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1.
目的 比较不同期别煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞自噬活动的差别.方法 对116例行全肺灌洗的观察对象和煤工尘肺患者进行现场调查,并收集其肺灌洗液,纯化后得到肺巨噬细胞,用透射电镜观察其自噬形态,采用免疫印迹方法检测自噬标志性蛋白LC3及自噬调控蛋白beclin1、mTOR和p-mTOR的表达量,分析接尘观察对象、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞自噬活动的强弱变化.结果 透射电镜观察,发现自噬活动在不同期别煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中Ⅱ期煤工尘肺肺泡巨噬细胞中有自噬溶酶体明显多于观察对象和Ⅰ期煤工尘肺,Ⅱ期煤工尘肺的肺泡巨噬细胞中自噬体和自噬溶酶体明显少于Ⅱ期煤工尘肺.Ⅱ期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1蛋白表达量明显高于Ⅰ期,Ⅲ期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1蛋白表达量明显低于Ⅱ期,Ⅲ期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达量明显高于Ⅰ期,Ⅱ期煤工尘肺患者Beclin1蛋白表达量高于接尘观察对象,差异均有统计学意义(P<0.05).Ⅱ期煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞mTOR和p-mTOR的表达量明显低于接尘观察对象和Ⅰ期,Ⅲ期尘肺患者肺泡巨噬细胞mTOR和p-mTOR表达量明显高于Ⅱ期,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 不同期别煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞自噬活动不同.  相似文献   

2.
目的探讨慢性饮水砷暴露对小鼠脾脏的炎症反应及Th1/Th2细胞因子和转录因子表达的影响。方法将30只健康SPF级雌性昆明小鼠根据体重按照随机数字表分为对照组和25、50 mg/L NaAsO_2染毒组,每组10只。采用自由饮水方式染毒,染毒6个月后,测定小鼠脾脏组织中炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平。采用Real-time PCR方法分别检测脾脏Th1和Th2的转录因子T-bet、Gata3和细胞因子Ifn-γ、IL-4的mRNA表达水平。同时用Western blot法观察Nrf2、NQO1和GSTO1/2的蛋白表达水平。结果与对照组比较,随着染毒剂量的上升,各染毒组小鼠脾脏炎症因子IL-12和IL-6的mRNA水平均上升,除IL-12的25 mg/L剂量组外,差异均具有统计学意义(P0.05);各染毒组小鼠脾脏细胞因子Ifn-γ和IL-4的转录水平呈上升趋势;Nrf2及其调控的下游蛋白NQO1和GSTO1/2的表达水平明显增加。结论慢性砷暴露小鼠免疫器官脾脏的炎症相关因子IL-12和IL-6明显增加,同时上调Th1和Th2特异性细胞因子的表达水平,调节CD4~+T淋巴细胞亚群的分化,从而发挥对小鼠脾脏的免疫调节效应。  相似文献   

3.
目的检测重症肺炎患者支气管肺泡灌洗液(BALF)的炎症因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)治疗前后表达水平,并分析其与肺炎严重程度及预后的相关性,为临床检测治疗提供参考依据。方法选取2015年6月-2017年6月医院收治的行机械通气的重症肺炎患者30例,将其作为重症肺炎组,另选取同期医院收治的行机械通气的呼吸衰竭患者30例,将其作为对照组,采用ELISA方法对两组患者炎症因子IL-6、IL-8、IL-10表达水平进行检测比较,并对研究组患者肺炎严重程度、转归以及预后情况进行观察,分析上述炎症因子与肺炎严重程度及预后的相关性。结果重症肺炎组患者入院时CRP、IL-6、IL-8及IL-10表达水平高于对照组患者(P<0.05);重症肺炎患者第1天CPIS评分与BALF中IL-6、IL-8水平之间存在正相关(r=0.773、0.762,P<0.05);与好转组比较,恶化组患者BALF中IL-6、IL-8及IL-10水平差异均具有统计学意义(P<0.001)。结论重症肺炎患者BALF中IL-6、IL-8表达水平能够对肺感染程度进行反映,肺部感染越严重则IL-6、IL-8水平越高;BALF中IL-8及IL-10水平能够对预后进行反映,两者水平越高表示患者预后越差。  相似文献   

