功能确定后的HRP细胞内注射标记的三叉神经中脑核神经元的电镜研究

在猫的Ｐｒｏｂｓｔ束纤维内记录并注射ＨＲＰ，确定出支配咬肌肌梭的三叉神经中脑核神经元，对其进行了连续切片电镜观察．发现约有１０个不明来源的终扣与被标记的中脑核神经元密切接触，其中４个与之形成明确的突触．突触有两种类型：对称性含混合透明小泡（圆形、椭圆形和扁平小泡）者和非对称性含圆形透明小泡者．另外后者也含有为数很少、散在分布的小圆形致密芯颗粒小泡．在其它与标记胞体密切接触的终扣内，也可见到不规则分布的致密芯颗粒小泡．本文对上述所见的可能的功能机制进行了讨论。     

大鼠脊髓小脑前束起始细胞——脊髓边缘细胞突触形态学的电镜研究

将辣根过氧化物酶注入大鼠小脑后,在脊髓L_1～L_3节段中的脊髓边缘细胞(SBC)得到逆行标记。对标记的SBC的突触联系进行电镜观察,并根据突触前区小泡形状及终扣形态,将这些终扣大致可分为6型,即S、F、Cf、T、G和P型。其中S和F型终扣根据其形态,各自又分为两个亚型,即细长型和圆型。S和F型分别含有球形及扁平型小泡;Cf型终扣含扁形小泡,突触前、后膜无明显特征,在突触后膜下有亚突触间隙;T型终扣含有清亮球形小泡,也可见大颗粒小泡,在突触后膜下可见致密体;G型终扣在突触前区内含有大颗粒小泡;P型是指附着在大S型终扣上的含有多样形小泡的终扣。S型、T型和G型突触后膜均比前膜明显增厚,呈不对称性。有关上述SBC突触终扣来源问题,还需进一步研究。     

大鼠红核脊髓束与脊髓小脑束起始细胞突触联系的电镜研究

采用神经元溃变和ＨＲＰ神经元逆行追踪结合的方法。电镜观察红核脊髓束终末与脊髓小脑束起始细胞的突触联系。结果表明红核脊髓束溃变终末与ＨＲＰ标记的脊髓小脑束起始神经元（脊髓边缘细胞和Ｃｌａｒｋｅ柱细胞）胞体及树突形成突触,但大部分溃变终扣则与非标记神经元构成突触。以轴－树触居多。溃变终扣主要呈电子致密型和清亮型两种。以致密型为主,内多含圆形小泡。实验提示红核脊髓束与脊髓小脑束起始细胞存在直接或间接的突     

家兔皮质脊髓束向脊髓长下行固有束神经元的投射──HRP逆行追踪结合顺行溃变技术的光镜和电镜研究

用成年家兔１１只，在脊髓腰膨大部注射ＨＲＰ或麦芽凝集素结合的辣根过氧化物酶（ＷＧＡ－ＨＲＰ），逆行追踪长下行脊髓固有束神经元在颈髓和部分胸髓的分布。其中５例动物在腰膨大注射ＨＲＰ的同时进行大脑皮质脊髓束起始区的损毁，电镜观察皮质脊髓束在颈髓的溃变末梢与ＨＲＰ逆行标记神经元的关系。结果表明，长下行脊髓固有束神经元在脊髓灰质内可分为背腹两群，背侧群主要集中在Ｖ层，细胞较少；腹侧群位于ＶＩＩ、ＶＩＩＩ层，细胞数较多。电镜下可观察到与标记神经元相突触的终扣多为圆形含圆形和混合型小泡。演变末梢有些与标记神经元的胞体或树突形成突触，也有些通过未标记的终扣间接与标记神经元相联系。本研究表明，家兔皮质脊髓束可能通过多种下行通路控制腰部运动，其中，胞体位于颈髓的长下行脊髓固有束神经元肯定与这一下行运动控制机制有关。     

