安徽皖南红豆杉中紫杉醇和多糖的提取与含量测定

目的：对皖南红豆杉中的紫杉醇和多糖的提取、分离并测定其含量。方法：将其树皮粉碎后用无水乙醇提取,采用柱色谱法进行分离,得到紫杉醇;用水提醇沉方法从红豆杉果实中得到粗多糖,经Sevag法除去粗多糖中的蛋白质,并采用硫酸-苯酚法测定多糖含量。结果：紫杉醇为6.7mg,产率为0.206‰;多糖为0.316g,产率为1.54%。结论：该方法简便可行。     

苯酚-硫酸法测定慈姑中多糖的含量

目的建立测定慈姑中多糖含量的方法。方法采用水提醇沉法提取慈姑多糖,并用苯酚-硫酸法对所提慈姑多糖含量进行测定,测定波长490 nm。结果在范围20~100μg内呈良好线性关系,r2=0.992 8,平均回收率为104%,RSD=4.72(n=5),且供试溶液在2 h内显色稳定。结论苯酚-硫酸法测定慈姑中多糖含量,方法灵敏、重现性好,适用于慈姑多糖含量测定。     

鲍氏针层孔菌菌丝体多糖脱蛋白方法研究

目的:对多糖提取液中的蛋白质去除方法和条件进行了优化,比较不同方法对蛋白质去除的影响。方法:采用Sevag法与三氯乙酸(TCA)法去除鲍氏针层孔菌多糖中的游离蛋白质。结果:TCA去除蛋白质的效果优于Sevag法,TCA最佳脱蛋白条件为:5%三氯乙酸用量,处理3次,反应时间30min;在此条件下,蛋白质去除率为82%,多糖损失率为10.8%。结论:TCA法为最佳的鲍氏针层孔菌脱蛋白方法。     

脱蛋白方法对蜘蛛香多糖总抗氧化能力的影响

目的:研究3种脱蛋白方法对蜘蛛香多糖总抗氧化能力的影响。方法:采用Sevag法、三氯乙酸法和盐酸法对蜘蛛香粗多糖脱蛋白,测定蛋白质脱除率、多糖损失率和总抗氧化能力损失率。结果:采用Sevag法脱蛋白,多糖总抗氧化能力损失率最小。Sevag法处理6次,蛋白质脱除率为41.71%,多糖损失率为46.38%,总抗氧化能力损失率为11.62%。结论:蜘蛛香粗多糖适宜用Sevag法脱蛋白。     

麻黄多糖中蛋白含量测定及脱蛋白方法的比较

目的：建立麻黄多糖中蛋白的含量测定方法,比较不同脱蛋白方法的蛋白脱除效果。方法：水提醇沉提取麻黄多糖,Sevag法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-Sevag法去除蛋白,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。结果：麻黄多糖脱蛋白前的蛋白含量为26.30%,Sevag法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶-Sevag法脱蛋白后的蛋白含量分别为15.00%,6.80%和1.70%;三种方法的蛋白脱除率分别为42.97%,74.14%和93.54%。结论：木瓜蛋白酶-Sevag法的脱蛋白效果较好,考马斯亮蓝G-250染色法操作简便,准确性好,不失为多糖中蛋白含量测定的一种好方法。     

六味地黄生物制剂总多糖的精制工艺优选

目的:优化六味地黄生物制剂总多糖的精制工艺,为该制剂的开发提供参考。方法:以粗多糖质量为指标,采用正交试验考察醇沉浓度、醇沉时间、药液相对密度对总多糖醇沉工艺的影响。在单因素试验基础上,以蛋白质清除率和总多糖保存率的综合评分为指标,采用正交试验优化三氯乙酸(TCA)-正丁醇法脱蛋白工艺。以色素清除率和总多糖保存率的综合评分为指标,利用正交试验优化活性炭除色素工艺。结果:最佳醇沉工艺为醇沉浓度85%,醇沉时间6 h,药液相对密度1.05;粗多糖质量8.92 mg。最佳脱蛋白工艺为粗多糖溶液与TCA-正丁醇体积比1∶2,TCA-正丁醇(1∶15),振荡时间20 min,静置时间0.5 h;蛋白质清除率80.23%,总多糖保存率85.45%。最佳除色素工艺为脱色温度40℃,活性炭加入量6%,脱色时间40 min;色素清除率74.84%,总多糖保存率78.69%。结论:优选的精制工艺稳定可行,适用于六味地黄生物制剂总多糖保健产品的开发。     

淫羊藿多糖的精制实验研究

目的研究淫羊藿多糖的精制工艺以及含量测定。方法采用Sevag法脱去蛋白质;用透析法除去小分子物质;用苯酚-硫酸法测定淫羊藿多糖的含量。结果淫羊藿粗多糖经精制后其纯度为88.84%,RSD为0.36%。结论该法可用于淫羊藿多糖的精制以及含量测定。     

