺菌均为阴性。AmpC酶基因检测结果有2株菌ACT-1阳性而DHA全阴。结论多重耐药细菌存在多种耐药基因。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌消毒剂-磺胺耐药基因型研究

目的 探讨产ESBLs肺炎克雷伯菌消毒剂和磺胺耐药基因存在状况。方法 采用PCR检测qacE△1-sul Ⅰ基因。结果 35株产ESBLs肺炎克雷伯菌qacE△1-sul Ⅰ基因阳性13株（37．1％）。结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌qacE△1-sul Ⅰ基因携带率很高。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及遗传学特征

目的:了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及其遗传学特征。方法:对35株产ESBLs肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测aac(3)-Ⅰ,aac(3)-Ⅱ,aac(6′)-Ⅱ,ant(3″)-Ⅰ,ant(2″)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰ,aac(6′)-Ⅰb等7种氨基糖苷类修饰酶基因,TEM,SHV,LEN,OKP,CTXM-1,CTXM-2,CTXM-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,OXA-2,DHA,ACT-1等15种β-内酰胺酶基因,intI1,intI2,intI3等3种整合子基因,tnpA(TnA转座子标记),merA(Tn21/Tn501转座子标记),qacEΔ1-sul1消毒剂耐药基因,qnr喹诺酮类耐药基因,共检测29种耐药基因并对部分产物进行测序。结果:35株肺炎克雷伯菌中检出β-内酰胺酶基因22株,阳性率62.9%。整合子基因阳性22株,阳性率62.9%。氨基糖苷类修饰酶基因阳性26株,阳性率74.3%。tnpA全部阴性。merA阳性2株,阳性率5.7%。qacEΔ1-sul1阳性13株,阳性率37.1%。qnr全部阴性。在测序中发现一种新的基因型,并以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名,登录于美国NCBI(登录号:EF375621)。结论:产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因及耐消毒剂基因的携带率非常高,耐药基因谱及其遗传学特征非常复杂。     

株多重耐药肺炎克雷伯菌耐药基因和整合子、转座子遗传标记研究

目的了解多重耐药肺炎克雷伯菌的耐药基因存在状况和遗传学背景。方法聚合酶链反应法对多重耐药的肺炎克雷伯菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶基因、质粒AmpC酶基因、qacE△1-sull耐消毒剂和磺胺基因、整合子遗传标记（整合酶基因）、Tn21／Tn501转座子遗传标记（汞离子还原酶基因）检测。结果TEM、SHV型β-内酰胺酶基因，DHA型质粒AmpC酶基因，aac（6’）-I型氨基糖苷类修饰酶基因，qacE△1-sull耐消毒剂和磺胺基因，整合子遗传标记（intIl整合酶基因），Tn21／Tn501转座子遗传标记（merA汞离子还原酶基因）检测阳性。结论多重耐药肺炎克雷伯菌存在多种耐药基因和I类整合子、Tn21／Tn501转座子。     

新生儿医院感染肺炎克雷伯菌耐药性及β-内酰胺酶编码基因检测

目的 了解新生儿医院感染肺炎克雷伯菌的耐药性和耐药基因特点.方法 应用K-B法对17株肺炎克雷伯菌进行16种抗菌药物敏感性试验,检测β-内酰胺酶基因TEM、SHV、PER、VEB、GES、CARB、CTX-M-1群,碳青霉烯酶基因OXA-23群、OXA-24群、OXA-51群、OXA-58群,金属β-内酰胺酶基因IMP、VIM、SPM、GIM,AmlpC酶基因ADC、DHA.结果 17株肺炎克雷伯菌对氨苄西林、头孢曲松、头孢唑啉、头孢他啶高度耐药,而对氨基糖苷类和喹诺酮类药物敏感性较高,碳青霉烯类亚胺培南敏感率达100%;17株中β-内酰胺酶基因TEM阳性9株、SHV阳性1株:碳青霉烯酶基因、金属β-内酰胺酶基因均阴性;AmpC酶基因DHA阳性3株.结论 新生儿疑似肺炎克雷伯菌败血症时,亚胺培南可能是现阶段最好的选择.     

