慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞中丙型肝炎病毒RNA正,负链的…

选择ＨＣＶ基因组５＇非编码区的两对引物，利用逆转录巢式ＰＣＲ技术对３５例慢性丙型肝炎患的血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ、ＰＢＭＣ中正、负莲ＨＣＶ ＲＮＡ进行检测。结果血清中正链ＨＣＶ ＲＮＡ阳性率为６２．９％（２２／３５），ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为５４．３％（１９／３５），负链ＨＣＶ ＲＮＡ的阳性率为３４．３％（１２／３５）。同时对第２次ＰＣＲ的阳性产物进行限制性片段长度多态性分析（ＲＦ     

Fas系统与心肌炎预后的关系（基础）

近年来，心肌炎发病呈增高趋势。目前研究认为，除入侵的病毒可直接造成心肌细胞损害外，细胞介导的细胞毒作用（CMC）在心肌组织的损伤中可能起着重要作用。Fas／FasL途径是CMC致靶细胞损伤的途径之一，被认为是心肌炎损伤的机理，也影响着心肌炎的转归。现对Fas/FasL在心肌炎预后的判断中的意义概述如下。     

脑缺血再灌注损伤与Fas/FasL

随着溶栓技术的开展，血液循环重建引起的再灌注损伤日益受到重视，其相关研究已经取得较大的进展。现对Fas／FasL系统及其在脑缺血再灌注损伤中的作用进行阐述。     

Fas/FasL与宫颈癌关系的研究进展

凋亡是基因控制的、细胞自主有序的死亡,指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命,最后脱落离体裂解为若干凋亡小体而被巨噬细胞吞噬。凋亡在维持机体内环境稳定中起重要作用。Fas与FasL的相互作用是引起细胞凋亡的主要途径之一,深入了解Fas/FasL在宫颈癌中的作用和调控机制,对宫颈癌的诊断、疗效评价及预后判断中具有重要意义。     

Fas/FasL与宫颈癌关系的研究进展

凋亡是基因控制的、细胞自主有序的死亡,指细胞在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自己结束其生命,最后脱落离体裂解为若干凋亡小体而被巨噬细胞吞噬.凋亡在维持机体内环境稳定中起重要作用.Fas与FasL的相互作用是引起细胞凋亡的主要途径之一,深入了解Fas/FasL在宫颈癌中的作用和调控机制,对宫颈癌的诊断、疗效评价及预后判断中具有重要意义.     

乙型肝炎病毒宫内感染中母胎外周血单核细胞的转运机制

研究宫内感染的机制对降低我国HBsAg慢性携带率具有非常重要的意义.妊娠过程中母体血液中的血小板和白细胞可通过胎盘屏障,而胎盘细胞凋亡与胎盘屏障通透性增加又存在不可分割的内在联系,PBMC是HBV肝外感染的主要细胞,在HBV复制、感染及迁延中起着重要作用,可以作为HBV的载体.这些证据提示PBMC母胎转运在HBV宫内感...     

Fas/FasL系统与妊娠免疫耐受

随着免疫学的飞速发展 ,妊娠免疫耐受机制的研究不断深入。在对Fas和FasL相互作用介导的细胞凋亡在免疫特赦部位及外周免疫耐受中所起的重要作用充分认识后 ,Fas FasL系统在妊娠免疫耐受中是否发挥作用日益引起学者的兴趣。研究表明 ,妊娠期 ,FasL在胎盘中高度表达 ,且体外实验证实滋养层细胞可诱导表达Fas的淋巴细胞发生凋亡 ,为妊娠免疫耐受现象的最终阐明提供了另一可能机制。     