蝉花总多糖的提取纯化及含量测定

目的：探索蝉花总多糖的提取纯化及含量测定方法,为深入研究蝉花总多糖提供技术方法。方法：采用水提醇沉法提取水溶性粗多糖,经Sevag法除蛋白、透析和活性炭脱色制备得蝉花总多糖,采用苯酚硫酸法测定多糖含量,干燥失重法测定水分含量。结果：经纯化后的蝉花总多糖含量为51．6％,水分含量为8．7％,在250～280nm间无明显吸收峰。结论：该系列纯化方法能有效地去除核酸、蛋白质、小分子物质等杂质成分,使蝉花总多糖含量达到50％以上;苯酚硫酸法测定蝉花总多糖含量简便、准确、重现性好。     

当归多糖除蛋白质的方法与条件优化

目的研究Sevag法去除当归粗多糖中蛋白质的最佳条件,并比较Sevag法和反复冻融法的除蛋白质效果。方法采用单因素实验法,以蛋白质去除率和多糖损失率为指标,研究Sevag法不同试剂比例、用量、处理时间的除蛋白质效果,并与反复冻融法相比较。结果 Sevag法除蛋白质最佳条件为氯仿∶正丁醇=4∶1,多糖溶液∶Sevag试剂=3∶1,搅拌时间35 min。Sevag法除蛋白质的最适次数为6次,反复冻融法为4次,后者除蛋白质效果优于前者。结论优化了Sevag法除当归粗多糖中蛋白质的方法,反复冻融法除蛋白质效果优于Sevag法。     

蒙古扁桃药材中多糖的提取及含量测定

目的从蒙古扁桃药材中提取多糖并测定多糖含量。方法经脱脂、醇提后,采用水提醇沉法制备蒙古扁桃多糖,Savage法脱蛋白;以蒙古扁桃精制多糖测得蒙古扁桃多糖对葡萄糖的换算因子,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量。结果平均加样回收率为97.39%,RSD=1.18%(n=6);蒙古扁桃药材中多糖的含量为7.78%。结论该法简便、快速、准确、重现性好,为蒙古扁桃药材的质量控制和资源开发利用提供理论依据。     

五味子醇提残渣中粗多糖的体外抗氧化活性研究

目的 研究五味子醇提残渣中粗多糖的体外抗氧化活性.方法 采用水提醇沉法从五味子醇提残渣中提取粗多糖,用苯酚-硫酸法测定多糖含量;采用化学比色法测定五味子粗多糖对H2O2诱导小鼠红细胞氧化溶血的影响以及对小鼠肝匀浆丙二醛(MDA)生成的影响;用碘量法测定粗多糖的油脂抗氧化性能.结果 五味子醇提残渣中粗多糖的得率为9.14%,粗多糖中多糖含量为42.33%; 五味子醇提残渣粗多糖在体外能有效抑制脂质过氧化,抑制红细胞溶血和MDA生成的IC50值分别为3 mg/ml和1.32 mg/ml;五味子粗多糖能有效抑制食用油脂的过氧化, 0.2%多糖组对猪油和大豆油的抑制率均达64%以上.结论 五味子粗多糖具有较好的体外抗氧化活性,可开发为功能性食品.     

桑枝多糖的提取与含量测定

目的建立一种测定桑枝中多糖含量的方法。方法采用水提醇沉法对桑枝中的多糖进行提取,用Sevag法等进行纯化,蒽酮-浓硫酸法测定多糖的含量。结果回归方程:A=0.02494C 0.0571,r=0.9995,线性范围为0.08~0.4μg.L-1。桑枝多糖的含量为18.74%(RSD=2.1%),平均回收率为98.6%,RSD=1.4%。结论该法简便、快速、重现性好,为桑枝的质量控制提供了方法。     

一大分子量香菇多糖的提取分离纯化

目的 研究从香菇子实体中提取分离纯化得到分子量在4.0×105 Da以上的精制香菇多糖.方法 用碱提-醇沉法提取香菇粗多糖,设计正交试验优化碱提工艺,并通过脱色、超滤分离纯化得到分子量在4.0×105Da以上的精制香菇多糖.苯酚-硫酸法测定总糖量,高效凝胶色谱法测定分子量,紫外光谱检测蛋白质和核酸.结果 正交试验证实碱的浓度是影响提取工艺的主要因素,最优碱提工艺为提取温度为25℃,碱的质量分数为5％,提取时间为24h,苯酚-硫酸法测定超滤后香菇多糖的含糖量为95.00％,高效凝胶色谱法测定香菇多糖的重均分子量为6.054×105Da,紫外光谱中在260 nm、280 nm波长处没有吸收峰.结论 碱提-醇沉法提取香菇粗多糖工艺简单,纯化后的香菇多糖为分子量均一的多糖组分,不含核酸和蛋白质,为以后的结构研究和药理药效研究奠定了基础.     

