维生素缺乏对水生实验动物——剑尾鱼的影响

本研究对剑尾鱼(Xiphophorus helleri)施行全生活周期饲喂缺少某类维生素(Vit)的人工配合饲料，结果表明：(1)VE、VA添加量不足对对生长不利；(2)各种Vit缺乏对卵巢、胚胎发育有不同程度的影响，其中VE不足的影响较为显著；(3)畸形在本试验条件下发生率较低，≤5%，但尚可看出多种Vit与畸形有一定的相关性，其中与缺乏VK、VD、VC的关系较为密切；(4)眼白内障发生率以未添加VB，VK的两组最高，分别为12．5%和11．3%；(5)VC摄取量不足的剑尾鱼，抗感染力犬幅度下降。     

利用微卫星多重PCR技术鉴定剑尾鱼RR-B系

目的建立多重PCR技术鉴定选育剑尾鱼RR-B系的方法。方法根据可明显鉴定剑尾鱼RR-B系的6对特异性微卫星引物Msa012、Msa014、Msa033、Msb025、Msd003、Msd051,采用不同的组合方式对RR-B系剑尾鱼和红眼红体的非选育剑尾鱼进行多重PCR扩增。结果引物组合1(Msa014、Msb025、Msd003)和组合2(Msa012、Msa033、Msd051)两个三重PCR反应体系能清楚的扩增各个微卫星座位,且各目的片段之间无干扰,易于识别,引物组合1的排除概率为99.98%,引物组合2的排除概率为99.96%,能准确鉴定剑尾鱼RR-B系。结论本检测方法具有较高的稳定性,可快速准确鉴定剑尾鱼RR-B系。     

中药指纹图谱的研究进展

目前 ,指纹图谱作为中药材单味药和复方全组成及其提取物的质量控制方法 ,已经成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段。现将中药指纹图谱的研究进展作简单介绍。1　中药指纹图谱的发展背景中药指纹图谱 (Fingerprinting)借用DNA指纹图谱发展而来 ,广义的中药指纹图谱包括中药材DNA指纹图谱和中药材化学 (成分 )指纹图谱 ,狭义的中药指纹图谱仅指后者 ,是表达中药代谢产物化学特征的指纹图 ,包括光谱、波谱和色谱指纹图。色谱指纹图谱发展最早 ,也是迄今为止最为重要的指纹图谱。按谢培山先生的定义[1 ] ,中药色谱指纹图谱是…     

同种不同产地牛蒡子DNA指纹图谱特征研究

目的 探讨同种不同产地牛蒡子DNA指纹图谱特征。方法 采用RAPD技术对全国四大商品区的中药牛蒡子生品和其中两个商品区的制品进行了DNA指纹图谱特征研究。结果 四大商品区的生品牛蒡子DNA指纹图谱一致,制品牛蒡子的DNA指纹图谱与生品的有较大差异。结论 DNA指纹图谱用于鉴定同种药材的生品结果可靠。     

RR-B系剑尾鱼LDH和GDH同工酶的分析

目的　分析RR B系剑尾鱼第 2 0代个体的LDH和GDH两种同工酶 ,检验其遗传均一性。方法　应用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳 ,分析剑尾鱼眼球、脑、肝脏、肌肉、心脏等部位的乳酸脱氢酶 (LDH)和葡萄糖脱氢酶(GDH) ,并以同工酶谱最具代表性的组织对不同个体的RR B系和非选育剑尾鱼进行分析和比较。结果　RR B系剑尾鱼不同个体的乳酸脱氢酶酶谱和葡萄糖脱氢酶酶谱是一致的 ,非选育剑尾鱼的乳酸脱氢酶酶谱和葡萄糖脱氢酶酶谱存在多态性。结论　RR B系剑尾鱼有较好的遗传均一性。     

光疗前后新生儿的DNA指纹分析

目的：了解光疗法对新生儿的ＤＮＡ是有损伤。方法；采用ＬＥ１１．８小卫星探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法检测接受光疗前后新生儿外周血为ＤＮＡ指纹谱带。结果；２２例接受光疗前后的新生儿ＤＮＡ指纹相比，均未见到任何谱带的改变。结论；光疗未引起新生儿的ＤＮＡ损伤，应用国产蓝光治疗器对高阻红素血症新生儿在４８ｈ内治疗是安全的。     

光疗前后新生儿的DNA指纹分析

目的：了解光疗对新生儿的ＤＮＡ是否有损伤。方法：采用ＬＥ１１．８小卫星探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法检测接受光疗前后新生儿外周血的ＤＮＡ指纹谱带。结果：２２例接受光疗前后的新生儿ＤＮＡ指纹相比，均未见到任何谱带的改变。结论：光疗未引起新生儿的ＤＮＡ损伤，应用国产蓝光治疗器对高胆红素血症新生儿在４８ｈ内治疗是安全的。     

