SDF-1、CXCR4及ERK1／2在病理性瘢痕中的表达及临床意义

目的：检测病理性瘢痕组织中SDF-1,CXCR4及ERK1／2的表达并探讨其在病理性瘢痕中的相互作用机制。方法：采用免疫组织化学SABC法检测66例病理性瘢痕,25例非病理性瘢痕及27例正常皮肤中SDF-1,CXCR4及ERK1／2的表达。结果：与正常皮肤及非病理性瘢痕相比,SDF-1、CXCR4及ERK1／2三者在病理性瘢痕中均高表达（P〈0．05）;在病理性瘢痕中,SDF—1与ERK1／2的表达呈正相关关系（r=0．293,P〈0．05）,CXCR4和ERK1／2的表达呈正相关关系（r=0．284,P〈O．05）结论：SDF-1／CXCR4生物轴在病理性瘢痕形成过程中可能通过调节ERK1／2途径从而在病理性瘢痕的增生中发挥重要作用。     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子的表达及其意义

目的:观测结缔组织生长因子(Connective Tissue Growth Factor,CTGF)在瘢痕组织中的表达,以探讨其与病理性瘢痕形成的关系。方法:分别取正常皮肤20例、成熟瘢痕20例、增生性瘢痕20例和瘢痕疙瘩20例标本,经HE染色、原位杂交(SABC法)染色,用图象分析系统定量分析CTGF在不同组织中表达的差异性。结果:CTGF在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、瘢痕疙瘩边缘正常皮肤中呈强阳性表达,明显高于其在正常皮肤中的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);其在成熟瘢痕、增生瘢痕边缘正常皮肤呈弱阳性表达,与正常皮肤相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:CTGF在病理性瘢痕的发生发展中起重要作用。     

TNFR1及Bcl-2在病理性瘢痕组织细胞凋亡中的表达及意义

目的研究TNFR1和Bcl-2在病理性瘢痕组织细胞中的表达及其对成纤维细胞凋亡与增殖的影响.方法取手术切除的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩患者各15例标本,正常皮肤12例标本,应用免疫组织化学方法进行检测,分析TNFR1和Bcl-2的表达及分布规律.结果 TNFR1在正常皮肤、增生性瘢痕及瘢痕疙瘩中成纤维细胞的表达阳性率分别为10.70%、3.23%和7.72%,TNFR1在正常皮肤组中的阳性表达率明显高于增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组,而瘢痕疙瘩组阳性表达率却又明显高于增生性瘢痕组,三组间阳性表达率相互比较差异均有显著意义(P<0.01);Bcl-2在增生性瘢痕组(19.35%)和瘢痕疙瘩组(48.33%)的阳性表达率明显高于正常皮肤组(4.07%),三组间阳性表达率相互比较差异亦均有显著意义(P<0.01).结论 Bcl-2的持续过表达可能是瘢痕疙瘩呈瘤样增生的原因之一.介导的死亡受体凋亡通路受阻及TNFR1介导核转录因子NF-kB的激活,表明TNFR1对成纤维细胞的增殖与凋亡具有双重的调节作用.     

病理性瘢痕中结缔组织生长因子的免疫组化研究

目的：研究结缔组织生长因子在病理性瘢痕组织中的表达,以探讨其与病理性瘢痕形成的关系。方法：分别留取正常皮肤15例,浅表性瘢痕20例,增生性瘢痕、增生性瘢痕边缘正常皮肤、瘢痕疙瘩及瘢痕疙瘩边缘正常皮肤各20例组织标本,应用HE染色、免疫组化（SABC法）染色,观察CTGF在各组织中的表达,并用图像分析系统定量分析其在不同组织中表达水平的差异性。结果：CTGF在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩、瘢痕疙瘩边缘正常皮肤中的表达均明显高于正常皮肤,有显著性差异（P〈0.05）;而在浅表性瘢痕、增生性瘢痕边缘正常皮肤中仅有极微弱的CTGF阳性着色,与正常皮肤相比差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫组化研究显示CTGF主要定位于真皮层成纤维细胞胞浆中。结论：结缔组织生长因子与病理性瘢痕临床生物学行为之间有相关性,在其发病过程中可能发挥重要作用,可能成为今后临床治疗瘢痕的一个有力靶位。     

