靶向白色假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶的小分子干扰RNA对白色假丝酵母菌毒力影响

目的探讨靶向白色假丝酵母菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(SAP)的小分子干扰RNA(siRNA)对白色假丝酵母菌SAP的基因表达影响,以期为RNA干扰技术抑制真菌毒力提供实验基础。方法设计并合成SAP靶向的siRNA,用醋酸锂转染白色假丝酵母菌,试验设空白对照组、错义对照组、SAP siRNA组,采用RT-PCR测定转染后白色假丝酵母菌SAP mRNA表达水平,制备BSA培养基测定天冬氨酸蛋白酶活性及小鼠毒力实验。结果与空白对照组、错义对照组相比,转染48h后,siRNA组白色假丝酵母菌中SAP mRNA表达明显下调为(0.51±0.05),siRNA组天冬氨酸蛋白酶活性PA值为(0.84±0.04)均高于空白及错义对照组,小鼠30d死亡率显著降低为20.0%。结论化学合成的靶向SAP siRNA能够下调白色假丝酵母菌中SAP基因的表达,降低白色假丝酵母菌的毒力,该实验为进一步研究应用RNA干扰技术抗真菌治疗奠定基础。     

呼吸道白色假丝酵母菌基因分型与耐药性研究

目的 了解呼吸道白色假丝酵母菌的基因分型和不同基因型白色假丝酵母菌的药敏情况,并探讨基因分型与耐药性之间的关系.方法 采用PCR扩增白色假丝酵母菌基因组DNA的25S rDNA基因内含子区,根据扩增产物片段大小和数目分型,采用ATB FUNGUS3酵母菌药敏试剂盒对不同基因型白色假丝酵母菌进行药敏分析.结果 80株白色假丝酵母菌临床分离株分为3型:A型39株、B型30株、C型11株;A型是主要的基因型,占48.75％,B型占37.50％,C型占13.75％;3种基因型白色假丝酵母菌均未出现对两性霉素B耐药株,C型白色假丝酵母菌未出现对氟胞嘧啶耐药株,A、B、C型白色假丝酵母菌对氟康唑的耐药率分别为5.1％、6.7％、18.2％,对伊曲康唑的耐药率分别为5.1％、13.3％、27.3％,对伏立康唑的耐药率分别为2.6％、3.3％和9.1％,B型和C型白色假丝酵母菌对唑类药物的耐药率高于A型.结论 A型白色假丝酵母菌呼吸道感染基因分布中占首位,白色假丝酵母菌的基因分型对抗真菌药物的选择,控制真菌感染有重要意义.     

嗜酸乳杆菌与白色假丝酵母菌交互作用

目的对嗜酸乳杆菌与白色假丝酵母菌间的交互作用及pH、乳酸、乙酸、H2O2等对白色假丝酵母菌生长影响进行评价,为细菌性阴道病治疗后易转为外阴阴道假丝酵母菌病的原因提供依据。方法不同浓度嗜酸乳杆菌、白色假丝酵母菌混合培养;白色假丝酵母菌经不同pH值培养基培养、1%乳酸、1%乙酸、3%H2O2作用,检测其浓度变化,形态学观察白色假丝酵母菌形态变化。结果嗜酸乳杆菌浓度依赖性抑制白色假丝酵母菌生长,白色假丝酵母菌可促进嗜酸乳杆菌生长;pH值为3.5~5.5时,嗜酸乳杆菌具有较强的抑菌能力,当pH值为4.0时,嗜酸乳杆菌抑菌能力最强;乳酸、乙酸均对白色假丝酵母菌生长有明显抑制作用且具有浓度和时间依赖性,H2O2对白色假丝酵母菌生长并无直接抑制作用。结论嗜酸乳杆菌主要通过其代谢产物乳酸而不是H2O2直接产生抑菌作用,细菌性阴道病治疗后转为外阴阴道假丝酵母菌病的发生,主要与乳杆菌因某些因素生长受抑,导致数量降低及其产酸能力下降有关。     

