急性髓细胞白血病的表观遗传学异常改变及其靶向治疗的研究进展

目前,由于传统化疗的局限性,急性髓细胞白血病(AML)的治疗一直未能取得突破性的进展,特别是如何提高复发/难治性患者的疗效已成为AML临床治疗中一个亟待解决的难题.近年来,随着对AML分子生物学研究的不断深入,一些具有预后意义的分子遗传学改变有望作为AML危险度分层的指标以及治疗靶点,而引起学术界的广泛关注.有关AML分子靶向药物治疗的研究层出不穷,其中针对AML表观遗传学异常改变的治疗研究已经取得了较大的进展.表观遗传学改变与基因突变有重要的区别,即表观遗传学改变是可逆的,通过使用针对相应的表观遗传学异常改变的药物可使沉默的抑癌基因重新表达.目前,应用于AML临床治疗的针对表观遗传学异常改变的药物主要包括DNA去甲基化药物与组蛋白去乙酰化酶抑制剂,以及二者的联合应用.针对AML表观遗传学异常改变的治疗方案有望成为中、高危AML患者,尤其是不能耐受化疗的老年患者的治疗选择之一.笔者拟就AML的表观遗传学改变,以及其靶向治疗的研究进展进行综述.     

急性粒-单核及单核细胞白血病研究进展

急性粒-单核细胞白血病(AMMoL)和急性单核细胞白血病(AMoL)分属于FAB分类的M4和M5亚型,它们无论在临床表现、细胞形态还是细胞遗传学方面都存在很多相似之处,传统的治疗方案相同.但即使是同一亚型病人对相同治疗方案的反应也存在很大差异,促使研究者寻找更为精确的诊断、预后标准.不断积累的现代细胞遗传学和分子遗传学知识使得对AML的认识深入到基因水平.染色体畸变、融合基因、基因异常表达、单核苷酸多态性、启动子甲基化、组蛋白乙酰化等分子事件在AML病例中频频出现,提示AML的本质是涉及造血干/祖细胞增殖、分化、凋亡的基因失活或功能改变.运用分子生物学技术已经发现不少与AML治疗、预后相关的靶点基因.从分子遗传学水平重新细分AML亚型并依据不同的发病机制对症下药是未来AML治疗学的发展趋势.     

急性髓系白血病细胞遗传学、分子遗传学预后分层及治疗

急性髓系白血病(AML)是一组在细胞遗传学和分子遗传学方面具有高度异质性的血液系统恶性肿瘤.细胞遗传学和分子遗传学改变对AML的预后有重要意义,可以指导AML进行预后分层,再根据分层情况制定不同的治疗方案.本文就细胞遗传学和分子遗传学与AML分层治疗之间的联系进行综述.     

细胞遗传学正常的急性髓系白血病分子生物学预后因素研究进展

急性髓性白血病（AML）是一组高度异质性疾病,随着细胞遗传学研究的进展,人们发现AML伴有重现性染色体结构的变异不仅是特定AML亚型的诊断标志,也是判断疾病缓解、复发危险以及总生存率的重要预后因素。然而,应用现有的染色体分析技术,目前仍然有大约40％-49％的成人AML患者和25％的儿童AML患者中在显微镜下未能被观察到有染色体核型异常。这些所谓的细胞遗传学正常的AML（cytogenetically normal acute myeloid leukemia,CN—AML）患者通常被划分在中等预后组。但临床研究发现,这些CN—AML患者临床结局并非一致,其原因是CN—AML患者存在不同的基因变异。这些分子生物学水平的变异不仅可为CN—AML的进一步分类提供依据,而且还与这部分患者的预后存在密切关系,同时也为研究分子靶向治疗提供了潜在的靶位。本文就国外在该领域的研究进展作一综述,讨论的问题包括有：提示预后不良的基因变异;Baalc基因和ETS相关基因的过度表达;Wilms肿瘤基因变异;提示预后良好的基因变异,其中又包括核仁磷酸蛋白基因变异和混合系列白血病基因部分串联重复;最后讨论的问题是CCAAT／增强子结合蛋白α基因突变。     

