δ阿片受体在急性全脑缺血再灌注中的表达变化

目的：观察δ阿片受体（DOR）在急性全脑缺血及再灌注时的表达变化。以评价其与脑复苏时再灌注损伤的关系。方法：30只健康雄性SD大鼠随机分成假手术组、全脑缺血组和缺血再灌注组，分别建立急性全脑缺血及再灌注大鼠模型模拟心跳骤停引起的全脑缺血与再灌注损伤。采用Western blotting（Western印迹法）方法研究全脑缺血及再灌注大鼠脑组织中DOR的表达变化。结果：缺血组DOR的表达低于假手术组（下调），而缺血再灌注组中的DOR表达高于假手术组（上调）。结论：全脑缺血的机制可能涉及δ阿片受体的下调；DOR可能通过上调自身的缺血预处理作用以减轻全脑缺血再灌注损伤而起保护作用。     

δ阿片受体激动剂DADLE对大鼠皮质神经元缺氧损伤的影响

目的 探讨δ阿片受体激动剂DADLE对于体外培养的火鼠皮质神经元抗物理缺氧损伤是否具有保护作用.方法 将体外培养8d的大鼠皮质神经兀进行MAP2免疫荧光鉴定后,随机分为4组:缺氧组(n=6),缺氧+DADLE预处理组(n=6),对照组(n/,=6),对照十DADLE预处理组(n=6).缺氧细胞置人含体积分数1%02,5%c02及94%N2的缺氧箱内37℃培养72 h.DADLE预处理组在将细胞置入孵箱之前加入DADLE(终浓度为10 μmol/L.);对照组则将细胞置入含95%空气和5%C02的恒温培养箱中培养.用hoehest 33258核染色法评价细胞凋亡情况,检测细胞乳酸脱氢酶LDH漏出量;检测各组细胞上清液葡萄糖水平,以评价其匍萄糖/能量代谢状况.应用单因素方差分析山LDH漏出最及葡萄糖水平,Y2检验分析神经元生存率.结果 皮质神经元培养8 d后,经MAP2免疫荧光鉴定为95%细胞为神经元.DADLE预处理缺氧细胞组细胞存活率为(71.88±1.77)%,高于未处理缺氧细胞绀的(43.58±3.07)%,P<0.05,DADLE预处理+缺氧组的LDH活力单位为(3824.274-294.86),低于未处理缺氧组的(4516.59±605.02),P<0.05.DADLE预处理+缺氧组细胞上清液葡萄糖水平为(11.924±2.05)mmol/L,高于未处理缺氧组的(9.884±0.71)mmol/L,P<0.05.结论 δ阿片受体激动剂DADLE对体外培养的大鼠皮质神经元抗缺氧损伤具有保护作用,可能作用机制为其降低缺氧皮质神经元的葡萄糖/能量代谢需求,减轻缺氧损伤时细胞的葡萄糖/能量代谢障碍.     

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肾功能的影响

目的 探讨δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肾功能的保护作用及其机制.方法 Sprague-Dawley(SD)大鼠72只,随机(随机数字法)分为假手术组(sham-operated group,SHAM组)、脓毒症组(sepsis group,SEP组)和DADLE处理组(DADLE-treated group,DADLE组),每组24只.SHAM组打开腹腔后关闭,SEP组采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)法建立脓毒症模型,DADLE组在CLP后即静脉注射5 mg/kg DALDE.各组在建模后2 h,6 h和10 h各取8只,检测以下指标:①血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和β_2-微球蛋白(β_2-MG).②血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素6(IL-6).③左肾组织三磷酸腺苷(ATP)含量.④右肾病理观察.多组间比较用方差分析,组间两两比较采用口检验.结果 ①DADLE组BUN和Cr分别在6 h和10 h比SEP组显著降低(P＜0.01),DADLE组β2-MG在各时间点均显著低于SEP组(P＜0.01).②与SHAM组比较,SEP组和DADLE组在各时间点TNF-α和IL-6均显著升高,DADLE组显著低于SEP组(P＜0.01).③与SHAM组比较,SEP组和DADLE组肾组织的ATP在各时间点均降低(P＜0.01),DADLE组高于SEP组,三组间差异具有统计学意义(P＜0.01).④光镜下见SEP组逐步出现肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性、脱落和坏死,基底膜消失,DADLE组的肾小管上皮细胞脱落和坏死程度轻于SEP组,基底膜保持完整.结论 DADLE可以改善脓毒症大鼠肾功能,降低炎症因子水平,减缓肾组织ATP的下降,减轻肾小管上皮细胞的损害,具有肾保护作用.     

