Toll样受体4配体的研究进展

Toll样受体4(TLR4)是TLR超家族的一员,主要识别细菌内毒素、革兰阴性菌细胞壁成分脂多糖和脂寡糖等物质,防止微生物入侵。TLR4被配体激活后可产生促炎症细胞因子和炎症趋化因子,调节天然免疫反应,但其异常调节会引发自身免疫性疾病。本文综述了TLR4的生物结构和配体识别机制和近几年对TLR4有调节作用的脂质A类似物、天然产物和合成小分子化合物的研究进展,讨论了配体的构效关系和复合物中配体-受体与蛋白质-蛋白质相互作用。     

肝细胞癌组织中Fas抗原表达和分布的初步研究

目的 探讨肝细胞癌(HCC)组织中的Fas抗原的表达和分布。方法 采用抗-Fas多克隆抗体,以免疫组化法检测24例HCC患者尸解的肝癌组织。结果 肝癌及其癌旁组织中Fas抗原检出率分别为41.7％(10/24)和83.3％(20/24);癌组织中Fas抗原表达强度显著低于癌旁组织。结论 Fas抗原在HCC组织中有表达,并可以介导肝癌细胞凋亡。     

人肝细胞肝癌组织中CLDN1和CLDN4的表达差异及其作用分析

目的探讨紧密连接蛋白CLDN1和CLDN4在人肝细胞肝癌(human hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其意义。方法郑州大学第一附属医院2010年至2011年手术切除的HCC组织标本60例和正常肝组织50例,采用免疫组织化学二步法分别检测CLDN1和CLDN4的表达。结果 CLDN1和CLDN4在HCC组织中的阳性表达率分别为70%(42/60)和25%(15/60),两者的表达与患者年龄、性别、血液AFP浓度无关(P>0.05),与肿瘤分化程度无关(P>0.05)。CLDN1和CLDN4在HCC中的表达具有相关性(r=0.533,P<0.05)。CLDN1在正常肝组织中无表达(0/50),CLDN4在正常肝组织中高表达(50/50)。两者在正常肝组织中的表达具有明显差异(P<0.05)。结论肝细胞肝癌中存在CLDN1和CLDN4的异常表达,CLDN1在HCC中表达上调,而CLDN4在HCC中表达下调,两者表达具有相关性(r=0.533,P<0.05)。推测CLDN1表达上调和CLDN4表达下调能够促进肝细胞肝癌的发生发展。     

叶酸受体在原发性肝癌组织中的表达及其意义

目的 研究原发性肝癌组织中叶酸受体(FR)的表达情况,探讨其与肿瘤临床和病理特征的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测原发性肝癌(45例)、肝硬化(32例)及正常肝(20例)组织中FR-α和FR-β的表达情况,分析原发性肝癌组织FR-α表达与临床病理特征的关系.结果 88.9％ (40/45)的原发性肝癌组织表达FR-α,18.8％ (6/32)肝硬化组织中表达FR-α,而正常肝组织中未见FR-α表达.而在原发性肝癌及肝硬化组织中均无FR-β表达,20例正常肝组织中3例有FR-β表达.原发性肝癌组织FR-α表达与患者性别、年龄等因素无相关性,但早一中期患者阳性表达高于进展期患者.结论 原发性肝癌组织广泛高表达FR-α,这为早期诊断及靶向药物治疗奠定了基础.     

KLF4在肝细胞癌中的异常表达

目的探讨Kruppel样因子4（Kruppel-like factor4,KLF4）与肝细胞癌（Hepatocellular carcinoma,HCC,简称肝癌）发生和发展的关系。方法应用免疫组织化学技术检测KLF4在人正常肝组织、肝硬化组织及肝癌组织中的异常表达,分析KLF4与肝癌发生的可能分子生物学机制。结果免疫组织化学方法证明KLF4在肝癌组织中呈现蛋白质水平的低表达。结论 KLF4作为抑癌基因在肝癌的发生发展中起到相当重要的作用。     