急性髓系白血病靶向治疗的研究进展

虽然传统化疗治疗急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)取得一定的疗效,但在提高初治完全缓解率和克服缓解后复发方面仍存在局限性。随着研究的深入发现AML在发生、发展的过程中存在包括细胞表面分子异常表达、基因突变和基因异常甲基化等多种细胞分子遗传学及表观遗传学方面的异常。针对上述异常改变的靶向药物的出现,改善了AML患者的预后,为AML治疗提供了新的途径。目前研究较多的分子靶向药物包括CD33单克隆抗体、酪氨酸激酶受体抑制剂、甲基化转移酶抑制剂等。本文就AML治疗中分子靶向治疗问题的进展做一综述。     

急性髓细胞白血病预后相关分子遗传学研究的最新进展

新一代高通量基因组学技术在急性髓细胞白血病(acute myelocytic leukemia,AML)的应用,为AML分子遗传学的研究提供了崭新的平台。随着AML相关突变和异常表达基因的发现,我们对AML的异质性和预后分级有了新的认识,也必将为AML分子靶向治疗和个体化治疗提供强有力依据。     

AML1-ETO融合蛋白的研究进展

急性髓系白血病中AML1-ETO融合蛋白被认为是一种预后良好的细胞和分子遗传学异常,但若伴有其他分子学异常,如KIT、FLT3、AML1-ETO9a剪接变体等更易致白血病生成,且影响预后.AML1-ETO能抑制GATA-1乙酰化,从而抑制红系分化、AML1-ETO对其靶基因的影响以及冬凌草、格列卫靶向治疗已成为目前研究的热点.     

MRI特征在预测髓母细胞瘤分子亚型的应用价值

髓母细胞瘤(Medulloblastoma,MB)常分为4种分子亚型,各亚型不仅具有独特的人口遗传学和临床表现,而且患者预后存在明显的差别。MRI对髓母细胞瘤的诊断、手术指导、随访、鉴别分子亚型具有重要作用,早期正确识别MB的分子亚型有助于手术切除计划、放疗和化疗等靶向治疗。本文MRI特征在预测MB分子亚型的临床应用及研究进展进行综述。     

2014年急性髓系白血病治疗进展

随着分子检测技术的广泛应用,急性髓系白血病(AML)中许多有独立预后意义的分子标志被检测出来,基于分子标志的新亚型如核心结合因子相关的 AML(CBF-AML)、FMS 样的酪氨酸激酶3相关的 AML(FLT3-AML)被确立。AML 中许多与表观遗传学异常相关的重现性基因突变也得以发现。这些发现有助于深入研究 AML发病机制并提供新的治疗靶点。本文除介绍2014年 NCCN 的 AML 和急性早幼粒细胞白血病治疗指南外,也分别介绍 CBF-AML、FLT3-AML 以及针对 AML 中表观遗传学异常的治疗进展。     

与急性髓系白血病预后相关的基因过表达

细胞遗传学分析为急性髓系白血病(acute myeloid leukemia.AML)提供了进行靶向治疗的遗传学标志,同时也提供了不同AML亚型的预后信息.而近来发现的与预后相关的各种基因过表达使得对不同预后的AML的分析进入分子水平.本文就与AML预后相关的基因过表达做一综述.1脑膜瘤-1(meningioma-1,MN1)基因MN1基因最初是在具:(4;22)脑膜瘤患者中被发现的.它被认为是22号染色体脑膜瘤抑癌基因的候选基因.它所编码的蛋白为转录辅激活因子,在脊柱动物中高度保守,且同其他已知蛋白无同源性.在AML中,MN1表达常出现在平衡易位:(12;22)(p13;q12)中.这种易位编码了融合蛋白MN1-TEL.     