大鼠延髓孤束核吻侧段内脑啡肽阳性终末与γ-氨基丁酸阳性神经元联系的形态学研究

目的 观察大鼠孤束核吻侧段(rNTS)内脑啡肽阳性(ENK-ir)终末与γ-氨基丁酸(GABA-ir)阳性神经元之间的联系.方法 免疫荧光双重标记技术,包埋前免疫组织化学方法染色结合免疫金颗粒标记的电镜双标技术.结果 激光扫描共焦显微镜下可见rNTS内有大量的ENK-ir纤维和终末及散在的GABA-ir神经元.ENK-ir终末与GABA-ir神经元之间形成密切接触.在电镜下可见ENK-ir阳性产物主要定位于圆形清亮突触小泡及大颗粒囊泡表面.ENK-ir轴突终末与GABA-ir及阴性神经元胞体及树突之间形成对称性和非对称性的突触联系,以对称性突触为主.结论 rNTS内的ENK-ir终末可能通过抑制或增强GABA能神经元活性,或直接抑制味觉感受神经元活性的方式,参与NTS内味觉信息的感受和调节.     

大鼠中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核通路的电镜研究

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴树突触。另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内其它神经元之间形成多种突触联系。本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行投射的终末与中缝大核内的神经元成分之间还形成比较复杂的突触联系，并对之进行了讨论。     

皮质—网状—脊髓通路——HRP法结合溃变电镜法研究

用ＨＲＰ逆行标记法结合溃变电镜技术，观察了１２只大鼠的蓝斑，外侧网状核，中缝大核，巨细胞网状核在旁正中网状核中皮质纤维终末的超微结构及其与网状脊髓神经元的突触联系。损伤皮质感觉运动区的各例动物，均出现两种溃变型，电子致密型和微丝增生型。前者为皮质的主要溃变型，分布于各核；后者出现很少，只见于外侧网状核。电子致密型终扣有大小两种，大终扣少，有含圆形清亮型小泡，多形清亮型小泡，清亮型和颗粒型小泡并存的     

家兔脊髓长下行固有束与坐骨神经运动神经元之间的突触联系

本实验采用成年家兔１２只，在上颈髓单侧注入海人酸后，将ＨＲＰ注放同侧的坐骨神经内，应用ＨＲＰ逆行追踪结合顺行溃变镜方法，首次在电镜水平对脊髓长下行固有束终末与坐骨运动神经元之间的突触联系进行了研究，结果表明，在坐骨神经运动神经元的胞体及近侧树突表面发现有少量的溃变终扣。根据溃变终扣的外形可分圆形和长形，根据溃变终扣内突小泡的形态发为圆形和椭圆形，突触联系包括：（１）溃变终扣与标记胞体及树突形成轴     

大鼠丘脑前核内海马下托复合体谷氨酸能传入终末与皮质投射神经元的突触联系

目的 探讨大鼠丘脑前核-海马下托复合体神经元环路的突触结构及谷氨酸分布特征.方法 应用HRP束路追踪结合包埋后胶体金免疫电镜技术.结果 在丘脑前核内,可见HRP顺行标记的海马下托复合体传入轴突终末,终末多为卵圆形,内含圆形透亮突触小泡和数个线粒体.其做为突触前成分与HRP标记的树突或非HRP标记的树突形成非对称性突触.在谷氨酸胶体金免疫反应切片上,胶体金颗粒标记胞体、树突、轴突终末等.HRP标记的轴突终末和一些非HRP标记的与突触后成分形成非对称性突触的轴突终末(Gray Ⅰ型)内,胶体金颗粒密度明显大于背景(胞体、树突、Gray Ⅱ型轴突终末等)的胶体金颗粒密度.其平均胶体金颗粒密度为突触后树突的3倍多,为对称性轴突终末(Gray Ⅱ型)的6倍多.在两张邻近的连续切片,γ-氨基丁酸(GABA)胶体金免疫反应切片上,GABA胶体金颗粒浓重标记Gray Ⅱ型轴突终末,背景标记极少;而非对称性轴突终末(Gray Ⅰ型)胶体金颗粒标记极弱.谷氨酸胶体金免疫反应切片上,Gray Ⅱ型轴突终末胶体金颗粒标记极弱.GABA阳性轴突终末与HRP标记的树突形成对称性突触,在同一树突上可见GABA能轴突终末形成的对称性突触和其他轴突终末形成的非对称性突触.结论 丘脑前核内来自海马下托复合体投射神经元的轴突终末是谷氨酸能的;来自海马下托复合体皮质投射神经元轴突终末,在丘脑前核与投射至海马下托皮质的神经元树突形成非对称性轴-树突触.     