肝细胞癌与癌周细胞Fas抗原及其配体的表达

目的　探讨Fas系统在肝细胞癌免疫逃逸及免疫反击中的作用。方法　采用间接免疫荧光流式细胞术检测 2 0例肝细胞癌病人的肿瘤细胞和癌周肝细胞Fas抗原及其配体的表达水平。结果　肿瘤细胞Fas及其配体的表达水平分别为 31.72± 12 .74和 7.14± 6 .6 8,癌周细胞分别为 2 3.85± 8.36和 4.13± 3.82 ,肿瘤细胞与癌周细胞相比Fas与Fas配体的表达水平均显著上调 (P <0 .0 1)。结论　下调Fas表达的免疫逃逸机制在肝细胞癌不起主要作用 ,通过Fas系统介导免疫活性细胞凋亡的“Fas反击”机制可能在肝细胞癌具有重要作用。     

ILK与VEGF在肝细胞癌中的表达及相互关系

目的研究整合素连接激酶（integrin-linked kinase,ILK）、血管内皮细胞生长因子（Vascular endothelial growth factor,VEGF）在肝细胞癌中的表达,探讨它们之间的相互关系及与肝细胞癌病理分级的关系和临床意义。方法应用免疫组化方法检测ILK、VEGF在55例肝细胞癌及20例正常肝细胞中的表达,分析它们的表达情况与肝细胞癌病理分级的关系以及各指标之间的相互关系。结果 ILK与VEGF在肝细胞癌中均表达,且表达率随着肝细胞癌病理分级的上升而呈上升趋势（P〈0.05）,两者之间存在明显的正相关性。结论 ILK与VEGF在肝细胞癌中均为高表达,在其发生发展中起重要作用,有望为肝细胞癌的靶向治疗提供新的途径。     

川芎嗪对大鼠动脉粥样硬化形成中Toll样受体4表达的影响

目的 观察川芎嗪(TMP)对大鼠动脉粥样硬化(AS)形成的抑制作用及其可能机制.方法 雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、TMP 20 mg/kg和40 mg/kg组.用维生素D3和高脂饲料喂养,诱导AS的形成,4周后,腹腔注射TMP,第8周后检测大鼠主动脉AS形成情况,计算斑块面积占血管断面总面积的百分比,并用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测主动脉弓Toll样受体(TLR4)的表达水平.结果 与模型组比较,TMP 2个剂量组AS斑块面积占血管断面总面积的百分比、主动脉弓TLR4表达量均显著降低,且有剂量依赖性.结论 TMP具有抗动脉粥样硬化作用,其抑制动脉壁TLR4的表达可能是其作用机制之一.     

肝细胞癌组织中TGF-β1基因mRNA和蛋白表达的研究

目的　从转录和翻译两个水平探讨转化生长因子 β1(TGF β1)在肝细胞癌 (HCC)中的表达。方法　用免疫组化技术 ,分别检测 36例肝癌组织和癌旁肝组织中TGF β1及转化生长因子 β1Ⅱ型受体 (TβRⅡ )蛋白的表达 ;用原位杂交方法检测 2 6例肝癌组织和癌旁肝组织中TGF β1mRNA的表达 ,并将TGF β1蛋白与TGF β1mRNA ,TGF β1mRNA与TβRⅡ蛋白进行比较。 结果　 (1)肝癌组织中TGF β1mRNA、TGF β1蛋白表达均明显高于癌旁组织 (P <0 0 1) ;肝癌组织TβRⅡ蛋白表达明显低于癌旁组织 (P <0 0 1)。 (2 )肝癌组织中TGF β1mRNA与TGF β1蛋白呈正相关 ,TGF β1mRNA与TβRⅡ蛋白表达呈负相关。 结论　肝癌组织中TGF β1基因的变化发生在多个水平 ;TGF β1在肝癌发生中发挥重要作用 ;TGF β1抑制作用的减弱主要是由于TβRⅡ蛋白表达减弱引起。本研究为肝癌发病机制和基因治疗提供理论依据。     

颅脑损伤病儿血清血凝素样氧化低密度脂蛋白受体、Toll样受体4表达水平及临床意义研究

目的 检测颅脑损伤病儿血清血凝素样氧化低密度脂蛋白受体（LOX-1）、Toll样受体4(TLR4)表达水平,探讨二者与颅脑损伤病儿发病的关系。方法 选取2020年1—12月在南京市儿童医院就诊的颅脑损伤病儿82例作为研究对象;另选取同时期保健科体检的90例健康儿童作为对照组。颅脑损伤病人出院后6个月,根据治疗结果格拉斯哥预后量表（GOS）评定,分为预后不良组33例和预后良好组49例。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测所有受试者病儿血清LOX-1、TLR4表达水平,经Pearson法分析颅脑损伤病儿血清LOX-1、TLR4的相关性,受试者操作特征曲线（ROC曲线）分析LOX-1、TLR4水平对颅脑损伤病儿预后不良的预测价值;logistic回归分析影响颅脑损伤病儿预后不良的有关因素。结果 与对照组[（3.13±0.97）μg/L、（0.52±0.11）μg/L]相比,颅脑损伤病儿血清LOX-1[(13.24±1.69)μg/L]、TLR4表达水平[（8.83±1.57）μg/L]升高（P<0.05）;预后不良病儿（功能受限、活动受限）血清LOX-1[(16.31±2.30)μg...     

