目的 探究纳米层状双氢氧化物（LDH）共载氟尿嘧啶（Fu）姜黄素（Cur）混合剂型对肝癌细胞的抑制作用。方法 通过共沉淀法合成纳米LDH混合剂型,并对其进行详细表征,如电镜（TEM）、X射线衍射（XRD）及动态光散射技术（DLS）检测,细胞计数试剂盒（CCK8）测定Fu组、Fu+Cur组及纳米剂型组对7721、Hep G2和LM3细胞的增殖抑制作用,同时凋亡试剂盒检测各组对7721细胞的凋亡效应,Western blot检测各组对细胞抗凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达及下游Caspase的活化情况。结果 合成的纳米LDH混合剂型具有较好的均一性,DLS检测提示其粒径约为400nm,XRD提示Fu及Cur通过水平方式插入LDH层间;CCK8结果提示,相对于单纯的Fu组、Fu+Cur组和LDH-Fu组,LDH-Fu-Cur组对LM3、Hep G2和7721细胞具有更强的增殖抑制作用（P <0.05）。相对于单纯的Fu组、Fu+Cur组和LDH-Fu组,LDH-Fu-Cur组对LM3、Hep G2和7721细胞具有更强的促凋亡效应作用（P <0.05）,35μg/ml浓度的Fu纳米混合剂型组凋亡率高达（87.0±4.7）%,而单纯Fu仅为（23.0±2.3）%;Western blot检测结果显示,纳米混合剂型能够下调7721细胞Bcl-2水平。结论 纳米LDH混合剂型具有良好的抗肿瘤效应,其机制可能为下调肿瘤抗凋亡基因Bcl-2从而引起下游Caspase活化。
相似文献目的 研究上皮-间质转化（EMT）相关的微小RNA（microRNA,以下简称miRNA）-221在结直肠癌患者中的表达水平,并探索其对结直肠癌细胞迁移水平的影响。方法 选取该院40例结直肠癌患者为研究组,选取同期体检的40例健康人群为对照组。采用实时定量RT-PCR法检测结直肠癌患者癌组织以及癌旁组织中miRNA-221表达水平,同时对比结直肠癌患者及正常人血浆中miRNA-221表达水平。对结直肠细胞采用miRNA-221的mimic及inhibitor分别高、低表达miRNA-221后,采用transwell法分别检测细胞的侵袭水平以及EMT相关蛋白表达。结果 miRNA-221在直肠癌组织的表达水平显著高于癌旁组织,差异有统计学意义（P <0.05）;miRNA-221在直肠癌患者血浆中的表达水平显著高于健康对照人群,差异有统计学意义（P <0.05）。干扰结直肠癌HT-29细胞株中miRNA-221后,结直肠癌细胞迁移能力显著降低（均P <0.05）,且细胞中EMT相关的上皮钙黏蛋白（E-cad）的表达水平降低;而过表达HT-29细胞株中miRNA-221,结直肠癌细胞迁移能力显著增加,且细胞中EMT相关的上皮钙黏蛋白（E-cad）的表达水平增加。结论 结直肠癌患者高表达的miRNA-221通过促进结直肠癌细胞的迁移水平来参与结直肠癌发生发展的进程。
相似文献目的 探讨Micro RNA-132（miR-132）在结肠癌中的表达及其临床意义。方法 实时逆转录定量PCR和原位杂交分析结肠癌组织中miR-132的表达情况。分析miR-132表达与结肠癌临床病理参数和预后之间的相关性。结果 miR-132在结肠癌组织中的表达明显低于正常结肠黏膜组织（P <0.01）,miR-132低表达与结肠癌分期更晚有关。多元回归分析表明,miR-132低表达与结肠癌患者生存期更短有关（P <0.01）,miR-132是结肠癌患者预后的独立预测因子。结论 miR-132表达下调能够促进结肠癌进展,是预测结肠癌患者预后的可靠指标,miR-132也具有成为结肠癌靶向治疗靶点的潜力。
相似文献目的 探讨循环型microRNA-92a（miR-92a）在先天性巨结肠（HD）中的表达,以及通过上调尾侧型同源转录因子-2（CDX2）基因抑制肠神经干细胞（ENSCs）增殖的可能机制。方法 选取2013年1月-2015年12月在山东省临沂市沂水中心医院行先天性巨结肠根治术16例HD患儿的术前血清标本。实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测血清miR-92a mRNA的表达。提取孕15 d胎鼠肠管ENSCs,通过免疫学方法鉴定ENSCs;免疫磁珠法分选Nestin+ENSCs,脂质体转染使Nestin+ENSCs内过表达miR-92a,噻唑蓝法检测细胞的增殖活性,qRT-PCR、Western blot检测CDX2基因的表达。结果 HD患儿血清中miR-92a mRNA的相对表达量为（23.5±4.66）,高于对照组（t =12.661,P =0.000）;ENSCs细胞培养早期Nestin染色阳性,具有向Tuj-1阳性、胶质纤维酸性蛋白阳性细胞分化的潜能;ENSCs过表达miR-92a后,CDX2 mRNA的相对表达为（13.024±3.882）,高于对照组（F =47.212,P =0.000）,CDX2蛋白表达为（0.436±0.0828）,高于对照组（F =48.793,P =0.000）,细胞的增殖活性在转染后24、48和72 h明显受抑制。结论 miR-92a通过上调CDX2基因的表达,抑制ENSCs的增殖,可能促进HD发生、发展。