皮质—脑桥核—小脑通路的HRP结合溃变电镜法研究

目的：观察大鼠脑桥核内皮质纤维终末的溃疡变型及其与脑桥核小脑投射神经元的突触联系方式,方法：采用HRP逆行标记结合溃变电镜技术。结果：（1）皮质纤维终末出现电子致密和微丝增生两种溃变类型。以电子致密型为主。后者终末又有两种不同形态,即含圆形清亮型小泡和多形清亮型小泡者,以圆形清亮型小泡终末占优势。（2）皮质纤维终末与脑桥核小脑投射神经元形成轴－树和少量轴－体突触,部分溃变终末与HRP标记的投射神经元形成单突触联系,结论：皮质纤维与脑桥核小脑投射神经元间存在的单突触联系构成了皮持－脑桥核－小脑通路。     

大鼠延髓孤束核吻侧段内脑啡肽免疫阳性轴突末梢与含阿片μ受体的γ-氨基丁酸能神经元之间的突触联系

目的:观察大鼠孤束核吻侧段(rNTS)内脑啡肽免疫反应阳性(ENK-ir)终末、γ-氨基丁酸免疫反应阳性(GA-BA-ir)神经元及阿片μ受体免疫反应阳性(MOR-ir)神经元三者之间的联系。方法:包埋前免疫组织化学方法显色结合免疫金颗粒双重标记后,电镜观察。结果:在电镜下可见ENK-ir产物主要定位于圆形清亮突触小泡及大颗粒囊泡表面,GABA-ir产物主要分布于胞体及树突内部,多见于粗面内质网及核糖体等结构,MOR-ir产物主要位于树突膜、线粒体膜、内质网膜等结构表面;ENK-ir轴突终末与GABA-ir神经元胞体及树突之间形成对称性和非对称性的突触联系,以对称性突触为主;ENK-ir轴突终末与MOR-ir神经元的胞体及树突形成以对称性突触为主的突触联系;GA-BA-ir与MOR-ir产物共存于神经元内,GABA/MOR-ir神经元与免疫反应阴性的终末形成对称性和非对称性突触,以对称性突触为主。结论:rNTS内的ENK-ir终末可能通过与MOR结合,调节GABA能神经元的活性,从而参与味觉信息的感受和调节。     

大鼠延髓后角神经降压肽(NT)的亚细胞定位和胞吐释放

神经降压肽(NT)广泛分布于哺乳动物的中枢神经系统,具有明显的镇痛作用,为了探索其镇痛机理的形态学基础,本文应用电镜免疫组化技术,对大鼠延髓后角NT的超微结构和胞吐释放进行了研究。超微结构显示延髓后角浅层NT轴突终末形态多样,大小不一,含有圆形或多形性清亮小泡及数量不等的大颗粒小泡,它们主要与未标记的树突形成轴-树突触,其突触后成分有的还含有少量清亮小泡。NT免疫反应阳性树突可分为两类:一类主要含微管;另一类主要含大颗粒小泡,有的尚可见少量清亮小泡。这两类NT树突可成为未标记的含圆形小泡终末、多形性小泡终末以及突触小球中央轴突终末的突触后成分,提示后角浅层NT神经元可接受不同种类轴突终末(包括一级伤害性传入纤维)的传入(?)动,然后可能再通过一个抑制性中间神经元,抑制痛觉的传递。本文还观察到有少量NT终末内的大颗粒小泡靠近突触活性区处,而更多见它们沿非突触部位轴膜分布,并与其融合,形成胞吐。本文认为NT既可在突触活性区处又可能在非突触部位释放。     