4.
目的通过观察呼吸机相关性肺炎(VAP)患者的支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症因子的变化,同时检测血清中的相应炎症因子以预测肺部感染状况、疾病的发展趋势和预后的关系。方法前瞻性研究,随机选择2005年3月-2009年3月收住MICU、SICU、NICU建立人工气道进行机械通气的患者80例作为研究对象,入科后即刻用纤维支气管镜行机械通气时的气道管理,并进行支气管肺泡灌洗(BAL),采集BALF,同时采血,检测4个时相的血清、BALF的白介素-8(IL-8)、前降钙素(PCT)、C反应蛋白(CRP)。结果患者血清和BALF中IL-8、CRP、PCT的动态变化基本一致,即在确诊VAP时呈现高峰,随着感染的控制浓度逐步下降;BALF中IL-8在肺局部有腔室化趋势;血清中CRP的浓度始终高于BALF中的浓度,但两组间差异无统计学意义;BALF中的PCT始终高于血清,两组间差异有统计学意义(P0.01);PCT在VAP患者的BALF中能较IL-8、CRP提前升高,但IL-8、CRP明显下降后PCT仍然处于较高水平。结论 VAP患者的BALF与血清中的炎症因子有相关性,但PCTI、L-8在BALF中浓度较高,与疾病的预后密切相关,BALF中的PCT能较血清提前预示肺部感染状况。  相似文献   

5.
目的 比较日本爆发性丙型肝炎病毒1型(hepatitis C virus Japanese fulminant hepatitis-1,HCV JFH-1)感染的Huh7细胞中细胞自噬因子在霉酚酸(mycophenolic acid,MPA)处理组与对照组的表达差异,探讨MPA对肝细胞自噬相关因子的调节影响.方法 用HCV JFH-1感染Huh7细胞,用5μg/ml的霉酚酸处理细胞24 h,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR)和蛋白免疫印迹法测定细胞内HCV、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated-protein 1 light chain,MAP1-LC3B,简写LC3B)、自噬相关因子3(autophagy-related gene 3,ATG3)和自噬相关因子7(autophagy-related gene 7,ATG7)的信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)和蛋白相对表达量,比较上述因子在处理组和对照组之间的差异.结果 在核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)和蛋白水平上,MPA可以降低HCV在Huh7细胞中的表达并且降低自噬标记物LC3B mRNA和LC3 B-II的蛋白质表达(均有P<0.001);MPA可以使Huh7细胞中的自噬相关因子 ATG3和ATG7的mRNA和蛋白相对表达量下降(P <0.001;P =0.003;P=0.010;P =0.002).结论 MPA可以抑制HCV JFH-1在Huh7细胞中的复制和细胞自噬,并且可以下调自噬因子ATG3和ATG7的表达,推测MPA可能通过调节自噬关键因子表达来抑制细胞自噬从而拮抗HCV的复制.  相似文献   

6.
目的 探讨神经元自噬相关蛋白LC3在反复惊厥大鼠脑损伤中的表达及其意义. 方法 随机将60只SD大鼠分成对照组和反复惊厥组,其中反复惊厥组根据最后一次惊厥至取材时间的不同(0、3、6、12、24h)分为5个亚组,每组10只.采用戊四氮诱导大鼠惊厥的方法制作模型,每日1次,共7次.采用HE染色检测海马细胞损伤情况,免疫组织化学方法检测大鼠海马内LC3的表达情况. 结果 对照组大鼠海马神经细胞形态正常,萎缩、缺失、细胞核溶解、碎裂等少见;反复惊厥组大鼠海马神经细胞的核浓缩、核碎裂等损伤在6、12、24 h明显高于对照组,以24 h最为显著,两组比较,差异有统计学意义;对照组海马内LC3蛋白弱阳性表达,反复惊厥组LC3蛋白阳性细胞呈密集分布,其表达强度明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义. 结论 大鼠惊厥脑损伤与神经元自噬有关,神经细胞自噬可能会加重惊厥性脑损伤.  相似文献   

7.
目的:探讨HT-2毒素对体外培养软骨细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)及自噬与凋亡通路相关蛋白表达的影响。方法:采用体外培养方法,取1~2日龄SD乳鼠第三代软骨细胞,采用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原免疫荧光染色法进行细胞鉴定;CCK-8法检测软骨细胞增殖情况,根据细胞存活率选取2、4、8 ng/ml HT-2毒素用于后续...  相似文献   