TNFR1及Bcl-2在病理性瘢痕组织细胞凋亡中的表达及意义

目的　研究TNFR1和Bcl- 2在病理性瘢痕组织细胞中的表达及其对成纤维细胞凋亡与增殖的影响。方法　取手术切除的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩患者各 15例标本 ,正常皮肤 12例标本 ,应用免疫组织化学方法进行检测 ,分析TNFR1和Bcl- 2的表达及分布规律。结果　TNFR1在正常皮肤、增生性瘢痕及瘢痕疙瘩中成纤维细胞的表达阳性率分别为 10 .70 %、3.2 3%和 7.72 % ,TNFR1在正常皮肤组中的阳性表达率明显高于增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组 ,而瘢痕疙瘩组阳性表达率却又明显高于增生性瘢痕组 ,三组间阳性表达率相互比较差异均有显著意义 (P <0 .0 1) ;Bcl- 2在增生性瘢痕组 (19.35 % )和瘢痕疙瘩组 (48.33% )的阳性表达率明显高于正常皮肤组 (4.0 7% ) ,三组间阳性表达率相互比较差异亦均有显著意义 (P <0 .0 1)。结论　Bcl- 2的持续过表达可能是瘢痕疙瘩呈瘤样增生的原因之一。介导的死亡受体凋亡通路受阻及TNFR1介导核转录因子NF -kB的激活 ,表明TNFR1对成纤维细胞的增殖与凋亡具有双重的调节作用。     

微纤维蛋白1在病理性瘢痕中的表达及意义

目的 检测微纤维蛋白1(FBN1)在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的表达情况,研究其与TGF-β1的相关性,探讨病理性瘢痕发生的分子机理.方法 用RT-PCR法检测瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤三种组织中FBNI和TGF-β1mRNA的表达量并进行相关性分析;用免疫组化的方法对FBN1蛋白在人类皮肤组织的表达进行定位及半定量研究.结果 FBN1 mRNA在瘢痕疙瘩(0.802±0.116)高于正常皮肤(0.252±0.067)218.25%(P<0.01),增生性瘢痕(0.628±0.144)较正常皮肤增高149.21%(P>0.05).TGF-β1在瘢痕疙瘩较正常皮肤和增生性瘢痕分别增高200.27%和92.81%(均为P<0.01);FBNI和TGF-β1 mRNA在上述标本中的表达量呈正性相关(r=0.820,P<0.01).FBN1蛋白主要在人类皮肤组织的表皮、毛囊和汗腺的基底膜以及真皮层的血管内皮细胞、部分成纤维细胞和细胞外基质中表达阳性.在真皮层,FBN1蛋白在瘢痕疙瘩(0.117±0.042)表达量较正常皮肤(0.185±0.043)和增生性瘢痕(0.181±0.048)分别减少36.76%和35.36%(均为P<0.01).结论 FBN1在瘢痕疙瘩表达异常,它是瘢痕疙瘩相关基因(瘢痕相关基因),可能通过参与TGF-β1信号通路的调节影响病理性瘢痕的发生.     

IL-32在病理性瘢痕中的表达及其生物学作用研究

目的:探讨IL-32在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的形成过程中所起的生物学作用。方法:收集2009年10月至2011年6月广东医学院附属医院整形外科手术切除的瘢痕疙瘩组织12例,增生性瘢痕组织12例,正常皮肤24例,分别应用免疫组织化学技术、RT-PCR和Western Blot检测IL-32在它们中的表达情况。结果:IL-32在正常皮肤增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中均有表达,在正常皮肤中表达较强,在增生性瘢痕及瘢痕疙瘩组织中表达较弱;IL-32mRNA和IL-32蛋白在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩中的表达较正常皮肤明显降低(P均<0.05),而增生性瘢痕组和瘢痕疙瘩组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IL-32在病理性瘢痕组织的形成过程中起着一定的重要作用,有进一步研究的价值。     