剑尾鱼杂交种黑色素瘤的形成和病理观察

目的通过剑尾鱼属内鱼类的杂交,观察黑色素瘤在其杂交后代的形成情况。方法白体剑尾鱼(♀)与黑体剑尾鱼(♂)杂交,子一代(F1)和子二代(F2)分别自交,观察其后代外部特征变化和黑色素瘤形成的情况;对黑色素瘤进行组织病理观察。结果剑尾鱼杂交种的F2代开始出现性状分离,F3中有较高的黑色素瘤发生率,为20.5%。HE染色和Lillie黑色素染色证实增生组织为黑色素瘤。结论通过不同剑尾鱼的杂交和自交,后代有黑色素瘤形成,可望进行黑色素瘤模型的构建。     

多氯联苯对剑尾鱼超氧化物岐化酶活性的影响

目的　研究多氯联苯 (PCBs)暴露对剑尾鱼 (Xiphophorushelleri)超氧化物歧化酶 (SOD)活性的影响 ,探讨剑尾鱼器官组织内SOD活性变化作为环境风险评价 (ERA)的有效生物学标记的可行性。方法　测定了PCBs对剑尾鱼 30d的半致死浓度 (LC50 ) ;使用浸浴法以 0、2、5 0 μg L三个PCBs浓度为剑尾鱼染毒 ,定量测定了 72h内肝、鳃及卵巢组织中的SOD的活性变化。结果　PCBs对剑尾鱼的 30dLC50 为 1 0 5 80 μg L ;PCBs对剑尾鱼肝脏和卵巢的SOD活性有明显 (P <0 0 1 )的影响。在最初染毒的 1 2h内 ,SOD活性略有上升 ,但随暴露时间延长 ,浓度增加 ,肝和卵巢的SOD活性均呈下降趋势。此外 ,结果还显示肝组织的SOD活性较高于卵巢的SOD活性 ,表明不同器官组织的SOD活性对PCBs胁迫的敏感性存在一定的差异。实验中鳃组织SOD活性在PCBs暴露后其变化不明显 (P >0 0 5 )。结论　表明剑尾鱼肝细胞SOD活性可作为环境风险评价 (ERA)的有效生物学标记     

近交系剑尾鱼的STR遗传检测技术

目的 建立近交系实验用鱼DNA检测方法,用于遗传质量控制.方法 以RR-B、RW-H、BY-F三个近交系剑尾鱼的基因组DNA为主要研究对象,并以非选育剑尾鱼作对照,采用STR (short tandem repeat) 引物扩增方法检测不同品系在DNA上的异同.设计10对STR引物,优化PCR电泳条件,使用相同的实验条件进行重复,以得到可靠的扩增条带,筛选出特异性引物.结果 有4对引物可扩增出稳定条带,1对引物(AY204223)的PCR扩增条带在非选育群中表现多态性,在RR-B与BY-F系表型一致,与RW-H表型不同.这些STR位点能够区分剑尾鱼三个近交系品系.结论 STR检测技术可望用于近交系剑尾鱼的遗传质量监测.     

小小卫星DNA阳性克隆的鉴定及DNA指纹分析

提取四种近交系小鼠的肝脏ＤＮＡ，分别用ＨｉｎｆＩ和Ｈａｅ　Ⅲ酶切。用３３．１５和本课题组克隆的小鼠小卫星阳性克隆ＤＮＡ片断作探针，用［α－３２Ｐ］ｄＣＴＰ随机引物标记，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，获得了理想的小鼠ＤＮＡ指纹图谱。初步确定阳性克隆ＤＮＡ片断Ｖ２具有较好的多态性，可作为小鼠基因组小卫星探针，用于实验动物的遗传监测、基因连锁分析和小鼠遗传图谱的研究。     

中药材指纹体系

建立反映中药材整体信息的指纹体系是现阶段全面、有效控制中药材质量的手段。中药材指纹体系是采用化学指纹图谱和基因指纹图谱来分别表述、控制中药材的多元化学组份和源于生物体的特性，从有效成分和遗传物质两方面实现对中药材质量的控制。基因指纹图谱可从遗传物质上进一步佐证中药区别于化学药品的特性。基因指纹与化学指纹相结合，对于中药的品种鉴定、质量评价、药用优良品种的选育都具有重要的意义。实施中药材指纹体系，首先要建立药典品种的含多种检测方法的化学指纹和基因指纹图谱库，其次要建立指纹图谱的计算机模式识别系统。     