8.
目的分析难治性哮喘合并肺部感染患者肺泡灌洗液(BALF)与血清的炎症因子水平及BALF中病原菌培养结果。方法选择医院2014年12月-2016年1月收治的难治性哮喘合并肺部感染患者96例设为试验组,选取同期于医院行支气管肺泡灌洗检测者50例作为对照组,所有受检者均行支气管肺泡灌洗术获取BALF及血清中白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和病原菌。比较两组肺泡灌洗液和血清中炎症因子的差异,分析肺泡灌洗液中病原菌及药敏结果。结果试验组患者血清和BALF中的炎症因子IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α分别为56.91±6.34)pg/ml和(108.33±18.44)pg/ml、(289.31±36.73)pg/ml和(421.78±48.54)pg/ml、(20.93±3.92)pg/ml和(13.92±1.51)pg/ml、(2.53±0.32)mg/ml和(2.72±0.43)mg/ml均高于对照组(P均0.001)。试验组患者血清中的炎症因子IL-6、IL-8低于BALF中的水平(P0.05);而IL-10高于BALF中的水平(P0.05);TNF-α在血清和BALF中的水平比较差异无统计学意义。96份肺泡灌洗液培养分离出病原菌128株,其中革兰阳性菌42株占32.81%,以肺炎链球菌为主;革兰阴性菌82株占64.06%,以流感嗜血杆菌为主;真菌4株占3.13%。化脓性链球菌、肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌三者对头孢拉定、头孢唑林的耐药率均超过50.00%;铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌三者对替考拉宁、头孢噻吩的耐药率均超过50.00%。结论难治性哮喘合并肺炎感染患者的血清和BALF炎症因子存在一定的差异,BALF炎症因子与感染的相关性更强,BALF炎症因子和病原菌检测对难治性哮喘合并肺部感染的诊治具有重要的指导价值。  相似文献   

9.
目的研究矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)内质网应激(ERS)和自噬相关蛋白的表达规律。方法采用单纯随机抽样方法,选择矽肺壹期、贰期、叁期男性患者20、28、22例分别设为矽肺壹期、贰期和叁期组,以6例诊断为观察对象的男性矽尘作业工人为对照组。收集研究对象的支气管肺泡灌洗液,分离、纯化和培养AM,经裂解后提取蛋白,采用免疫印迹法检测AM中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白的相对表达水平。结果矽肺壹期、贰期和叁期患者AM中GRP78、Beclin1和LC3的蛋白相对表达水平均高于对照组(P<0.05),矽肺贰期和叁期组患者上述3个指标均高于矽肺壹期组(P<0.05),矽肺叁期组患者AM中GRP78蛋白相对表达水平低于矽肺贰期组(P<0.05);矽肺叁期组患者AM中Beclin1和LC3的蛋白相对表达水平均高于矽肺贰期组,但差异均无统计学意义(P>0.05)。多重逐步线性回归分析结果显示,矽肺患者AM中GRP78、Beclin1和LC3的蛋白相对表达水平均与矽肺期别呈正相关(P<0.01)。结论不同期别矽肺患者AM中ERS和自噬的相关蛋白表达程度不同,AM的ERS和自噬在矽肺纤维化发生发展中可能发挥重要作用。  相似文献   

10.
目的 探究糖尿病足感染(DFI)患者病原菌分布特征及创面组织中细胞自噬相关蛋白表达。方法 选取2015年11月-2019年11月医院收治的196例DFI患者(感染期126例,感染控制期70例),分析患者病原菌分布,检测微管结合轻链蛋白-3(LC3)、自噬特异性基因(Beclin-1)和泛素结合蛋白(P62)的表达量和白细胞计数(WBC)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平,分析检测结果。结果 126例感染期DFI患者共培养分离病原菌147株,包括革兰阴性菌84株、革兰阳性菌52株、真菌11株,主要病原菌为铜绿假单胞菌、奇异变形菌、金黄色葡萄球菌;感染期患者LC3、Beclin-1表达水平均低于感染控制期患者,P62表达水平和WBC、CRP、PCT水平均高于感染控制期患者,差异有统计学意义(P<0.05);重度感染患者LC3、Beclin-1表达低于中度、轻度感染患者,P62表达高于中度、轻度感染患者,中度感染患者LC3、Beclin-1表达低于轻度感染患者,P62表达高于轻度感染患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 DFI患者感染病原菌主要为革兰阴性菌,常见菌为铜绿假单胞菌、奇异变形菌、金黄色葡萄球菌,感染后DFI患者LC3、Beclin-1表达降低而感染指标水平和P62表达提高,且三者表达水平与感染程度有关。  相似文献   

