急性早幼粒细胞白血病患者巨核系祖细胞集落形成单位的抑制活性

确定急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者血清及全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）对正常骨髓巨核系祖细胞集落形成（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）生长是否有抑制作用。方法用细胞培养方法，动态观察２２例ＡＰＬ患者用ＡＴＲＡ治疗时其血清及１０－６ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长的影响，同时测定患者血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）活性和骨髓白血病细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｌ）。结果治疗前，血清对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长呈抑制作用（２９．６％±２．４％），该活性随治疗而减轻，骨髓缓解时为刺激作用（－１８．７％±４．１％，Ｐ＜０．００１），与骨髓ＣＦＵ－Ｌ、血清ＴＮＦ活性呈正相关，与血小板计数、骨髓巨核细胞数呈负相关，ＡＴＲＡ促进ＣＦＵ－Ｍｅｇ的生长。结论ＡＰＬ患者血清对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长有抑制作用，该作用可监测疗效，Ａ－ＴＲＡ对ＣＦＵ－Ｍｅｇ生长有刺激作用。     

急性早幼粒细胞白血病患者巨核系祖细胞集落形成单位的抑制活性

急性早幼粒细胞白血病患者巨核系祖细胞集落形成单位的抑制活性周荣富孙关林吴文，等（中华医学杂志１９９６，７６（４）∶２７８）目的确定急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）患者血清及全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）对正常骨髓巨核系祖细胞集落形成（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）生长是否...     

维甲酸对正常造血祖细胞集落形成的影响

用细胞培养方法观察了不同浓度（１０－９～１０－５ｍｏｌ／Ｌ）的全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）对正常造血祖细胞集落形成的影响。结果表明，随着浓度的增加，ＡＴＲＡ对红系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ）的抑制作用增加，但在１０－８～１０－６ｍｏｌ／Ｌ内对粒单系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）的形成有促进作用，１０－６ｍｏｌ／Ｌ的ＡＴＲＡ对巨核系祖细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）生长也有促进作用，提示在急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）用ＡＴＲＡ治疗过程中，ＡＴＲＡ参与了其正常造血功能的恢复。     

肿瘤坏死因子α基因转染人脑胶质瘤浸润淋巴细胞的实验研究

采用脂质体转染技术将能表达肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）基因的重组逆转录病毒质粒ｐＬ（ＴＮＦ－α）ＳＮ导入病毒包装细胞ＰＡ３１７，在细胞培养上清液中得到重组病毒，滴度为１．４×１０９ＣＦＵ／Ｌ。将此病毒上清液感染人脑胶质瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ），用Ｇ４１８筛选出能表达标记基因ＮｅｏＲ的阳性克隆，ＥＬＩＳＡ法测得ＮｅｏＲ阳性ＴＩＬ培养上清液中存在ＴＮＦ－α，可达５３０ｎｇ／Ｌ，Ｌ９２９依赖细胞法并测出上清液中有ＴＮＦ－α生物学活性。结果表明，我们构建的重组逆转录病毒可介导ＴＮＦ－α基因在人脑胶质瘤ＴＩＬ中的表达     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者的淋巴细胞对红系和粒-巨噬系祖细胞的影响

为了研究阵发性睡眠性血红蛋白尿（ＰＮＨ）患者的淋巴细胞对红系和粒－巨噬系祖细胞的影响，将ＰＮＨ患者的植物血凝素－淋巴细胞培养液（ＰＨＡ－ＬＣＭ）加入造血祖细胞培养基中，用于红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）和粒－巨噬系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）的培养。结果在含有ＰＮＨ患者的ＰＨＡ－ＬＣＭ的培养条件下，ＰＮＨ患者骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ集落数明显低于含有正常人ＰＨＡ－ＬＣＭ的培养条件下的集落数；正常人骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ集落数亦明显低于含有正常人的ＰＨＡ－ＬＣＭ培养条件下的集落数。结果表明ＰＮＨ患者淋巴细胞对造血的支持作用减弱。     

