猪在流行性出血热传播中的作用──I．EHF病人家中猪血清EHFV抗体的检测

猪在流行性出血热传播中的作用──Ｉ．ＥＨＦ病人家中猪血清ＥＨＦＶ抗体的检测江西医学院微生物学教研室刘佩芹,谌济国,余克花,龙健自从１９８８年张云等［１］首次从猪肺中分离到流行性出血热（ＥＨＦ）病毒以来,关于猪在ＥＨＦ传播中的作用研究,已见血清学［２］...     

流行性出血热病毒对正常人骨髓细胞致病变作用

应用正常人骨髓粒细胞系作体外培养并感染流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ），分别进行细胞膜脂流动性、扫描电镜和免疫用镜检查。结果发现ＥＨＦＶ感染粒细胞系后１小时开始，感染组细胞膜脂流动性始终低于对照组。扫描电镜发现ＥＨＦＶ感染粒细胞后３天，细胞表面出现凹陷，感染１周细胞膜出现空洞和缺损，并可见细胞肿胀，而对照组细胞均完整。免疫电镜检查发现胶体金颗粒主要沉着在细胞膜上，次为细胞浆内，说明ＥＨＦＶ主要在胞浆内复制，抗原主要在细胞膜上表达。以上结果说明ＥＨＦＶ感染髓细胞后最早引起的是细胞膜病变和损害。     

流行性出血热病毒对正常人骨髓细胞致病作用

应用正常人骨髓粒细胞系作体外培养并感染流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ），分别进行细胞膜脂流动性、扫描电镜和免疫电镜检查。结果发现ＥＨＦＶ感染粒细胞系后１小时开始，感染组细胞膜脂流动性始终低于对照组。扫描电镜发现ＥＨＦＶ感染粒细胞后３天，细胞表面出现凹陷，，感染１周细胞膜出现空洞和缺损，并可见细胞肿胀，而对照组细胞均完整。免疫电镜检查发现胶体金颗粒主要沉着在细胞膜上，次为细胞浆内，说明ＥＨＦＶ主要在胞浆     

免疫吸印法检测实验感染戊型肝炎病毒的猕猴血清抗—HEV,ORF2和 …

目的与方法 应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）中国株基因结构区的３种重组融合蛋白ＧＳＴ－ＯＲＦ２．１，ＧＳＴ－ＯＲＦ２．３，ＧＳＴ－ＯＲＦ３建立的免疫吸印法（ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ，ＷＢ）对实验感染中ＨＥＶ的２只猕猴的３４份系列血清抗－ＨＥＶＯＲＦ２．１，ＯＲＦ２．３和ＯＲＦ３抗体进行了检测。结果 抗－ＨＥＶＯＲＦ２．１出现较早，于感染后１３天即阳转，且持续时间较长，在康复后１５个月仍呈现强阳性；抗－ＨＥＶ     

流行性出血热病毒及环磷酰胺对自然杀伤细胞的影响

应用３Ｈ－ＴｄＲ同位素释放法，以流行性出血热病毒（ＥＨＦＶ）和／或环磷酰胺（ＣＹ）使用鼠的自然杀伤（ＮＫ）细胞作效应细胞，以对ＮＫ细胞敏感的小鼠肿瘤细胞（ＹＡＣ－１细胞）作靶细胞，进行免疫杀伤实验。实验发现，ＥＨＦＶ感染鼠的ＮＫ细胞活性，高于正常对照组（ｐ＜０．０５）；ｄ若向已感染ＥＨＦＶ鼠再注射剂量为１００ｍｇ／ｋｇ体重的ＣＹ，则其Ｎｋ细胞活力明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。提示自然杀伤细胞可能在抗ＢＨＦＶ感染中起重要作用，免疫抑制剂能损伤细胞免疫功能     

免疫吸印法检测实验感染戊型肝炎病毒的猕猴血清抗－HEV ORF_2和ORF_3的动态变化

与方法应用戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）中国株基因结构区的３种重组融合蛋白ＧＳＴ－ＯＲＦ２．１、ＧＳＴ－ＯＲＦ２．３，ＧＳＴ－ＯＲＦ３建立的免疫吸印法（ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ，ＷＢ），对实验感染ＨＥＶ的２只猕猴的３４份系列血清抗－ＨＥＶＯＲＦ２．１．ＯＲＦ２．３和ＯＲＦ３抗体进行了检测。结果抗－ＨＥＶＯＲＦ２．１出现较早，于感染后１３天即阳转，且持续时间较长，在康复后１５个月仍呈现强阳性；抗－ＨｇＶＯＲＦ２．３．ＯＲＦ３虽出现也较早，但仅对急性期血清有强反应，且持续时间较短，自感染９０天后明显减弱。结论抗－ＨＥＶＯＲＦ２．３．ＯＲＦ３单独或联合检测，对诊断急性戊型肝炎有意义；而抗－ＨＥＶＯＲＦ２．１则是ＨＥＶ急性和既往感染以及保护性抗体反应的灵敏指标，可用于流行病学调查及戊型肝炎疫苗的免疫效果评价。     

