血清肌钙蛋白Ⅰ用于化疗药物致心肌毒性的检测

近些年来,心肌肌钙蛋白Ⅰ(cNnI)与心肌损伤关系的研究逐步展开,并已在心肌损伤疾病的诊断中得到肯定,是反映心肌损伤的敏感而且特异的生化指标[1-3].     

一种检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的生物传感器

目的：建立一种新的血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)定量检测法。方法：用亲和层析法提纯cTnI，免疫BALB／C鼠及新西兰兔，并用杂交瘤技术及膜渗滤亲和层析法，制备了特异性抗cTnI单克隆抗体和多克隆抗体。以葡萄球菌蛋白A作基底膜，特异性多克隆抗体作捕捉抗体，单抗9F5作第二抗体，制成了表面等离子体共振生物传感器。比较了直接法和夹心免疫法检测血清cTnI的性能。结果：夹心免疫法的最低检测限(0．8μg／L)是直接法的5倍(4μg／L)，检测范围为(0．8～20)μg／L，批内及批间精密度分别达3．8％～5．1％，6．3％～8．1％。用该夹心法及国外试剂盒分别检测40名健康献血队员和28例急性心肌梗死患者血清cTnI水平，两者符合率分别为97．5％和94．6％。结论：所建立的夹心免疫法操作简单，特异性强，灵敏度高，符合临床诊断要求。     

新生儿缺氧缺血性脑病血清心肌肌钙蛋白Ⅰ及肌酸激酶检测的研究

目的　探讨血清心肌肌钙蛋白Ⅰ (cTnI)在新生儿缺氧缺血性脑病 (HIE)时心肌损伤的诊断价值。方法　检测4 5例HIE患儿的血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)和肌酸激酶同工酶 (CK MB) ,并同时检测 30例健康儿童作为对照组。结果　HIE患儿血清cTnI和CK MB明显高于正常对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5 ) ,血清cTnI在诊断HIE患儿心肌损伤时较血清CK MB更为敏感 (P <0 .0 5 ) ;结论　HIE患儿血清cTnI和CK MB明显高于正常小儿 ,说明HIE患儿存在心肌损伤 ,血清cTnI在诊断心肌损伤时较血清CK MB更为敏感。     

血清人心肌肌钙蛋白I快速测定方法的建立

目的：建立一种简便、快速、准确检测人心肌肌钙蛋白Ｉ（ｃＴｎＩ）的胶体金免疫层析法。方法;应用ｃＴｎＩ抗体细胞株６株。其中３Ｆ１０作为金标抗体,３Ａ７作为生物素化抗体,链霉亲合素结合于硝酸纤维素膜、制成免疫层析测试条,依据测试条上出现肉眼可见的红色线条判定结果。结果：检测灵敏度可达０．４ｎｇ／ｍｌ。测定３０例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者血清ｃＴｎＩ,并与国外同类产品比较,两者符合率为９３．６％。结论：     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ酶促化学发光免疫分析方法的建立

目的 建立检测人心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法.方法 采用两株抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ的单克隆抗体,一株包被聚苯乙烯化学发光板,一株标记辣根过氧化物酶,采用辣根过氧化物酶/鲁米诺/过硼酸钠体系,建立了测定人血清心肌肌钙蛋白Ⅰ的酶促化学发光免疫分析方法,并进行了方法学鉴定.用该法测定80例正常人血清,确定正常参考值范围;测定临床病理样品27例,与Beckman全自动化学发光试剂测定值进行相关性分析.结果 本方法测定范围0.3 ～ 100μg/L,分析灵敏度0.16μg/L;37℃反应时间30min;回收率76.8％ ～ 111.1％;高浓度cTnI血清样品经系列倍比稀释后测定,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数0.999;批内、批间变异系数分别为3.90％～6.71％,7.66％～10.34％;与心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白C(TnC)、骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ(sKTnI)、骨骼肌肌钙蛋白T(sKTnT)、人心肌脂肪酸结合蛋白(h-FABP)、人心肌肌酸激酶(CK-MB)、人心肌肌红蛋白、C-反应蛋白(CRP)均无交叉;确定临床正常参考值小于0.304μg/L;与Beckman全自动化学发光试剂比较,两者测定值线性相关系数为0.925.结论 该方法反应时间短、特异性强、重复性好,具有应用及推广价值.     

