柱前衍生化–高效液相色谱法测定蒙古黄芪多糖中单糖的组成

目的 测定蒙古黄芪多糖中的单糖组成。方法 蒙古黄芪多糖样品用三氟乙酸溶液水解成单糖,用1-苯基-3-甲基- 5-吡唑啉酮（PMP）衍生化,采用HPLC法于245 nm波长处检测各单糖。结果 蒙古黄芪多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、阿拉伯糖组成,物质的量比分别为0.02∶0.05∶0.17∶1∶0.18。结论 此方法简单、快速、重复性好,可用于蒙古黄芪多糖中单糖组成分析。     

柱前衍生-HPLC法测定芹菜籽中油脂的组成及含量

目的建立柱前衍生-HPLC法测定芹菜籽中油脂组成及含量的方法。方法索氏提取法提取芹菜籽中的油脂,皂化后,用2,4,-二溴苯乙酮将其衍生化,反相高效液相色谱法在254nm处紫外检测,以乙腈-水(80∶20)为流动相,流速为1.0mL/min。结果各脂肪酸在20min内分离完全,测得芹菜籽油脂是由油酸、亚油酸、软脂酸3种脂肪酸组成,其含量分别为32.2%、59.4%、4.9%。结论本法操作简便,精密度、稳定性、重现性均良好,可用于测定芹菜籽油脂中脂肪酸的组成及含量。     

柱前衍生化反相高效液相色谱法测定蝉蜕中3种氨基酸含量

目的 建立柱前衍生化反相高效液相色谱法测定蝉蜕中天冬氨酸、酪氨酸和缬氨酸3种氨基酸含量的方法。方法 采用酸水解法制备氨基酸样品溶液,以异硫氰酸苯酯柱前衍生化后进行高效液相色谱分析。采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm),梯度洗脱,流动相A为0.1 mol/L醋酸钠缓冲液- 乙腈(93∶7),流动相B为乙腈- 水(4∶1),流速1.0 mL/min,柱温为43 ℃,检测波长254 nm,进样量20 μL。结果 氨基酸衍生溶液在36 h内保持稳定,3种氨基酸在线性范围内峰面积与浓度的相关系数均大于0.999 0,加样回收率(n＝6)分别为95.62%、101.26%和100.00%。结论 所建立的检测方法稳定可靠,精密度和重复性良好,可用于蝉蜕中天冬氨酸、酪氨酸、缬氨酸含量测定。     

柱前衍生化-HPLC法分析麻黄多糖ESP-B1的单糖组成

目的 建立了柱前1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生HPLC法分离检测6种中性糖、2种糖醛酸的方法,对麻黄纯多糖ESP-B1的单糖组成进行分析。方法 麻黄热提总多糖经各种离子交换和凝胶柱色谱分离得到1个麻黄纯多糖ESP-B1,经H₂SO₄水解后,用PMP柱前衍生,KH₂PO₄-NaOH缓冲液（pH 6.8）-乙腈（84∶16）等度洗脱,高效液相250 nm紫外检测。结果 麻黄纯多糖ESP-B1由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖4种单糖组成,其物质的量比为3.5∶2.2∶1.0∶93.3。结论 该衍生化方法以及优化的高效液相色谱法具有简单、快速、重现性好等特点,可用于麻黄多糖中单糖组成的测定。     

柱前衍生化高效液相色谱法测定复方酮康唑乳膏中硫酸新霉素的含量

目的：建立柱前衍生化高效液相色谱（HPLC）法测定复方酮康唑乳膏中硫酸新霉素的含量。方法：采用安捷伦 C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为甲醇∶水（35∶65）（含0.2 mol·L-1醋酸和0.013 mol·L-1的庚烷磺酸钠）,流速为1.0 mL·min-1,柱温为30 ℃,检测波长为399 nm,进样量为20 μL。结果：硫酸新霉素在0.004～0.06 mg·mL-1（r=0.9997）范围内线性关系良好,6次重复性试验相对标准偏差（RSD）为0.88%,检测限为0.04 μg,平均回收率为98.4%。结论：柱前衍生化HPLC法高效、便捷、准确,可作为抗生素微生物检定法的替代方法,用于测定复方酮康唑乳膏中硫酸新霉素的含量。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定大蒜中蒜氨酸

