高效毛细管电泳在中药指纹图谱应用

综述了南效毛细管电泳技术的基本原理及近几年高效毛细管电泳技术在中草药、动物药和复方制剂指纹图谱建立中的应用,并与高效液相之间的对比.     

山西道地药材远志的毛细管电泳指纹图谱研究

目的 建立山西道地药材远志的毛细管电泳指纹图谱(CEFP),获得对照图谱,并与不同产地远志药材指纹图谱相比较,以控制远志质量。 方法 未涂层毛细管柱(75 μm×57 cm,有效长度50 cm);缓冲液：25%甲醇的20 mmol·L^-1硼砂溶液;分离电压：18 kV;检测波长：210 nm;温度：25 ℃;进样条件：0.5 psi,5 s。使用指纹图谱相似度评价软件进行数据处理,比较分析远志HPCE指纹图谱的相似度。 结果 建立了山西道地远志药材的HPCE指纹图谱共有模式,并比较了不同产地远志药材HPCE指纹图谱的相似度。 结论 所建立的CEFP具有较好的重复性,为远志药材质量控制提供了新方法。     

续断高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的:利用高效毛细管电泳(HPCE)方法建立中药续断的指纹图谱。方法:采用50μm×65 cm(有效长度57 cm)未涂层石英毛细管柱,以pH 9.20,50 mmol.L-1的硼砂-硼酸为缓冲溶液体系,运行电压25 kV,温度25℃,压力进样5 kPa×30 s,检测波长212 nm。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版"软件和聚类分析方法,对样品图谱进行分析。结果:12批续断HPCE指纹图谱共确认了14个共有指纹峰,其中产自湖北的2批药材相似度介于0.8至0.9之间,产自四川的10批药材相似度大于0.9。聚类与相似度结果一致。结论:此法准确、可靠,可为续断药材的质量评价与控制提供科学依据。     

场放大进样-高效毛细管电泳测定中药附子指纹图谱研究

目的 建立适用于附子药材饮片的指纹图谱法。方法 采用FASS-HPCE技术对检测条件进行优化,确立高效毛细管电泳色谱分析中药附子质量的指纹图谱方法。采用所建立的中药高效毛细管电泳指纹图谱对10个批次的附子饮片进行考察。结果 经考察确定适于附子指纹图谱研究的电泳条件为背景缓冲液100 mmol·L^-1硼砂-硼酸缓冲溶液（pH 9.0）：甲醇=7：3的电解质溶液;电压进样：20 kV,20 s;分离电压：10 kV;检测波长：230 nm;柱温：25℃。所采集的10批药材中有8个共有峰,其中的3个峰分别指认为苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱,是附子主要的药效物质。结论 所建立的基于高效毛细管电泳技术的指纹图谱法作为一种快速、有效的分析方法可用于中药附子的研究。     

复方甘草片的毛细管电泳指纹图谱研究

目的 建立复方甘草片的毛细管电泳指纹图谱。方法 以50 mmol·L-1硼砂溶液(含10％甲醇,v/v)提取样品,用毛细管区带电泳法,紫外检测波长228 nm,电压14 kV,以50mmol·L-1硼砂溶液为背景电解质,氢氯噻嗪为参照物(s),对6个厂家各10批以上复方甘草片进行指纹图谱研究。以20个峰的迁移时间、峰面积、相对迁移时间和相对峰面积分别构成表征样品性质的4个向量,以不同批指纹向量与标准对照指纹向量间的相关系数和夹角余弦为测度评价指纹的相似性,并以所建立的CE指纹图谱检验另外1个厂家样品为合格。结果 所建立的CE指纹图谱具有稳定、重现的特点。结论 该指纹图谱可控制复方甘草片的质量。     

川芎药材的指纹图谱研究

目的 对川芎药材进行指纹图谱方法的建立。方法 用HPLC方法建立川芎醇提取物的指纹图谱。结果 共有12个色谱峰。结论 符合中药材指纹图谱技术要求。     

川芎高效液相指纹图谱的研究

目的:用高效液相色谱法建立川芎的指纹图谱.方法:采用Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇和水梯度洗脱,检测波长323 nm,使用"计算机辅助相似度评价软件"进行数据处理,对不同批药材指纹图谱的相似度进行比较分析.结果:精密度和重复性试验中各共有峰、相对峰面积的RSD均小于5%,符合有关规定,不同批号川芎药材的指纹图谱相似度较好.结论:方法准确、重复性好,为川芎的质量控制提供了依据.     