叶酸受体α在原发性肝癌组织及细胞中的表达

目的研究原发性肝癌组织和细胞中叶酸受体仅的表达情况,探讨其与肿瘤临床和病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测原发性肝癌组织及细胞、肝硬化组织及正常肝组织中表达叶酸受体d的情况,分析原发性肝癌组织叶酸受体α表达与临床病理特征的关系。结果原发性肝癌组织中叶酸受体α表达率为88．9％（40／45）,肝硬化组织为18．8％（6／32）,正常肝组织中无叶酸受体仅表达（0／20）。原发性肝癌组织叶酸受体α表达与患者性别、年龄等因素无相关性,但进展期患者阳性表达高于早一中期患者。结论原发性肝癌组织广泛高表达叶酸受体α,这为早期诊断及靶向药物治疗奠定了基础。     

干燥综合征患者外周血淋巴细胞Toll样受体4CD14的表达

目的探讨干燥综合征(SS)患者外周血淋巴细胞Toll样受体(TLR)4、CD14的表达。方法分别采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和流式细胞仪检测TLR4、CD14mRNA和蛋白的表达。结果 SS患者外周血单个核细胞TLR4、CD14mRNA和蛋白的表达均高于对照组(P<0.05);初发组TLR4、CD14mRNA和蛋白表达水平明显高于缓解组(P<0.05);复发组TLR4、CD14mRNA和蛋白表达水平与缓解组相比明显增高(P<0.05);复发组TLR4、CD14mRNA和蛋白表达水平与初发组相比无统计学意义(P>0.05)。结论①SS患者外周血淋巴细胞高表达TLR4和CD14,且与病情活动相一致;②脂多糖(LPS)-TLR4信号传导途径参与了SS的发病机制。     

Toll样受体4及肝细胞生长因子水平与急性肾损伤病变程度的关系

目的 观察血清及肾组织中Toll样受体4（TLR4）、肝细胞生长因子（HGF）水平与急性肾损伤病变程度的关系。方法 上海市松江区中心医院肾内科2015年5月至2017年5月收治的90例急性肾损伤患者根据疾病分期不同,分为A组33例（急性肾损伤Ⅰ期）、B组29例（急性肾损伤Ⅱ期）、C组28例（急性肾损伤Ⅲ期）。分别取患者静脉血及穿刺活检肾组织,检测血清及肾组织中TLR4、HGF的表达情况,并以急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅲ（APACHE Ⅲ）分析其与急性肾损伤病变程度的相关性。结果 C组血清TLR4、HGF水平高于B组、A组,B组TLR4、HGF水平高于A组,差异均有统计学意义（P<0.05）。3组肾组织中TLR4、HGF阳性表达率差异有统计学意义（P<0.05）;B组、C组TLR4、HGF阳性表达率高于A组,C组TLR4、HGF阳性表达率高于B组,差异均有统计学意义（P<0.017）。TLR4、HGF水平随肾损伤病变程度的加重而升高,TLR4与APACHE Ⅲ评分呈正相关（r=0.942,P<0.05）,HGF与APACHE Ⅲ评分呈正相关（r=0.926,P<0.05）。结论 不同分期急性肾损伤患者血清及肾组织中TLR4、HGF水平存在差异。TLR4、HGF与急性肾损伤病变程度呈正相关。     