11.
目的 探讨缺血性脑血管患者细胞自噬相关因子与炎性因子的相关性,为完善其病理机制,寻找新的治疗靶点提供依据.方法 选取缺血性脑血管病患者85例,按照颈动脉斑块分级分为三组:Ⅰ级21例、Ⅱ级35例、Ⅲ级29例,并以33例健康志愿者为对照组.抽取空腹肘静脉血,采用WB法测定自噬相关因子LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与Beclin-1的蛋白表达量,采用ELISA法测定炎性因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平.结果 对照组、Ⅰ级斑块、Ⅱ级斑块、Ⅲ级斑块的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin1表达和血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平依次升高(P<0.05);经Pearson分析,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达与IL-1β、IL-6和TNF-α水平之间,Beclin1表达与IL-1β、IL-6和TNF-α水平之间均呈线性正相关(P<0.05);经秩相关分析,颈动脉斑块分级与LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、IL-1β、IL-6、TNF-α之间均呈正相关性(P<0.05).结论 缺血性脑血管病患者细胞自噬能够通过与炎性反应的相互作用影响斑块稳定性,可能为其病理机制的重要组成部分.  相似文献   

12.
目的 探讨游离二氧化硅(SiO2)粉尘暴露大鼠肺组织不同时间点自噬标志物微管相关蛋白1轻链3(Microtubules associated protein 1 light chain 3,LC3)和酵母自噬相关基因6(Beclin1)的变化。 方法 将72只无特定病原体级(SPF)Wistar雄性大鼠随机分为溶剂对照组和SiO2模型组,模型组大鼠采用非暴露式气管滴注法一次性给予SiO2悬浮液建立矽肺模型,溶剂对照组大鼠给予等量生理盐水。造模后两组分别于1、7、14、21、28、60 d处死6只大鼠,用苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察两组大鼠不同时间点肺组织常规病理变化和纤维化程度;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肺组织匀浆中转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-1和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平;用Western blot法检测肺组织中自噬相关蛋白LC3和Beclin1的相对表达水平。 结果 HE染色结果显示,模型组大鼠肺组织在第1天至第60天持续存在炎性反应,炎性评分均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Masson染色观察结果显示,模型组大鼠肺组织从第14天开始出现少量胶原纤维增生,至第60天可见大量胶原纤维,纤维化评分明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);对照组大鼠肺组织未见胶原纤维增生。ELISA法测定结果显示,模型组大鼠在染尘后各时间点肺组织匀浆中IL-1、TNF-α和TGF-β的含量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,模型组大鼠肺组织Beclin1蛋白表达水平在第7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肺组织LC3II/LC3I的比值在第1、7、14、21、28和60天时呈下降趋势,均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 游离SiO2粉尘致大鼠矽肺发病过程中,自噬相关蛋白LC3和Beclin1的表达水平与矽肺的不同发展阶段有关。在大鼠染矽尘早期,肺组织以炎性变化为主;随着染矽尘大鼠纤维化程度的加重。  相似文献   

13.
目的观察去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响。方法用去血清的培养液诱导处于对数生长期的颗粒细胞,0、4、12、24 h后用单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法检测自噬体的形成,反转录-聚合酶链反应(RT-PCT)和Western blot方法分别检测颗粒细胞微管相关蛋白1轻链3(MAPLC3)和Beclin-1 mRNA和蛋白的表达。结果随着去血清时间的延长,MDC阳性细胞数及自噬泡数量增多;4 h后LC3-Ⅱ及Beclin-1mRNA表达开始增加,且随着时间增加有增加趋势[LC3-Ⅱ:(0.21±0.02)、(0.45±0.12)、(0.60±0.05)、(0.74±0.03),P0.05;Beclin-1:(0.20±0.06)、(0.37±0.11)、(0.52±0.07)、(0.69±0.07),P0.05];4 h后蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Beclin-1蛋白表达亦增加,且随时间增加有增加的趋势[LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ:(0.12±0.05)、(0.32±0.09)、(0.63±0.07)、(0.92±0.04),P0.01;Beclin-1:0,(61±0.01)、(0.83±0.11)、(1.09±0.05)、(1.35±0.10),P0.05]。结论去血清饥饿可诱导颗粒细胞自噬的发生,这可能与卵泡发育和闭锁的发生、发展有关。  相似文献   