铜绿假单胞菌消毒剂磺胺耐药基因研究

目的 探讨铜绿假单胞菌（PA）消毒剂磺胺耐药基因存在状况。方法 对临床分离的96株铜绿假单胞菌采用PCR检测消毒剂磺胺耐药基因（qacE△1-sulⅠ）。结果 96株PAqacE△1-sulⅠ阳性42株（阳性率43．8％）。结论 铜绿假单胞菌qacE△l-sulⅠ携带率很高。     

多重耐药鲍曼不动杆菌抗菌药物、消毒剂耐药基因研究

目的了解多重耐药的鲍曼不动杆菌（ABA）11簇β-内酰胺酶、3簇金属β-内酰胺酶、4簇OXA类碳青烯酶、2簇AmpC酶、6簇氨基糖苷类修饰酶基因和消毒剂耐药基因携带状况。方法采用PCR检测203株多重耐药的ABA菌耐药基因。结果203株中ADC阳性186株（91．6％）、TEM阳性124株（61．1％）、OXA-23cluster阳性66株（32．5％）、SHV阳性18株（8．9％）、PER阳性6株（3．0％）、DHA阳性1株t（0．5％）；ant（3”）-I阳性189株（93．1％）、aac（6’）一Ib阳性118株（58_3％）、aac（3）-I阳性114株（56．2％）、aac（6’）-II阳性13株（6．4％）、ant（2”）-I阳性13株（6．4％）、aac（3）-II阳性10株（4．9％）；qacE△1阳性164株（80．8％）。结论多重耐药的ABA菌β-内酰胺酶、OXA类碳青烯酶、AmpC酶、氨基糖苷类修饰酶基因携带率高。     

ICU泛耐药鲍曼不动杆菌分离株相关耐药基因检测

目的了解重症监护病房（ICU）分离的泛耐药鲍曼不动杆菌（PDR-AB）耐药基因特点。方法应用K-B法进行抗菌药物敏感性试验,应用PCR技术对12株PDR-AB菌进行耐药基因测定。结果12株PDR-Ab中TEM、DHA、OXA-23、qacE1-sul1和intll扩增阳性株为12（100%）株;而PER、VEB、VIM、IMP、GES扩增阴性。12株PDR-Ab中均检出氨基糖苷类修饰酶基因,其中aac（3）-I、aac（6’）-I、ant（3＂）-I阳性率均为100%。aac（6′）-Ⅱ、aac（3）-Ⅱ、ant（2″）-Ⅰ未发现阳性结果。12株DR-Ab中基因组合方式为TEM＋OXA-23＋ADC＋qacE1-sul1＋intll＋aac（3）-I＋aac（6’）-I＋ant（3＂）-I。结论ICU分离的PDR-AB菌TEM、DHA、OXA-23、qacE1-sul1、intll、aac（3）-I、aac（6’）-I、ant（3＂）-I等耐药基因携带率高。     

肺炎克雷伯菌16种β内酰胺酶基因检测研究

目的了解20株仅对亚胺培南敏感的肺炎克雷伯菌（KPN）β-内酰胺酶产生状况。方法对20株KPN菌用PCR法进行16种13内酰胺酶基因（TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-2群、CTX-M-9群、OXA-1群、OXA-2群、OXA-10群、PER、GES、VEB、CARB、DHA、ACT-1）检测。结果20株KPN菌检出TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-9群、OXA-1群、DHA等6种β-内酰胺酶基因，阳性率分别为85％、25％、25％、20％、25％、70％。20株KPN菌中有19株至少检出1种β-内酰胺酶基因，最多同时检出6种β-内酰胺酶基因。结论该20株KPN菌β内酰胺类抗菌药物耐药与产β-内酰胺酶密切相关。     

鲍曼不动杆菌的耐药性及β-内酰胺酶耐药基因研究

目的 分析我院内鲍曼不动杆菌（Ab）的耐药性及耐药基因,为临床合理利用抗生素提供重要依据。方法 采用K-B纸片扩散法对我院30株Ab进行抗菌药物敏感性的测定,PCR技术检测8种β-内酰胺酶基因,并对1株Ab的OXA-23基因进行了测序分析。结果 30株Ab菌对头孢曲松的耐药率最低为6.67%,亚胺培南的耐药率达到了100%,其中头孢他啶、头孢吡肟、阿莫西林/舒巴坦的耐药率均达到了80%以上。30株Ab菌中TEM基因阳性16株(53.3%)、IMP基因阳性10株(33.3%)、VIM基因阳性8株(26.7%)、PER基因阳性4株(13.3%),OXA-23基因阳性20株(66.7%),OXA-24基因阳性23株(76.7%),ADC基因阳性5株(16.7%),SHV基因阳性3株(10%),OXA-23测序结果显示,其与NCBI中与FJ975154.1的同源性最高,为98%。结论 鲍曼不动杆菌的耐药性与β-内酰胺类基因的高表达密切相关。     