Toll样受体 2、Toll样受体 4 mRNA和蛋白在急性出血坏死性胰腺炎肝损伤中的表达及意义

目的 探讨Toll样受体2(TLR2)、TLR4信使核糖核酸(mRNA)和蛋白在急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)肝损伤中的表达及意义.方法 2019年6月至12月选取健康SD大鼠(郑州大学实验动物中心)60只为研究对象,采用随机数字表法分为模型组和对照组,每组30只,同时模型组和对照组再随机分为3 h组、6 h组和12 h组各10只.模型组采用牛磺胆酸钠建立AHNP模型,对照组注射生理盐水,检测各组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和淀粉酶,qRT-PCR和Western blotting检测肝脏组织TLR2、TLR4 mRNA和蛋白表达,HE染色观察肝脏组织.结果 模型组造模后3 h组、6 h组和12 h组血清ALT[(170.02±32.21)U/L、(310.01±80.02)U/L、(720.11±112.28)U/L]、AST[(450.13±100.21)U/L、(980.12±132.21)U/L、(1100.32±145.03)U/L]和淀粉酶[(7099.27±1209.02)U/L、(11010.19±1200.01)U/L、(17003.21±2007.82)U/L],肝脏组织TLR2和TLR4 mRNA及蛋白相对表达量[TLR2 mRNA(0.962±0.201)、(1.201±0.223)、(1.501±0.212),TLR2蛋白(0.713±0.091)、(1.102±0.100)、(1.343±0.121);TLR4 mRNA(1.701±0.332)、(2.011±0.350)、(2.562±0.313),TLR4蛋白(1.210±0.170)、(1.446±0.182)、(1.788±0.190)]均逐渐增高(P<0.001),且均明显高于对照组[ALT(84.40±14.92)U/L、(85.50±15.20)U/L、(84.19±14.49)U/L;AST(170.02±20.01)U/L、(168.82±21.14)U/L、(171.14±20.11)U/L;淀粉酶(1102.00±183.29)U/L、(1154.49±190.04)U/L、(1160.03±186.27)U/L;TLR2 mRNA(0.030±0.010)、(0.031±0.011)、(0.029±0.009),TLR2蛋白(0.021±0.008)、(0.020±0.009)、(0.022±0.010);TLR4 mRNA(0.882±0.181)、(0.880±0.170)、(0.883±0.179),TLR4蛋白(0.961±0.192)、(0.967±0.181)、(0.966±0.180)](P<0.001).肝组织TLR2、TLR4 mRNA表达与血清ALT、AST和淀粉酶呈正相关(P<0.05),TLR2、TLR4蛋白表达与血清ALT、AST和淀粉酶呈正相关(P<0.05);模型组造模3 h后可见肝细胞气球样变性,6 h后炎性细胞浸润汇管区,小叶周边细胞发生嗜酸性变性,12 h后出现大片状出血坏死及灶性坏死.结论 TLR2、TLR4 mRNA和蛋白在AHNP肝损伤组织中的表达升高,可能在肝脏损伤过程中有重要作用.     

PPARγ在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ( PPARγ)在肝细胞癌(HCC)中表达的临床意义.方法 半定量RT-PCR法、免疫组织化学法检测34例患者HCC组织及相对应的癌旁组织的PPARγ表达,结合临床特征行统计学分析.结果 79.4% (27/34)HCC组织PPARγ mRNA表达高于癌旁组织.PPARγ蛋白在HCC组织中均呈阳性表达,表达在胞浆和(或)胞核中;而癌旁组织为阴性或弱阳性表达,为胞浆染色.阳性表达分级之间存在显著差异,χ2=39.62,P＜0.05.PPARγ mRNA表达水平与蛋白表达分级与HCC大小、包膜完整、高转移复发倾向和HBV感染及肝硬化背景密切相关(P＜0.05);但与患者年龄、性别、Okuda分期、pTNM分期、组织分化程度、AFP阳性和随访转移结果无关.PPARγ mRNA及蛋白高表达均与患者的总生存期负相关.结论 PPARγ在HCC中过表达,与HCC的发展可能有关,可能作为判断HCC预后的一种预测性指标.     

HIF-α、VEGF 和 DLL4在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的：探讨 Delta 样配体4（ Delta-like ligand 4,DLL4）、低氧诱导因子α（ hypoxia inducible factor alpha, HIF-α）和血管内皮生长因子（ vascular endothelial growth factor,VEGF）在非小细胞肺癌（ non-small cell lung cancer, NSCLC）中的表达及其临床意义。方法选取河北省胸科医院胸外科2012年10月—2015年11月经手术治疗 NSCLC患者的手术切除标本72例作为 NSCLC 组,另选距离原发肿瘤5 cm 以上的肺组织标本（经 HE 染色病理证实无肿瘤浸润）72例作为正常对照组。通过免疫组化染色的方法检测 DLL4、HIF-α及 VEGF 的表达情况,并结合患者的临床病理资料进行分析。结果 NSCLC 组 DLL4、HIF-α及 VEGF 阳性表达率显著高于正常对照组（ P ﹤0.01）;DLL4、HIF-α及VEGF 表达与 NSCLC 肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结转移有关（ P ﹤0.05）,而与患者年龄、性别、病理类型及肿瘤长径无关（P ﹥0.05）;DLL4、HIF-α与 VEGF 表达两两之间均呈显著正相关（ r =0.320、0.366、0.335,P ﹤0.01）。结论DLL4、HIF-α及 VEGF 在 NSCLC 发生、发展和转移中可能起协同作用,检测 DLL4、HIF-α及 VEGF 的表达对临床判断非小细胞肺癌发生、发展、预后及研发新的靶向治疗药物有一定的价值。     