重症乙型肝炎患者血清中可溶性Fas和可溶性FasL水平的检测

目的检测可溶性Fas(sFas)和可溶性FasL(sFasL),在重症乙型肝炎患者血清中的水平并探讨其参与肝细胞凋亡的价值. 方法用ELISA双抗体夹心法检测28例重症乙型肝炎和19例急性乙型肝炎患者血清中sFas和sFasL含量,并以20例健康体检者作为对照. 结果血清sFas在急性乙型肝炎中最高,其次是重症乙型肝炎正常对照;sFasL水平依次为重症乙型肝炎、急性乙型肝炎正常对照;各组与对照组相比差异均有显著性(P<0.05);重症乙型肝炎中sFas和sFasL均升高,但sFas/sFasL比值反而有所下降. 结论血清sFas和sFasL含量与乙型肝炎病情密切相关,CTL细胞通过Fas系统活化介导的细胞毒作用以凋亡方式清除病毒感染的肝细胞,是机体抗HBV感染的重要途径之一, 在重症乙型肝炎中sFas和sFasL水平均升高,sFas水平可能存在相对不足,不能有效拮抗sFasL介导Fas阳性靶细胞的凋亡,而导致广泛肝细胞坏死,可能是其死亡的原因之一.     

冠心病外周血单核细胞肺炎衣原体包涵体的检测

本文探讨冠心病患者外周血单核细胞（PBMC）中肺炎衣原体（Cpn）包涵体检测的临床应用价值。作者选择150例冠心痛（冠心痛组）及55例非冠心痛（对照组）患者，使用低渗溶血法制备PBMC，直接免疫荧光法检测Cpn包涵体。结果表明，Cpn包涵体阳性反映患者体内存在Cpn感染状态。     

丙型肝炎患者外周血单核细胞中细胞因子信号传导因子的mRNA表达及意义

目的 探讨慢性丙型肝炎患者外周血单核细胞(PBMC)中细胞因子信号抑制因子表达及意义,为促使机体产生细胞免疫提供依据.方法 选取2010年6月-2012年3月就诊于温州医学院附属第三医院的50例慢性丙型肝炎患者为慢性丙型肝炎组,同时选取38例健康体检者为对照者组,抽取丙型肝炎患者和正常人的静脉血,用ELISA方法检测血清中细胞因子IL-2、IFN-γ的水平;RT-PCR法检测外周血单核细胞内SOCS1、SOCS3的mRNA表达.结果 慢性丙型肝炎组PBMC内的SOCS1和SOCS3的表达较对照组高(P＜0.05);外周血血清中IL-2和IFN-γ的水平均较对照组显著下降(P＜0.01).结论 丙型肝炎病毒上调PBMC内SOCS1和SOCS3水平可能使病毒逃避机体抗病毒反应.     

子痫前期患者胎盘组织Fas／FasL的表达异常及意义

目的 比较子痫前期患者与正常孕妇胎盘组织中Fas/FasL的表达.探讨Fas/FasL系统的表达与子痫前期的关系.方法 采用免疫组化法检测30例正常妊娠晚期及60例子痈前期患者(其中轻度30例,重度30例)胎盘组织中Fas和FasL表达强度.结果 Fas/FasL主要表达于胎盘绒毛滋养细胞的胞浆及胞膜内,与正常对照组比较,Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加(x2=23.25,P＜0.05),差异有显著性;而FasL在重度子痫前期组的表达强度明显降低(x2=6.67,P＜0.05),差异有显著性.结论 Fas和FasL的改变与子痫前期相关,Fas/FasL的异常表达导致妊娠免疫耐受机制破坏可能是子痫前期发病的重要机制之一.     

Fas表达异常与重度子痫前期的关系研究

目的:探讨重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞Fas(又称APO-1,CD95)的表达及意义。方法:采用免疫组化法观察24例Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞的表达,并与24例正常晚期妊娠胎盘比较。结果:Fas主要表达于胎盘绒毛合体滋养细胞及细胞滋养细胞的胞浆及胞膜内。与正常对照组比较,Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达水平显著增加(P<0.05),差异有显著性。Fas在重度子痫前期组胎盘绒毛滋养细胞的表达与新生儿出生体重和胎盘重量均有明显相关性。结论:Fas在重度子痫前期患者胎盘绒毛滋养细胞中表达失衡,通过免疫途径诱导滋养细胞发生级联凋亡反应及滋养细胞对螺旋小动脉的浸润过浅,影响“血管重铸”过程,导致胎盘缺血、缺氧,可能与重度子痫前期的病因及病理过程有关。     