一株携带多种耐药基因的铜绿假单胞菌研究

目的了解铜绿假单胞菌的多重耐药情况和有关机理。方法聚合酶链反应（PCR）法对多重耐药的铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因、耐消毒剂和磺胺基因（qacE△1—sul1）的检测。并对CARB基因进行了测序。结果PCR显示CARB、TEM型β-内酰胺酶基因，aac（6’）-Ⅰ、aac（6’）-Ⅱ、ant（2″）-Ⅰ、ant（3″）-Ⅰ AMEs基因、qacE△1-sul1耐消毒剂基因和耐磺胺基因扩增阳性，oprD2基因扩增检测呈缺失型。CARB基因扩增产物测序，经BLAST程序分析（WWW．ncbi．nlm．nih．gov）为CARB-3型。结论铜绿假单胞菌存在多重耐药基因，管壁涂有季胺类、双胍类消毒剂和磺胺的Ⅱ代导管的抑菌效果需重新评价。     

鲍曼不动杆菌消毒剂——磺胺耐药基因研究

目的了解鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺基因（qacE△1-sul1）存在情况。方法自临床分离27株鲍曼不动杆菌，采用聚合酶链反应法检测qacE△1-sul1基因和Ⅰ类整合酶基因（intⅠ1）。结果27株AB菌检测qacE△1-su1Ⅰ基因阳性22株（81-4％），intⅠ1基因阳性23株（85.2％）。qacE△l-su1Ⅰ基因和intⅠ1基因具有相关性。结论我院临床分离的鲍曼不动杆菌qacE△1-sul1基因携带率较高。这和qacE△1-sul1基因与Ⅰ类整合酶基因整合在一起有关。     

消毒剂-磺胺耐药基因的检测

目的检测临床分离的革兰阴性杆菌菌株Ⅰ类整合子消毒剂-磺胺耐药(qacE△1-sul1)基因的携带情况。方法采用聚合酶链反应技术,对311株革兰阴性杆菌临床分离菌株(分别为大肠埃希菌96株,肺炎克雷伯菌肺炎亚种71株,铜绿假单胞菌64株,鲍氏不动杆菌61株,阴沟肠杆菌19株)进行qacE△1-sul1基因的检测。结果 311株革兰阴性杆菌中180株qacE△1-sul1基因阳性,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亚种、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、阴沟肠杆菌qacE△1-sul1基因阳性率分别为69.8%、53.5%、37.5%、75.4%、26.3%。大肠埃希菌和鲍氏不动杆菌qacE△1-sul1基因阳性率高于肺炎克雷伯菌肺炎亚种、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌,差异有显著意义(q=3.019～6.129,P<0.05)。结论临床分离菌株qacE△1-sul1基因高携带率可能是目前医院感染的高发因素之一,临床应重视消毒剂的合理使用,并定期了解医院细菌耐消毒剂的情况。     

多重耐药铜绿假单胞菌耐消毒剂基因存在状况

目的了解铜绿假单胞菌（Pa）耐消毒剂基因qacE△1-sul1的存在状况。方法从临床分离的Pa中筛选出多重耐药Pa,采用聚合酶链反应（PCR）检测qacE△1-sul1基因。结果20株多重耐药Pa中17株为阳性。结论大部分多重耐药Pa携带qacE△1-sul1基因,携带率高。     

肺炎克雷伯菌连续分离株耐药性及Ⅰ类整合子遗传标记研究

目的 了解肺炎克雷伯菌(KPN)连续分离株整合酶基因存在情况和耐药性.方法 应用双基因聚合酶链反应法对44株KPN连续分离株进行检测.结果 44株KPN菌连续分离株中qacE△1-sul1基因阳性12株(27.3%).结论 在肠杆菌科细菌耐药机制中,Ⅰ类整合子起着非常重要的作用,它的3'-保守端有季胺类化合物(消毒剂)的耐药基因(qacE△1)和磺胺耐药基因(sul1)重叠基因,为Ⅰ类整合子遗传标记,整合子使细菌能够很快获得新的耐药基因以适应环境要求.     

鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶耐药基因研究

目的了解鲍曼不动杆菌(A.baumannii,AB)β-内酰胺酶耐药基因表达和传播情况。方法应用PCR技术对我院血液标本分离的17株AB菌进行β-内酰胺酶基因测定,应用K-B法进行抗菌药物敏感性试验。结果17株AB菌有10株为泛耐药株。对头孢菌素类抗生素高度耐药,对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南及美洛培南等也有较高耐药率,以头孢哌酮/舒巴坦敏感性最高。17株中TEM阳性13株,OXA-23群阳性10株,ADC阳性12株,其余基因均阴性。13株检出β-内酰胺酶基因,10株TEM OXA-23群 ADC 3种β-内酰胺酶基因阳性。结论我院AB菌不仅具有多重耐药性,而且TEM、OX-A-23群及ADC等β-内酰胺酶基因携带率高。OXA-23群基因的获得和传播与β-内酰胺类药物的滥用有关。     

34株多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性及β-内酰胺酶基因分析

目的:对34株多重耐药铜绿假单胞菌的药敏结果和β-内酰胺酶基因进行分析,以指导临床合理用药。方法:用KB法对铜绿假单胞菌进行常规药敏试验,选取34株多重耐药铜绿假单胞菌,并用PCR扩增方法检测其β-内酰胺酶基因:TEM,SHV,PER,VEB。结果:34株多重耐药铜绿假单胞菌对12种常用抗生素的耐药率为20.5%~100%,PCR检测出TEM为44.1%,SHV为11.8%,VEB为5.9%,PER为0%。结论:我院多重耐药铜绿假单胞菌携带的β-内酰胺酶基因以TEM为主。     

ICU产ESBLs大肠埃希菌耐药性及基因型分析

目的了解医院重症监护病房(ICU)产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括TEM、CTX-M-1群、DHA、SHV、oprD2、GES、OXA和VIM。结果 51株产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药,对亚胺培南、哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的耐药率分别为2.0%、8.0%和11.8%,其余14种抗生素的耐药率为54.9%~100.0%。51株产ESBLs大肠埃希菌共检出TEM、CTX-M-1群、SHV和oprD2等4种β-内酰胺酶基因,其阳性率分别为76.50%、37.3%、5.9%和31.4%。结论 ICU分离的产ESBLs大肠埃希菌多重耐药严重,携带的β-内酰胺酶基因以TEM为主。     

泛耐恶臭假单胞菌40种耐药基因的研究

目的研究泛耐恶臭假单胞菌40种耐药机制。方法应用法国梅里埃公司的API鉴定条／PSE5．0药敏条和美国BD公司的Phoenix NMIC／ID-109鉴定／药敏板鉴定和细菌药敏试验，应用PCR法检测1株泛耐恶臭假单胞菌临床分离株30种β-内酰胺酶基因、6种氨基糖苷类修饰酶基因（AMEs）、消毒剂／磺胺耐药基（qacE△1-sul1）、整合子（int）1、2、3等40种耐药基因，分析其分布情况。结果在本株菌，8种耐药基因阳性（二种β-内酰胺酶基（b1aCARB、b1aVIM）、4种氨基糖苷类修饰酶基因（aac（6′）-Ⅰb、aac（3）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ）和二种整合子基因（qacE△1-sul1、intⅠ1），其它28种β-内酰胺酶基因、2种氨基糖苷类修饰酶基因（aac（6′）-Ⅱ、aac（3）-Ⅰ）和二种整合子基因（intⅠ2、intⅠ3）均为阴性。结论本株泛耐菌耐药机制为多重机制，主要与b1aCARB、b1aVIM、AMEs和Ⅰ类整合子有关。经检索中文生物医学期刊文献数据库（CMCC）和medline数据库，本研究是泛耐恶臭假单胞菌检测耐药基因最多的报道，也是第一篇从恶臭假单胞菌检出β-内酰胺酶b1aCARB和aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-Ⅰb、ant（3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ）耐药基因的报道。     

34株多重耐药铜绿假单胞菌β内酰胺酶基因及Ⅰ类整合子检测分析

目的:探讨我院临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的β-内酰胺酶相关基因及Ⅰ类整合子(int Ⅰ 1和qacE△1-sul1)的携带情况,为临床抗感染治疗和控制医院感染提供依据.方法:采用K-B法对临床分离的铜绿假单胞;进行药敏试验,选出34株多重耐药菌株,用PCR法检测其相关耐药基因16种.结果:在34株多重耐药铜绿假单胞菌...