腺样囊性癌组织中增殖细胞核抗原标志物的表达及其意义

目的：探讨增殖细胞核抗原标记物（Ki-67）在腺样囊性癌（ACC）组织中的表达情况及其意义。方法：采用免疫组织化学S—P法测定Ki-67在54例ACC组织中的表达情况，t检验统计分析其临床及病理学意义。结果：Ki-67在ACC组织中的表达与临床分期及病理类型有关。Ki-67的高表达预示着ACC的预后较差。结论：Ki-67可作为判断ACC恶性程度及预后的有效指标。     

肝细胞癌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的定量及生物学作用

用免疫组化ＡＢＣ法对１２５例肝细胞癌及６例正常肝组织Ⅰ、Ⅲ型胶原进行免疫染色，癌组织内两种胶原的长度密度均显著低于正常肝及癌旁肝组织（Ｐ＜０．０１），有浸润转移的肝癌组织胶原长度密度明显低于无浸润和转移者（Ｐ＜０．０１）。结果提示肝癌组织内胶原降解与肿瘤生物学特性有关，胶原在肿瘤浸润和转移的病理过程中有抑制作用。     

Toll样受体4的研究及现状

Toll样受体4（Toll-like receptor4，TLR4）是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体，在天然免疫反应中具有重要的作用。TLR4细菌脂多糖（1ipopolysaeeharide，LPS）是介导信号跨膜转导的主要受体，对于革兰氏阴性菌的感染性炎症至关重要。近年来，有关TLR4介导的信号转导及其TLR4与疾病的关系受到人们的关注。本文就TLR4的信号转导、TLR4与LPS的关系进行了综述，并介绍了TLR4与相关疾病之间的关系，对TLR4的研究意义进行了肯定。     

神经纤毛蛋白 1和血管内皮生长因子受体 2在肝细胞癌组织中的表达和临床意义

目的 检测神经纤毛蛋白1(NRP-1)和血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)在肝细胞癌组织及其癌旁正常肝组织中的表达情况,同时探讨NRP-1和VEGFR2的表达与肝细胞癌病人预后的关系.方法 收集2014年11月至2018年11月在徐州医科大学附属医院肝胆外科行手术切除并经病理学确诊为肝细胞癌病人的肿瘤石蜡标本40例及其癌旁正常肝组织标本20例,应用免疫组织化学法检测肝细胞癌组织及正常肝组织中NRP-1和VEGFR2的表达情况.对病人进行至少为期1年的随访,末次随访时间为2019年11月.结果 NRP-1、VEGFR2在肝细胞癌组织中的表达[(0.398±0.051)、(0.454±0.058)]明显高于正常肝组织[(0.244±0.095)、(0.337±0.064)](均P<0.05).NRP-1、VEGFR2表达与肝细胞癌病人的肿瘤最大径、有无血管侵犯、分化程度、TNM分期明显相关(均P<0.05),而与病人的性别、年龄、有无慢性肝炎病毒感染、甲胎蛋白水平、肿瘤数目、有无肝硬化、Child-Pugh分级无关(均P>0.05).NRP-1和与VEGFR2的表达呈正相关(r=0.789,P<0.001).此外,NRP-1、VEGFR2表达高的肝细胞癌病人的术后1年内复发率高[63.64％(14/22)、55.00％(11/20)],而NRP-1、VEGFR2表达低的肝细胞癌病人的术后1年复发率较低[5.56％(1/18)、20.00％(4/20)](均P<0.05).结论 NRP-1、VEGFR2在肝细胞癌组织中均有高表达,在肝细胞癌的发生和发展中起重要作用,而NRP-1、VEGFR2的高表达提示病人预后不良.