BYHWD对脊髓损伤大鼠脊髓组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的:观察补阳还五汤(buyanghuanwu decoction,BYHWD)对脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型大鼠脊髓神经细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及其mRNA表达的影响,初步探讨BYHWD抑制脊髓神经细胞凋亡的作用机制。方法:Wistar大鼠40只,随机分为四组:正常对照组、SCI模型组、BYHWD组和甲基强的松龙(MP)注射组,每组10只大鼠;后三组动物先建立SCI损伤模型,然后分别给予BYHWD组和MP组BYHWD和MP治疗。四组动物分别于术后1、7、14、21 d和28 d对大鼠后肢神经功能的恢复情况进行BBB(Basso-Beattie-Bresnahan)功能评分。第28 d处死各组大鼠,采用Real-time PCR法检测脊髓组织Bcl-2和Bax mRNA的表达情况,Western Blot法检测脊髓组织Bcl-2和Bax蛋白的表达情况。结果:大鼠麻醉清醒后,SCI组大鼠损伤平面以下完全瘫痪。BBB评分结果显示:术后第7 d~28 d,与正常对照组相比,SCI组BBB评分明显降低(P0.05);与SCI组相比,BYHWD处理组和MP处理组大鼠BBB评分明显增高(P0.05),但BYHWD处理组和MP处理组大鼠相比,BBB评分无明显差异(P0.05)。Real-time PCR和Western Blot结果显示:与正常对照组相比,SCI组Bax蛋白及mRNA的表达明显升高(P0.05),而Bcl-2蛋白及mRNA的表达则明显有所降低(P0.05)。与SCI组相比,BYHWD处理组和MP处理组大鼠脊髓组织Bax蛋白及mRNA表达明显降低(P0.05),而Bcl-2蛋白及mRNA表达则明显有所升高(P0.05)。但BYHWD处理组和MP处理组大鼠脊髓组织Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达之间无明显差异(P0.05)。结论:BYHWD可以改善SCI大鼠后肢的运动功能,通过下调Bax的表达,上调Bcl-2的表达,从而抑制SCI大鼠脊髓神经细胞的凋亡,发挥其保护作用。     

雌激素对大鼠胸腺细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响

目的:探讨苯甲酸雌二醇对大鼠胸腺Bcl-2和Bax表达及细胞凋亡的影响及其机制.方法:雌性大鼠行卵巢切除术,给予苯甲酸雌二醇后,观察胸腺指数的变化,Hochest33342荧光染色及透射电镜标本观察胸腺细胞凋亡情况,免疫组织化学检测胸腺组织中Bcl-2和Bax的表达情况,原位杂交技术检测Bcl-2、Bax m RNA的表达情况.结果:双侧卵巢切除组大鼠胸腺指数较假手术组增加,双侧卵巢切除+雌激素组大鼠胸腺指数较双侧卵巢切除组减小;假手术组和双侧卵巢切除组大鼠胸腺组织中以正常胸腺细胞为主,偶见凋亡细胞或凋亡小体,双侧卵巢切除+雌激素组可见较多凋亡细胞和凋亡小体;双侧卵巢切除+雌激素组大鼠胸腺组织中Bcl-2表达较双侧卵巢切除组和假手术组增高明显降低,而Bax表达呈现相反趋势;Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达与Bcl-2、Bax的表达呈一致性.结论:雌激素可以降低大鼠胸腺指数,抑制胸腺组织中Bcl-2的表达,促进Bax的表达,从而诱导大鼠胸腺细胞凋亡,促进雌性大鼠胸腺退化.     

高血脂对脑缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:通过检测大脑皮质内Bcl-2和Bax蛋白的表达,探讨高血脂加重脑缺血再灌注损伤的可能机制.方法:高脂饲料喂养建立高脂血症动物模型,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型.神经行为学评分观察大鼠神经行为改变、TTC染色检测梗死灶体积、免疫印迹检测Bcl-2和Bax的表达.结果:与假手术组比较,单纯脑缺血再灌注组和高血脂合并脑缺血再灌注组Bcl-2和Bax表达增加,并随再灌注时间的延长表达逐渐增加,再灌注24 h时达高峰,而后又降低.相同再灌注时间点,与单纯脑缺血再灌注组比较,高血脂合并脑缺血再灌注组Bcl-2减少但Bax增加.结论:高血脂可通过影响Bcl-2和Bax蛋白的表达,使Bcl-2/Bax值降低,加重脑缺血再灌注损伤.     

雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞Bcl-2和Bax表达的影响

本实验建立了去卵巢和雌激素替代疗法动物模型,用免疫组织化学SABC法结合图象分析方法,观察大鼠心内神经节细胞中Bcl-2和Bax的变化,探讨雌激素对卵巢摘除大鼠心内神经节细胞中Bcl-2和Bax表达的影响。去卵巢(OVX)大鼠心内神经节细胞中Bcl-2的表达较正常对照组明显减弱(P<0.05),雌激素替代治疗组大鼠心内神经节中Bcl-2的表达与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05),而较卵巢摘除组显著增高(P<0.05);卵巢摘除后同时给予特异性雌激素受体阻断剂(TAM)和17β-雌二醇(OVX+TAM+ERT)组大鼠心内神经节中Bcl-2的表达较正常对照组显著减弱(P<0.05),但与OVX组无显著性差异(P>.05)。各组中Bax的表达无显著性差异(P>0.05)。实验结果提示雌激素能上调大鼠心内神经节细胞中Bcl-2的表达,但对Bax的表达无影响。     

姜黄素对大鼠胸主动脉瘤Bcl-2和Bax表达的影响

目的 探讨姜黄素对大鼠胸主动脉瘤形成过程中Bcl-2和Bax表达的影响。方法 将30只成年雄性Wistar大鼠随机分为3组,即对照组、动脉瘤组和姜黄素治疗组。采用氯化钙（CaCl2）诱导法制备胸主动脉瘤模型,术后4周取材。HE染色及地衣红染色观察胸主动脉组织学改变;免疫组织化学和Western blotting方法检测动脉瘤壁Bcl-2和Bax的表达。结果 姜黄素可明显抑制胸主动脉的扩张。与对照组比较,动脉瘤组Bax表达水平明显升高,Bcl-2表达水平降低,姜黄素能有效降低动脉瘤中Bax的表达,升高Bcl-2表达水平。 结论 姜黄素可以促进胸主动脉瘤Bc1-2蛋白的表达,抑制Bax蛋白的表达,降低Bax/Bcl-2的比值。     

高脂血症对大鼠主动脉内皮细胞Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨高脂血症SD大鼠主动脉内皮细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的变化及其诱导内皮细胞凋亡的可能机制。方法:清洁级大鼠17只,随机分为高脂血症模型组(8只)和对照组(9只),分别以高脂饲料和普通饲料喂养16周后,检测血脂水平,采用免疫组织化学方法检测两组大鼠主动脉内皮细胞Bax、Bcl-2的表达,同时用HE染色和电镜观察主动脉组织形态学改变。结果:与对照组相比,模型组大鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平升高(P<0.01),主动脉内皮细胞Bax蛋白表达明显增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显减少(P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01);模型组主动脉内膜增厚和平滑肌细胞增殖,内皮组织部分脱落,内皮细胞胞膜破裂,胞质脱失,核膜不完整。结论:高脂血症可引起大鼠血管内皮细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2水平及比值改变,加重血管内皮损伤,促进细胞凋亡,加速动脉粥样硬化进程。     

白介素10对大鼠缺血梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax表达的作用研究

目的 探讨白介素10对大鼠脑缺血梗死灶周围Bcl-2和Bax表达的作用.方法 18只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑缺血组(MCAO组)、脑缺血 溶剂对照组(Vehicle组)和脑缺血 IL-10干预组(IL-10组),免疫组化和RT-PCR法观察术后24h梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax表达水平的变化.结果与Sham相比,MCAO组梗死灶周围脑组织Bcl-2和Bax的表达显著上调,Bcl-2/Bax比值显著下降;与Vehicle组比,IL-10组Bcl-2的表达显著上调,Bax表达显著下调,Bcl-2/Bax比值显著增加.结论 IL-10与脑缺血梗死灶周围Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax比值增加有关,提示IL-10可能与抑制梗死灶周围脑组织神经细胞凋亡有关.     