相似文献目的 观察肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2在人肝细胞癌细胞中的表达及下调后对增殖生存的影响并探讨其机制。方法 以蛋白免疫印迹法（Western blot）及实时定量逆转录聚合酶链反应法（qRT-PCR）检测肝细胞癌细胞株中肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达,并采用小干扰RNA转染Hep3B细胞株对肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达进行下调,Western blot和qRT-PCR检测转染效率、增殖凋亡相关基因表达;甲基噻唑基四唑检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期及凋亡。结果 肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2蛋白及mRNA在肝癌细胞株Hep3B、Huh7、HepG2、MHCC97H中均有表达,在Hep3B细胞株中表达量最高（F=5.742,P <0.01;F=3.452,P <0.05）;与空白对照（siNC）组比较,si肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2组中P-P21及磷酸化的蛋白激酶B蛋白表达下调（t =8.462,P <0.01;t =9.742,P <0.01）,P21、蛋白激酶B及Cleaved Capase-9蛋白表达上调（t =12.247,P < 0.001;t =6.452,P <0.01;t =11.634,P <0.001;t =12.273,P < 0.001）;与siNC组比较,在72 h和96 h,si肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达下调后Hep3B细胞增殖能力下降（t =8.176,P <0.01;t =2.246,P <0.05）,Hep3B停留在G1期比例增高,G2及S期比例减少（t =4.23,P <0.05;t =2.13,P <0.05;t =5.72,P <0.05）,凋亡率升高（t =8.633,P <0.01）。结论 下调肌动蛋白丝相关蛋白1相似蛋白2表达通过P21磷酸化及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路抑制肝细胞癌细胞增值及生存,可作为肝细胞癌治疗的靶向候选基因。
相似文献目的 探讨含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶caspase-1（CASP1）表达在非小细胞肺癌（NSCLC）发生、发展中的作用。方法 收集华北理工大学附属医院2010～2014年确诊为NSCLC患者的肺癌及癌旁组织25对。采用免疫组织化学染色方法,比较CASP1基因在肺癌和癌旁组织以及不同病理类型及分化程度肺癌组织中的表达差异。使用正常和肿瘤组织表达数据库（GENT）提供的数据,分析CASP1在肺癌组织及正常组织中的表达差异。结果 免疫组织化学结果显示,CASP1在肺癌组织中的表达量（0.021±0.004）低于相应的癌旁组织（0.083±0.008）,差异有统计学意义（t =-8.554,P =0.000）。进一步对GENT数据库进行分析,发现在U133plus2提供的数据中,CASP1在肺正常组织中的表达量为（1137±42.17）,高于其在肺肿瘤组织中的表达量（844±19.35）,差异有统计学意义（Z =-7.037,P =0.000）。同样的结果出现在U113A提供的数据中,CASP1在肺正常组织的表达（467±11.19）高于其在肺肿瘤组织（423±8.44）中的表达,差异有统计学意义（Z =-2.898,P =0.004）。不同分化程度肺癌组织的免疫组织化学结果显示,CASP1的表达水平在高分化（0.027±0.006）、中分化（0.017±0.003）、低分化（0.007±0.002）肺癌组织中的差异有统计学意义（F =6.653,P =0.006）。组间比较显示,CASP1在高分化组织中的表达高于其在低分化肺癌组织中的表达,差异有统计学意义（P =0.001）,但与中分化组织中的表达比较无统计学意义（P =0.056）。笔者未发现CASP1在肺腺癌（0.019±0.003）和鳞癌（0.012±0.004）中表达差异有统计学意义（t =1.382,P =0.180）。结论 CASP1在非小细胞肺癌组织中表达下调,表明其在NSCLC的发生、发展过程中可能发挥重要作用。