目的建立了柱前衍生化高效液相色谱法测定大蒜中蒜氨酸的方法。方法衍生化试剂为邻苯二甲醛(OPA),采用Waters Symetry C18色谱柱(150 mm×3.9 mm),以0.05 mol/L pH 7.0的磷酸缓冲液-乙腈(70∶30)为流动相,体积流量0.8 mL/min,检测波长337 nm。结果蒜氨酸在0.01~0.20 mg/mL与峰面积线性关系良好,r=0.99,检测限为0.01 mg/mL,平均回收率为93.9%,RSD为2.1%(n=5)。结论本方法检测快速,定量准确,可用于大蒜中蒜氨酸的定量测定。     

柱前衍生HPLC法测定鸦胆子油中的脂肪酸含量

目的建立HPLC法测定鸦胆子油中的脂肪酸的方法。方法以2,4′-二溴苯乙酮为衍生化试剂,18-冠-6醚为相转移催化剂,采用KromasilC8(250mm×4mm,5μm)反相柱,波长254nm,以乙腈-水(80∶20)为流动相等度洗脱,柱温室温,体积流量为1.3mL/min,正十七烷酸为内标,一次基线分离5种脂肪酸。结果亚油酸的线性范围为0.022～0.330μg,软脂酸的线性范围为0.014～0.213μg,油酸线性范围为0.028～0.416μg,硬脂酸的线性范围为0.012～0.177μg。平均回收率分别为99.2%、97.2%、101.8%、97.8%,RSD分别为1.2%、1.5%、0.4%、2.3%。结论该方法重现性好,定量准确,可作为鸦胆子油中脂肪酸的定量方法。     

高效液相色谱法测两头尖多糖的单糖组成

目的:测定两头尖多糖中单糖的组成。方法:两头尖多糖采用2 mol/L三氟醋酸水解后通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,用高效液相色谱法梯度洗脱测定;检测波长250 nm。结果:两头尖多糖由D-葡萄糖、D-核糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、L-岩藻糖、D-甘露糖、D-半乳糖、D-木糖)组成。结论:高效液相色谱法测两头尖多糖的单糖组成,操作方法简便,具有良好的重复性及稳定性。     

柱前衍生高效液相色谱法测定蚕蛹提取物中氨基酸含量

目的 用柱前衍生法测定蚕蛹提取物中氨基酸含量,方法以磺酰氯二甲胺偶氮苯(DABS-CL)作衍生剂,采用柱前衍生高效液相色谱法(RP-HPLC),YMC-Pack ODS-A柱(250mm×4.6mm,5mm),流动相A为25mol/L KH2PO2,流动相B为乙腈:甲醇=70:30;流速1.5 ml/min梯度洗脱,检测波长436nm,柱温35℃,结果各种氨基酸均具有良好的线性关系(相关系数,=0.9989～0.9999)、精密度(RSD<1.50%)、稳定性(RSD<3.50%)、平均回收率(98.83%～107.83%),测定蚕蛹提取物中氨基酸含量,其含有人体必需氨基酸占总氨基酸含量的40%以上,结论该方法简便实用,分析结果准确可靠,适用于动植物中富有氨基酸含量的测定.     

高效液相色谱柱前衍生法测定丙戊酸血药浓度

目的　建立测定血清中丙戊酸血药浓度的高效液相色谱法。方法　血清在酸性条件下用正己烷提取 ,采用 2 ,4 二溴苯乙酮将丙戊酸转变为可紫外检测的酯 ,RP HPLC测定。结果　在 3.4 9～ 2 1 8.5 6 μg/ml范围内 ,丙戊酸衍生物和内标的峰面积比与浓度呈良好的线性关系 ,r=0 .9998,平均回收率大于 96 % ,日内和日间RSD <5 %。结论　本法准确、灵敏、选择性强、重现性好、快速、简便 ,适用于丙戊酸血药浓度的临床和科研测定     