丙酸睾酮对大鼠胸腺细胞凋亡及胸腺中Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨丙酸睾酮在大鼠胸腺退化过程中的作用及其对大鼠胸腺中Bcl-2和Bax表达的影响。方法雄性大鼠去势后给予丙酸睾酮皮下注射,分别于注射后第1、4、7天取材,用半薄切片甲苯胺蓝染色检测胸腺细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测胸腺组织中Bcl-2和Bax的表达情况,采用t检验进行统计学处理。结果丙酸睾酮处理组大鼠胸腺组织中可发现较多的凋亡细胞和凋亡小体;去势组大鼠胸腺组织中Bcl-2表达量明显高于假手术组（P〈0.001）,丙酸睾酮处理后Bcl-2表达量明显减少（P〈0.001）;而Bax的表达正好相反,去势组大鼠胸腺组织中Bax表达量明显低于假手术组（P〈0.001）,给予丙酸睾酮后Bax表达量明显增加（P〈0.001）;结论丙酸睾酮可诱导大鼠胸腺细胞凋亡,并抑制大鼠胸腺组织中Bcl-2的表达,促进Bax的表达。     

Real-Time PCR检测Bcl-2和Bax基因在脊髓钝挫伤大鼠中的表达

目的使用Real-Time PCR检测脊髓钝挫伤后不同时间点Bcl-2和Bax基因表达变化。方法 SD成年雌性大鼠72只,随机分为假手术组、脊髓挫伤6h组、脊髓挫伤12h组、脊髓挫伤1d组、脊髓挫伤3d组、脊髓挫伤5d组、脊髓挫伤7d组、脊髓挫伤14d组和脊髓挫伤28d组。大鼠于术后相应各时间点取损伤段脊髓进行RealTime PCR,对基因Bcl-2和Bax表达进行定量分析。结果 Real-Time PCR发现假手术组Bax和Bcl-2基因mRNA水平较高,损伤后均明显下降。Bax基因mRNA在损伤后6h立即下降,12h时明显上升(P<0.01),在损伤后3d又呈现显著性下降(P<0.01),此后一直持续这个水平至28d。Bcl-2基因在损伤后6h也明显下降(P<0.01),12h时立即上升(P<0.01),1d时下降(P<0.01),至损伤后14d又显著性上升(P<0.01)。结论脊髓钝挫伤后大鼠Bax和Bcl-2基因mRNA表达水平于早期显著下降,之后明显上升随后又下降。Bax和Bcl-2基因在脊髓损伤后基因的表达变化为脊髓损伤机制研究提供理论依据。     

神经干细胞移植对脑外伤大鼠神经功能及脑组织Bcl-2与Bax表达的影响

目的探讨神经干细胞移植对脑外伤大鼠神经功能及脑组织Bcl-2与Bax表达的影响。方法108只SD成年大鼠随机分为假手术组(36只)、脑外伤组(36只)和神经干细胞移植组(36只)。采用改良的Feeney氏法制作大鼠脑外伤动物模型,损伤1周后在皮质处局部注射移植神经干细胞,分别在细胞移植后的第7天、14天和21天进行神经功能评分。免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠脑组织Bcl-2与Bax蛋白的表达。结果脑外伤组大鼠出现明显的神经功能障碍,神经干细胞移植后第7、14和21天大鼠的神经功能评分明显降低(P0.05)。与假手术组相比,不同时间点脑外伤组大鼠脑组织Bcl-2蛋白的表达显著降低,Bax蛋白的表达显著升高(P0.05);与相同时间点的脑外伤组大鼠相比,神经干细胞移植组大鼠脑组织Bcl-2蛋白的表达显著升高,Bax蛋白的表达显著降低(P0.05)。结论神经干细胞移植促进脑外伤大鼠神经功能的恢复可能与上调Bcl-2蛋白和下调Bax蛋白表达相关。     

热休克蛋白70在缺糖损伤的HeLa细胞中对Bax和Bcl-2以及Bax构象改变的影响

目的 观察热休克蛋白70(Hsp70)对缺糖引起的HeLa细胞凋亡的影响,探讨其与凋亡相关的Bcl-2家族成员的相互作用关系. 方法 用人正义Hsp70重组质粒稳定转染HeLa细胞获得Hsp70过表达细胞.采用Hsp70过表达和正常HeLa细胞无糖培养建立两组细胞损伤模型,并均取3个平行样本.四甲基偶氮唑盐(MTT)法测细胞活率;Hoechst染色法和Giemsa染色法检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测Bax和Bcl-2的表达变化,并计算其灰度比值;细胞免疫化学和荧光免疫法检测Bax构象改变情况. 结果 缺糖48h内,Hsp70明显抑制了HeLa细胞凋亡并增强其活力,同时也抑制了凋亡细胞中 Bax/Bcl-2的增高以及Bax的构象改变. 结论 缺糖诱导下,热休克蛋白70在HeLa细胞中能够通过与Bcl-2家族成员作用而抑制凋亡的发生.     