雷公藤单体T_4对类风湿关节炎患者周围血单个核细胞及滑膜细胞产生肿瘤坏死因子的影响

观察了经雷公藤单体Ｔ_４处理２ｈ后对正常人和类风湿关节炎（ＲＡ）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）及ＲＡ患者消化的滑膜单个细胞（ＲＡ－ＤＳＳＣ）分泌ＴＮＦ的影响。在３５ｎｇ／ｍｌ浓度下，正常人ＰＢＭＣ（ｎ＝１０）及ＲＡ－ＰＢＭＣ（ｎ＝６）Ｔ_４处理组产生ＴＮＦ活性水平明显低于对照组（Ｐ＜０．００１）。延长Ｔ_４作用时间至６ｈ，ＲＡ－ＰＢＭＣＴ_４处理组ＴＮＦ活性水平下降更为明显（Ｐ＜０．００１），表明Ｔ_４可抑制ＰＢＭＣ体外产生ＴＮＦ活性水平，其对ＲＡ－ＰＢＭＣ作用不同时间的抑制率分别为２５．５４％及４０．５１％（Ｐ＜０．０１），说明Ｔ_４抑制作用可能与作用时间有关。同时Ｔ_４亦可抑制ＲＡ－ＤＳＳＣ体外产生ＴＮＦ活性水平（Ｐ＜０．０１），提示Ｔ_４有望成为一新的植物性治疗ＲＡ药物。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者的淋巴细胞对红系和粒—巨噬？…

为了研究阵发性睡眠性血红蛋白尿（ＰＮＨ）患者的淋巴细胞对红系和粒－巨噬系祖细胞的影响，将ＰＮＨ患者的植物血凝素－淋巴细胞培养液（ＰＨＡ－ＬＣＭ）加入造血祖细胞培养基中，用于红系爆式集落形成单位（ＢＦＵ－Ｅ）和粒－巨噬系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）的培养。结果在含有ＰＮＨ患者的ＰＨＡ－ＬＣＭ的培养条件下，ＰＮＨ患者骨髓ＢＦＪ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ集落数明显低于含有正常人ＰＨＡ－ＬＣＭ的培养条件下的集落数     

急性白血病患者骨髓细胞体外培养及其临床意义

作者报告了４８例急性白血病患者的骨髓髓系白血病细胞集落（ＡＭＬ－ＣＦＵ）和粒－单核细胞集落（ＧＭ－ＣＦＵ）体外培养的结果。结果表明，急非淋白血病治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数比缓解组高，而ＧＭ－ＣＦＵ比缓解组低，差异显著。观察１４例急非淋白血病患者治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数与预后的关系，发现ＡＭＬ－ＣＦＵ丛／集比值具有判断预后的价值，ＡＭＬ－ＣＦＵ数与此无关。本文还提出，ＡＭＬ－ＣＦＵ培养用于微小残余白血病的诊断必须结合形态观察。     

急性白血病患者骨髓细胞体外培养及其临床意义

作者报告了４８例急性白血病患者的骨髓髓系白血病细胞集落（ＡＭＬＣＦＵ）和粒－单核细胞集落（ＧＭ－ＣＦＵ）体外培养的结果。结果表明，急非淋白血病治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数比缓解组高，而ＧＭ－ＣＦＵ比缓解组低，差异显著。观察１４例急非淋白血病患者治疗前ＡＭＬ－ＣＦＵ数与预后的关系，发现ＡＭＬ－ＣＦＵ丛／集比值具有判断预后的价值，ＡＭＬ－ＣＦＵ数与此无关。本文还提出，ＡＭＬ－ＣＦＵ培养用于微小残余白血病的诊     

脐血血清对正常及白血病骨髓粒－单祖细胞生长的影响

利用粒－单祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）的体外培养，观察脐血血清（ＵＣＳ）对正常及白血病骨髓造血祖细胞生长的影响，结果表明：ＵＣＳ对正常及急性白血病（ＡＬ）患者完全缓解的骨髓ＣＦＵ－ＧＭ形成有一定增殖作用，而对初发／复发未治ＡＬ患者的骨髓ＣＦＵ－ＧＭ形成无类似作用。     

血清和脑脊液中肿瘤坏死因子α水平与急性白血病相关性研究

目的：观察急性白血病（ＡＬ）与中枢神经系统白血病（ＣＮＳ－Ｌ）患者血清与脑脊液（ＣＳＦ）中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）水平变化，并探讨其临床意义。方法：用酶联免疫检测盒，采用双抗体夹心方法（ＥＬＩＳＡ），同时检测３６例ＡＬ患者与１３例正常对照组血清与ＣＳＦ中ＴＮＦα水平。结果：各型急性白血病患者血清与ＣＳＦ中ＴＮＦα均明显升高，并发ＣＮＳ－Ｌ后ＣＳＦ中ＴＮＦα进一步升高；急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）     

雷公藤单体T4对类风湿关节炎患者周围血单个核细胞及滑膜…

观察了经雷公藤单体Ｔ４处理２ｈ后对正常人和类风湿关节炎患者外周血单个核细胞及ＲＡ患者消化的滑膜单个细胞分泌ＴＮＦ的影响。在３５ｎｇ／ｍｌ浓度下，正常人ＰＢＭＣ（ｎ＝１０）及ＲＡ－ＰＢＭＣ（ｎ＝６）Ｔ４处理组产生ＴＮＦ活性水平明显低于对照组（＜０．００１）。延长Ｔ４作用时间至６ｈＲＡ－ＰＢＭＣＴ４处理组ＴＮＦ活性水平下降更为明显（Ｐ＜０．００１），表明Ｔ４可抑制ＰＢＭＣ体外产生ＴＮＦ活性水平，其对Ｒ     