新型荧光试剂柱前衍生高效液相色谱定量分析小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质

目的 采用新合成的荧光试剂柱前衍生氨基酸类神经递质,建立其测定方法,并测定小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的含量。方法 以1,3,5,7-四甲基-8-苯基-（4′-O-（N-琥珀酰亚胺乙酸酯））-二氟化硼-二吡咯甲烷（TMPAB-OSu）作为柱前荧光衍生试剂,在pH 8.8的硼酸-硼砂缓冲溶液中,30℃衍生反应5 min后获得稳定的荧光衍生产物,在反相色谱柱上,采用梯度洗脱进行5种氨基酸类神经递质标准品衍生物的分离检测,荧光激发波长为497 nm,检测波长为509 nm。结果 5种氨基酸类神经递质的线性范围为0.01~1.2 μmol/L,线性回归系数均大于0.998 1,检出限为1 nmol/L（S/N=3∶1）。小鼠脑脊液中天门冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、γ-氨基丁酸和丙氨酸的含量分别为0.06、0.20、0.26、0.03和0.07 μmol/L,标准加入回收率为96%~104%,RSD为0.7%~2.9%。结论 该方法的灵敏度高、重现性好,为小鼠脑脊液中氨基酸类神经递质的分析检测提供了一种新方法。     

DNPH柱前衍生高效液相色谱法测定水产品及水发产品中甲醛的方法

目的探讨2,4-二硝基苯肼(DNPH)柱前衍生高效液相色谱法测定水产品及水发产品中甲醛的方法。方法采用超声法提取样品,提取液于60℃水浴中衍生20 min,用环己烷提取,最后于液相色谱仪进行分析定量。结果甲醛在0~20μg/ml浓度范围内,标准曲线线性关系良好,相关系数r为0.9998,相对标准偏差为0.9%~4.5%,加标回收率为93.00%~99.16%;检测结果与国标方法比较差异无统计学意义(P0.05)。结论本方法具有灵敏度高、选择性好、精密度和准确度好等优点,而且简便、快捷,适合分析大批量样品。     

超高液相在药物分析领域中的应用

超高效液相色谱（UPLC）具有传统HPLC色谱所不具备的高分离能力、高灵敏度及专属性优势,针对超高液相在药物分析领域的广泛应用,本文对超高液相色谱及其与质谱联用技术在药物分析领域取得的成果,分别从药物成分分析、药代动力学两方面进行了详细阐述与总结。     

超高效液相色谱法同时测定藿香正气水中7种成分含量

利用超高效液相色谱同时测定藿香正气水中7种有效成分的含量。采用Acquity BEH C₁₈(2.1 mm×100 mm,1.7 μm)色谱柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液线性梯度洗脱,柱温35 ℃,流速0.4 mL/min,分别在249,284,336 nm测定7种有效成分含量,12 min内完成测试。结果显示,甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素、橙皮苷、厚朴酚、和厚朴酚、苍术素等7种成分在各自线性范围呈良好的线性关系(r>0.999 9),加样回收率在96.16%~103.4%之间。     

直接蛋白沉淀-超高效液相色谱法测定氟尿嘧啶血药浓度

建立直接蛋白沉淀-超高效液相色谱法测定血浆中微量氟尿嘧啶的方法。以6%高氯酸为沉淀剂,5-氯尿嘧啶为内标物,样品经涡旋振荡等处理后,高速离心获取上清液作为供试液。供试液测定采用Acquity HSS T₃色谱柱,水-乙腈为流动相,流速为0.2 mL/min,进样量为5 μL,柱温为20 ℃。方法的专属性、准确度、精密度、线性等指标经验证后完全符合定量测定要求,与传统的测定方法相比,可显著缩短进样分析时间、降低试剂成本。本方法已经被成功用于临床病人的血药浓度检测,具有良好的临床应用前景。     