14.
目的 探讨自噬相关蛋白14(ATG14)在氟致神经毒性中的作用.方法 不同浓度氟化钠(NaF)(0、20、40、60 mg/L)染毒人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)24 h,采用CCK-8试剂盒测定细胞存活率,流式细胞术测定凋亡率,免疫印迹法测定UNC-51样激酶1(UNC-51-like kinase 1,ULK...  相似文献   

15.
目的:探讨miR20a-自噬-炎症小体通路在子宫内膜异位症(EMs)表达及意义.方法:收集2019年1月-2020年12月就诊于本院妇产科的EMs患者住院病历,从中选择60例子宫内膜组织为EMs异位组,健康女性正常子宫内膜组织60例为对照组,再将EMs异位组分为:EMs组、脂多糖(LPS)诱导组、LPS+ miR-20...  相似文献   

16.
观察低浓度臭氧(O3)暴露后过敏性哮喘大鼠支气管-肺泡灌洗(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中炎症细胞及IL-2等细胞因子的改变情况。结果显示,大鼠气道呈变应性炎症改变和气道黏膜损伤加重,同时支气管-肺泡灌洗液中细胞因子发生改变,表明IL-2、IL-6和IL-8等细胞因子在O3介导的气道炎症过程中起重要作用。  相似文献   

17.
目的:分析毒死蜱对大鼠海马神经元自噬相关蛋白表达的影响,探讨自噬在急性毒死蜱中毒中枢神经损伤中的作用。方法:于2018年10月,将35只雄性清洁级SD大鼠根据观察时间点随机分成7组,即0.5 d、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d组和对照组,每组5只。各观察组采用81.5 mg/kg毒死蜱一次性灌胃处理,对照组给予...  相似文献   

18.
目的探讨纤维支气管镜肺泡灌洗对肺癌合并呼吸机相关性肺炎(VAP)患者肺功能及炎症因子的影响。方法选取医院2015年2月-2018年2月收治的VAP患者122例为研究对象。按随机数字表法将患者分为试验组和对照组,每组61例。试验组患者予对照组常规灌洗吸痰的同时应用纤维支气管镜行肺泡灌洗。统计两组患者机械通气时间、肺部感染控制时间、ICU入住时间和住院费用。分析治疗前后两组患者呼吸力学参数呼吸做功(WOB)、动态顺应性(Cdyn)、气道峰压(PIP)和气道阻力(Raw)。观察患者肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)和超敏C-反应蛋白(hs-CRP)等炎症因子水平变化。结果试验组机械通气时间、肺部感染控制时间、ICU入住时间均较对照组缩短(P<0.05),两组住院费用比较差异无统计学意义;治疗后,两组患者WOB、PIP和Raw均降低,Cdyn均上升,试验组改善程度优于对照组(P<0.05);治疗后,两组炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8和hs-CRP均降低,试验组降低程度优于对照组(P<0.05)。结论在常规治疗的基础上,以纤维支气管镜辅助治疗VAP可降低其机械通气时间、肺部感染控制时间和ICU入住时间,改善呼吸功能,减轻炎症介质对肺组织的损伤,提高临床治疗效果。  相似文献   

19.
目的研究饮水砷暴露对大鼠学习与记忆能力的影响。方法将48只雄性健康断乳SD大鼠随机分为4组,每组12只。对照组饮用自来水,砷暴露组分别饮用2.72、13.6和68mg/L亚砷酸钠溶液。饮水砷暴露12周后,用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,水迷宫实验完成后用氢化物发生一原子荧光光谱法测定大鼠血砷和脑砷含量。结果血砷含量随饮水砷浓度升高而升高.与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。脑砷含量随饮水砷浓度升高而升高,13.6mg/L和68mg/L组与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。在定向航行实验中,与对照组相比,68mg/L组大鼠逃逸潜伏期显著延长(P〈0.05)。在空间探索实验和可视平台实验中,各组问差异没有统计学意义。结论相对较高剂量的饮水砷暴露能降低大鼠的学习能力。  相似文献   

20.
目的:探索细胞自噬在瓦斯爆炸致大鼠急性肺损伤(ALI)中的改变及其意义。方法:于2018年2月,通过大型巷道爆炸实验系统模拟煤矿井下瓦斯爆炸,将SD大鼠随机分为对照组以及6个距离组(40 m、80 m、120 m、160 m、200 m、240 m),每组18只。于爆炸前、爆炸后24 h检测各组大鼠呼吸功能,麻醉处死大...  相似文献   

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