应用PCR检测载脂蛋白E表型

为探讨壮族人群载脂蛋白E（apoE）基因与冠心病之间的内在联系，应用FCR方法检测158例壮族健康人群和53例临床确诊的壮族冠心病患者apoE表型和等位基因频率分布，结果健康人群等位基因频率分布是ε20.108、ε3．813、ε40．079，冠心病组为ε20．076、ε30．792、ε40.132。冠心病患者中E4/3频率明显高于健康人群（P＜0．01），提示ε4可能是冠心病的遗传易患因子。     

载脂蛋白E外显子4基因多态性与Alzheimer‘s病

探讨了载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）外显子４基因多态性与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ‘ｓ病的关系。应用聚合酶链反应扩增ａｐｏＥ外显子４基因片段，对扩增片段用ＨｈａⅠ酶切消化后进行基因分型，并用ＤＮＡ测序技术对分型结果予以证实，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ病组与年龄匹配对照组在ａｐｏＥ外显子４ε３／４基因型频率和ε４等位基因频率分布上的差异有显著性（ｘ＾２＝８．９１，Ｐ〈０．０５，Ｘ＾２＝９．４９，Ｐ〈０．０１），Ａｌｚｈ     

PCR-SSCP法检测冠心病患者载脂蛋白E基因多态性

目的：建立聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测冠心病患者载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）-基因多态性,研究我国汉族冠心病（ＣＨＤ）患者载脂蛋白Ｅ基因多态性 及其对血脂水平的影响。方法：建立ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术,测定９０例ＣＨＤ患者及１００例相应年龄的健康者ａｐｏＥ基因多态性,同时测定研究对象６项血脂指标。结果：ＣＨＤ患者ａｐｏＥ４等位基因频率显著高于对照组（０．１１１比０．０６,Ｐ〈０．０５）     

聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测载脂蛋白E基因型

目的建立一种简便、准确、实用的人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型的检测方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增ａｐｏＥ基因含编码１１２位和１５８位氨基酸的基因序列，扩增产物用限制性内切酶ＨｈａⅠ酶切，聚丙烯酰胺凝胶电泳后，观察酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＩＰ）图谱。结果运用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法检测了１１３名健康人ａｐｏＥ基因型，频率分别为ε３／３６９．０％，ε３／２１６．８％，ε４／３１１．５％，ε４／２１．８％，ε４／４０．９％；ε２、ε３和ε４等位基因频率分别是９．３％、８３．２％和７．５％。结论该方法简单、快速、准确，对人体无害，适合于一般实验室开展及大规模人群调查     

载脂蛋白B基因位点多态性与冠心病关系的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增技术对载脂蛋白（ａｐｏ）Ｂ基因点３＇端可变数目串联重复位点（ＶＮＴＲ）作快速而准确分型。研究了该位点多态性与冠心病之间关系，与相关疾病及正常对照组作了比较。在２５３例中，各组的ａｐｏＢ基因位点呈现不同的基因带型。扩增片段大小为５５２～１１２８ｂｐ。冠心病组发现有１５个ａｐｏＢ等位基因，正常人群组有１２个等位基因。ａｐｏＢ３＇端ＶＮＴＲ的基因频率分布为０．００１～０．４     

载脂蛋白B基因位点多态性与冠心病关系的研究

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增技术对载脂蛋白（ａｐｏ）Ｂ基因点３＇端可变数目串联重复位点（ＶＮＴＲ）作快速而准确分型。研究了该位点多态性与冠心病之间关系，与相关疾病及正常对照组作了比较。在２５３例中，各组的ａｐｏＢ基因位点呈现了不同的基因带型。扩增片段大小为５５２～１１２８ｂｐ。冠心病组发现有１５个ａｐｏＢ等位基因，正常人群组有１２个等位基因。ａｐｏＢ３＇端ＶＮＴＲ的基因频率分布为０．００１～０．４３，杂合度为４１．９％～８０．０％。急性心肌梗塞组中８０８ｂｐ等位基因的检出率明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。同时研究了冠心病组ａｐｏＢ基因与血清脂类、脂蛋白及载脂蛋白Ａ１、Ｂ水平之间的关系。     

载脂蛋白E多态性研究的方法学进展

人载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）具有明显的遗传多态性，三种常见的等位基因（ε２，ε３，ε４）分别编码三种主要异构体（Ｅ２，Ｅ３，Ｅ４）。ａｐｏＥ多态性不仅是心血管疾病的一种重要易患因素，而且与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病及老化密切相关，目前国内外检测ａｐｏＥ多态性的方法主要有两类：一类以极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）或血清为样品检测ａｐｏＥ蛋白表型，另一类以ＤＮＡ为样品检测ａｐｏＥ基因型，本文仅对ａｐｏＥ基因结构与多     