ATP─MgCl2复合液抑制烫伤大鼠氧自由基和肿瘤坏死因子的生成

目的：研究ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２对烧伤早期自由基及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的生成所产生的影响．方法：通过大鼠３０％总体表面积（ＴＢＳＡ）三度烫伤模型观察经ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２治疗后，血清ＴＮＦ－α生物学活性及全血细胞化学发光峰时和峰值的变化．结果：烫伤６ｈ后，血清ＴＮＦ－α生物学活性明显升高（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），至伤后２４ｈ均维持在较高水平．伤后立即经ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２治疗可明显抑制血清ＴＮＦ－α活性升高．伤后６～２４ｈ，中性粒细胞（ＰＭＮ）产生氧自由基的能力明显增强（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），但血浆调理活性降低．伤后立即给予ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２治疗，可抑制ＰＭＮ产生氧自由基的能力，同时提高血浆对ＰＭＮ的调理作用．结论：ＡＴＰ－ＭｇＣｌ２可降低烧伤早期炎症介质ＴＮＦ的生物学活性，抑制ＰＭＮ过度产生自由基，有利于严重烧伤机体重要脏器功能的维护     

脐血抗—HPCA—2和Tük3标记的CD34阳性细胞的流式细胞仪比较分析

在标记脐血造血祖细胞表面抗原（ＨＰＣＡ），ＣＤ３４中，比较抗－ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ和Ｔｋ３（纯抗体）标记的ＣＤ（３４＋）细胞在流式细胞仪分析中的荧光特征及两种单抗标记的ＣＤ（３４＋）细胞与体外培养的粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆发形成单位（ＢＦＵ－Ｅ），和混合集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｉｘ）的相关性。结果发现脐血有核细胞中，抗ＨＰＣＡ－２阳性细胞占１．０５±０．７２％（ｎ＝１３），Ｔｋ３阳性细胞占２．０６±１．２５％（ｎ＝８），差别显著（Ｐ＜０．０５）。每毫升脐血两种抗体标记的细胞分别为９６．５６±５６．６４和２３１．４０±１６３．９３（Ｐ＜０．０５）。尽管ＨＰＣＡ－２阳性细胞与Ｔｋ３阳性细胞数量呈显著正相关（ｒ＝０．８７５，Ｐ＜０．０１），前者与ＣＦＵ－ＧＭ，ＢＦＵＥ，ＣＦＵ－Ｍｉｘ及集落总数ＣＦＵｓ均呈正相关，而后者仅与ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵｓ相关。研究提示在检测造血祖细胞时，用抗－ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ代替Ｔｋ３可降低假阳性，获得较好的ＯＤ（３４＋）细胞与ＣＦＵ间的线性关系。     

PHA—MNCCM对慢性再障骨髓基质细胞生长影响的研究

目的：探讨植物血素－单个核细胞条件培养液（ＰＨＡ－ＭＮＣＣＭ）对正常人与慢性再障（ＣＡＡ）成纤维细胞集落（ＣＦＵ－Ｆ）形成的影响,以及对再障血清中抑制物的拮抗作用。方法：采用改良Ｇａｓｔｒｏ－Ｍａｌａｓｐｉａ培养法,分组观察ＣＦＵ－Ｆ形成率。结果：标准培养体系中ＣＡＡ组ＣＦＵ＿Ｆ产率明显低于正常组（Ｐ〈０．０１）,ＰＨＡ－ＭＮＣＣＭ刺激ＣＡＡ组ＣＦＵ－Ｆ形成作用明显大于正常组（Ｐ〈０．００１）,Ｃ     

肝癌患者血清中TNF,IFN含量变化及其与乙肝病毒复制关系…

该实验应用Ｌ９２９细胞杀伤法和微量细胞病变抑制法对乙肝病毒标志物阳性肝癌患者血清中肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）和干扰素（ＩＦＮ）含量进行了检测，并对肝癌患者血清ＴＮＦ，ＩＦＮ含量变化与乙肝病毒复制指标ＨＢｅＡｇ的关系进行了观察，结果表明肝癌患者血清中ＴＮＦ活性明显高于对照组（Ｐ〈０．０１），ＩＦＮ含量明显低于对照组，肝癌患者ＨＢｅＡｇ阳性患者ＴＮＦ活性及ＩＦＮ含量显著高于ＨＢｅＡｇ阴性患者（Ｐ〈０．０１     