中药的毛细管电泳指纹图谱的研究方法

目的介绍了毛细管电泳指纹图谱的优势，毛细管电泳指纹图谱的研究方法与评价方法及其在中药质量控制中的应用。方法以中药指纹图谱质量控制特征为基础，综述了毛细管电泳在中药指纹图谱方面应用的基础理论和方法。结果建立了一套完整的中药指纹图谱研究方法，包括实验条件的优化、系统适用性试验、电泳峰的指认与标定、双定性双定量相似度评价法等。结论数字化指纹图谱技术是数字中药质控的典型代表和核心技术，建立毛细管电泳数字化指纹图谱是实现中药现代质量控制的重要技术之一。     

口服川芎挥发油后小鼠体内藁本内酯的组织分布特性

目的：建立藁本内酯的RP-HPLC分析方法，并应用于藁本内酯在小鼠体内各组织的分布研究。方法：生物样品经过正己烷萃取浓集后，以尼莫地平为内标，用Kromasil C18柱（150mm×4．6mm，5μm）进行分析，以乙腈-10％异丙醇水溶液（58：42）为流动相，流速1．0mL／min，在324nm处进行检测。结果：藁本内酯与内标的保留时间分别为7．2min和5．9min，藁本内酯在各组织中一定浓度范围内线性关系良好，各组织中低、中、高浓度蒿本内酯的回收率及精密度均符合方法学要求。藁本内酯在小鼠主要效应器官中浓度分布如下：c肺〉c心〉C脑，在主要消除器官中c肝〉c脾〉c肾。藁本内酯在肺和脾脏中分布较多。结论：本方法方便、准确、可靠、可用于藁本内酯的体内分析研究。     

中药川芎HPLC指纹图谱分析方法的研究

目的建立川芎药材的指纹图谱的分析方法。方法采用HPLC/UV方法测定川芎药材提取物的指纹图谱,并对10批不同来源的川芎进行了比较。结果确定了川芎药材指纹图谱的高效液相分析条件,建立了川芎指纹图谱。结论HPLC指纹图谱分析方法可简便鉴别不同来源的川芎药材。     

HPCE测定附子活性成分的血浆蛋白结合率

目的 建立适用于附子生物碱类化学成分血浆蛋白结合率的方法。方法 通过考察进样方式、电泳缓冲液组成等因素确定色谱条件,并采用该条件测定苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱和苯甲酰乌头原碱的血浆蛋白结合率。结果 经考察确定色谱条件为：电压进样,缓冲液为100 mmol·L^-1硼砂-硼酸缓冲溶液（pH=9.0）∶甲醇=7∶3,分离电压为15 kV,检测波长为230 nm。在1,2,5 μg·mL^-1 3个剂量下,附子中苯甲酰次乌头原碱的蛋白结合率分别为（43.81±3.2）%,（42.51±3.6）%,（42.09±2.3）%;苯甲酰新乌头原碱的蛋白结合率分别为（39.59±4.0）%,（34.58±3.7）%,（37.02±3.0）%;苯甲酰乌头原碱的蛋白结合率分别为（48.23±4.6）%,（33.26±3.9）%,（32.60±3.8）%。结论 超滤法结合HPCE技术可作为一种新型药物蛋白结合率测定的方法。     

川芎药材HPLC法指纹图谱的研究

目的建立川芎药材RP-HPLC指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法以0.3%磷酸(pH3.0)-乙腈为流动相进行梯度洗脱。检测波长284nm,色谱柱为Phenomenex C18,柱温为30℃,流速为0.8mL.min-1。结果确立了川芎指纹图谱的HPLC分析条件,并对不同产地川芎指纹图谱的相似度进行了分析,共有指纹峰12个,其中3号峰为阿魏酸,川芎药材的相似度大于0.9。结论采用HPLC法建立川芎药材指纹图谱,方法重现性好,可靠、简便,为提高川芎质量控制标准提供参考。     

高效毛细管电泳法测定血浆中肝素含量及临床应用

采用硼砂电泳缓冲体系的胶束动电毛细管电泳法（ＭＥＣＣ），非涂渍毛细管（３０ｃｍ×５０μｍ），电压２０ｋＶ，外标法定量，检测波长２７０ｎｍ。血浆中肝素含量在８０～７０００Ｕ／Ｌ之间呈良好线性关系，最低检测限２５Ｕ／Ｌ。低、中、高３种样品液的平均回收率分别为９５．６％、９７．５％、９８．７％。批内与批间相对标准偏差分别小于３．５％和５％。同时用ＭＥＣＣ法和凝血酶法检测１批血样，结果相似。此法适合于肝素含量高的血样检测。     