兔脑缺血再灌注后NSE和S-100的表达及其血清水平的变化

目的：探讨兔大脑中动脉缺血再灌注（MCAO／R）后脑组织神经元特异性烯醇化酶（NSE）和S-100蛋白的表达及其血清含量的变化。方法：将制作成功的兔MCAO／R模型58只，随机分为永久性缺血组30只和缺血再灌注组28只；另取10只动物行假手术分别作为缺血组（5只）及再灌注组（5只）的对照组。免疫组化法检测脑缺血再灌注不同时间脑组织NSE和S-100蛋白的表达，ELISA法检测血清NSE和S-100的含量。结果：假手术组脑组织NSE和S-100表达微弱，血清含量较低。永久性脑缺血3h和缺血再灌注2h后，脑组织NSE和S-100表达同步升高和降低．变化趋势基本一致，但NSE和S-100表达在缺血再灌注47h组较永久性缺血48h组再次明显升高。血清NSE和S-100水平直到缺血5h和再灌注5h开始同步升高，较脑组织NES和S-100表达时间延迟3h。结论：神经细胞和胶质细胞对缺血再灌注损伤非常敏感，再灌注可加重脑组织的损伤，破坏血-脑屏障，NSE和S-100从脑脊液循环进入了血液循环．血清NSE和S-100的水平可作为评价脑损伤程度和转归的早期指标。     

葛根素在大鼠全脑缺血-再灌注时对核因子-κB表达的影响

目的:探讨葛根素在全脑缺血-再灌注损伤中的作用机制.方法:采用Pulsinelli法建立大鼠全脑缺血-再灌注模型.分别在大鼠全脑缺血10 min后再灌注2、6、12、24和48 h时,用免疫组织化学法检测海马CA1区核因子-κB(NF-κB)的活性和抑制蛋白-κB(IκB)的表达,用原位杂交法检测肿瘤坏死因子-α mRNA(TNF-α mRNA)的表达,用苏木精-伊红(HE)染色检测存活神经元数目.结果:全脑缺血-再灌注后,NF-κB的活性和TNF-α mRNA的表达在2 h即明显升高,分别在6 h和12 h达到高峰,48 h仍高于假手术组(P均<0.01);IκB的表达在2 h有明显下降,6 h降至最低点,以后逐渐升至2 h水平,存活神经元数目随再灌注时间的延长而逐渐较少(P均<0.01).在各对应时间点,葛根素可明显降低NF-κB的活性(P均<0.05), 增加IκB的表达和存活神经元数目(P<0.05或 P<0.01);在6～48 h时降低TNF -α mRNA的表达(P<0.05).结论:全脑缺血-再灌注时,葛根素可通过抑制IκB的降解及NF-κB的活性,下调TNF-α mRNA的表达,而起到脑保护作用.     