急性髓系白血病初诊患者β-连环蛋白和周期蛋白D1mRNA的表达及其意义

本研究旨在检测急性髓系白血病（AML）患者β-连环蛋白（beta—catenin）及周期蛋白D1（cyclinD1）mRNA的表达变化,分析其相关性,为探讨Wnt／β联蛋白（Wnt／beta—catenin）通路在AML发病机制中的作用提供理论依据。采用实时荧光定量RT—PCR的方法检测beta—catenin及cyclin D1 mRNA的相对表达水平,分析两者在AML不同亚型及良性血液病患者中的表达变化及相关性。结果表明,AML骨髓单个核细胞（BMMNC）中beta-cateninmRNA的表达水平明显高于良性血液病患者（P〈0．05）,但在AML各亚型之间其表达量无统计学差异（P〉0．05,在AML中存在cyclinD1 mRNA的过度表达,其表达水平明显高于良性血液病组（P〈0．05）,在各亚型间其表达量无统计学差异（P〉0．05）。Beta-catenin与cyclinD1的表达水平在AML-M1、M2、M4中存在显著正相关性（r值分别为0．822,0．627,0．712,P值分别为0．001,0．020,0．002）。结论：在AML患者中存在beta—catenin及cyclin D1的过度表达,且在部分亚型中存在显著相关性;Wnt／beta-catenin通路在AML中被异常激活,很可能是通过该通路下游靶基因cyclinD1的激活,参与白血病细胞的周期紊乱和异常增殖的调节。     

Gemtuzumab ozogamicin in non-acute promyelocytic acute myeloid leukemia

INTRODUCTION: Gemtuzumab ozogamicin (GO) has been used in relapsed, refractory and newly diagnosed acute myeloid leukemia (AML) as a single agent and in combination with intensive chemotherapy. Results of recent Phase III trials have led to its withdrawal in the USA although a beneficial effect of GO in genetically defined AML subgroups was evident. AREAS COVERED: This review examines the use of GO as a single agent or in combination with intensive chemotherapy in non-acute promyelocytic AML. The literature search was based on publications on GO indexed in the PubMed electronic database and selected meeting abstracts. GO has shown moderate activity as a single agent but promising activity in combination with intensive chemotherapy in refractory or relapsed AML. Relapsed AML defined molecularly by mutant nucleophosmin-1 without concurrent fms-related tyrosine kinase 3 (FLT3) internal tandem duplication seems to benefit most from GO. In newly diagnosed AML two up-front randomized Phase III trials evaluating GO in induction therapy failed to demonstrate an improvement in response and survival. Again, genetically defined subgroups may benefit. EXPERT OPINION: Future challenges of personalized therapy in AML will be to integrate the signals from current subgroup analyses underlining the role of GO in genetically defined AML entities.     

CD47在急性髓细胞白血病干细胞中表达的临床意义

目的 探讨CD47在急性髓细胞白血病干细胞（AML-LSC）中表达的临床意义.方法 搜集2009年8月至2011年7月就诊于三家不同医院的初诊AML患者共96例,将患者按AML不同亚型归类.采用流式细胞仪检测其骨髓LSC中CD47的表达,观察CD47在AML各亚型患者LSC上的表达差异,并分析CD47表达阳性对AML患者疗效及预后的影响.结果 CD47高表达的AML患者高白细胞者更多,常规治疗后完全缓解率低,白血病复发率高（P均＜0.05）.CD47在AML各亚型患者LSC上的表达差异不明显（P均＞0.05）. 结论 CD47在AML-LSC上表达或可作为判断AML疗效和预后的指标之一.     

Gemtuzumab ozogamicin in non-acute promyelocytic acute myeloid leukemia

Introduction: Gemtuzumab ozogamicin (GO) has been used in relapsed, refractory and newly diagnosed acute myeloid leukemia (AML) as a single agent and in combination with intensive chemotherapy. Results of recent Phase III trials have led to its withdrawal in the USA although a beneficial effect of GO in genetically defined AML subgroups was evident.

Areas covered: This review examines the use of GO as a single agent or in combination with intensive chemotherapy in non-acute promyelocytic AML. The literature search was based on publications on GO indexed in the PubMed electronic database and selected meeting abstracts. GO has shown moderate activity as a single agent but promising activity in combination with intensive chemotherapy in refractory or relapsed AML. Relapsed AML defined molecularly by mutant nucleophosmin-1 without concurrent fms-related tyrosine kinase 3 (FLT3) internal tandem duplication seems to benefit most from GO. In newly diagnosed AML two up-front randomized Phase III trials evaluating GO in induction therapy failed to demonstrate an improvement in response and survival. Again, genetically defined subgroups may benefit.

Expert opinion: Future challenges of personalized therapy in AML will be to integrate the signals from current subgroup analyses underlining the role of GO in genetically defined AML entities.     