高效毛细管电泳法同时测定4种喹诺酮类药物

用高效毛细管电泳法分离测定４种喹诺酮类药物，盐酸洛美沙星，依诺沙星，盐酸环丙沙星，氧氟沙星，用５０ｍｍｏｌ／Ｌ硼砂－磷酸盐缓冲液（ｐＨ８．５）运行电压１８ｋＶ２１４ｎｍ检测，压差法进样１０ｃｍ，１０ｓ，以咖啡因为内标定量，线性范围分别为：氧氟沙星和盐酸环丙沙星２０～１００ｍｇ／Ｌ，依诺沙星２４～１２０ｍｇ／Ｌ盐酸洛美沙星２０．８～１０４ｍｇ／Ｌ。峰面积之比与样品浓度线性回归，ｒ〉０．９９９５，最低     

落新妇苷在小鼠体内的组织分布

目的 建立落新妇苷组织浓度的高效毛细管电泳分析方法,并对其在小鼠体内的组织分布进行测定.方法 高效毛细管电泳之胶束电动模式测定小鼠尾静脉注射30 mg/kg落新妇苷后不同时间点各组织中药物含量.结果 落新妇苷在组织器官的浓度分布特点是:C心＞C肝＞C肾＞C脾＞C肺＞C脑.心脏组织C5min＞C15min＞ C60min,自5 min浓度达峰后呈缓慢递减趋势,C60min仍保持较高浓度.其他组织C15min达峰,肝脏在C15min至C60mm均保持较高药物浓度,C60 min在各组织中浓度最高.60 min内脑组织含有较稳定药物含量.结论 落新妇苷在小鼠体内分布广泛,心、肝、肾保持较高组织浓度,且能够穿越血脑屏障分布到脑组织中.     

甲壳低聚糖的制备和分析

解决壳聚精的水不溶性,拓宽壳聚精的应用范围。方法：直接用过氧化氢对高分子量、高脱乙酸化度的壳聚糖进行非均相降解、制备了水溶性甲壳低聚糖产品,对产品进行红外光谱结构表征,并用高效毛细管电泳测定了寡糖的聚合度。探讨了温度、过氧化氢浓度对降解所需时间、产品得率及甲壳低聚糖聚合度的影响。结果：选择降解温度 ８０℃～９０℃,过氧化氢浓度 ８％～１０％时,水解时间０．５ ～１．０ ｈ,水溶性产品得率为 ４０％～４５％,聚合度为３～７的寡糖占水解产物的３６％～５０％。结论：该方法制备甲壳低聚糖是可行的。如进一步研究工艺条件,有望进行工业化生产。     

川芎中洋川芎内酯A和Z-蒿本内酯的HPLC法测定

建立了HPLC法测定川芎药材中的洋川芎内酯A和Z-蒿本内酯.采用Zorbax SB-C_(18)色谱柱,以乙腈-1%乙酸为流动相,梯度洗脱,检测波长280 nm.洋川芎内酯A和Z-蒿本内酯在0.048 8～2.44mg/ml和0.0409～2.05mg/ml浓度范围内线性关系良好.回收率为98.77%和99.05%,RSD为0.83%和1.10%.     

毛细管电泳手性拆分西他沙星异构体

目的:建立西他沙星及其异构体高效毛细管电泳拆分的新方法。方法:以β-环糊精及几种环糊精衍生物作为手性添加剂,采用毛细管电泳分离新型抗菌素西他沙星与其3个异构体。对运行缓冲液的浓度、pH,环糊精的种类、二元环糊精体系中环糊精的比例,分离电压,柱温,有机改性剂等因素对分离的影响进行考察,并对拆分机制进行初步探讨。结果:运行缓冲液为含2%硫酸化-β-环糊精和1%β-环糊精的25 mmol.L-1的磷酸二氢钾-磷酸缓冲溶液(pH 2.5),操作电压为-25kV,柱温为25℃,检测波长为295 nm,西他沙星与其3个异构体达到良好分离。结论:所建立的毛细管电泳方法简便,适用于西他沙星异构体的检查。