经鼻腔给予IGF-1对脑缺血再灌注损伤大鼠血清S100B蛋白水平的影响

目的探讨经鼻腔给予胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠S100B蛋白水平表达的影响。方法取36只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组,12只/组。模型组和实验组大鼠制成大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,实验组在造模1 h后经鼻腔给予50μg IGF-1,模型组和假手术组在造模1 h后给予等体积的磷酸盐缓冲液（PBS）。各组大鼠分别于术后6 h、1 d、3 d应用ELISA法检测血清S100B蛋白水平。结果各时间点假手术组大鼠血清S100B蛋白水平显著低于模型组和实验组（P均〈0.05）,且实验组血清S100B蛋白水平显著低于模型组（P〈0.05）。结论 IGF-1经鼻腔给药可以降低局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠血清S100B蛋白水平,对局灶性脑缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

鞘内注射μ、δ阿片受体激动剂对大鼠骨癌痛的影响

目的: 比较鞘内及RVM区注射MOR和DOR激动剂对大鼠骨癌痛及神经病理痛的痛行为学的影响，探讨MOR和DOR在骨癌痛发病机制中的作用。方法：雌性Wistar大鼠，随机分为14组：BCP+NS组、BCP+DAMGO（1、5、10μg）组、BCP+DPDPE（0.1、0.5、1μg）组、SNI+NS组、SNI+DAMGO（0.5、1、5μg）组、SNI+ DPDPE（0.1、0.5、1μg）组。注药20min后，观察不同剂量药物对大鼠触诱发痛及机械痛觉过敏反应的影响。结果：在骨癌痛大鼠，鞘内注射DAMGO 1μg 仅轻微升高大鼠双侧后爪对von fray的缩爪阈值；DAMGO 5、10μg可显著升高大鼠双侧后爪对von fray的缩爪阈值，明显缩短术侧后爪对针刺的缩爪持续时间（P＜0.05）；DPDPE（0.1、0.5、1μg）对骨癌痛大鼠双侧后爪的触诱发痛和术侧后爪的机械痛觉过敏反应呈剂量依赖性的抑制作用；在SNI模型大鼠，DAMGO和DPDPE均呈剂量依赖性的抑制大鼠的触诱发痛和机械痛觉过敏反应（P＜0.05）。结论: 鞘内给予μ、δ阿片受体选择性激动剂对大鼠骨癌痛及神经病理性疼痛均有明显的镇痛作用，所需的剂量在骨癌痛大于神经病理性疼痛。     

脑缺血再灌注后神经元特异性烯醇化酶和S-100β蛋白变化与神经功能等级评定的关系

背景脑脊液和血浆中神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经组织蛋白S-100β含量在脑缺血性损伤时升高的程度能反映脑损伤的程度和预后.目的观察大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织NSE和S-100β的变化规律及其意义.设计随机对照的研究.地点及对象本实验在青岛大学医学院脑血管病研究所和山东省脑血管病防治重点实验室完成.成年健康雌性SD大鼠36只,体质量230～270 g,清洁级,由中国科学院上海实验动物中心提供.方法实验由作者完成.方法用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,应用神经等级评分观察脑缺血再灌注后行为功能的恢复,免疫组织化学法检测脑组织中NSE和S-100β的动态变化.主要观察指标各组大鼠皮质区、纹状体NSE,S-100β含量及神经功能评分.结果皮质区、纹状体区的NSE和S-100β免疫阳性反应均于缺血再灌注后12 h明显增强,并随时间变化而逐渐下降,至14 d降至正常水平.神经功能评分再灌注2 h～1 d时为3.00分,再灌注3,7,14 d恢复至1.50分(t=2.60～4.48,P＜0.05).结论脑缺血再灌注损伤后脑组织NSE和S-100β蛋白表达增加,并与神经功能恢复有相关性.     