流行性出血热并发神经系统损害机理的临床研究

对４６例流行性出血热（ＥＨＦ）伴神经系统（ＮＳ）损害者进行了临床和实验室研究，结果表明，ＥＨＦ伴ＮＳ损害的病因以ＥＨＦ脑炎最多。根据１例患者的脑脊液（ＣＳＦ）中分离到ＥＨＦ病毒（ＥＨＦＶ），９３．１％患者ＣＳＦ中抗－ＥＨＦＶ－ＩｇＭ阳性，而无ＮＳ症状的对照组全部阴性等结果，认为ＥＨＦＶ的直接致病作用为ＥＨＦ脑炎的主要病因，提示早期抗病病毒治疗可能预防ＥＨＦ脑炎。低蛋白血症是脑水肿、脑疝的原因，及时     

心力衰竭时内皮细胞损伤和功能变化的临床研究

为了解血管内皮细胞（ＶＥＣ）损伤及其功能变化与充血性心力衰竭（ＣＨＦ）的关系，我们以循环内皮细胞（ＣＥＣ）作为ＶＥＣ损伤的指示物，以血浆内皮素（ＥＴ）、血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）和前列环素（ＰＧＩ２）反映ＶＥＣ功能改变，对５４例ＣＨＦ患者与３０例正常人进行对比研究。结果表明：ＣＨＦ病人ＣＥＣ数量、ＥＴ浓度和ＡＣＥ活性明显增高，并与病情严重程度一致，轻度ＣＨＦ者，ＰＧＩ２增高，严重ＣＨＦ者ＰＧＩ２较正常降低，ＣＥＣ数与血ＥＴ和ＡＣＥ呈显著正相关，提示ＣＨＦ病人ＶＥＣ损伤，致其分泌的内皮源性舒张因子与收缩因子失平衡，参与了ＣＨＦ的病理过程。     

？须恙螨感染流行性出血热病毒的实验研究

本实验研究人疫区流行性出血热病毒抗原阳性鼠体所带的须恙螨幼虫中分离到１株ＥＨＦＶ；另从叮刺吸食感染ＥＨＦＶ小鼠体液的游离须恙螨幼虫中也分离到１株ＥＨＶ。     

散发性戊型肝炎及其重叠HBV感染的研究

为调查ＨＥＶ及ＨＢＶ重叠感染情况,我们将２１０例抗ＨＥＶ阳性患者及ＨＢＶ重叠感染报告如下。 １．材料与方法：病例为我院收住的１５４７例肝炎患者,其中２１０例ＨＥＶ及ＨＢＶ和ＨＥＶ重叠感染,年龄３—８０岁,平均４２．４岁。男１５９例,女５１例,男女比例为３．１２：１。急性肝炎（ＡＨ）９９例,慢性肝炎（ＣＨ）５６例,肝炎肝硬化（ＬＣ）１５例,重型肝炎（ＨＦ）３６例,原发性肝癌（ＨＣＣ）４例。单纯ＨＥＶ感染８６例,ＨＢＶ和ＨＥＶ重叠感染１２４例。方法采用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）或微粒子酶免法（ＭＥ…     

Liver involvement in epidemic haemorrhagic fever: In situ hybridization, immunohistochemical and pathological studies

In the present study, liver biopsy specimens from 37 patients with epidemic haemorrhagic fever (EHF) were investigated by using light and electron microscopy, immunohistochemistry for the EHF virus envelope protein G2 and in situ hybridization (ISH) for EHF viral RNA. Immunostaining and in situ hybridization were both positive, and a few of the aetiological agents, the EHF virus (EHFV) particles, were found individually within the dilated Golgi cisternae and vesicles, and the dilated rough endoplasmic reticulum of the hepatocyte. The pathological alterations of the liver cells infected with EHFV were: hepatocellular degeneration, cytoplasmic vacuolation, and spotty necrosis; moreover, zonal necrosis was present and adjacent to the narrowed and occluded sinusoids. In degenerated and spotty necrotic cells, the positive signals from of ISH for EHFV RNA and those from immunostaining for the virus protein were both stronger than those in the zonal liver cell necrosis area. The results showed that hepatocellular degeneration and spotty necrosis might be directly related to the virus and its duplication inside the liver cells, while the zonal necrosis was ischaemic and thought to be caused by microcirculation dysfunction.     

