泛耐药肺炎克雷伯菌的耐药基因研究

目的 了解1株对临床常用18种抗菌药物(包括亚胺培南、美罗培南)均耐药的肺炎克雷伯菌(KPN)所携带的耐药基因状况.方法 对该株KPN进行了9类耐药基因的PCR法检测,包括β-内酰胺酶基因blaTEM、blaSHV、blaLEN、blaOKP、blaCTX-M-1、2、9群、blaOXA-1、2、10群、blaCARB、blaPER、blaVEB、blaGES、金属β-内酰胺酶基因blaIMP、blaVIM、blaKPC,AmpC酶基因blaDHA、blaACT/MIR、blaCMY/MOX、blaCMY/LAT,氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6')-Ⅰ b、aac(6')-Ⅱ、ant(2")-Ⅰ、ant(3")-Ⅰ,喹诺酮类耐药基因qnrA、TMP耐药基因dfrA1、dfrA17,消毒剂磺胺耐药基因qacE△1-sul1,整合子遗传标记基因intⅠ1、intⅠ2、intⅠ3,转座子遗传标记基因tnpA、merA,共计36种.结果 KPN共检出7种耐药基因,分别为β-内酰胺酶基因blaTEM,blaSHV,金属β-内酰胺酶基因blaKPC-2,氨基糖苷修饰酶基因aac(3)-Ⅱ,ant(3")-Ⅰ,消毒剂磺胺耐药基因qacE△1-sull,整合子遗传标记基因intⅠ1.结论 在该株泛耐药KPN中发现了少见的blaKPC-2金属β-内酰胺酶基因,该菌对18种抗菌药物的耐药可能与其同时携带有多种耐药基因有关,临床应对此类菌株引起重视.     

ICU泛耐药肺炎克雷伯菌肺部感染暴发与控制

目的 调查重症监护病房(ICU)泛耐药肺炎克雷伯菌(PDRKP)医院感染暴发原因,探讨控制措施的有效性及不足之处.方法 对2010年10月22日-11月3日4例泛耐药肺炎克雷伯菌患者进行流行病学调查和病区环境卫生学监测,采取环境消毒、隔离防护、加强手卫生等一系列措施控制感染暴发.结果 13d内相继发生4例PDRKP肺部感染,罹患率15.38％;从暴露时间、区域分布和相同病原菌、相同耐药谱判断,本次感染符合局部同源暴发.结论 患者出院后终末消毒不彻底、医务人员接触传播,可能是此次肺炎克雷伯菌流行的外源性因素;合理使用抗菌药物,延缓耐药菌的产生,做好多药耐药菌的监测,严格执行各项消毒隔离措施,提高手卫生依从性,在预防与控制医院感染暴发中发挥重要作用.     

泛耐药肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药机制研究

目的 通过检测一株泛耐药肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类、氨基糖苷类和氟喹诺酮类抗菌药物耐药相关基因表达状况,分析该菌泛耐药的原因及其机制,为临床资料提供参考依据。方法 回顾性分析2012年1月住院患者经API 20E系统初步鉴定菌种并经基因扩增与测序进一步确认的一株泛耐药肺炎克雷伯菌,采用聚合酶链反应(PCR)法分别检测β-内酰胺酶编码基因与膜孔蛋白编码基因、氨基糖苷类修饰酶编码基因和16SrRNA甲基化酶编码基因、拓普异构酶Ⅱ(DNA旋转酶)A亚单位和拓普异构酶ⅣC亚单位编码基因(gyrA、parC)突变分析以及可移动遗传元件标记基因。结果 在该泛耐药肺炎克雷伯菌株中分别检出TEM、SHV、CTX-M-1群、KPC、DHA等5种β-内酰胺酶编码基因、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、ant(3″)-Ⅰ等3种氨基糖苷类修饰酶编码基因、intⅠ1、tnpU、tnp513、IS26、IS903、ISEcp1、ISKpn6、trbC等8种可移动遗传元件标记基因,并发现gyrA和parC基因存在突变,但膜孔蛋白编码基因检测呈阴性。结论 借助于可移动遗传元件而获得广泛耐药基因并表达5种β-内酰胺酶编码基因和3种氨基糖苷类修饰酶编码基因、且存在gyrA基因与parC基因的有义突变,是该菌株泛耐药的主要原因与机制。     