心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)提纯及ELISA的建立

目的心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiactroponinⅠ,cTnⅠ)的提纯及酶联免疫分析方法的建立。方法从猝死健康人心脏中,提取人心肌肌钙蛋白Ⅰ作为抗原,用其免疫新西兰雌性大耳白家兔,制备出抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ抗体,采用夹心方法,建立cTnⅠ酶联免疫吸附分析法。结果从人心肌中提取出11.7mgcTnⅠ,心肌肌钙蛋白Ⅰ抗血清滴度达1∶100000,Ka=2.38×109Lm/ol。方法学指标:灵敏度为0.2ngm/l;精密度,批内、批间变异系数分别为CV=3.8%和CV=8.2%;准确度,平均回收率99.7%;特异性,与心肌肌钙蛋白T、心肌肌钙蛋白C、肌酸磷酸激酶(CK)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)均无交叉反应。用该方法和进口试剂盒对32例急性心肌梗死(AMI)患者和40例健康人血中cTnⅠ水平进行检测,两者符合率分别为93.7%、95.0%。结论该方法适于临床常规检验及科研工作需要,具有广泛应用前景。     

脐血心肌肌钙蛋白Ⅰ及其与急性宫内窘迫的关系研究

目的探讨急性宫内窘迫对脐动脉血CTnl的影响.方法利用化学发光免疫分析法测定正常新生儿和发生过急性宫内窘迫及产时窒息新生儿脐动脉血中CTnl浓度.结果急性宫内窘迫组脐动脉血CTnl(x±s=0.728±2.998ng/m1),显著高于正常儿组(x±s=0.024±0.183ng/ml)P＜0.01.产时窒息组(x±s=0.049±0.08ng/ml)与正常组之间差异不显著P＞0.05.结论;急性宫内窘迫症可造成胎儿心肌受损,脐血CTnl是胎儿心肌受损的可靠指标.     

血清肌钙蛋白Ⅰ测定的临床意义

肌钙蛋白Ⅰ (ＴｒｏｐｏｎｉｎⅠ ,ＴｎⅠ )具有三种不同的同型物 ,分别定位于骨骼肌快肌、慢肌及心肌中。心肌肌钙蛋白Ⅰ (ＣａｒｄｉａｃｔｒｏｐｏｎｉｎⅠ ,ｃＴｎⅠ )氨基酸序列有别于快、慢骨骼肌钙蛋白Ⅰ (ｓＴｎⅠ ) ,使其免疫特性亦有别于骨骼肌中的两种同型物 ,具有心肌特异性[1] 。当心肌细胞受到损伤时 ,可引起血清ｃＴｎⅠ浓度的变化。本文采用美国拜尔公司化学发光免疫分析法对 93例患者血清进行ｃＴｎⅠ浓度的测定 ,现将结果报道如下。材料和方法一、对象 :(一 )对照组 :选择不同年龄和性别 ,无明显心脏疾病和心功能障碍者 4…     

抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体制备中免疫抗原的选取

目的　获得与人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ没有交叉反应的抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ (HcTnⅠ )特殊位点的单克隆抗体。方法　选择了包括牛心肌肌钙蛋白Ⅰ (BcTnⅠ )、根据HcTnⅠ氨基酸序列的亲水性设计的 4个钥孔虫戚血蓝蛋白 (KLH)偶联肽段和一个八倍体多肽分子 (MAP)等 6种代用抗原 ,通过免疫、杂交和筛选 ,获得了能分泌抗 (HcTnⅠ )的IgG型抗体的杂交瘤细胞株 ,并对得到的抗体进行了特异性鉴定。结果　用其中 4种抗原免疫得到了抗HcTnⅠ的IgG型单抗的细胞株 ,其中的 3种合成肽可以得到分泌抗HcTnⅠ特殊位点的IgG型单抗细胞株。结论　为临床上检测cTnⅠ以诊断急性心肌梗塞 ,提供了可能抗体     