痴呆病人ApoE基因检测与多态性分析

目的研究痴呆病人与载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）等位基因之间的关系。方法对３０例老年性痴呆（ＡＤ）患者和２５例多发梗死性痴呆患者的ＡｐｏＥ基因进行检测,确定基因型,计算基因频率,验证ＡｐｏＥ与ＡＤ的相关性。结果ＡＤ病人基因型以ε３／４最多,ε３／３型次之;血管性痴呆（ＶＤ）病人以ε３／３型最多,ε２／３次之;从等位基因频率看,ＡＤ病人及ＶＤ均以ε３型等位基因频率最高,ＡＤ病人ε４等位基因频率显著高于ＶＤ病人及正常人群, ＶＤ各型基因频率与上常人群无差别。结论 ＡｏｐＥ基因频率分布在ＡＤ与 ＶＤ及正常人群之间存在异质性,ε４等位基因是ＡＤ的主要危险因素。     

载脂蛋白E4等位基因是冠心病独立危险因素

选择参加巴尔的摩寿命纵向研究的７３０例为观察对象，其中男４２１例，女３０９例，年龄５２±１７岁，均无冠心病病史。应用比例风险回归模型分析危险因素与冠心病之间的关系。结果共检出２００例２７％载脂蛋白Ｅ４ａｐｏＥ４等位基因，其中杂合子１８３例，纯合子１７例。有无ａｐｏＥ４受试者的冠心病其他危险因素相仿。全组７３０例中１０４例１４％发生冠心病，其中男性随访２０年发生率为１８％，女性随访１３年为９％；具有ａｐｏＥ４等位基因者发生冠心病的比率４０例，２０％显著大于无此基因者６４例，１２％，Ｐ＜０．０５。多…     

载脂蛋白E基因多态性检测技术的对比性研究

目的建立并比较载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）基因多态性检测技术,为ＡｐｏＥ基因分型提供良好的方法。方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）和ＰＣＲ单链构象多态性（ＳＳＣＰ）检测技术对１１０例患者及相同人数的正常人进行ＡｐｏＥ基因型检测和分析。结果应用ＲＦＬＰ、ＳＳＣＰ技术测得正常对照组：ε２／２（０,０．０２０）,ε３／３（０．７００,０．７６０）,ε４／４（０,０．０４０）,ε２／３（０．１００,０．０６０）,ε２／４（０,０．０２０）,ε３／４（０．２００,０．１００）,ε２（０．０５０,０．０６０）,ε３（０．８５０,０．８４０）,ε４（０．１００,０．１００）。经χ２检验,ＡｐｏＥ基因型频率和等位基因频率的差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。上两种检测技术与既往两种检测技术（ＩＥＦ,ＷｅｓｔｅｒｐＢｌｏｔｉｎｇ）的结果经χ２检验,其ＡｐｏＥ等位基因频率的差异也无显著意义（Ｐ＞０．０５）,均符合中国汉族人ＡｐｏＥ基因频率分布。结论ＰＣＲＲＦＬＰ方法是一种稳定可靠的ＡｐｏＥ基因多态性分析方法,多重ＰＣＲＳＳＣＰ技术更加简便有效,使ＡｐｏＥ基因多态性的研究更加完善。     

载脂蛋白B基因MspI多态性分析及其临床应用

为研究载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因多态性与冠心病的关系，应用ＰＣＲ检测９０例冠心病患者和１２０例健康人ａｐｏＢＭｓｐＩ酶切位点的限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）。结果产生三种基因型：Ｍ＋Ｍ＋、Ｍ＋Ｍ－、Ｍ－Ｍ－，冠心病组等位基因Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９２、０．０８；对照组Ｍ＋、Ｍ－频率分别为０．９８、０．０２，少见等位基因Ｍ－的频率在冠心病组显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），但两组各基因型之间的血脂、脂蛋白、载脂蛋白水平均无显著性差异。提示ａｐｏＢ基因该位点的多态性可能与冠心病的发病有关，但与血浆脂质及载脂蛋白的关系不明显     

载脂蛋白E多态性与动脉硬化脑梗塞关系的研究

载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）由２９９个氨基酸残基组成，分子量３４２０ＫＤ，是一种多功能糖蛋白，在脂类运输及调节脂蛋白和脂类代谢过程中起作用。ａｐｏＥ基因位于１９号染色体长臂（１９ｑ１３）上〔１〕，基因位点存在多态性，有３种常见的等位基因ε２、ε３、ε４，...     