β-catenin在病理性瘢痕中的表达和意义

目的 探讨β-连环蛋白(β-catenin)在病理性瘢痕组织中的表达及β-catenin和Wnt/β-catenin信号转导通路在病理性瘢痕发病机制中的作用.方法 应用western blotting法半定量检测β-catenin在30例增生性瘢痕(H组)、30例瘢痕疙瘩(K组)与30例正常皮肤(N组)中的表达情况,并进行统计学分析.结果 β-catenin在增生性瘢痕、瘢痕疙瘩中的表达量均明显高于正常皮肤,其差异有统计学意义(P ＜0.01),增生性瘢痕与瘢痕疙瘩之间比较存在差异,但无统计学意义(P ＞0.05).结论 β-catenin的过度表达与病理性瘢痕的形成有关,Wnt/β-catenin信号转导通路在病理性瘢痕的形成中起着重要作用.     

瘢痕成纤维细胞中cyclin D1、p16的表达及关系研究

目的:了解细胞周期蛋白D1、p16在病理性瘢痕中的表达及它们之间的相互关系,以探讨他们在瘢痕形成过程中的作用。方法:采用免疫组化(SP法)对8例成熟瘢痕、11例增生性瘢痕、11例瘢痕疙瘩及8例正常皮肤组织进行染色,观察CyclinD1和p16在不同组织中的表达。结果:正常皮肤及普通瘢痕成纤维细胞中CyclinD1、p16均为阴性;增生性瘢痕与瘢痕疙瘩成纤维细胞中CyclinD1、p16与正常皮肤相比均有极显著性差异(P<0.05);瘢痕疙瘩成纤维细胞CyclinD1表达高于增生性瘢痕,且有显著性差异(P<0.05);p16在瘢痕疙瘩成纤维细胞的表达比增生性瘢痕为高,但两者之间没有统计学差异.结论:CyclinD1、p16在病理性瘢痕的发生及发展中起重要的作用。在瘢痕疙瘩里p16的细胞抑制作用可能无法与CyclinD1的促细胞增殖作用相拮抗,所以细胞呈现持续增殖状态;而在增生性瘢痕里CyclinD1与p16可能处于相对的平衡状态,所以其生长具有一定的自限性。     

VEGF和TSP-1在病理性瘢痕中的表达及其意义

目的 研究血管内皮生长因子(VEGF)和TSP-1(thrombospondin 1)在病理性瘢痕中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组化SP法检测正常皮肤、扁平瘢痕、增生性德痕和瘢痕疙瘩组织中VEGF、TSP-1蛋白的表达并进行统计学分析.结果 病理性瘢痕组织中VEGF蛋白表达增高,与正常皮肤、扁平瘢痕对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);病理性瘢痕组织中TSP-1蛋白表达显著低于正常皮肤、扁平瘢痕对照组(P<0.05);四类组织中VEGF蛋白和TSP-1蛋白呈负相关(P<0.05).结论 VEGF和TSP-1的表达与病理性瘢痕形成机制有关,VEGF可能通过诱导血管生成而促进瘢痕增生,TSP-1降低导致病理性瘢痕中血管的增生,并可能抑制VEGF的升高,从而导致病理性瘢痕的形成.     

ILK,PI3K,PTEN蛋白在病理性瘢痕中的表达

目的：探讨病理性瘢痕组织中整合素连接激酶（ILK）,第十染色体同源丢失性磷酸酶基因（phosphatase and tensin homolog deleted on Chromosome10,PTEN）和磷酯酰肌醇3一激酶（PI3K）的表达。方法：采用免疫组化sP法检测ILK,PTEN,PI3K在40例病理性瘢痕,20例非病理性瘢痕及20例正常皮肤组织中的表达水平。结果：病理性瘢痕组织中,ILK,PI3K蛋白阳性表达率分别为67．50％,70．00％,均高于非病理性瘢痕及正常皮肤组（P〈0。0167）;PTEN蛋白阳性表达率为25．00％,低于其他两组（P〈0．0167）。PTEN的表达与ILK,PI3K的表达强度成负相关（P〈0．05,r〈0）,ILK与PI3K表达成正相关（P〈0．05,r=O．63）。结论：ILK,PI3K及PTEN可能依赖PTEN／PI3K／ILK／PKB信号传导通路共同参与病理性瘢痕的形成,且ILK,PI3K可能起协同作用,与PTEN互相拮抗。     