δ阿片受体激动剂对失血性休克大鼠血流动力学的影响

目的探讨δ阿片受体激动剂D-Ala~2-D-Leu~5-enkephalin(DADLE)对失血性休克大鼠血压和心功能的影响。方法36只健康SD大鼠,随机分成假手术组、休克对照组和DADLE组(1 mg/kg组和5 mg/kg组),休克对照组和DADLE组大鼠放血使MAP降至40 mmHg,维持低血比状态(MAP=40 mmHg)60 min后,用生理盐水或DADLE复苏,观察复苏后3 h内动脉血压(SAP、DAP和MAP)和心功能指标(LVSP、±dp/dt_(max))的变化。结果休克对照组复苏后各时点动脉血压和心功能指标呈逐渐下降趋势。DADLE组复苏后5 min动脉血压和心功能指标开始升高,30 min达高峰,复苏后同一时点各项指标均显著高于对照组(P＜0．01),其中1 mg/kg组和5 mg/kg组没有显著差异。结论DADLE能改善失血性休克大鼠的血流动力学指标。     

阿片受体激动剂对缺血/再灌注心肌的保护作用

近来,随着溶栓和介入治疗的发展,AMI再灌注成功率显著提高。但是,血管再通时随之可能会发生缺血心肌的再灌注损伤。已证实缺血预处理(IPC)可产生心肌保护作用。而阿片受体激动剂通过激活心肌阿片受体能模拟缺血预处理对心脏的保护作用,心肌阿片受体激活能产生早期时相和后时相的心肌保护作用,信号途径涉及Gi/Go、蛋白激酶C、酪氨酸激酶和ATP敏感钾离子通道等。另外,阿片受体激动药对缺血/再灌注心肌也可产生直接的保护作用。但其作用机制有待于进一步的研究。     

脑缺血再灌注后神经元特异性烯醇化酶和S-100β蛋白变化与神经功能等级评定的关系

背景：脑脊液和血浆中神经元特异性烯醇化酶(NSE)和神经组织蛋白S-100β含量在脑缺血性损伤时升高的程度能反映脑损伤的程度和预后。目的：观察大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织NSE和S-100β的变化规律及其意义。设计：随机对照的研究。地点及对象：本实验在青岛大学医学院脑血管病研究所和山东省脑血管病防治重点实验室完成。成年健康雌性SD大鼠36只，体质量230-270g，清洁级，由中国科学院上海实验动物中心提供。方法：实验由作者完成。方法：用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，应用神经等级评分观察脑缺血再灌注后行为功能的恢复，免疫组织化学法检测脑组织中NSE和S-100β的动态变化。主要观察指标：各组大鼠皮质区、纹状体NSE，S-100β含量及神经功能评分。结果：皮质区、纹状体区的NSE和S-100β免疫阳性反应均于缺血再灌注后12h明显增强，并随时间变化而逐渐下降，至14d降至正常水平。神经功能评分再灌注2h—1d时为3．00分，再灌注3，7，14d恢复至1．50分(t=2．60．4．48，P&;lt;0．05)。结论：脑缺血再灌注损伤后脑组织NSE和S-100β蛋白表达增加，并与神经功能恢复有相关性。     

针刺对急性脑梗死患者神经功能及其血清S-100B蛋白的影响

目的 观察针刺对急性脑梗死(ACI)患者神经功能及其血清S-100B的影响.方法 将60例ACI患者随机分为针药组和药物组,每组患者30例,2组均接受神经内科常规药物治疗,针药组在神经内科常规药物治疗的基础上增加头针和体针联合治疗.2组患者均于治疗前和治疗2周后(治疗后)采用美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)评定其神经功能缺损程度,同时检测每名患者的血清S-100B含量.结果 治疗后,2组患者NIHSS评分和S-100B蛋白含量较组内治疗前均有显著降低(P＜0.01),且针药组2项指标分别为(11.17±1.80)分和(0.125±0.050)ug/L分别与药物组的(15.37±1.43)分和(0.175±0.059)ug/L比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 针刺可能促进ACI患者神经功能的恢复,降低促进其血清S-100B含量.     