人参皂甙Rg1对大鼠肢体缺血再灌注后脑组织Bax和Bcl-2表达的影响

目的:探讨肢体缺血再灌注(LIR)后脑组织Bax和Bcl-2基因表达的变化及人参皂甙Rg1对其影响.方法: 复制大鼠LIR模型,用人参皂甙Rg1进行干预,测定脑组织丙二醛(MDA)含量,采用尼氏染色观察脑组织病理学改变,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫组织化学方法检测Bax、Bcl-2表达,免疫印迹法检测Bax、Bcl-2表达变化.结果: 大鼠LIR后,脑组织海马区、中脑红核区神经元细胞受损,脑组织出现水肿裂隙,Bax的表达明显上调,与细胞凋亡数量的增加相一致,Bcl-2表达也相应增加.人参皂甙Rg1干预组与LIR组相比,MDA含量、凋亡细胞数、Bax表达降低.Bcl-2表达降低不明显.结论: LIR后有细胞凋亡机制参与脑损伤的发生,人参皂甙Rg1可能通过抑制Bax表达,降低Bax/Bcl-2比值,从而减轻脑损伤.     

Effect of curcumin on Bcl-2 and Bax expression in nude mice prostate cancer

Prostate cancer is a common malignant tumor in urinary system. Curcumin has curative effect on many kinds of cancers and can inhibit prostate cancer (PC)-3 cells proliferation. This study aimed to explore the curcumin induced prostate cancer cell apoptosis and apoptosis related proteins Bcl-2 and Bax expression. PC-3 cells were injected subcutaneously to the nude mice to establish the tumor model. The nude mice were randomly divided into group C (normal saline), group B (6% polyethylene glycol and 6% anhydrous ethanol), group H, M, L (100 mg/kg, 50 mg/kg, and 25 mg/kg curcumin). The tumor volume was measured every 6 days to draw the tumor growth curve. The mice were killed at the 30^th day after injection to weight the tumor. TUNEL assay was applied to determine cell apoptosis. Immunohistochemistry was used to detect Bcl-2 and Bax expression. The tumor volume and weight in group H, M, L were significantly lower than the control group (C, B) (P<0.05), and the inhibitory rate increased following the curcumin dose increase. Compared with the control group, Bcl-2 expression in group H, M, L gradually decreased, while Bax protein expression increased (P<0.05). The cell apoptosis rate showed no statistical difference between group B and C, while it increased in curcumin group H, M, and L (P<0.05). Curcumin could inhibit PC-3 growth, decrease tumor volume, reduce tumor weight, and induce cell apoptosis under the skin of nude mice by up-regulating Bax and down-regulating Bcl-2.     

镉影响大鼠胎盘发育及Bcl-2和Bax的表达

目的通过观察镉暴露后胎盘组织形态结构和凋亡相关蛋白表达量的改变，探讨镉对胎盘组织中细胞增殖与凋亡的影响。方法将孕6天（E6）的20只孕鼠随机分成染镉组和对照组，染镉组一次性腹腔注射氯化镉，剂量为2mgCd／kg体重。两组的孕鼠分别于E14和E18断椎处死，每只孕鼠随机取出6个胎盘，制备石蜡切片。行HE染色观察染镉后胎盘的形态改变，免疫组织化学技术显示镉对Bcl-2和Bax表达的影响。结果染镉组胎盘海绵带滋养层细胞、巨细胞和空泡化细胞增多，且迷路带及海绵带滋养细胞呈退行性改变。染镉组胎盘组织细胞中的Bcl-2蛋白表达量比相应的对照组表达量明显降低（E14：t=7．067，P〈0．01；E18：t=6．988，P〈0．01）；Bax蛋白表达量比相应的对照组表达量明显增多（E14：t=4．008，P〈0．01；E18：t=4．732，P〈0．01）；Bcl-2／Bax比值与相应对照组之间的差异有统计学意义（E14：t=9．517，P〈0．05；E18：t=23．380，P〈0．01）。结论镉可以通过影响Bcl-2和Bax的表达，改变Bcl-2／Bax比值，使胎盘组织细胞的增殖和凋亡平衡紊乱，导致胎盘发育异常。     