江苏地区汉族人载脂蛋白E基因型及等位基因频率分布

载脂蛋白Ｅ(ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＥ ,ａｐｏＥ)作为高亲和力的配体 ,与ａｐｏＥ受体及ＬＤＬ受体结合 ,介导含ａｐｏＥ脂蛋白的细胞吞饮和降解 ,在脂质代谢中起重要作用。动物实验证实ａｐｏＥ在清除致动脉粥样硬化脂蛋白残基中起作用[1] 。文献报道ａｐｏＥ多态性与冠心病、阿尔茨海默病等存在密切联系。我们采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性技术 ,研究江苏地区汉族健康人群载脂蛋白Ｅ基因型及等位基因频率分布 ,并与国内外不同人群比较其分布特征 ,为研究ａｐｏＥ与上述疾病的关系提供遗传学背景。报告如下。1　对象与方…     

免疫印迹法测定血清载脂蛋白E的表型

介绍一种免疫印迹法测定载脂蛋白Ｅ表型。通过唾液酸酶处理血清、脱脂、等电聚焦电泳和免疫印迹得到ａｐｏＥ表型图谱。本法主要特点是：（１）用唾液酸酶消化处理，减轻唾液酸型ａｐｏＥ的干扰；（２）使用宽ｐＨ范围（ｐＨ４～８）的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳，适用于分离包括Ｅ＿５、Ｅ＿７的所有ａｐｏＥ表型；（３）利用ａｐｏＥ多克隆抗血清与Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ￣ＲＡＢＣ试剂盒，使免疫显色更为敏感，从而使血清标本的用量减少到０．１～０．２μｌ就可清晰分辨ａｐｏＥ表型。本法适用于人群调查。     

老年冠心病患者载脂蛋白（α）多态性研究

目的：探讨载脂蛋白（α）〔ａｐｏ（α）〕表型分布特点及脂蛋白〔Ｌｐ（α）〕与老年冠心病的关系。方法：对１０４例老年冠心病（ＣＨＤ）患者（陈旧性心肌梗塞３１例，稳定型心绞痛３８例，冠心病心律失常２０例，心力衰竭１５例）进行了血清ａｐｏ（α）异构体多态性表型和血清Ｌｐ（α）及血脂水平检测，并与６８例健康老年人对照分析。结果：ＣＨＤ组Ｌｐ（α）和血脂水平明显高于对照组（Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１），检出１１种不同ａｐｏ（α）表型，其检出率ＣＨＤ组为８２．７％，对照组为７５．０％，ａｐｏ（α）低分子表型ＣＨＤ组明显高于对照组（３１．７％比１６．２％，Ｐ＜０．０５）。回归分析显示ａｐｏ（α）表型分子量与Ｌｐ（α）水平呈显著负相关（ＣＨＤ组ｒ＝－０．９０９１，对照组ｒ＝－０．９４７９，Ｐ＜０．０５）。结论：ａｐｏ（α）表型是Ｌｐ（α）水平的主要决定因素，其低分子量表型在临床上比Ｌｐ（α）水平更具有重要参考价值。     

载脂蛋白E基因对血脂代谢的调节及其与脑梗塞的关系

应用改良的聚合酶链反应－限制性片段长度多态性的方法，测定了１０２例正常人和６８例脑梗塞者的载脂蛋白Ｅ（ａｐｏＥ）基因型，并分析了两组受试者的血脂、脂蛋白和载脂蛋白Ｂ（ａＰＯＢ）水平的差别，以及该基因对上述脂质参数的影响。结果显示，ａｐｏＥ４等位基因有升高血总胆固醇（ＴＣ）、低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－ｃｈ）和ａｐｏＢ水平的作用，而ａｐｏＥ２位基因则有相反的作用。后者的频率在脑梗塞组高于对照组。提示，ａｐｏＥ对个体的血脂水平有明显的调节，ａｐｏＥ２等位基因携带者患脑梗塞的危险性增加。     

血脂正常的冠心病患者血清载脂蛋白AⅠ、B_（100）检测的临床意义

目的探讨血脂正常的冠心病患者血清载脂蛋白水平及其检测的临床意义。方法检测３９例血清总胆固醇（ＴＣ）及甘油三酯（ＴＧ）均正常的冠心病患者血脂、脂蛋白及载脂蛋白（ａｐｏ）ＡＩ、Ｂ１００水平，并与４１例健康人作了比较。组内差别用ｔ检验，相关性比较用直线回归分析。结果ＨＤＬ－Ｃ、ａｐｏＡｌ含量及ａｐｏＡＩ／ａｐｏＢ１００比值显著低于健康人，差异显著至极显著（Ｐ＜０．０５～ｐ＜０．００１），ａｐｏＢ１００显著高于健康人，差异显著（Ｐ＜０．０５）。冠心病患者ＴＣ、ＴＧ及ＬＤＬ－Ｃ与ａｐｏＢ１００存在密切正相关。结论血清３ｐｏＢ１００含量升高、ａｐｏＡＩ含量及ａｐｏＡＩ／ａｐｏＢ１００比值降低是预测冠心病危险的最敏感、最准确的指标之一，特别是对血脂正常、无动脉硬化体征的冠心病患者。     