泛耐药肺炎克雷伯菌耐药基因研究

目的了解1株泛耐药肺炎克雷伯菌(PDRPKA)耐药基因携带状况。方法采用三维试验分析泛耐药肺炎克雷伯菌产β-内酰胺酶、氨基糖苷酶等,聚合酶链反应(PCR)扩增和产物测序方法确认,检测该株PDRPKA49种基因。结果该株PDRPKA携带TEM-1、SHV、DHA、blaCTX-M-1群、blaCTX-M-9群、aac(3)-Ⅱ、ant(2″)-Ⅰ、ant(3″)-Ⅰ、aph(3′)-Ⅰ、intⅠ1、qacE△1-sul1、tnpU、tnp513、merA等14种耐药基因。结论该株PDRPKA携带多种耐药基因是泛耐药原因。     

基层医院肺炎克雷伯菌的耐药现状调查

目的调查基层医院肺炎克雷伯菌的耐药现状,为临床医师合理用药提供依据.方法用K-B法做体外药敏试验,用纸片确证试验检测产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌.结果我院肺炎克雷伯菌产ESBLs率为24.8%;137株肺炎克雷伯菌对亚胺培南100%敏感,对阿米卡星和环丙沙星耐药率约为40%,对其余6种常用抗生素耐药率均＞50%.结论基层医院也要重视细菌的耐药监测工作,预防医院感染的发生与流行.     

儿童重症感染泛耐药肺炎克雷伯菌1例报道及相关文献

目的探讨泛耐药肺炎克雷伯菌的耐药现状、机制、易感因素、耐药率及产生"超级细菌"的关系。方法报道医院近期确诊的1例急性非淋巴细胞白血病患儿化疗后骨髓抑制期间合并重症泛耐药肺炎克雷伯菌感染病例资料,并复习相关文献。结果临床中泛耐药菌感染问题越来越严重,特别是对于存在肿瘤、化疗等因素导致免疫力低下的患者,泛耐药菌感染严重,一旦发生预后不良,是临床工作中遇到的一大难题。结论必须合理应用抗菌药物,建立并严格执行有效的感染控制措施,参照抗菌药物应用指南,依据细菌耐药性监测结果,合理选择抗菌药物,避免长期和过度使用抗菌药物,是目前控制泛耐药感染发生的有效对策。     

血液科病房碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌感染的调查与干预

目的通过对血液科病房碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)致3例血流感染病例的调查及感控干预,为预防医院感染暴发流行提供参考依据。方法 2013年6月事件发生期间设定为A组107例,2013年7月-12月设置为B组629例,2014年设置为C组1 081例,2015年设置为D组1 161例;对2013年6月3例CRKP致血流感染的患者进行临床及分子流行病学调查分析,并采取消毒隔离等干预措施,根据事件发生期、干预后分组并追踪30个月,运用χ~2检验分析不同组间感染发生率差异。结果 3例菌株属同一基因克隆,经启动消毒隔离等干预措施,观察干预后仅发生1例CRKP新病例,事件发生期、干预后CRKP感染率差异有统计学意义(P<0.05),无暴发流行事件。结论接触传播是此次事件的主要疑似因素;落实接触隔离措施、提高医护人员手卫生依从性、严格执行无菌操作、加强环境及物体表面的清洁与消毒、强化终末消毒,将有效预防医院感染的发生。     

某院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌检出与耐药表型分布

目的了解临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药表型及临床分布特征,为临床合理用药和医院感染防控提供依据。方法收集2013—2015年某医院住院患者临床分离的CRKP,分析标本来源分布及病原菌药敏同源性。结果949株非重复分离的肺炎克雷伯菌中,检出CRKP 75株(7.90%)。2013—2015年CRKP的检出率分别为1.35%、7.77%、17.04%,呈逐年上升趋势,差异有统计学意义(P0.01)。CRKP感染部位主要为呼吸道和泌尿道,主要分布于重症监护病房(ICU)、老年病科和急诊科。CRKP对阿米卡星和复方磺胺甲口恶唑的敏感率稍高,分别为57.33%、48.00%。CRKP社区获得性感染者22例,占29.33%;医院获得性感染者53例,占70.67%。75例CRKP感染患者死亡18例(24.00%)。耐药表型分析有同源性的CRKP分为5种克隆,主要在ICU、急诊病房和老年病科等科室传播流行。结论CRKP感染的比例有逐年升高的趋势,临床应加强CRKP的监测,采取强化的感染控制措施,预防和控制CRKP的播散和流行。     