Fas／FasL参与热诱导大鼠睾丸生精细胞凋亡的调控

目的：探讨睾丸局部加热致大鼠睾丸生精细胞凋亡及Fas/FasL信号通路在生精细胞凋亡调控中的作用。方法16只成年SD雄性大鼠随机均分为加热组和对照组。加热组进行大鼠睾丸43℃水浴15 min;对照组行大鼠睾丸22℃水浴15 min。24 h后进行灌流和内固定,取睾丸。制作5μm的组织切片,采用睾丸原位末端标记法（TUNEL）和免疫组化分析,检测生精细胞凋亡及 Fas 和 FasL 表达。化学发光法检测大鼠血清睾酮水平。结果加热组睾丸生精细胞凋亡率（15.8％±1.6％）较对照组（2.2％±0.5％）显著增加;加热后Fas和FasL在生精细胞和支持细胞表达水平也明显升高;对照组和加热组血清睾酮（T）水平无差异。结论睾丸局部加热诱导生精细胞凋亡,Fas和FasL系统为该凋亡过程的信号通路之一。     

三氯乙烯药疹样皮炎患者周围血T淋巴细胞表面Fas、FasL表达研究

目的 研究三氯乙烯(TCE)药疹样皮炎患者周围血T淋巴细胞表面Fas、FasL的表达,及其在TCE药疹样皮炎发病中的作用.方法 选择TCE药疹样皮炎患者12例、接触对照24例及非接触对照19例3组对象,流式细胞术进行周围血CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群分析,并检测表面Fas、FasL阳性表达百分比.结果 病例组周围血CD4+、CD8+T细胞中位数(1 089.51、916.65×106个/L)明显高于接触时照组(645.75、533.91×106个/L)和非接触对照组(579.70、310.80×106个/L,P＜0.05).CD4+/CD8+细胞比值3组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).病例组CD4+T细胞表面FasL表达(47.35%)明显高于非接触对照组(33.64%,P＜0.05),但与接触对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).病例组CD8+T细胞表面Fas与FasL表达(5.42%、28.71%)明显高于接触对照组(2.53%、24.42%)和非接触对照组(2.76%、12.47%,P＜0.05或P＜0.01).接触对照组CD4+、CD8+T细胞表面FasL表达(46.81%、24.42%)显著高于非接触对照组( 33.64%、12.47%,P＜0.01);但2类细胞表面Fas表达与非接触对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 TCE药疹样皮炎患者CD8+T细胞是主要的效应性T细胞,其表面Fas、FasL的高表达与TCE药疹样皮炎的发生相关.     

早期肾损伤的慢性乙型肝炎患者PBL Fas表达和凋亡的检测及意义

目的　初步研究外周血淋巴细胞激活诱导细胞死亡 (AICD)在慢性乙型肝炎患者早期肾损伤中可能存在的作用。方法　分离 2 0例正常健康人 (A组 )、2 4例慢性乙型肝炎无肾损伤者 (B组 )及 2 0例慢性乙型肝炎早期肾损伤者 (C组 )外周血淋巴细胞 (PBL) ,用流式细胞仪检测PBLFas表达率及培养后凋亡情况。结果　C组PBLFas表达及AICD分别为 39.6 8± 8.88,4 1.4 4±12 .78;B组为 30 .97± 13.6 9,2 8.87± 12 .2 4 ;A组为 19.0 3± 10 .2 4 ,19.4 5± 9.6 6。C组PBLFas表达及AICD明显高于其他两组 (P <0 .0 5 )。结论　PBLFas表达和AICD增加 ,可能在慢性乙型肝炎患者早期肾损伤中起一定作用。     