一种新的柱前衍生法测定血浆同型半胱氨酸

目的建立一种新的高效液相柱前衍生法,准确、快速测定血浆同型半胱氨酸(HCY)浓度.方法血中结合态的HCY经三丁基膦还原为游离HCY后,与衍生试剂7-氟苯唑-2-氧-1,3-二唑-4-磺酸胺(ABD-F)进行柱前衍生反应,衍生物经反相C18色谱柱,用0.15mol/L磷酸盐缓冲液(pH=4.2)与甲醇按85∶15配制的混合液洗脱.荧光检测激发λ=385nm,发射λ=515nm.结果在3.125～100.00μmol/L范围内,HCY浓度与荧光强度的线性关系良好,γ=0.9998,测定的批内、批间变异系数分别为3.13%和5.10%,高低2种浓度的回收率分别为98.5%和92.7%,健康人血浆HCY的参考值为8.12±2.72μmol/L.结论本法测定血浆HCY准确快速、特异性高、分离效果好,适用于临床血浆HCY测定的常规需要.     

色谱柱前衍生法测定饲料中赖氨酸的不确定度评定

目的 以赖氨酸为例介绍高效液相色谱柱前衍生法测定饲料中氨基酸的不确定度的评定方法 为建立有效的质量控制方法提供科学依据。方法直观图识别出各不确定度来源，将各个分量按系统效应和随机效应带来的不确定度，进行分别计算和整体合成。结果 本实验室高效液相色谱柱前衍生法测定饲料中赖氨酸的不确定度大小为O.0144(％)。结论 本方法评定过程清晰合理，影响因素不道漏，不重复，能将过程复杂的不确定度评定简单化，对其它方法的不确定度评定有举一反三的作用，同时也有利于实验室内部的控制。     

拉洛他赛的波谱解析及高效液相色谱法对其脂质体含量的测定

目的 拉洛他赛是国内外均未上市的新结构药物,未见质量研究相关报道。对拉洛他赛进行波谱解析以验证其分子式、相对分子质量和化学结构式,同时建立一种定量方法用于拉洛他赛脂质体制剂的含量测定。方法 利用质谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱测定方法,对拉洛他赛进行药物结构和光谱学解析;利用紫外-可见分光光度法对拉洛他赛进行全波长扫描,确定其吸收波长;利用高效液相色谱法,建立拉洛他赛定量方法并用于脂质体拉洛他赛包封率的测定。结果 揭示了拉洛他赛的四大光谱学特征并制订相应的标准图谱。确认了拉洛他赛的结构为三环二萜,分子式为C₄₅H₅₃NO₁₄,相对分子质量为831.900 1。建立了拉洛他赛的高效液相色谱定量方法,其色谱柱为C18硅胶反相色谱柱 (5 μm, 250 mm×4.6 mm),流动相为乙腈-水(体积比75 ∶25),检测波长为230 nm,该方法可用于测定脂质体制剂中拉洛他赛的包封率,稳定性、回收率和精密度高。此外,新制备了拉洛他赛脂质体,该脂质体粒径大约105 nm,均一性良好,药物包封率大于80%。结论 制订了拉洛他赛的质谱、红外吸收光谱、核磁共振波谱和紫外-可见光谱图谱,验证了拉洛他赛的分子式、相对分子质量和结构式,建立了拉洛他赛的高效液相色谱定量方法,该方法可用于拉洛他赛脂质体的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定复方维生素注射液(4)中三种组分的含量

目的: 建立用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定复方维生素注射液(4)中三种组分含量的方法。方法: 采用HPLC法,C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-乙醇(80:20),检测波长270 nm。结果: 维生素A棕榈酸酯在12.5~125.5 μg/m l之间线性良好(r=0.999 9),平均回收率为99.38%,相对标准偏差(RSD)为1.36%;维生素E在125~1251 μg/m l之间线性良好(r=0.999 9),平均回收率为98.87%,RSD为0.95%;维生素K₁在16.5~166.5 μg/m l之间线性良好(r=0.999 9),平均回收率为98.08%,RSD为1.57%。结论: HPLC法测定复方维生素注射液(4)中3种维生素的含量专属性强,灵敏度高,准确性好,可用于复方维生素注射液(4)的含量测定。