3种白色假丝酵母菌生物膜体外模型的比较研究

目的3种白色假丝酵母菌实验生物膜体外模型,观察生物膜形成的动态过程,比较3种模型研究结果的相关性。方法白色假丝酵母菌模式株ATCC 90038,分别用96孔板法,载玻片与6孔板法,以及连续培养法形成实验生物膜,荧光倒置显微镜观察生物膜的结构,XTT减低法定量检测生物膜的形成过程,比较3种方法形成的白色假丝酵母菌生物膜。结果3种方法都可以形成成熟的生物膜结构,定量分析有明显相关性。结论可以根据试验目的选择不同的白色假丝酵母菌实验生物膜的体外研究模型。     

白色假丝酵母菌及其细胞壁蛋白质组学的研究进展

白色假丝酵母菌(Candida albicans)是人类正常的微生态共生菌,近20多年来,由于器官移植免疫抑制剂和广谱抗菌药物的使用、癌症放疗化疗的增多、各种生物装置的体内置入和导管的留置、广谱抗菌药物的滥用和艾滋病的流行等,使得免疫功能低下者不断增多,深部真菌感染作为一种并发病,感染率大幅上升,已成为这些疾病患者死亡的主要原因.     

体外乳杆菌属对白色假丝酵母菌生长的抑制作用

目的研究体外乳杆菌属细菌对白色假丝酵母菌生长的抑制作用。方法选用嗜酸乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、短乳杆菌分别与白色假丝酵母菌混合培养,用革兰染色法观察白色假丝酵母菌菌体形态的变化;用菌落形成单位培养技术观察白色假丝酵母菌菌落数量的变化。结果在MRS培养基上混合培养显示,4种乳杆菌属中嗜酸乳杆菌对白色假丝酵母菌的生长抑制作用最强,观察菌体形态,被抑制生长后的白色假丝酵母菌单细胞孢子的细胞壁和细胞质都有较大的改变;加入嗜酸乳杆菌后可将白色假丝酵母菌的数量由原来的(11.62±2.68)×103 CFU/ml降低至(4.23±0.63)×103 CFU/ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论嗜酸乳杆菌能抑制白色假丝酵母菌的生长,破坏白色假丝酵母菌菌体的正常结构。     

呼吸内科白色假丝酵母菌的分布及药物敏感性分析

白色假丝酵母菌是人体最重要的条件致病菌,近年来,由于肾上腺皮质激素、免疫抑制剂及广谱抗菌药物的广泛应用,各种导管插管、腹膜透析、放射治疗等医疗技术的普遍开展,免疫功能低下人群扩大,全身性真菌感染者日益增多.为此,笔者对本院呼吸内科临床标本分离的290株白色假丝酵母菌进行鉴定及药敏试验,现将结果报道如下.     

深部感染白色假丝酵母菌的分布及耐药分析

目的 了解住院患者白色假丝酵母菌深部感染分布特点及其对抗真菌药物的耐药性,加强感染的防治.方法 回顾调查2007年1月1日-12月31日,住院患者各种标本分离到的白色假丝酵母菌的分布及药敏检测.结果 从住院患者送检的痰、尿液、血液、分泌物、咽拭子等标本中分离出1698株假丝酵母菌属,其中白色假丝酵母菌1075株,占63.3%;以下呼吸道感染为主,占89.8%;体外监测显示,白色假丝酵母菌对制霉菌素、氟康唑、伊曲康唑、5-氟胞嘧啶及两性霉素B仍保持良好敏感性,耐药率分别为3.9%、3.6%、2.5%、0.5%和0;白色假丝酵母菌感染与患者使用抗菌药物、激素、侵入性操作、体质、年龄及基础疾病等有关.结论 医院白色假丝酵母菌感染率明显上升,耐药性也日渐增加,合理使用抗菌药物及免疫抑制剂、减少不必要的诊疗操作、早期诊断及有效性治疗是防治深部白色假丝酵母菌感染的关键.     