秀丽隐杆线虫-泛耐药肺炎克雷伯菌感染模型的建立

目的建立泛耐药肺炎克雷伯菌（XDRKP）感染秀丽隐杆线虫感染模型。方法在液体条件下,利用临床分离的XDRKP菌株感染秀丽隐杆线虫,观察线虫存活及体内细菌数量变化情况。结果线虫感染XDRKP后活动明显迟缓,不同浓度的XDRKP对线虫的致死情况不同。log-rank检验显示,1.5×10⁶ CFU/mL XDRKP组与E.coli OP₅₀对照组的生存曲线差异无统计学意义（χ2=0.08,P>0.05）;1.5×10⁷、1.5×10⁸ CFU/mL组与E.coli OP50对照组的生存曲线差异均有统计学（χ²值分别为229.37、275.98,均P<0.001）,1.5×108与1.5×10⁷ CFU/mL XDRKP组线虫的生存率低于对照组。实验获得上清悬液,经细菌纯培养后进行细菌鉴定和药敏测试,证实为XDRKP。XDRKP感染线虫4、6、12、24 h后,线虫体内细菌总量分别为（0.28±0.02）×10⁵、（0.50±0.38）×10⁵、（1.73±0.56）×10⁵、（2.62±0.53）×10⁵ CFU/mL,不同时间线虫体内细菌总数存在统计学差异（F=1 363.39,P<0.001）。结论成功建立了秀丽隐杆线虫-XDRKP感染模型。     

黏菌素耐药肺炎克雷伯菌耐药性及同源性

目的 了解黏菌素耐药的肺炎克雷伯菌耐药特点、临床分布、耐药性表型及基因型,并对菌株进行同源性分析。方法 收集2021年1月-2021年12月上海交通大学医学院附属瑞金医院临床分离的黏菌素耐药肺炎克雷伯菌共17株,使用微生物质谱检测系统(MOLDI-TOF MS)进行菌株鉴定,Vitek-2 Compact全自动微生物分析仪进行药敏试验,肉汤稀释法确认黏菌素敏感性,对菌株携带的耐药基因型进行PCR扩增和序列分析,分析菌株之间的同源性。结果 17株黏菌素耐药的肺炎克雷伯菌菌株中,血液中分离率最高(4株占23.5%),科室分布以ICU为主(11株占64.7%);黏菌素耐药的肺炎克雷伯菌对β-内酰胺酶抑制剂复合制剂、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星耐药率达100%;均携带bla_SHV和bla_TEM,未检出mcr基因;其中16株(94.1%)多位点序列分型(MLST)为ST-11型;17例分离出黏菌素耐药肺炎克雷伯菌患者均合并多种基础疾病,13例(76.5%)为男性,年龄(37～96)岁,住院天数(33～146)天,9例(52.9%)死亡,4例(23.5...     

肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性变迁

目的 调查医院2006年1月-2010年12月分离的肺炎克雷伯菌的耐药趋势,为临床治疗提供可靠依据.方法 收集送检标本中分离的肺炎克雷伯菌株,按全国临床检验规程分离鉴定,并采用K-B法进行药敏试验,用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 共分离出563株肺炎克雷伯菌,以痰标本分离率最高,占64.48％,其次是尿液、血液、分泌物分别占9.24％、6.93％、2.13％;肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南的耐药率为0,对氨苄西林的耐药率＞98.0％;对庆大霉素、头孢呋肟、头孢西丁的耐药率总体上呈上升趋势.结论 对肺炎克雷伯菌进行及时鉴定和药敏分析,把握其耐药趋势,可有效指导临床合理用药.     

ICU一起疑似泛耐药鲍氏不动杆菌暴发调查与控制

目的通过调查重症监护室(ICU)一起疑似泛耐药鲍氏不动杆菌(PDR-AB)感染暴发的情况,研究泛耐药鲍氏不动杆菌医院感染防控的集束化策略,指导医院感染防控措施实施。方法通过分子流行病学分析与环境卫生学监测相结合的方法,对2018年2月-2018年4月ICU住院患者鲍氏不动杆菌分离与感染情况展开调查,对疑似污染的环境与物品进行微生物学采样、鉴定和药敏试验。患者和环境中PDR-AB克隆菌株采用脉冲场凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis,PFGE)技术进行同源性分析。结果 2018年3月ICU PDR-AB院内定植或感染患者7例,患者新发感染率10.14%;PDR-AB定植或感染患者的头部垫巾,病床床尾板、床栏,护士站台面及医务人员护理服和清洗消毒后的纤支镜中分离出PDR-AB存在;ICU患者与环境分离的27株PDR-AB耐药谱基本一致;PFGE结果显示患者、环境、纤支镜PDR-AB克隆菌株来自于同一亚型。结论 PDR-AB克隆菌株在患者、环境及纤支镜之间具有高度同源性的克隆传播,通过强化医务人员无菌观念,患者隔离,环境及医疗器械的严格清洁消毒,暴发流行情况得到有效控制。     