急性髓系白血病NPM1基因突变检测的临床意义

目的 探讨初诊急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者NPM1基因突变发生率及其与染色体核型和FAB亚型之间的关系,并分析NPM1基因的突变类型.方法 选取2004至2010年中日友好医院血液科99例初诊AML患者.采集患者骨髓标本,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增基因组DNA,并采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)和毛细管电泳两种方法对AML患者NPM1基因突变进行检测.应用G显带方法对其中72例初诊AML患者进行细胞遗传学分析,同时对10例NPM1突变阳性患者进行直接测序分析.NPM1插入突变在各亚型患者中发生率的比较采用x2检验.变性PAGE和毛细管电泳两种方法检测NPM1基因突变发生率的比较采用McNemar检验.结果 毛细管电泳法与变性PAGE法检测AML患者NPM1基因插入突变发生率分别为15％ (15/99)和11％ (11/99),差异无统计学意义(x2 =2.25,P＞0.05).NPM1插入突变在各亚型患者中发生率分别为:急性粒细胞白血病部分分化型(M2)(27％,8/30)、急性单核细胞白血病(M5)(32％,6/19)、红白血病(M6)(13％,1/8),差异无统计学意义(x2=1.06,P＞0.05),其余亚型未检测到NPM1插入突变.49例AML异常核型患者的NPM1插入突变发生率为4％ (2/49),23例正常核型患者的NPM1插入突变发生率为26％ (6/23),差异有统计学意义(x2=5.61,P＜0.05).10例NPM1基因插入突变均为A型突变(c.860_863 dupTCTG).突变导致NPM蛋白羧基末端读码框移,末尾7个氨基酸WQWRKSL被11个氨基酸CLAVEEVSLRK所代替.2例患者检测到内含子缺失突变,分别为IVS10-18_-15delCTTT和IVS10-17-15delTTT.结论 NPM1插入突变为AML患者常见基因改变,正常核型患者插入突变发生率高于异常核型患者.在NPM1基因内含子区发现2例缺失突变.     

HSC commitment–associated epigenetic signature is prognostic in acute myeloid leukemia

Acute myeloid leukemia (AML) is characterized by disruption of HSC and progenitor cell differentiation. Frequently, AML is associated with mutations in genes encoding epigenetic modifiers. We hypothesized that analysis of alterations in DNA methylation patterns during healthy HSC commitment and differentiation would yield epigenetic signatures that could be used to identify stage-specific prognostic subgroups of AML. We performed a nano HpaII-tiny-fragment-enrichment-by-ligation-mediated-PCR (nanoHELP) assay to compare genome-wide cytosine methylation profiles between highly purified human long-term HSC, short-term HSC, common myeloid progenitors, and megakaryocyte-erythrocyte progenitors. We observed that the most striking epigenetic changes occurred during the commitment of short-term HSC to common myeloid progenitors and these alterations were predominantly characterized by loss of methylation. We developed a metric of the HSC commitment–associated methylation pattern that proved to be highly prognostic of overall survival in 3 independent large AML patient cohorts, regardless of patient treatment and epigenetic mutations. Application of the epigenetic signature metric for AML prognosis was superior to evaluation of commitment-based gene expression signatures. Together, our data define a stem cell commitment–associated methylome that is independently prognostic of poorer overall survival in AML.     

获得性再生障碍性贫血恶性克隆性演变的长期随访研究

目的 观察获得性再生障碍性贫血(AA)治疗后演变为骨髓增生异常综合征(MDS)和(或)急性髓系白血病(AML)的发生率并分析其危险因素.方法 长期随访1991至2009年收治的1003例从患者,观察疾病演变,并分析其进展为MDS/AML的可能危险因素,包括患者性别、年龄、病因、治疗前后染色体核型变迁、疾病严重程度、治疗方案及治疗反应等.结果 1003例患者中位随访时间为62(2～423)个月,其5年总生存率为(78.0±1.0)%,共计27例转化为MDS/AML[非重型AA(NSAA)11例,重型AA(SAA)6例,超重型AA(VSAA)10例].Kaplan-Meier估计法分析1003例AA患者10年MDS/AML转化率为(4.5 ±1.0)%,VSAA组10年MDS/AML转化率[(12.8±3.5)%]显著高于NSAA组[(4.1±1.9)%,P＜0.01]和SAA组[(3.5±1.4)%,P＜0.01],而后二组间差异无统计学意义(P=0.616).单因素及多因素分析均显示患者年龄＞40岁[RR=3.527(95%CI:1.598～7.784),P＜0.01]、VSAA[RR=5.122(95%CI:2.214～11.853),P＜0.01]、发病前射线、毒物、化学制剂等接触史[RR=3.401(95%CI:1.535～7.534),P＜0.01]及重组人粒细胞集落刺激因子(rhuGCSF)疗程大于300 d[RR=10.782(95%CI:4.600～25.269),P＜0.01]为AA转化为MDS/AML的危险因素.结论 长期随访对于评估AA患者治疗后进展为MDS/AML至关重要,随访期间应制定规范监测策略,及时发现转化的MDS/AML并尽早采取相应措施阻断其进展.