SDF-1/CXCR4与胃肠间质瘤临床病理因素的关系

目的探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其受体CXCR4与胃肠间质瘤临床病理因素的关系。方法采用免疫组织化学检测110例胃肠间质瘤手术标本、55例瘤旁组织、10例正常肝脏和腹膜组织中SDF-1和CXCR4的表达。结果 SDF-1在GIST中的阳性表达率（36.4%）明显低于瘤旁组织（72.7%）、正常肝脏（100%）及正常腹膜组织（100%）（P〈0.01）。CXCR4在GIST阳性表达率（76.4%）明显高于瘤旁组织（5.5%）及正常肝脏（0%）（P〈0.01）,在正常腹膜组织阳性表达率（100%）与GIST差异无统计学意义（P〉0.05）。SDF-1在小肠间质瘤中的阳性表达率高于胃间质瘤（P〈0.01）,其之间差异有统计学意义。CXCR4在核分裂相≤5/50HPF组中的阳性表达率高于〉5/50HPF组（P〈0.05）、在2～5cm组中的阳性表达率最高（P〈0.05）、在低危组中的阳性表达率最高（P〈0.05）,各组之间差异有统计学意义。SDF-1和CXCR4阳性表达与复发、淋巴结及远处转移无关（P〉0.05）。结论 CXCR4参与胃肠间质瘤发生,SDF-1与小肠间质瘤高侵袭性有关。     

Stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) and its receptor CXCR4 in the formation of postburn hypertrophic scar (HTS)

Recent data support the involvement of stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) in the homing of bone marrow-derived stem cells to wound sites during skeletal, myocardial, vascular, lung, and skin wound repair as well as some fibrotic disorders via its receptor CXCR4. In this study, the role of SDF-1/CXCR4 signaling in the formation of hypertrophic scar (HTS) following burn injury and after treatment with systemic interferon α2b (IFNα2b) is investigated. Studies show SDF-1/CXCR4 signaling was up-regulated in burn patients, including SDF-1 level in HTS tissue and serum as well as CD14+ CXCR4+ cells in the peripheral blood mononuclear cells. In vitro, dermal fibroblasts constitutively expressed SDF-1 and deep dermal fibroblasts expressed more SDF-1 than superficial fibroblasts. Lipopolysaccharide increased SDF-1 gene expression in fibroblasts. Also, recombinant SDF-1 and lipopolysaccharide stimulated fibroblast-conditioned medium up-regulated peripheral blood mononuclear cell mobility. In the burn patients with HTS who received subcutaneous IFNα2b treatment, increased SDF-1/CXCR4 signaling was found prior to treatment which was down-regulated after IFNα2b administration, coincident with enhanced remodeling of their HTS. Our results suggest that SDF-1/CXCR4 signaling is involved in the development of HTS by promoting migration of activated CD14+ CXCR4+ cells from the bloodstream to wound sites, where they may differentiate into fibrocyte and myofibroblasts and contribute to the development of HTS.     