重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备重组人心肌肌钙蛋白I（rhcTnI）的单克隆抗体,并对其单克隆抗体的特性进行鉴定。方法利用纯化后的rhcTn I作为免疫原,常规免疫Balb／c小鼠．取其脾细胞与同系骨髓瘤细胞Sp2／0进行常规融合。用甲基纤维素半固体培养基法获得单克隆抗体杂交瘤细胞株,利用ELISA、Western blot等方法对单克隆抗体的特性进行鉴定。结果筛选出3株稳定分泌抗rhcTnI的单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别命名为4B3、7D5和3E6。 3株单克隆抗体的免疫球蛋白亚类分别为IgGl（4B3、7D5）和IgG2b（3E6）。3株单克隆抗体与rhcTnI发生特异性结合,而与大肠杆菌菌体蛋白、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）无特异性交叉反应,3株单克隆抗体的亲和力常数分别为1．76×10^9L／mol、1．43×10^9L/mol和1．04×10^9L/mol。结论获得了效价高、特异性好的抗rhcTnI的单克隆抗体,为cTnI诊断试剂盒的研制奠定了基础。     

超敏肌钙蛋白Ⅰ检测在糖尿病心肌损伤早期诊断中的价值

目的 探讨在糖尿病心肌损伤的早期诊断中检测血清超敏肌钙蛋白Ⅰ（hs-cTnⅠ）的价值。方法 选取2017年1月~2019年1月本院收治的103例2型糖尿病合并心肌损伤患者为观察组,选取同期行健康体检的100例志愿者为对照组,分别检测两组血清中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、糖化血红蛋白（HbA1c）及hs-cTnⅠ水平并比较。结果 两组AST、CK、CK-MB水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;观察组HbA1c及hs-cTnⅠ水平高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;在观察组患者中,HbA1c≤6.4%组与HbA1c＞6.4%组的患者AST、CK及CK-MB水平比较,差异无统计学意义（P＞0.05）,而HbA1c≤6.4%组hs-cTnⅠ水平低于HbA1c＞6.4%组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 针对糖尿病心肌损伤,通过对患者hs-cTnⅠ进行检测,有助于疾病的早期诊断及治疗。     

化学发光法测定519例心肌肌钙蛋白Ⅰ水平

心肌肌钙蛋白Ⅰ（CTnⅠ）作为心肌损伤标志物,在临床上已应用了多年,由于其高度的心肌特异性,对于心肌损伤的高度敏感性及较长的窗口期,CTnⅠ已被临床医生及检验人员广泛接受,已取代肌酸激酶同工酶（CK-MB）,不仅成为判断心肌损伤,特别是诊断急性心梗（AMI）的标准。而且已成为判断冠脉综合征患者处于心肌损伤风险的最合适的标志物,CTnⅠ的升高还可支持临床医生及早做出抗血栓、抗血小板凝集及介入性治疗。     

人心肌肌钙蛋白Ⅰ胶体金免疫层析试纸条的研制

目的建立一种简便实用胶体金免疫层析检测方法．用于人心肌肌钙蛋白I（cTnI）的快速检测。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,以鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,以兔源抗cTnI多克隆抗体固定于硝酸纤维素膜作为捕获抗体,采用免疫层析技术制备快速检测cThI胶体金免疫层析检测试纸条。并与国外生产的胶体金试剂盒作对比。结果该试纸条检测范围质量浓度为5ng／mL～1μg／mL;灵敏度质量浓度为5ng／mL：特异性：与肌红蛋白、肌酸磷酸激酶同工酶、cTnT、cTnC无交叉反应：与国外胶体金试纸条检测结果比较阳性符合率为96．4％,阴性符合率为100．0％。结论成功建立cTnI胶体金免疫层析检测方法,该方法灵敏度高,特异性强,检测速度快,适于急性心肌梗死的早期诊断及科研工作需要．     