急性肺损伤新生大鼠肺组织细胞凋亡及其相关基因的表达和意义

【目的】　探讨细胞凋亡与其相关基因Fas/FasL系统表达在缺氧、缺氧后吸入纯氧致肺损伤发病机理中的意义。　【方法】　通过复制缺氧、缺氧后吸入纯氧大鼠肺损伤模型,采用TUNEL法、原位杂交检测、SqRT-PCR技术观察肺组织细胞凋亡情况、FasmRNA、FasLmRNA表达强度探讨其相关基因的表达。　【结果】　缺氧组或缺氧后吸入纯氧组在缺氧4 h后即可见大鼠肺泡上皮细胞和肺血管内皮细胞出现凋亡现象,并随着时间延长,细胞凋亡指数增高(P均<0.01),同时FasmRNA、FasLmRNA表达均上调,且缺氧后吸入纯氧组大鼠FasmRNA、FasLmRNA表达均较单纯缺氧组明显增强(P<0.05)。　【结论】　细胞凋亡与FasmRNA、FasLmRNA表达的上调可能参与缺氧和缺氧后吸入纯氧时导致的肺损伤。     

Fas/FasL及Bcl-2在子痫前期胎盘的表达及意义

目的:探讨Fas抗原(Fas)及其配体(FasL)、Bcl-2在子痫前期患者胎盘合体滋养细胞中的表达变化及其意义。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)连接法检测20例正常晚期妊娠妇女(正常晚孕组)、20例轻度子痫前期产妇(轻度子痫前期组)及20例重度子痫前期产妇(重度子痫前期组)胎盘组织中Fas、FasL及Bcl-2表达水平。结果:Fas、FasL及Bcl-2主要表达于胎盘合体滋养细胞胞质及胞膜中。FasL、Bcl-2在轻度子痫前期组(62.28±4.92、80.67±6.19)及重度子痫前期组(41.74±6.38、64.42±5.43)胎盘中的表达均低于正常晚孕组(80.72±6.01、92.49±7.88),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。Fas在轻度子痫前期组(55.94±4.35)及重度子痫前期组(75.98±6.01)胎盘中的表达均高于正常晚孕组(40.58±5.43),分别与正常晚孕组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:Fas、FasL及Bcl-2在子痫前期胎盘合体滋养细胞中表达失衡,可能与子痫前期的发病及发展有关。     

低硒碘处理大鼠肝脏某些生化指标和凋亡蛋白(Fas/FasL)表达的变化

目的探讨低硒碘处理大鼠肝脏某些生化指标与凋亡蛋白(Fas/FasL)表达的变化。方法选取人工合成的低硒、低碘复合饲料喂养繁殖的仔二代SD大鼠作为研究对象,采用比色法检测大鼠肝脏中GPX-Px的活性、脂质过氧化物(MDA)和一氧化氮(NO)的含量,用western blot法检测肝脏组织中凋亡蛋白(Fas/FasL)的表达。结果低硒组大鼠肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(GPX-Px)的活性明显降低,MDA、NO含量及凋亡蛋白Fas/FasL的表达均明显升高;低碘组大鼠肝脏中GPX-Px活性、NO含量未见明显改变,MDA含量明显增加,Fas/FasL表达明显升高。低硒低碘联合组大鼠肝脏GSH-Px活性降低及MDA、NO含量、Fas/FasL表达水平增加的幅度远大于单纯低硒或低碘组。结论长期硒缺乏可致大鼠肝脏GSH-Px活性下降,MDA和NO含量升高,肝脏Fas/FasL过量表达。     

母胎界面Fas及其配体FasL表达与妊娠期高血压疾病的关系

目的:探讨母胎界面上Fas及其配体FasL表达与妊娠期高血压疾病的关系。方法:采用免疫组化方法对49例产妇母胎界面上Fas及其配体FasL表达进行测定,其中正常孕足月产妇16人,妊娠期高血压疾病轻度子痫前期产妇18名,妊娠期高血压疾病重度子痫前期15名,所有患者均为剖宫产分娩。结果:妊娠期高血压疾病组胎盘滋养细胞Fas表达较正常孕足月组增强并随病情加重更为明显,而FasL着色较正常孕足月组减弱,随病情加重更为明显。在底蜕膜细胞中,随妊娠期高血压疾病的加重FasL表达与正常孕足月相比逐渐减弱。结论:母胎界面Fas及其配体FasL表达紊乱,致使局部免疫反应增强,免役豁免机制被破坏,而高表达的Fas引起胎盘滋养细胞及底蜕膜细胞随之增加,导致胎盘侵蚀异常,血管重铸障碍,可能是妊娠期高血压疾病发病的重要机制之一。