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为了建立检测卫氏并殖吸虫抗原的血清学诊断方法,我们制备了针对卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫的单克隆抗体,部分鉴定了为单克隆抗体所识别的抗原表位,其中,囊蚴期特异性抗原表位对高碘酸敏感而对蛋白酶具有抵抗力,系碳水化会物;反之,成虫期特异性抗原表位对高碘酸具有抵抗力而对蛋白酶敏感,系多肽。应用Dot-ELISA,以并殖吸虫的期特异性单克隆抗体能够检测人血清中0.3~75ng/ml相应的并殖吸虫抗原。 相似文献
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丰宫并殖吸虫成虫抗原特异性的研究(摘要) 总被引:2,自引:2,他引:0
随着并殖吸虫病防治工作的不断深入,并殖吸虫病病原学诊断方法及现场应用愈趋困难。血清学诊断方法具有快速、敏感等特点,但常出现交叉反应现象。目前在实际工作中,多采用虫卵或成虫的粗制抗原,因而常给诊断带来困难。为探讨交叉反应出现的原因,本文对丰宫并殖吸虫(ParagonimusProlferus)成虫的粗抗原进行了分离和纯化,认为其中有两种蛋白成分可能作为特异的诊断抗原,用于丰宫并殖吸虫的血清学诊断。选用250-300g重的大白鼠32只,经连续三天粪检阴性确认无并殖吸虫感染后, 相似文献
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卫氏并殖吸虫基因片段的亚克隆及其表达的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:获得诊断肺吸虫病的特异性重组抗原,以了解其作为免疫诊断抗原的价值。方法:将免疫筛选获得的卫氏并殖吸虫基因克隆双酶切,所得cDNA片段亚克隆入表达载体pRESETB,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,以聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western blotting)对表达产物进行鉴定。结果:成功地将文库中2个大小不同的卫氏并殖吸虫基因片段连接到载体中,其中Pw-2重组子特异性表达产物是分子质量约为32ku的蛋白带,可被卫氏并殖吸虫免疫免血清特异性识别。结论:成功构建了编码卫氏并殖吸虫特异性抗原的重组克隆Pw-2。 相似文献
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应用单克隆抗体(Mab)和Dot-ELISA方法检测血清中卫氏并殖吸虫(Pw)种、期特异性抗原(Ag),以进行并殖吸虫病活动性感染的血清学诊断。结果所有痰卵阳性的患者和大部分痰卵阴性的可疑患者血清中检出成虫期特异性Ag。部分两类患者中血清还检出囊蚴期特异性Ag。其它蠕虫感染、肺结核患和健康中国人血清,囊蚴和成虫Ag均为阴性。以吡喹酮治疗实验感染犬可激发血清中Pw成虫Ag明显而短暂的增加,但在2个月 相似文献
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卫氏并殖吸虫成虫的特异性诊断抗原 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:寻找诊断并殖吸虫病的特异性抗原。方法:应用SDS-PAGE和Western blot对卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析。结果:卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS-PAGE后显示14条蛋白带,其中相对分子质量为53000、3l000、25000、16000、11000是主带;相对分子质量为53000和34000的条带可与华支睾吸虫病患者血清反应;108000、94000、65000的条带可与血吸虫病患者血清反应;58000、53000、43000的条带可与旋毛虫感染的大鼠血清、小鼠血清及旋毛虫病患者血清反应。37000的蛋白带只能被斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和并殖吸虫病患者血清所识别,而不与华支睾吸虫病、血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清、旋毛虫病患者血清、正常大鼠、小鼠血清及正常人血清发生交叉反应。结论:卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为37000的蛋白组分为卫氏并殖吸虫成虫的特异性抗原,可用于并殖吸虫病的免疫学诊断及血清流行病学调查. 相似文献
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免疫印渍技术用于斯氏并殖吸虫病抗原检测的研究 总被引:1,自引:1,他引:0
采用免疫印渍技术分析了斯氏并殖吸虫30、60和90d虫体抗原组份与斯氏、卫氏并殖吸虫病人、华支睾吸虫、血吸虫、囊虫、包虫病人和健康人血清反应情况。结果发现斯氏和卫氏并殖吸虫病人血清均可识别9条抗原多肽,分子量分别为17、27、29、35.5、37.5、60、72和90kDa,其中35.5、37.5和39kDa三条抗原带可100%同2种并殖吸虫病人血清起反应,特异性达100%。72和90kDa抗原多肽可与其他寄生虫病人和正常人血清发生交叉反应。不同虫龄期的抗原在反应条带上无明显区别,但以30d龄虫体抗原的显色更清晰。结果提示35.5、37.5、和39kDa抗原多肽具免疫学诊断价值。 相似文献
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应用于结核病血清学诊断的理想抗原应具有种的特异性及强的免疫原性。目前已获得大量纯化和特异的抗原。本文综述了结核病血清学诊断抗原的现状和进展。 相似文献
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丰富并殖吸虫后尾蚴、成虫及小睾并殖吸虫成虫的蛋白电泳分析(摘要) 总被引:1,自引:0,他引:1