广西百色地区壮、汉两民族冠状动脉粥样硬化性心脏病患者载脂蛋白E的基因多态性

目的:分析广西百色地区壮、汉两民族冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者载脂蛋白E基因多态性与冠心病的关系。方法:①分组:冠心病组94例,其中壮族42例,汉族52例,均为右江民族医学院附属医院心内科2005-08/2006-08的住院冠心病患者。全部符合1979年世界卫生组织修订的冠心病诊断标准。对照组100例中壮族50例,汉族50例,均为同期住院的非冠心病患者,并排除心脑血管疾病及肝、肾、内分泌等影响脂质代谢的疾病。②方法:用酚氯仿抽提核酸法从凝血块中分离,用多聚酶链式反应,Hhal内切酶消化法进行载脂蛋白E基因多态性检测。结果:所有受试者完成测试并进入结果分析,无脱落者,DNA抽提均成功。①载脂蛋白E的基因型频率:对照组中壮族人群的E2/2和E2/3基因型频率明显高于汉族人群(P<0.05),而E3/4基因型频率却明显低于汉族人群(P<0.05);壮族对照组E2/2和E2/3基因型频率明显高于壮族冠心病组(P<0.05);而E3/4基因型频率明显低于壮族冠心病组(P<0.05);汉族对照组E2/3基因型频率明显高于汉族冠心病组(P<0.05);壮族冠心病组的E2/2基因型频率明显高于汉族冠心病组。②载脂蛋白E等位基因频率:壮族对照组载脂蛋白Eε2等位基因频率明显高于汉族对照组(0.239±0.216,0.101±0.169,P<0.05),ε3和ε4等位基因频率与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。壮族和汉族冠心病组ε2等位基因频率明显低于相应对照组(P<0.05),ε4等位基因频率明显高于相应对照组(P<0.05)。冠心病组中壮、汉两个民族载脂蛋白E之ε2,ε3和ε4等位基因频率差异无显著性(P>0.05)。结论:广西壮族自治区百色地区壮、汉两民族冠心病人群中载脂蛋白E基因多态性(ε2等位基因缺失)为冠心病的危险因子之一。     

66例老年冠心病患者脂蛋白分析

目的 探讨老年冠心病（ＣＨＤ）患者的脂蛋白特点。方法 取健康老年组与ＣＨＤ组做对照，分别做血清十项指标检测。包括ＴＣ，ＴＧ用酶法测定，ＨＤＬ－Ｃ．ａｐｏＡ．Ｂ．ＣⅡＣⅢ．Ｅ及Ｌｐ（ａ）用免疫比浊法测定。ＬＤＬ－Ｃ依据公式计算。结果 健康老年组与ＣＨＤ组比较，ＴＣ．ＴＧ．ＨＤＬ－Ｃ．ＬＤＬ－Ｃ．ａｐｏＡ，ａｐｏＢ，Ｐ〈０．００１；ａｐｏＣⅡ，Ｐ〈０．０１。ＴＧ．ＴＣ分别与ａｐｏＣⅡ．ａｐｏＣⅢ极相关     

应用聚合酶链反应研究载脂蛋白B基因多态性及其临床意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１００例正常人及１０３例冠心病人载脂蛋白Ｂ（ａｐｏＢ）基因ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＩ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ＿Ｓ）研究表明：（１）此两个位点上少见等位基因（Ｘ￣＋和Ｅ￣－）相对频率在冠心病组中均明显高于正常对照组，提示这些基因多态性与冠心病发病有一定关联。（２）ＸｂａＩ位点上具Ｘ￣＋Ｘ￣－基因型含血浆ＨＤＬ—Ｃ水平明显低于相应的Ｘ￣－Ｘ￣－基因型者，可能为Ｘ￣＋等位基因与冠心病关联的机理之一。（３）ＸｂａＩ和ＥｃｏＲＩ两位点的多态性间无连锁不平衡，推测这些位点的多态性以各自独立的方式影响动脉粥样硬化的形成。（４）ＰＣＲ方法用于ａｐｏＢ基因多态性的研究具有简便、敏感、重复性好、可判性强等优点，值得推广应用。