乳癖康胶囊指纹图谱实验条件探索

目的：探索乳癖康胶囊指纹图谱的实验条件。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18柱,（4.6 mm×250 mm,5μm）,对样品的提取溶剂、提取方法、检测波长、洗脱溶剂、洗脱方法进行了选择。结果：本试验采用80%甲醇为提取溶剂,超声60 min提取,选择280 nm作为检测波长,采用洗脱条件4,进行乳癖康胶囊HPLC指纹图谱研究较好。结论：实验证明,该文选定的色谱方法可操作性强,重现性好,可作为乳癖康胶囊指纹图谱研究的基础。     

在亚慢性毒性试验中应用红剑鱼、孔雀鱼和食蚊鱼的效果观察

目的探索红剑鱼、孔雀鱼和食蚊鱼作为实验动物用于七天亚慢性毒性试验材料的可行性。方法依据生长和现存量作为观察指标,测定了铬、锌、铜、镉对孔雀鱼和食蚊鱼的无可观察效应浓度(NOEC)和最低可观察效应浓度(LOEC)。结果铬、锌、铜、镉对红剑鱼的NOEC分别是2500,200,10,20ug/L,LOEC分别是5000,400,20,40ug/L。铬、锌、铜、镉对孔雀鱼的NOEC分别是2500,200,10,10ug/L,LOEC分别是5000,400,20,20ug/L。铬、锌、铜、镉对食蚊鱼的NOEC分别是2500,400,5,10ug/L,LOEC分别是5000,800,10,20ug/L。结论红剑鱼、孔雀鱼和食蚊鱼作为实验动物用于七天亚慢性毒性试验是可行的。     

克隆波尔山羊的微卫星DNA鉴定

目的 :利用微卫星DNA技术进行体细胞克隆后获得个体的鉴定。方法 :提取正常山羊、供核波尔山羊、本地受体山羊及克隆个体的基因组DNA ,通过设计微卫星DNA多态PCR引物扩增微卫星DNA序列并对之进行微卫星DNA鉴定。结论 :通过微卫星DNA序列的扩增 ,证明克隆个体为供核波尔山羊的克隆。     

地黄不同提取部位HPLC指纹图谱实验研究

目的：测试干地黄不同提取部位对大鼠尿样强，LC指纹图谱。方法：将3种地黄即水溶性部位、脂溶性部位、醇溶性部位的药材提取物，分别给3组SD大鼠灌胃，连续3d，取尿液，离心，浓缩，滤过，得A、B、C组尿液供试样品液，与空白对照组进行对照，分别测试HPLC指纹图谱。结果：水溶性大分子部位是干地黄的主要有效部位，有助于阐明该药的药理活性、作用机制。     

无特定病原体金定鸭微卫星DNA遗传多样性分析

目的 利用微卫星标记对无特定病原体金定鸭群进行遗传多样性分析。方法 采用微卫星标记,对SPF金定鸭种群中71个个体进行遗传多样性分析。结果SPF金定鸭种群中17个位点上共检测到119个等位基因,每个微卫星座位上等位基因数介于3～13;该SPF金定鸭群体中有13个位点（PIC > 0.5）呈现出高度多态,平均杂合度为0.5816 ± 0.0142,其它位点均呈现出中度多态。仅有5个位点处于Hardy-Weinberg平衡状态,其余12个位点显著偏离Hardy-Weinberg平衡,达到极显著水平（P<0.01）。结论 该SPF金定鸭群体内均存在丰富的遗传多样性,满足建立封闭群的遗传特征,可以利用该群体继续开展无特定病原体金定鸭封闭群的建立。     

微卫星DNA分析国内24个近交系小鼠遗传状况

目的利用微卫星位点对国内24种近交系小鼠进行遗传状况分析。方法用前期筛选的富含多态性和等位基因数多的30个小鼠微卫星位点,合成荧光标记引物,对近交系小鼠基因组DNA进行PCR的扩增,经STR扫描对各近交系小鼠品系进行基因分型。结果在24个近交系小鼠品系中,有16个品系在品系内在30个位点上均具有相同基因型。而在不同品系间同一位点具有多态性,可初步对不同品系进行鉴别区分。其余品系内个别动物存在多态性。结论所选位点可以参考用于近交系小鼠遗传质量检测分析,并进行初步品系检测鉴定。     

微卫星DNA多态性在十种近交系小鼠遗传监测中的应用研究

目的：研究微卫星DNA多态性在近交系小鼠遗传监测中的应用。方法：选取小鼠不同染色体上的16个微卫星位点，应用PCR技术对常用的10个近交系小鼠进行了微卫星DNA多态性分析。结果：14个微卫星DNA具有稳定扩增效果，在同一品系不同个体之间表现单态性；在不同品系之间表现多态性。结论：运用所筛选的14个位点进行微卫星多态性分析，能够快速、经济地对近交系小鼠进行遗传监测。