红毛五加粗多糖脱蛋白工艺比较

目的　研究红毛五加粗多糖脱蛋白工艺。方法　 1用 Sevage法脱蛋白 ;2用三氯乙酸法脱蛋白 ;3用苯酚 -硫酸法测定红毛五加多糖含量。结果　 1用 Sevage法脱蛋白后红毛五加粗品多糖中多糖含量为80 .6 % ;2用三氯乙酸法脱蛋白后红毛五加粗品多糖中多糖含量为 6 8.6 % ;。结论　用 Sevage法脱蛋白效率较高 ,可用于红毛五加多糖分离、精制     

天麻多糖的纯化工艺研究

对本实验室提取的川产天麻多糖粗提液进行分离纯化,研究结果表明：采用酶法除蛋白效果比较理想,一次就能达到比较好的效果,胰蛋白酶用量为2.0U/mg,处理时间以5h最好;酶解结合一次Sevag法再醇沉后,蛋白脱出率为90.1%;进样体积8ml、样品浓度4%、流速0.8ml/min时,Sepharose 6 Fast Flow凝胶分离效果最好。     

半叶马尾藻多糖的分离纯化与光谱分析

本文对半叶马尾藻多糖采用水提醇沉法粗提，蛋白酶联合Sevag法去蛋白纯化，凝胶过滤柱层析分离得半叶马尾藻纯多糖的不同组分，溴化钾压片红外光谱测定和紫外光谱扫描鉴定分析。结果表明，SHP的苯酚-硫酸呈色反应呈阳性，茚三酮反应呈弱阳性，碘-碘化钾反应呈阴性，说明提取物为非淀粉性多糖。SHP的提取率为8．56％，总糖含量为90．96％。凝胶过滤柱层析结果表明，半叶马尾藻多糖中含有吡喃多糖、木聚糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖和果糖等。紫外扫描结果显示多糖几乎不含核酸和蛋白质；红外光谱显示SHP主要为吡喃多糖，并显示多糖分子结构中存在β2糖苷键，还存在α-D-半乳吡喃糖的特征吸收峰。     

零陵香水溶性多糖组分的GC-MS分析

目的:鉴定零陵香水溶性多糖组分,为建立专属性的质量评价指标和中药药效组分新药研发奠定基础。方法:采用水提醇沉法制备零陵香粗多糖,Sevag法除蛋白、H₂O₂脱色、透析得到精制多糖,衍生化后用GC-MS分析。结果:零陵香水溶性多糖主要组分依次为鼠李糖醇-阿拉伯糖-核糖-葡萄糖-木糖,其相对含量比例为1.03:9.17:4.74:18.95:17.11。结论:GC-MS联用法可快速鉴定零陵香水溶性多糖组分。     

薏苡仁多糖提取及纯化工艺的研究

目的：优选薏苡仁多糖提取、分离及纯化的最佳工艺。方法：通过正交试验法确定薏苡仁多糖的最佳提取工艺;采用单因素优选法考察醇沉浓度及醇沉时间对多糖得率的影响;用Sevag法（正丁醇一氯仿混合液1：5）和三氯乙酸法（TCA）脱蛋白。结果：薏苡仁多糖最佳提取工艺条件为10倍量水提取2次,每次1h;醇沉时多糖含量与乙醇浓度呈正比,且当乙醇浓度为90％时,多糖含量达到最大,醇沉时间为9小时。结论：该工艺稳定、简便易行、提取物中多糖含量及纯度均较高。     

川芎多糖除蛋白方法研究

目的 对川芎多糖进行除蛋白处理,筛选最佳除蛋白方法.方法 采用Sevag法、三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法3种方法对川芎多糖进行除蛋白处理,通过比较不同方法处理后的蛋白含量及多糖含量来确定最佳的除蛋白方法.结果 Sevag法的蛋白质去除率高(90%以上),但多糖回收率仅为40%;三氯乙酸法的蛋白质去除率为37.28%,多糖回收率为73.19%;三氯乙酸-正丁醇法的蛋白质去除率为83.60%,多糖回收率为85.16%,且操作快速、简便.结论 三氯乙酸-正丁醇法除蛋白效果较好.     

不同精制工艺对复方生血口服液成分及初步药效的影响

目的:考察不同精制工艺对复方生血口服液的成分及功效的影响。方法:采用醇沉、絮凝澄清、超滤3种工艺对生血复方水提液进行精制,采用HPLC-ELSD测定不同精制样品中黄芪甲苷的含量,并对比观察经3种工艺制备后的生血方对血虚模型小鼠外周血象的影响。结果:经醇沉法工艺精制后生血复方水提液中黄芪甲苷保留率为79.33%,絮凝澄清法为67.69%,超滤法为58.72%。与模型组比较,醇沉和超滤样品干预后血虚模型小鼠白细胞明显升高(P0.05),絮凝澄清样品未见明显升白作用。结论:结合药学及初步药效指标,能更好地优选复方生血水提液的精制工艺,醇沉法和超滤法更适合用于复方生血口服液的精制。