新生儿室泛耐药鲍氏不动杆菌感染暴发调查

目的 对一起新生儿室泛耐药鲍氏不动杆菌感染暴发进行调查分析,查找原因,以采取有效方法控制感染流行.方法 采用现场采样检测,对采集标本进行细菌鉴定及药物敏感试验,检测结果为泛耐药鲍氏不动杆菌的进一步采用肠杆菌基因组内重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)基因检测其同源性.结果 医院新生儿室2011年7月15-23日共收治患儿30例,连续发生4例泛耐药鲍氏不动杆菌引起的下呼吸道感染病例,感染率为13.33％;经对室内环境表面采样检测,在共用的喉镜镜片表面分离出与4例感染患儿痰标本耐药模式一致的泛耐药鲍氏不动杆菌,经ERIC-PCR基因检测确定为同一基因型.结论 由泛耐药鲍氏不动杆菌污染的喉镜镜片引起的医院感染暴发.     

21例泛耐药鲍氏不动杆菌肺炎治疗分析

目的探讨较大剂量头孢哌酮/舒巴坦治疗泛耐药鲍氏不动杆菌肺炎的临床疗效,为临床合理应用抗菌药物提供指导。方法对2009年5月-2010年7月21例使用头孢哌酮/舒巴坦治疗泛耐药鲍氏不动杆菌肺炎的危重症患者进行回顾分析,对头孢哌酮/舒巴坦的临床疗效进行观察。结果 21例患者经治疗后,其中7例治愈,6例改善,8例失败,总有效率61.9%;8例患者细菌得到有效清除,细菌清除率为38.1%,3例患者死亡。结论较大剂量头孢哌酮/舒巴坦治疗泛耐药鲍氏不动杆菌肺炎,取得较满意疗效;细菌清除率低,与临床疗效相关性差,考虑与细菌定植有关。     

儿童泛耐药鲍氏不动杆菌重症感染1例

目的探讨鲍氏不动杆菌(ABA)的生物学及流行病学特点、感染及耐药现状以及泛耐药菌株的治疗及预防。方法对2010年9月确诊的1例急性混合细胞白血病患儿,化疗后骨髓抑制期间合并重症泛耐药鲍氏不动杆菌(PDRAB)感染病例资料进行分析,并复习相关文献。结果 ABA为主要的医院感染致病菌,主要发生在ICU及存在肿瘤、化疗等因素导致免疫力低下的特定患者,临床中ABA耐药问题日臻严重,甚至对碳青霉烯类抗菌药物也逐渐产生耐药,成为全世界医疗工作者遇到的一大难题。结论 PDRAB感染预后较差,控制感染的首要措施在于预防,应尽量减少医院环境的污染,采用目前较少应用的抗菌药物如多黏菌素、替加环素等治疗泛耐药菌株感染。     

泛耐药鲍曼不动杆菌相关耐药基因检测及亲缘性分析

目的 了解临床分离的泛耐药鲍曼不动杆菌(PDR-AB)携带β-内酰胺酶(bla)基因、整合酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因及喹诺酮类耐药基因情况以及它们的亲缘性关系.方法 用PCR及序列分析方法对50株PDR-AB进行各种耐药基因的检测,采用DNAMAN软件进行基因的树状结构的构建和亲缘性分析.结果 50株PDR-AB共检测耐药基因21种,TEM、SHV、PER、VEB-1、CTX-M-1、ADC、IMP-1、IMP-2、VIM-2、OXA-23、OXA-24、IntI1、IntI2、IntI3、qnrAm、qnrBm、qnrS、qepA、gyrA突变基因、parC突变基因、Aac(6')-1b阳性检出率分别为100％、100％、86％、0、38％、100％、100％、76％、88％、86％、0、98％、22％、2％、6％、60％、6％、0、100％、100％、76％.50株PDR-AB间具有一定的亲缘性.结论 PDR-AB同时携带多种耐药基因是导致其对常用药物均耐药的重要原因,临床应加强有效的监测工作来控制PDR-AB传播并选择有效的抗生素进行治疗.     