醛化鹅红细胞在流行性出血热病毒血凝和血凝抑制实验中的应用

本文用醛化鹅红细胞(AGRBC)与流行性出血热病毒(EHFV)的A血凝素(A-HAN)和R血凝素(R-HAN)作血凝试验(HAT)和血凝抑制抗体的检测,结果HA和血凝抑制(HI)滴度与用新鲜鹅红细胞(FGRBC)相同。用HIT和IFAT对20例流行性出血热病人血清抗体进行检测,结果阳性率分别为85％和90％。阳性符合率为94.4％。表明用AGRBC所作的HIT具有较高的敏感性和特异性。用保存不同时间的AGRBC反复测定6例病人血清的HI滴度,结果各组之间并无显著性差异。A-HAN组的变异系数为1.29％;R-HAN组为1.04％。因此,我们认为在HAT和HIT中,用AGRBC队完全可以代替FGRBC。     

从家鼠型疫区家畜家禽血清中检出流行性出血热病毒抗体

本文报告从山西农村流行性出血热(EHF)疫区家畜家禽血清中检出EHF病毒抗体的初步结果。在8种动物的520份血清标本中,用反向被动血凝抑制试验(RPHI)在6种动物的49份(19.42％)标本中检出EHF抗体。阳性血清的抗体滴度在1:10～1:80之间。抗体阳性率分别为狗20.95％(22/105),猪11.76％(11/119),羊6.06％(6/99),兔4.08％(4/98),牛3.85％(1/26),鸡2.90％(2/69)。3份驴和1份骡血清未检出EHF抗体。结果表明,家鼠型EHF疫区中,上述6种动物可被EHF病毒自然感染,同时说明在多种动物大数量血清流行病学调查中,RPHI是一种简便的满意方法。这些受感染的动物,在流行病学及动物流行病学中的意义,尚待进一步研究。     

流行性出血热（EHF）人群自然自动免疫动态研究

本研究对三种类型EHF疫区固定人群的抗体连续三年检测,以抗体累计阳性法统计分析,发现三种疫区人群均可通过自然感染获得动态的免疫屏障。家鼠型疫区流行过后人群抗体水平较高,但人群累计抗体流行率增长较慢;而有野鼠的疫区人群抗体水平虽较低,但因仍继续潜在流行1～2年,从而家、混、野三类疫区人群抗体流行率分别可达16.92％、18.43％和19.22％的相近水平。当人群抗体流行率达1～2万/10万(即10～20％)时,该病的流行即趋于减弱或停止,证明EHF可以形成一定的自然免疫屏障。只有这种屏障被易感人群的累积所冲破才有可能再次流行。并认为个体有1:20的EHFIgG抗体可防止再次感染,且抗体无论阴转与否3～5年间仍有免疫力。基此,亦为人群和个体人工免疫的可行性提供了有力证据。     

实验大白鼠吸入EHFV气溶胶后病毒在巨噬细胞内增殖的研究

流行性出血热病毒(EHFV)气溶胶被大白鼠吸入后,首先作用于肺泡巨噬细胞,随即肺泡内单个核细胞增多,病毒在其胞浆内增殖,最后定位于肺组织Ⅱ型上皮细胞内。结果表明,EHFV气溶胶可通过呼吸道使实验大白鼠感染,病毒在体内的传播可能是通过单核巨噬细胞系统。     

CNS manifestations of epidemic hemorrhagic fever. An advanced manifestation of disease associated with poor prognosis

The records of 134 patients with the clinical diagnosis of epidemic hemorrhagic fever (EHF) were evaluated. The conditions of 74 patients could be categorized as "serious" based on hemorrhagic complications and magnitude of proteinuria, BP abnormality, and pyrexia. Forty-six of these patients with a serious condition had one or more CNS abnormalities. Common manifestations included confusion, meningismus, and convulsions. Whereas abnormality in fever could not be related to CNS abnormality, BP disturbance, acidosis, and azotemia were significantly more common among patients with CNS disease. Fourteen percent of the patients in this study died, and all of them had CNS disturbance; mortality among patients with CNS disturbance was 41%. These results suggest that the CNS manifestations of EHF are multifactorial in cause and they identify a subset of patients with an advanced stage of disease and a grave prognosis.     

A study on virus localization and microcirculation in the liver in patients with epidemic hemorrhagic fever]

The findings in our clinical study was consistent with those reported by others that a temporary elevation of serum alanine aminotransferase activity is associated with epidemic hemorrhagic fever (EHF). However, the pathogenesis of the concomitant changes in liver function tests is still not clear. To clarify whether EHF virus is cytopathic or not for the liver, percutaneous liver biopsy was done in 19 patients with EHF within 3-12 days after the onset of symptoms. These liver biopsy specimens were examined with immunofluorescence assay and cell cultural technique, showing the presence of active viral replication in liver cells. Electron microscopy observation of the infected liver cells showed that ultrastructural distortions was accompanied by the existence of inclusion bodies of EHF virus in vacuoles of rough endoplasmic reticulum, endotheliocyte and microvilli. These findings strongly suggest that EHF virus may play a causative role in liver injury in patients suffering from EHF and hepatic microcirculation disturbance may be involved in the pathogenesis of EHF-related liver dysfunction as well.     

大白鼠吸入EHFV气溶胶后病毒在各脏器的分布

本项研究用病毒分离和RT-PCR技术检测大白鼠吸入流行性出血热病毒气溶胶后观察EHFV在各脏器的分布,结果发现大白鼠吸入EHFV气溶胶后30天即在心、肺、肾、脾和肝等脏器组织中用病毒分离和RT-PCR扩增技术检测到EHFV和EHFV-RNA,证实了EHFV由吸入感染引起。这对研究气溶胶吸入感染机理和传播方式提供了可靠的科学依据。