SDF-1/CXCR4生物轴对胆囊癌细胞增殖及迁移的影响

目的 研究胆囊腺癌中趋化因子SDF-1及其受体CXCR4的表达情况,探讨其与胆囊腺癌临床病理特点及淋巴转移的关系.方法 采用免疫组化SP法检测41例胆囊腺癌中SDF-1及其受体CXCR4蛋白阳性表达情况,并分析其与临床病理参数的关系.结果 SDF-1在胆囊癌、胆囊炎、胆囊结石组和正常对照组胆囊黏膜中的表达率分别为68.3%(28/41)、6.7%(6/90)和5.0%(1/20),CXCR4的表达率分别为51.2%(21/41)、5.6%(5/90)和5.0%(1/20),SDF-1和CXCR4在胆囊癌与慢性胆囊炎、胆囊结石组胆囊黏膜、正常对照组胆囊黏膜中的阳性率比较,差异均有统计学意义(SDF-1:χ2=64.33,P＜0.001;CXCR4:χ2=42.52,P＜0.001),胆囊癌不同病理组织学分级、Nevin不同分期、组织学不同分化程度、有无淋巴结或远处转移组间的SDF-1和CXCR4的阳性率表达差异均有统计学意义(P均＜0.05),而不同性别、年龄、有无伴发胆囊结石组、肿瘤大小间SDF-1和CXCR4的阳性率表达差异均无统计学意义(P均＞0.05),胆囊癌组织中SDF-1阳性表达率(68.3%)与CX-CR4阳性表达率(51.2%)之间存在显著正相关(r=0.68,P＜0.01).结论 本研究表明,SDF-1/CXCR4生物轴与胆囊癌关系密切,提示可以通过干预SDF-1/CXCR4生物轴来治疗胆囊癌.     

病理性瘢痕组织中微血管密度的测定及与survivin mRNA的表达关系

目的测定病理性瘢痕组织中CD105标记的微血管密度（microvesiel density,MVD）和survivin mRNA的表达,探讨病理性瘢痕组织中癌基因在血管形成中的作用。方法采用多相寡核苷酸探针原位杂交技术和免疫组织化学染色技术（SP法）,分别检测survivin mRNA、CD105蛋白在40例病理性瘢痕、20例非病理性瘢痕和20例正常皮肤组织中的表达,并计数CD105标记的MVD。结果CD105-MVD、survivinmRNA在病理性瘢痕较非病理性瘢痕和正常皮肤的表达差异皆具有统计学意义（P〈0.05）。病理性瘢痕组中survivin mRNA表达与CD105-MVD表达有相关性（P〈0.05）。结论病理性瘢痕组织中,凋亡抑制基因survivin表达上调可能参与了其血管形成过程。     

AMD3100体外阻断基质细胞衍生因子1/趋化因子受体4信号通路对人关节软骨细胞分泌基质金属蛋白酶3、9、13水平的影响

目的探讨趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)特异性拮抗剂AMD3100体外阻断基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor 1,SDF-1)/CXCR4信号通路对人关节软骨细胞分泌基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase,MMP)3、9、13水平的影响,明确AMD3100的作用机制。方法取12例骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者144块软骨组织(OA软骨组)和12例创伤性截肢患者144块正常软骨组织(正常软骨组)(Mankin评分均为0或1),根据添加培养液不同,每组再分为A、B、C 3个亚组。A亚组含1 000 nmol/L AMD3100及100 ng/mL SDF-1的DMEM液,B亚组含1 000 nmol/L MAB310及100 ng/mL SDF-1的DMEM液,C亚组含100 ng/mL SDF-1的DMEM液。体外培养2、4 d后,ELISA法测定培养液内MMP-3、9、13含量,RT-PCR检测软骨组织中MMP-3、9、13 mRNA表达。结果 ELISA法及RT-PCR检测示:同组相同时间点A亚组MMP-3、9、13含量及mRNA表达均显著低于B、C亚组(P<0.05)。同一时间点相同亚组OA软骨组MMP-3、9、13含量及mRNA表达均显著高于正常软骨组(P<0.05)。结论 SDF-1通过SDF-1/CXCR4信号通路可诱导人关节软骨中MMP-3、9、13的表达和释放;AMD3100可阻断SDF-1/CXCR4信号通路,使软骨细胞MMP-3、9、13 mRNA表达水平及分泌量降低,但AMD3100不能使退变的OA软骨分泌MMP-3、9、13恢复至正常软骨水平。     