医院泛耐药铜绿假单胞菌流行现状及其危险因素研究

目的探讨医院内泛耐药铜绿假单胞菌(pan-drugresistant Pseudomonas aeruginosa,PDRPA)流行现状及其危险因素,为临床防制PDRPA感染提供依据。方法 2008年7月～2009年6月对广州市某两个三级甲等医院进行为期1年的铜绿假单胞菌院内感染监测,采用Kirby-Bauer纸片扩散法分析并筛选泛耐药铜绿假单胞菌,回顾性分析相应病例的临床资料,通过单因素和多因素非条件Logisitic回归分析PDRPA感染的危险因素。结果铜绿假单胞菌的泛耐药率为6%(15/250),单因素分析发现年龄、糖尿病、冠心病、住院时间、是否入住ICU、使用β-内酰胺酶抑制剂抗生素、使用碳青霉烯类抗生素、使用喹诺酮类抗生素、使用一代头孢抗生素、抗生素使用天数、呼吸机、鼻饲插管、气管插管、深静脉插管与PDRPA感染有关;Logistic多因素回归分析只有糖尿病(P﹤0.01,OR=12.524,95%CI=2.472～63.187)和使用碳青霉烯类抗生素(P=0.043,OR=6.960,95%CI=1.065～45.473)为独立危险因素。结论糖尿病与使用碳青霉烯类抗生素是PDRPA的独立危险因素,因此,密切监测患者感染情况,尤其是糖尿病患者,合理使用碳青霉烯类抗生素,是预防和控制PDRPA院内感染的关键。     

泛耐药鲍氏不动杆菌医院感染危险因素的研究

目的 研究泛耐药鲍氏不动杆菌(PDRAB)医院感染的危险因素,为有效预防和控制PDRAB医院感染提供参考资料.方法 采用病例对照研究方法,对PDRAB感染的相关因素进行分析,确定危险因素.结果 61例PDRAB医院感染患者,感染多发生于入院后1～3周,感染类型以肺部感染为主,占70.5％,其次为创面及血液感染,分别占16.4％、6.6％;单因素分析显示,PDRAB医院感染的危险因素有气管切开(OR=31.0)、呼吸机通气(OR=31.0)、气管插管(OR=16.5)、人住ICU(OR=11.3)、其他插管(()R=2.3)及输氧(OR=2.1);多因素非条件logistic回归分析,进一步得出PDRAB医院感染的独立危险因素为气管切开和呼吸机通气.结论 加强重症监护病房的消毒、隔离制度,减少或规避侵入性诊疗操作,是有效预防和控制PDRAB医院感染的关键.     

泛耐铜绿假单胞菌氨基糖苷类药物产酶耐药机制的研究

目的:了解我院临床分离泛耐铜绿假单胞菌(PDRPA)16S rRNA甲基化酶基因、氨基糖苷类药物修饰酶基因存在状况,探讨PDRPA氨基糖苷类耐药机制。方法:GNS-448药敏卡及K-B法测定抗菌药物的敏感性,聚合酶链反应(PCR)检测氨基糖苷类修饰酶基因、16S rRNA甲基化酶基因。结果:22株PDRPA对20种常用抗菌药物耐药,16S rRNA甲基化酶rmtB阳性1株(4.5%);氨基糖苷类修饰酶aac(6′)-Ⅰb阳性4株(18.2%),ant(3″)-Ⅰ阳性12株(54.5%),ant(2″)-Ⅰ阳性8株(36.4%),其他基因均阴性。共18株检出氨基糖苷类修饰酶基因。结论:PDRPA氨基糖苷类耐药为多重耐药机制,我院PDRPA氨基糖苷类耐药机制主要与氨基糖苷类修饰酶基因相关。     

植生克雷伯菌与肺炎克雷伯菌β-内酰胺酶编码基因研究

目的调查一组耐药克雷伯菌属β-内酰胺酶编码基因表达状况以及KPC型β-内酰胺酶编码基因与插入序列的关系,为临床治疗提供参考依据。方法收集医院2009年10月-2011年3月分离出的20株克雷伯菌属,采用K-B纸片扩散法进行抗菌药物敏感性判断;采用聚合酶链反应(PCR)法检测A、B、C、D等4类40种β-内酰胺酶基因,PCR法连锁检测KPC型β-内酰胺酶编码基因与插入序列,采用Chromas软件对PCR阳性产物测序结果进行读序,并对测序结果用Chromas直接作BLAST Search比对。结果 20株克雷伯菌属共检出5种A类β-内酰胺酶编码基因TEM、SHV、CTX-M-1群、LAP、KPC,1种C类β-内酰胺酶编码基因DHA,1种D类β-内酰胺酶编码基因OXA-1群,阳性检出率依次为SHV100.0%、TEM8 5.0%、DHA85.0%、CTX-M-1群55.0%、KPC45.0%、LAP10.0%和OXA-1群5%;9株KPC阳性菌株KPC-ISKpn6连锁检测均为阳性。结论产β-内酰胺酶是克雷伯菌属耐β-内酰胺类药物的重要成因之一,KPC型β-内酰胺酶编码基因由插入序列ISKpn6介导。