不同剂量的一氧化氮对福尔马林炎性痛大鼠脊髓背角Bcl-2/Bax表达的影响

目的:探讨多次应用不同剂量的一氧化氮(NO)对福尔马林炎性痛中脊髓背角神经元Bcl-2、Bax表达的影响。方法:连续4 d给大鼠各进行鞘内注射不同剂量的一氧化氮前体左旋精氨酸(L-arginine,L-Arg)10μg/d(低L-Arg组)、250μg/d(高L-Arg组)或一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methylester,L-NAME)2700μg/d(L-NAME组),鞘内注射生理盐水(NS组)作为对照,各给药1次/d。随后于大鼠右后肢脚掌皮下注射福尔马林(2%,100μl),4 h后分别做免疫组化和Western Blot检测脊髓背角Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:免疫组化结果显示,Bcl-2和Bax表达分布于两侧脊髓背角,但主要位于脊髓背角浅层,各组在注射福尔马林同侧均明显高于对侧。Western Blot结果显示Bcl-2和Bax蛋白表达含量的比值,在各实验组与对照组比较,低L-Arg组Bcl-2/Bax比值明显升高,而高L-Arg组和L-NAME组Bcl-2/Bax比值均明显降低。bcl-2为抑制细胞凋亡的基因,而bax为促进细胞凋亡的基因。结论:在炎性痛模型中,低剂量的NO以促进抑凋亡基因的表达为主,而高剂量的NO以及NO生成不足均以促进促凋亡基因的表达为主,进而影响炎性痛的发生。     

Bcl-2 和Bax蛋白在慢性病毒性肝炎肝组织中的表达

目的研究细胞凋亡相关的Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白在慢性病毒性肝炎（ＣＨ）肝组织中表达的情况与该病发生发展的关系。方法对３５例不同病变程度的ＣＨ肝组织用免疫组化法检测Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的表达及定位。结果Ｂｃ１－２和Ｂａｘ分布基本一致，轻、中度ＣＨ主要见于碎屑样坏死（ＰＮ）区中的单个核细胞（ＭＮ），邻近ＰＮ区边缘的肝细胞浆中也有强阳性表达。ＨＥ染色观察，这些Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ阳性肝细胞多呈重度水样变性或嗜酸性变。在重度ＣＨ肝组织中Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ阳性的ＭＮ主要分布于重度ＰＮ区和桥接坏死区，周围部分肝细胞Ｂａｘ阳性，而Ｂｃｌ－２为阴性。在慢性重型肝炎，Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ除在亚大块肝细胞坏死区浸润的ＭＮ胞浆内表达外，残存肝细胞亦呈阳性表达。结论Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ在肝组织中的表达可能不仅与ＣＨ的细胞凋亡有密切关系，而且与慢性重型肝炎的发生发展有关     

凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax在糖尿病大鼠下颌下腺内的表达

目的:观察糖尿病大鼠下颌下腺内凋亡相关蛋白Bcl-2和Pax表达变化.方法:SD雄性大鼠用链脲佐菌素复制糖尿病动物模型,H-E染色观察下颌下腺形态学变化,免疫组织化学SABC技术检测Bcl-2及Bax蛋白表达变化.结果:糖尿病组大鼠下颌下腺组织萎缩,间质纤维增生.与对照组比较,糖尿病组大鼠下颌下腺导管上皮细胞Bcl-2表达下降,Bax表达显著增加.结论:Bcl-2及Bax表达在糖尿病病理变化过程中出现了一定的变化规律.     

Bcl-2/Bax蛋白在生后大鼠卵巢不同发育时期的表达

目的 探讨Bcl-2/Bax与卵泡发育和凋亡的关系. 方法 用免疫组织化学技术和图像分析系统,对95只大鼠生后不同发育时期卵巢中凋亡相关因子Bcl-2/Bax的表达情况进行研究. 结果 0～360 d卵巢各级卵泡中的卵母细胞均呈Bcl-2/Bax阳性染色.正常卵细胞中Bcl-2反应强于Bax,退化卵细胞中Bax的反应强于Bcl-2.Bcl-2/Bax在卵泡细胞中的表达模式有所不同,21d前 Bcl-2为阳性,21～150d之间为Bcl-2阴性;180d以后正常卵泡为阴性,闭锁卵泡为阳性;Bax的表达,180d前全为阴性,180d后的表达同Bcl-2.膜细胞中Bcl-2/Bax的表达与卵泡细胞存在相似之处.Bcl-2/Bax在黄体中的表达只见于180d后. 结论 Bcl-2/Bax对卵细胞的生长、发育、存活和凋亡可能有重要的调节作用,其对卵泡细胞、膜细胞及黄体细胞的存活和凋亡的调节作用不明显.