相似文献目的 探讨microRNA-93（miR-93）在宫颈癌组织中的表达及其对宫颈癌细胞生物学行为的影响。方法 收集2014年1月-2014年7月中南大学湘雅医院有完整病历资料的41例宫颈癌患者组织标本及对应癌旁组织,实时荧光定量-聚合酶链反应（qRT-PCR）检测宫颈癌组织中miR-93表达水平;采用脂质体转染法将miR-93模拟片段（mimic）转染入宫颈癌Hela细胞,恢复细胞内miR-93表达;活细胞计数试剂盒（CCK-8）和流式细胞术检测miR-93对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响;Transwell小室法检测其对Hela细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blot检测Hela细胞中上皮生长因子受体（EGFR）及其下游蛋白的表达量变化。结果 41例宫颈癌患者肿瘤组织中miR-93表达量（0.048±0.013）低于癌旁组织（0.113±0.025）,差异有统计学意义（P =0.026）;转染miR-93模拟片段后,宫颈癌Hela细胞中miR-93表达恢复;与对照组和空白组比较,实验组宫颈癌细胞增殖能力下降（P =0.004）,早期凋亡比例增加（P =0.032）,侵袭（P =0.003）和迁移能力下降（P =0.003）;过表达miR-93的Hela细胞EGFR及下游的p-AKT表达下降（P =0.005）,而总AKT蛋白无明显变化（P =0.372）。结论 miR-93在宫颈癌组织中的表达量下降,恢复其在宫颈癌细胞中的表达能够明显抑制其细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡,其机制部分与miR-93抑制宫颈癌细胞EGFR/AKT信号通路活性有关。
相似文献目的 检测锌指蛋白217（ZNF217）在结肠癌中的表达,分析ZNF217的表达水平与结肠癌患者临床病理特征及结肠癌患者生存与预后的相关性。方法 利用免疫组织化学方法检测84例结肠癌患者组织标本及相应癌旁组织中ZNF217的表达水平,并利用Spearman秩相关、K-M曲线及Cox比例风险回归模型等统计方法分析ZNF217在结肠癌中的临床相关性。结果 免疫组化结果发现结肠癌组织中ZNF217阳性表达率高于癌旁组织。Spearman秩相关显示ZNF217的表达水平与结肠癌患者TNM分期和淋巴转移情况呈正相关,且与其他结肠癌患者临床病理特征无相关性。K-M曲线显示ZNF217表达水平与结肠癌患者术后总体生存率及无进展生存率呈负相关。Cox风险比例模型显示ZNF217可作为判断结肠癌预后独立的预测指标。结论 ZNF217在结肠癌组织中表达升高,且可作为判断结肠癌患者生存及预后的独立的潜在分子指标。
相似文献目的 探讨microRNA-132（miR-132）对结肠癌细胞系LOVO生物学功能的作用。方法 通过体外转染miR-132 mimic的方式进行获得性功能实验。以细胞计数检测（CCK-8）、平板克隆形成、流式细胞凋亡检测以及划痕实验分析miR-132过表达对LOVO细胞增殖与侵袭的影响。结果 LOVO细胞中,外源性过表达miR-132能够抑制其生长,且抑制率呈时间、浓度依赖性,50 nmol/L miR-132 mimic处理72 h后,抑制率达30%。流式细胞凋亡检测发现miR-132过表达诱导细胞凋亡。miR-132过表达可以抑制LOVO细胞体内的外克隆形成能力。体外平板克隆形成实验显示,miR-132过表达使LOVO细胞克隆形成率从21%降至7%。划痕修复实验结果显示,高表达miR-132各组细胞的迁移能力降低。结论 miR-132过表达能显著抑制结肠癌细胞LOVO发生细胞凋亡及增殖,还能削弱结肠癌细胞LOVO的克隆形成能力。
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目的 观察microRNA-539（miR-539）的表达对甲状腺癌细胞侵袭与迁移的影响,探究miR-539与膜相关的鸟苷酸激酶蛋白1（CARMA1）在甲状腺癌中相互作用的机制。方法 构建miR-539与CARMA1高表达及低表达的细胞模型后通过transwell及MTT法检测两种不同的甲状腺癌细胞的侵袭、迁移及增殖能力。Western blot及RT-PCR检测细胞中蛋白及mRNA表达。结果 miR-539抑制甲状腺癌细胞的侵袭与迁移。通过荧光素酶报告检测发现miR-539通过靶向CARMA1的3’-UTR端从而起到抑制甲状腺癌中CARMA1的作用。进一步的研究证实,CARMA1可显著促进甲状腺癌细胞的侵袭与迁移。而调节CARMA1的表达,miR-539随之变化。研究还发现,与对照组比较,甲状腺癌中miR-539的表达量降低而CARMA1的表达量增加。结论 miR-539靶向CARMA1抑制甲状腺癌细胞的侵袭与迁移。
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