大鼠中脑导水管周围灰质—中缝大核—三叉神经脊束核尾侧亚核通…

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴－树突触，另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内它神经元之间形成多种触联系，本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行     

猫丘脑中央外侧核内丘脑皮质投射神经元的超微结构及其突触联系

应用ＨＲＰ逆行追踪法在电镜水平上对猫丘脑中央外侧核内皮质投射神经元的超微结构及其突触联系首次进行了研究。该核内皮质投射神经元以中型多见，胞核较大，核仁清晰，偏位，核膜有凹陷，常染色质较多，胞质内含丰富的线粒体，游离核糖体和粗面内质网。标记树突直径变化较大，从０．６８μｍ到４．４μｍ，含较多的线粒体、微管及滑面内质网，凶突触小泡。标记的皮质投射神经元胞体和树突做为突触后成分，与非标记的突触前成分形成     

猫后索核内后根初级传入终末与丘脑投射神经元之间的突触联系

用ＨＲＰ逆行追踪与顺行溃变相结合的方法，研究了猫后索核内初级传入终末与丘脑投射神经元之间的突触联系形式。在电镜下可见后索核内有５种突触联系式：１．溃变轴突终末与ＨＲＰ标记树突形成的轴－树突触；２．溃变轴突终末与ＨＲＰ标记胞体形成的轴－体突触；３．溃变轴突终末与非标记树突形成的轴－树突触；４．轴－轴－树连续性突触；５．非溃变的含扁平小泡或多形小泡轴突终末与ＨＲＰ标记的神经元胞体形成的轴－体突触。本文     

家兔脊髓长下行固有束与坐骨神经运动神经元之间的突触联系

本实验采用成年家兔12只,在上颈髓单侧往入海人酸后,将HRP注入同侧的坐骨神经内,应用HRP逆行追踪结合顺行溃变技术的电镜方法,首次在电镜水平对脊髓长下行固有束终末与坐骨神经运动神经元之间的突触联系进行了研究,结果表明,在坐骨神经运动神经元的胞体及近侧树突表面发现有少量的溃变终扣.根据溃变终扣的外形可分为圆形和长形,根据溃变终扣内突触小泡的形状可分为圆形和椭圆形.突触联系包括:(1)溃变终扣与标记胞体及树突形成轴一体、轴一树突触;(2)溃变终扣与非标记胞体及树突形成轴一体、轴一树突触;(3)正常轴突终末与标记胞体及树突形成轴一体、轴一树突触.本文首次报道,起源于上颈髓的脊髓长下行固有束终末与坐骨神经运动神经元之间存在着直接的突触关系.     

猫丘脑中央外侧核内脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间的突触联系

本实验应用顺行溃变和HRP逆行追踪相结合的方法，首次在电镜水平对猫丘脑中央外侧核内脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间的突触联系进行了研究．在脊髓第4颈段刀切损毁一侧侧索和前索后，将HRP注射于同侧大脑前上薛氏回和中上薛氏回前端。在电镜下于损毁同侧中央外侧核内可见下列突触连结：（1）溃变的脊丘系轴突终末与标记树突形成的轴-树突触；（2）溃变的脊丘系轴突终末与非标记树突形成的轴-树突触，个别非标记树突含有突触小泡；（3）正常的轴突终末与HRP标记树突和胞体形成的轴-树突触和轮一体突触；（4）正常的两个轴突终末与HRP标记树突形成的轴-轴-树连续性突触；（5）非标记的含突触小泡的突触前树突与HRP标记树突形成的树-树突触。同时可见大量汇聚型突触复合体。本文首次报道在丘脑中央外侧核内，脊丘系终末与丘脑-皮质投射神经元之间存在着直接的突触联系。     