Abstract：

Objective To assess the incidence and risk factors for evolution of acquired aplastic anemia (AA) into myelodysplastic syndrome/acute myeloid leukemia (MDS/AML).Method A total of 1003 AA patients hospitalized in our institute hospital between January 1991 and December 2009 enrolled into this study.The incidence and risk factors for AA developing MDS/AML by the Kaplan-Meier method and Cox proportional hazards models, respectively.Results The median follow-up was 62(2 -423) months and the projected 5-year survival rate was (78.0 ± 1.0) %.Twenty-seven patients evolved to MDS/AML, of whom 11,6 and 10 were from NSAA, SAA and VSAA subgroups, respectively.The estimated cumulative incidence of MDS/AML transformation for these 1003 patients after diagnosis was (4.5 ± 1.0)% at 10 year.The incidence of MDS/AML transformation in VSAA subgroup[(12.8 ±3.5)%]was significantly higher than in NSAA subgroup[(4.1 ±1.9)%](P＜0.001) and SAA subgroup[(3.5 ± 1.4)%](P = 0.008) ,but no difference between the latter two subgroups (P = 0.616).Age[RR=3.527 (95%CI:1.598 -7.784) ,P = 0.002], severity of disease[RR=5.122 (95%CI:2.214 - 11.853) ,P ＜0.001], the duration (days) of rhuG-CSF therapy[RR = 10.782 (95%CI:4.600-25.269) ,P＜0.001]and exposure to ray, chemicals or drugs[RR = 3.401 (95% CI: 1.535 -7.534) ,P = 0.003]were risk factors for the transformation in both univariate and multivariate analyses.Conclusion Long-term follow-up is essential to assess the incidence and risk factors for evolutions of acquired AA into MDS/AML, and to administer salvage therapy for transformation in time during follow-up.     

基于多维度临床数据整合分析揭示SLC25A12表达水平在急性髓系白血病患者中的预后价值

目的:研究分析SLC25A12在急性髓系白血病(AML)患者中的临床和预后价值。方法:本研究分别在2个队列中(n=46;n=290)比较了SLC25A12基因在AML患者和健康人骨髓或外周血细胞中的表达水平,利用2个独立AML研究队列(n=163;n=329)的基因组、转录组、临床和预后等多维度信息进行整合,分析SLC25A12的预后价值。结果:在AML患者白血病细胞中,SLC25A12的表达量明显高于健康人(P=0.0001;P=0.0238),单因素和多因素预后分析证实,SLC25A12高表达与患者较短的无事件生存(EFS,HR=1.605,P=0.018)和总体生存(OS,HR=1.818,P=0.002)显著相关。这进一步证实在预后危险度为预后良好和预后中等两个亚组中,SLC25A12高表达的患者无事件生存和总体生存同样显著降低。结论:SLC25A12高表达与AML患者的不良预后生存显著相关,这提示SLC25A12异常表达可作为AML预后评估的潜在的分子标志物。     

SQLE基因表达水平在急性髓系白血病患者预后评估中的价值

目的:在大样本数据分析下确定SQLE表达水平与急性髓系白血病(AML)患者的预后关系.方法:对多个含大样本白血病患者数据的队列包括基因组、转录组、基因芯片表达数据以及临床信息资料进行统计分析.结果:SQLE在AML患者肿瘤细胞中的表达量明显高于健康对照者(P=0.001).在3个AML患者队列中SQLE高表达组比低表达...