急性冠脉综合征患者血清肌钙蛋白Ⅰ、心肌酶谱的变化

急性冠脉综合征（ACS）已成为致死、致残的主要疾病，早Ⅰ期、准确、快速诊断ACS，及时溶栓或经皮冠状动脉介入治疗（PCI）是减少该病致残率、致死率的主要措施。心肌酶谱、肌钙蛋白Ⅰ（TnⅠ）作为心肌损伤的血清标志物，其敏感性、特异性均较高，是临床很有价值的诊断和观察指标。本文回顾性总结我院心内科和急诊科近几年收治的ACS病例上述指标的阳性率变化，结果报告如下。     

血清心肌酶及心肌肌钙蛋白测定在新生儿HIE中的应用

目的探讨血清心肌酶活性及心肌肌钙蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的意义,观察心肌肌钙蛋白与心肌酶之间的关系.方法设对照组(32例)和新生儿缺氧缺血性脑病组(60例),分别测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)活性及心肌肌钙蛋白(CTn-I),并作对比分析.结果 HIE组心肌酶的活性及心肌肌钙蛋白较对照组明显升高(P<0.05),且重度HIE组与轻度HIE组也有显著差异(P<0.01).结论血清中CK-MB及CTn-I可作为HIE脑损害程度的敏感指标,且CTn-I比CK-MB特异性更高.     

血清肌钙蛋白Ⅰ检测在急性心肌梗塞诊治中的临床价值

急性心肌梗塞(AMI)是威胁人类生命的主要疾病之一,及时诊治是挽救生命的关键.应用冠状动脉造影术和经皮冠状动脉腔内成形术(PTCA)是目前预防和诊治AMI的重要进展之一.自从1987年英国Cummins等首先报告用检测血清肌钙蛋白浓度来诊断AMI以来,心肌肌钙蛋白I(TnI)引起了研究者们的广泛重视.初步研究表明:肌钙蛋白I作为心肌细胞内特有的结构蛋白成分释放入血循环是心肌细胞损伤的高度敏感和特异的标志[1,2].本研究通过定性和定量测定AMI患者在冠状动脉造影术及PTCA术后的血清TnI,并与同步测定的肌酸激酶(CK)及同工酶(CK-MB)相对比,观察其敏感性和特异性,以及利用TnI检测心血管疾病介入治疗中心肌损伤的临床应用价值.     

人心肌肌钙蛋白玉鲁米诺化学发光酶免疫分析法的建立

目的:制备两株抗人心肌肌钙蛋白玉(human cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)单克隆抗体,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法。方法:制备腹水型单抗、饱和硫酸铵沉淀法和亲和层析柱Protein G 纯化抗体,并通过SDS-PAGE 和ELISA 对抗体特异性进行鉴定,建立鲁米诺化学发光酶免疫分析法,并对30 份临床血清样本进行检测。结果:本实验制备的两株单抗(分别命名为Ab1、Ab3;亚型都是IgG1)能够识别以cTnⅠ单体、cTnⅠ-C 复合物和cTnⅠ-T-C 复合物不同形式存在的cTnⅠ。Ab1、Ab3 的效价分别为1 :80 万和1 :40 万,亲和力常数分别为1.62×10⁹L/ mol、2.60×10⁸ L/ mol。利用2 株单抗建立的鲁米诺化学发光酶免疫分析法检测范围为:6.25 ~ 400 ng/ ml。对30 份临床样本进行检测,阳性检出率为77.3%,阴性检出率为100%。结论:建立了可以检测以cTn玉单体、cTnⅠ-C 和cTnⅠ-T-C 复合物形式存在的cTnⅠ的鲁米诺化学发光酶免疫分析法,具有更高的实用性。     

心肌肌钙蛋白Ⅰ床边定性测定对急性心肌梗死的快速诊断

为了观察急性心肌梗塞(AMI)患者血中心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)的动态变化, 采用一步法免疫色谱干膜层析活性卡, 快速检测了20例AMI患者的cTnⅠ并与CK-MB作对照. 结果发现cTnⅠ和CK-MB的阳性率分别为90%、60%, 两者之间有显著差异; 两者特异性分别为92.9%、85.7%, 无统计学显著差异; 心脏病患者CK-MB也有升高, 而cTnⅠ阴性. 结论: cTnⅠ活性卡操作简便, 灵敏性高, 可用于床边检测.