不同取样方法对老年人口腔感染白色假丝酵母菌检出率的比较

目的 比较不同取样方法对老年人口腔感染白色假丝酵母菌检出率的差异,观察健康老年人口腔白色假丝酵母菌的分布.方法 来自西北地区53例健康老年人,采用A、B、C 3种不同取样方法对老年人口腔感染白色假丝酵母菌检测,使用鉴定培养基和PCR方法鉴定白色假丝酵母菌,统计学分析比较不同取样健康老年人口腔白色假丝酵母菌检出率的差异.结果 结果发现三种取样方法白色假丝酵母菌检出率分别为52.8%、54.7%、54.7%,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 健康老年人口腔白色假丝酵母菌的检出率较高,3种取样方法的检出率差异不大,颊黏膜拭子结合浓缩离心接种鉴定培养基足简便有效的方法.     

流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌对氟康唑敏感性的研究

目的 建立流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌对氟康唑敏感性试验(FCST)的方法.方法用FCST法对标准菌株在不同实验条件下检测以探讨最佳实验条件,对FCST法与NCCLS M27-A法进行对比,得出最低抑菌浓度(MIC)判断标准;同时对30株临床菌株进行FCST法双份平行检测并与M27-A进行比较.结果 流式细胞术快速检测不同比例死菌与活菌混合液检测值及设定值具有良好的相关性(r=0.999);MIC判断标准为死菌比率在连续系列管中高浓度管比低浓度管出现＞50.0%的增长,并且保持稳定或连续增长,则可判定高浓度管药物浓度为该菌的MIC值;对30株临床分离菌株的检测发现,该法具有很好的重复性,与M27-A比较,两者一致率为93.3%,结果差异无统计学意义(P＞0.05),并有很好的相关性(r=0.822).结论 FCST具有快速、重复性好、易于判断MIC值、准确性高等优点,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景.     

Strain differentiation of Candida albicans by morphotyping

Strains of Candida albicans can be differentiated by the morphological features of streak colonies developed on malt agar. A morphotyping system is proposed, where numerical codes are assigned primarily on the basis of the nature and extent of marginal fringing and the surface topography of the streak colony. The system allows ready differentiation to be made of morphotypes, requires no specialized equipment or expertise and provides a simple and reproducible means for epidemiological studies of candida and candidosis.     

氧化剂抑制白色假丝酵母菌菌丝形成的研究

目的研究3种氧化剂对白色假丝酵母菌(CAL)菌丝形成的影响,探讨氧化应激对真菌病原体的抑制作用,为研发新的抗真菌药物提供理论依据。方法 2014年2月将3株CAL标准株和临床分离菌株悬液接种于含不同浓度过氧化氢、二酰胺和甲萘醌的RPMI-1640培养基中,分别于不同时间(0、2、4、6h)计数菌丝生成率,数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果 3种氧化剂对CAL菌丝形成均有抑制作用,H2O2、二酰胺和甲萘醌均呈剂量依赖性抑制菌丝生成,H2O2、二酰胺和甲萘醌浓度为30mmol/L时,CAL菌丝生成率开始下降,菌丝生成率分别为67.0%、58.0%、49.0%;在H2O2、二酰胺和甲萘醌处理2h时,CAL菌丝生成率开始下降,生成率分别为73.0%、59.0%、51.0%。结论 3种氧化剂呈浓度和时间依赖性抑制CAL菌丝形成,其中甲萘醌抑制CAL菌丝形成的作用最强,并且标准株菌丝生成率低于临床分离株。     

80株生殖道白念珠菌的药物敏感性研究

目的 为了解生殖道白念珠菌对五种抗真菌药物的敏感性及是否存在交叉耐药性，了解对抗真菌药物的耐药率，使临床医师能选择敏感的药物控制白念珠菌感染。方法 采用NCCLS M27-A推荐方法检测80株临床分离的生殖道白念珠菌对五种抗真菌药物的最低抑菌浓度(MIC80)。结果 80株临床分离生殖道白念珠菌对五种抗真菌药物的敏感率分别从41．3％至87．5％不等，而耐药率从0％至26．2％不等。且10株同时对氟康唑、咪康唑耐药，2株同时对氟康唑、酮康唑耐药，有1株同时对咪康唑、酮康唑耐药。结论 发现白念珠菌对两性霉素B最敏感，而对唑类药物耐药率较高，且唑类药物之间存在交叉耐药性。