白血病相关抑制物对CFU－GM增殖的抑制作用

用半固体双层琼脂培养法，将白血病细胞植入底层，正常ＣＦＵ－ＧＭ植入上层，作白血病细胞与正常ＣＦＵ－ＧＭ的共同培养。结果发现，底层琼脂中加入０．５×１０５／ｍｌ的白血病细胞后，上层琼脂中的ＣＦＵ－ＧＭ从对照组的１９３．５下降至１２３．１／１×１０５个骨髓有核细胞（ＢＭＮＣ），加入底层的白血病细胞增加时，ＣＦＵ－ＧＭ生成进行性受抑制，当植入的白血病细胞数达１５×１０５／ｍｌ时，几乎无ＣＦＵ－ＧＭ生成。此抑制作用亦见于白血病细胞的培养上清液中。量－效关系测定发现，正常ＣＦＵ－ＧＭ培养体系中加入１０％的白血病细胞培养上清液时，ＣＦＵ－ＧＭ生成率从对照纪的１１２．２下降到８８．６／１×１０５ＢＭＮＣ，以后抑制效应不再增加。以上结果揭示，白血病细胞对ＣＦＵ－ＧＭ的抑制是经某种体液因子实现的。     

阵发性睡眠性血红蛋白尿患者骨髓多向祖细胞的特点

采用造血祖细胞体外培养技术,研究阵发性睡眠性血蛋白尿（ＰＮＨ）患者骨髓多向祖细胞（ＣＦＵ－Ｍｉｘ）的增殖能力;骨髓细胞经酸化ＡＢ血清处理后ＣＦＵ－Ｍｉｘ的增殖能力。发现ＰＮＨ患者骨髓ＣＦＵ－Ｍｉｘ的集落数明显低于正常;骨髓细胞顷新鲜酸化ＡＢ血清处理后的ＣＦＵ－Ｍｉｘ集落数,明显低于经热酸化ＡＢ血清处理后培养的集落数。     

逆转录病毒介导的TNFa基因在胶质瘤细胞系（C6）中的表达及对肿瘤细胞恶性生长的影响

利用逆转录病毒载体ＬＸＳＮ构建了含有完整编码ＴＮＦｃＤＮＡ的重组逆转录病毒质粒ｐＬＸＳＮ－ｔｎｆ，用Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ将重组质粒导入病毒包装细胞ｐＡ３１７，经Ｇ４１８筛选培养获得抗性克隆，用ＮＩＨ３Ｔ３细胞测定病毒滴度，获得滴度为５×１０５ＣＦＵ／ｍｌ的细胞克隆。利用病毒上清液感染大鼠胶质瘤细胞系Ｃ６，得到Ｇ４１８抗性克隆细胞Ｃ６ｐＬＸＳＮ－ｔｎｆ，经ＰＣＲ检测，ＴＮＦｃＤＮＡ完整地整合在细胞基因组中。测定Ｃ６ｐＬＸＳＮ－ｔｎｆ细胞上清中ＴＮＦ的生物活性，结果显示ＴＮＦ有相对稳定的表达（４８～１８０Ｕ／ｍｌ１０６ｃｅｌｌｓ／２４ｈ）。实验还显示经ＴＮＦ基因转导的Ｃ６ｐＬＸＳＮ－ｔｎｆ细胞生长速度较之亲本肿瘤细胞Ｃ６明显下降，基因修饰后的肿瘤细胞在Ｗｉｓｔａｒ大鼠体内形成肿瘤的能力明显受到抑制。进一步用超离心法浓缩病毒对胶质瘤移植模型进行了体内治疗研究。     

G-CSF和GM-CSF对髓系白血病细胞增殖的影响

目的 了解粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对髓系白血病细胞增殖的影响。方法 采用甲基纤维素半固体培养法培养白血病细胞集落（ＣＦＵ－Ｌ）,观察Ｇ－ＣＳＦ和ＧＭ－ＣＳＦ对１１例ＡＭＬ和ＣＭＬ患者外周血ＣＦＵ－Ｌ形成的影响。结果 ＣＭ－ＣＳＦ对ＣＦＵ－Ｌ的促进作用明显高于Ｇ－ＣＳＦ（Ｐ＝０．０１２）,而Ｇ－ＣＳＦ对ＣＦＵ－Ｌ形成影响与对照组没有显著性差别（Ｐ＝０．４９５）。结论 Ｇ－ＣＳＦ对髓系白血病细胞体外增殖无明显影响,作为髓系白血病大剂量化疗的支持治疗可能更为安全。