下丘脑弓状核内GABA神经元与P物质神经元相互关系的免疫电镜双标研究

为了探讨下丘脑神经内分泌功能的突触调控机制和Ｐ物质（ＳＰ）神经元与γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）神经元之间的相互关系，我们用包埋前免疫电镜ＰＡＰ双标技术，研究了大鼠弓状核内ＳＰ和ＧＡＢＡ神经元的超微结构分布。先以ＤＡＢ为呈色剂显示ＳＰ的免疫反应，然后用钢酸铵－ＴＭＢ法显示ＧＡＢＡ免疫反应，再经ＤＡＢ－氧化钴稳定后作免疫电镜研究。结果观察到，在弓状核内有大量含ＤＡＢ和ＴＭＢ免疫反应产物的神经元结构，ＤＡＢ反应产物为颗粒状或絮状沉淀，电子密度高，弥漫分布；ＴＭＢ反应产物呈针状或块状，散在分布。含ＤＡＢ免疫反应的结构有ＳＰ神经元的胞体、树突和轴突。含ＴＭＢ免疫反应的结构有ＧＡＢＡ神经元的胞体、树突和轴突。两种神经元均为中、小型细胞，在弓状核内混杂分布。含ＳＰ的轴突接受免疫反应阴性轴突的非对称性突触连接；含ＳＰ的树突与含ＧＡＢＡ的轴突形成对称性的轴一树突触。含ＧＡＢＡ的树突接受免疫反应用性轴突的非对称性突触连接，也接受含ＳＰ轴突的非对称性突触连接。本研究不仅在超微水平进一步证实了大鼠弓状核内存在着ＳＰ和ＧＡＢＡ神经元及其末梢，而且首次在形态学上为下丘脑氨基酸能神经元与肽能神经元之间的相互调控提供了超微结构依据。     

大鼠中脑导水管周围灰质向下丘脑orexin神经元的纤维投射

目的:明确中脑导水管周围灰质(PAG)神经元调节下丘脑orexin神经元的解剖学基础。方法:首先采用逆行示踪技术,将霍乱毒素B亚单位(CTb)作为逆行示踪剂注射到下丘脑orexin神经元胞体分布的区域,免疫组织化学方法染色观察PAG内CTb逆行标记细胞的分布特点;接着采用顺行示踪技术和免疫组化相结合的方法,将生物素化葡聚糖胺(BDA)作为顺行示踪剂注射到PAG,观察下丘脑内BDA标记的神经纤维与orexin神经元的重叠分布特点;最后运用免疫电镜技术观察BDA标记轴突终末与orexin神经元之间的突触联系。结果:CTb注射到单侧下丘脑orexin神经元区域后,在PAG观察到大量CTb标记神经元,注射点同侧标记细胞数明显占优,其中PAG外侧区(lPAG)和腹外侧区(vlPAG)可见大量CTb逆标神经元,背外侧区(dlPAG)和背内侧区(dm PAG)可见少量标记神经元;注射点对侧lPAG及vlPAG区域也观察到少量CTb标记神经元。BDA注射到单侧lPAG后,下丘脑内双侧均可观察到BDA标记的神经纤维,但注射点同侧标记神经纤维数量明显占优。BDA标记纤维与orexin神经元胞体在穹窿背侧接近不定带(ZI)的区域(本文中将此区域称作"穹窿上区")形成显著的重叠分布。透射电镜下观察到BDA标记的轴突终末与orexin神经元之间形成突触联系,且多为非对称性类型。结论:lPAG投射到下丘脑的神经纤维在穹窿上区与orexin神经元形成优势重叠分布、并与orexin神经元的胞体或树突形成以非对称性为主的突触联系,提示orexin神经元可能在lPAG的直接支配下发挥其调节觉醒状态、摄食行为等功能。     

迷走神经背核尾侧内神经降压肽样免疫反应终末联系的电镜研究

用辣根过氧化物酶逆行标记法结合免疫细胞化学法（ＰＡＰ）法对大鼠迷走神经背核尾侧部内神经降压肽样免疫反应终末的核内联系进行了电镜下的研究。发现少量神经降压肽样免疫反应轴突终末与ＨＲＰ逆行标记的副交感节前神经元的树突构成非对称性突触；大多数神经降压肽样免疫反应轴突终末与末标记中间神经元的胞体和树突构成对称性或非对称性突触，以轴－树突触为主；未标记的轴突终末也可同ＨＲＰ逆行标记的副交感节前神经元的胞体和