对于并殖吸虫生活史各期(如虫卵、囊蚴、童虫、成虫)的抗原性研究国内外已有许多报道,由于并殖吸虫感染早期或并殖吸虫肺外型寄生者大多为未成熟虫体,因此,对囊蚴、童虫等抗原的期特异性分析与应用已受到许多学者的重视。对于丰宫并殖吸虫而言,极大多数情况 相似文献
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采用免疫标记技术(TES一IEST、AWA一IEST和TES一IFAT)及酶联免疫印渍技术(ELIB)对卫氏并殖吸虫,华支睾吸虫和姜片虫成虫可溶性抗原与日本血吸虫卵和成虫可溶性抗原之间的交叉反应性及其表位分子基础进行了研究。710份上述3种吸虫病人血清与日本血吸虫抗原之间的交叉反应率分别为3.9%(10/259),4.2%(11/261)和3.2%(6/190).用ELIB对上述吸虫组分抗原分析结果表明,卫氏并殖吸虫、华支睾吸虫和姜片虫抗原与日本血吸虫抗原之间的交叉反应表位分子量分别为97~76ku,40~14.5ku和106~14ku,华支睾吸虫和姜片虫成虫抗原之间显示67~14ku,范围的交又反应表位分子量。本研究为今后纯化抗原,提高血清学方法的特异性和敏感性,提供了重要依据。 相似文献
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目的寻找具有诊断和考核疗效价值的特异性抗原组分。方法应用ELIB对19例并殖吸虫病人在治疗前和治愈后血清中特异抗体水平的动态变化进行了研究。结果并殖吸虫病患者经有效药物治愈后0.5年、1年、3年、5年连续采血,经ELIB试验连续观察的结果表明.其中分子量为67kDa和82kDa的两条区带在治疗前显色明显。而且治愈后显色反应减弱和消失较为明显和迅速,治愈后5年的消失率可达94.7%(18/19),且与其他吸虫无交叉反应。结论ELIB检测67/82kDa抗原组分可作为并殖吸虫病诊断和疗效考核的有效方法。 相似文献
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目的通过梅毒血清学实验室间质量评价活动,了解宁夏银川市性病规范化门诊梅毒实验室血清学检测能力,以便更好地为临床服务。方法将中国疾病预防控制中心性病控制中心(简称性病中心)室间质控标本与常规标本在同样条件下进行测试,分别做非特异性梅毒螺旋体抗原血清定性试验和定量试验,特异性梅毒螺旋体抗原血清定性试验。结果 5家单位参加室间质评活动,非特异性梅毒螺旋体抗原血清定性试验和定量试验结果符号率分别为83.4%和80.0%;特异性梅毒螺旋体抗原血清定性试验结果符号率分别为91.7%。结论通过室间质控,非特异性梅毒螺旋体抗原血清定量试验合格率较低,但少数实验室存在未按操作规程操作、检测方法选择错误及试剂质量等问题。因此,宁夏银川市性病规范化门诊梅毒血清学试验检测水平有待提高。 相似文献
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整麻风杆菌(Whole mycobacterium Leprae,WML)及其特异酚糖脂(Phenolic glycolipidI,PGI)血清学活性的研究报告不少,但因麻风杆菌(ML)与其它分枝杆菌间存在着广泛地交叉反应抗原,且PGI也与结核杆菌间有部分微弱的交叉反应,因而寻找新的更特异的抗原具有重要意义.ND-O-BSA是PGI特异部分的天然二糖(natural disacchride)与BSA(bovine serum al-bumin)相联结的半合成产物,理论上应比PGI特异。本文报告ND-O-BSA血清学活性及其与WML,PGI血清学活性的比较结果,并讨论三者的敏感性,特异性及在早期麻风诊断中实用意义。 相似文献
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目的 :分离日本血吸虫成虫脲溶抗原中有免疫学活性的抗原分子 ,探讨其诊断血吸虫病的效果。方法 :利用SDS PAGE及免疫印迹法分析日本血吸虫成虫脲溶抗原 ,采用电泳层析法分离有免疫活性的 4 2kD蛋白 ,ELISA分析 4 2kD蛋白诊断血吸虫病的灵敏度和特异性。结果 :电泳层析获得了具有免疫学活性的 4 2kD蛋白 ;分离的 4 2kD蛋白诊断血吸虫病的灵敏度和特异性分别为 88.0 9%和 97.0 6 %。结论 :日本血吸虫成虫脲溶 4 2kD蛋白是一种日本血吸虫的血清学抗原 ,可用于血吸虫病诊断 相似文献
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目的 评估结核分枝杆菌(MTB)重组特异性抗原ESXO在大肠埃希菌中的高效表达,并评价其免疫原性.方法 采用常规分子克隆方法获得MTB重组蛋白ESXO.酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测84份确诊结核病(TB)患者血清和48份健康人血清中相应的抗结核ESXO抗体水平,评价血清学抗原活性,并与结核早期分泌蛋白ESAT-6和CFP-10的检测结果进行比较.结果 重组特异性抗原ESXO在大肠杆菌中获得成功表达,其在E.coli BL 21 plysS (DE3)中以可溶性和包涵体两种形式存在,相对分子质量(27 300)与预期相符,血清学抗原活性评估结果显示其特异度和敏感度分别为94.0% (45/48)和32.1%(27/84),特异度与ESAT-6和CFP-10相当,敏感度高于ESAT-6.结论 结核特异性抗原ESXO有望成为新的TB诊断与疫苗设计的候选抗原. 相似文献
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目的:分析评价血清前列腺特异抗原和前列腺特异抗原密度对前列腺癌诊断价值。方法:选择52例前列腺癌患者及50例前列腺良性增生患者为研究对象,采用化学发光免疫分析法测定血清前列腺特异抗原水平,并计算前列腺特异抗原密度,比较两组患者数据差异,并以ROC曲线评价其诊断价值。结果:患者PSA分布的组间差异有统计学意义(χ2=31.486,P<0.01);PSAD分布的组间差异有统计学意义(χ2=56.854,P<0.01)。PSA值提高敏感度相应下降,特异性提高,PSAD在各阶段的敏感度及特异性均较高。结论:前列腺癌诊断中采用血清前列腺特异抗原和前列腺特异抗原密度评价有一定的价值,其中前列腺特异抗原密度的准确度及特异性较高,对于前列腺癌和良性增生的鉴别中有重要的意义。 相似文献