烧伤后增生性瘢痕成纤维细胞中TRAIL受体的表达及意义

目的检测肿瘤坏死斟子相关凋亡诱导配体（TRAIL）的受体住烧伤后增生期增生性瘢痕成纤维细胞上的表达，并探讨其意义。方法应用RT-PCR和流式细胞术，检测了30例处于增生期的烧伤后增牛性瘢痕成纤维细胞中TRAIL各受体的表达，并以30例正常皮肤成纤维细胞作为对照。结果RT-PCR和流式细胞术的检测结果均显示：与正常对照组相比，增生期瘢痕的成纤维细胞中步匕亡受体DR5的表达显著降低（P〈0．05），诱导受体DcR1的表达显著升高（P〈0．05），其余受体的表达住两组间差异无统计学意义。结论烧伤后增生性瘢痕的形成可能与TRAIL介导的瘢痕内成纤维细胞凋亡受阻有关。     

小鼠全层皮肤创伤愈合过程中基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4基因表达的研究

目的：研究小鼠全层皮肤创伤愈合过程中创面基质细胞衍生因子-1（stroma-cell derived factor-1,SDF-1）及其受体CXCR4的基因表达情况。方法：建立小鼠背部皮肤正中近颈侧1.5cm×1.5cm的正方形皮肤全层缺损模型,分别于伤后1、2、3、4、5、7、10和14d获取创缘组织,应用半定量逆转录-聚合酶链反应检测损伤后各时间点创面SDF-1及CXCR4的mRNA表达,并观察组织病理学变化。结果：伤后1～3d创面有大量炎症细胞浸润,4d时有肉芽组织形成,5d可见上皮细胞覆盖创面,7d时创面周围明显上皮化,14d创面基本完全愈合。SDF-1及CXCR4在创面愈合过程均呈双峰表达,SDF-1基因表达于伤后1d明显增高（P〈0.01）,随后下降,于伤后3d达最低,随后再次升高,于伤后5d达峰值（P〈0.01）,然后下降,14d时接近伤前值。CXCR4基因表达于伤后1d升高,然后继续升高,至伤后5d达峰值,随后下降,于伤后10d表达最少（P〈0.01）,伤后14d表达再次增加（P〈0.01）。结论：SDF-1/CXCR4轴参与了创伤愈合的炎症反应期和增殖期的愈合过程,在皮肤组织创伤愈合过程中起着重要作用。     

SDF-1/CXCR4信号轴调控骨髓间充质干细胞向哮喘小鼠肺组织的迁移

目的：探讨基质细胞衍生因子-1（SDF-1）/CXCR4轴在外源性骨髓间充质干细胞（MSC）向哮喘模型小鼠肺组织迁移的作用.方法：无菌条件下取GFP转基因小鼠骨髓MSC,体外扩增,鉴定.采用Transwell培养系统,观察0、50、100、150和200 ng/ml SDF-1和CXCR4阻断剂AMD3100对MSC体外定向迁移的影响.取60只雌性BALB/c小鼠,随机分为6组（n=10）：PBS非哮喘组、MSC非哮喘组、PBS哮喘组、MSC哮喘组、SDF-1处理哮喘组、AMD3100处理哮喘组.哮喘组采用哮喘致敏液0.2 ml（含100 μg卵白蛋白）致敏,并使用卵白蛋白雾化吸入激发哮喘.非哮喘组在致敏和激发时均予以PBS处理.MSC处理组于哮喘激发前移植外源性MSC.SDF-1处理哮喘组在MSC移植前气管内注入SDF-1,AMD3100处理哮喘组注入AMD3100预先孵育的MSC.PBS哮喘组注射等量的PBS液.采用Westernablot和RT-PCR方法检测肺组织中SDF-1的表达水平,通过荧光显微镜观察表达GFP的外源性MSC在哮喘小鼠肺组织中的分布情况,比较SDF-1和CXCR4阻断剂AMD3100干预对MSC向肺组织迁移的影响.结果：Transwell实验显示MSC的迁移水平与SDF-1（0~150军ng/ml）成浓度依赖性.与正常小鼠比较,哮喘小鼠肺组织SDF-1表达增强.与MSC非哮喘组比较,MSC哮喘组小鼠肺部有更多MSC聚集.在哮喘肺组织中增加外源性SDF-1能够促进MSC向肺组织迁移.通过AMD3100阻断MSC的CXCR4可以明显减少MSC向肺组织的迁移水平.结论：SDF-1/CXCR4轴参与了MSC迁移到哮喘小鼠肺组织的过程.