DADLE对急性全脑缺血再灌注大鼠心脏及脑caspase-3的影响

目的研究大鼠心脏在急性全脑缺血再灌注时的病理改变及脑组织凋亡蛋白天冬氨酸特异酶切的半胱氨酸蛋白酶(Caspases)的表达情况。方法健康雌性SD大鼠50只(180~220 g)随机分为5组:假手术组(Sham,n=10):只暴露血管而不夹闭;缺血再灌注组(I/R组,n=10):实验选用大鼠构建动物模型,以二血管阻断加低血压法,建立急性全脑缺血再灌注模型,缺血时间持续15 min,之后解除双侧颈总动脉的夹闭进入再灌注期;δ阿片受体激动剂脑啡肽乙酸酯(DADLE)处理组分为2 mg/kg组(A组,n=10)、DADLE 3 mg/kg组(B组,n=10)、DADLE 5 mg/kg组(C组,n=10):在I/R组的基础上于再灌注前经颈外静脉注射DADLE。灌注120 min后开胸取心脏,Masson特殊染色,开颅取大脑采用western blot技术检测caspase-3的含量。结果 MASSON染色结果显示,I/R组可见部分的绿色胶原纤维,排列紊乱、疏松;而Sham组未见绿色胶原纤维,细胞排列整齐、紧密、无萎缩;DADLE处理组间无显著差异,未见绿色胶原纤维,心肌细胞排列较I/R组整齐、致密。Sham组Caspase-3蛋白表达显著低于其他各组(P0.05),DADLE处理组与I/R相比,Caspase-3表达显著降低(P0.05),其中B、C组Caspase-3表达显著低于A组(P0.05),B、C两组间无显著性差异(P0.05)。结论大鼠急性全脑缺血再灌注时,脑组织凋亡蛋白Caspase-3表达水平上调同时伴有心肌细胞不同程度损害;而通过施加DADLE可以有效地减缓心、脑的缺血缺氧损伤,对器官发挥保护作用。     

全脑缺血-再灌注后大鼠脑神经元中NF-κB的表达

目的 探讨全脑缺血．再灌注后大鼠脑神经细胞中NF-κB的表达。方法 SpragueDawley大鼠28只，雌雄各半，随机分为5组：对照组(假手术组)以及实验组4组(复苏后3、6、12、24h各为一组)，对照组4只，实验组4组每组6只。采用窒息合并冰氯化钾停跳液制作大鼠心跳骤停．心肺复苏模型，停跳5min后开始心肺复苏，采用免疫组织细胞化学方法观察复苏后神经细胞中NF-κB的表达。结果 复苏后6h海马区开始有NF-κB表达，持续至24h，且海马区周围的胶质细胞也有NF-κB表达。结论 NF-κB在大鼠全脑缺血．再灌注后神经细胞中可能具有保护和损伤双重作用。     

全脑缺血再灌注对大鼠氧自由基和内皮素的影响

目的：观察全脑缺血再灌注对大鼠氧自由基和内皮素的影响。方法：50只健康雄性SD大鼠，体质量150～300g，抽签法随机分为5组，假手术组、缺血再灌30min组、缺血再灌1h组、缺血再灌6h组、缺血再灌12h组。采用4-VD法建立全脑缺血再灌注模型，用邻苯三酚自氧化和TPA比色法测定大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛含量；用放射免疫法测定血浆内皮素的含量。结果：与假手术组相比，缺血再灌注各组脑内SOD活性明显降低(P&;lt;0．05)，丙二醛含量显著增高(P&;lt;0．05)，再灌流1，6h组的丙二醛明显增高且有随时间延长不断升高趋势，SOD明显降低且有继续降低趋势。脑缺血再灌注后不同时间段内血浆内皮素含量均有所增加，且也有随时间延长而升高的趋势。结论：全脑缺血再灌注能增加大鼠体内氧自由基和内皮素含量，在12h内随时间的延长而增加。     

长托宁对大鼠急性全脑缺血再灌注后NF-κB的影响

目的:探讨长托宁对大鼠急性全脑缺血再灌注后的脑组织NF-κB的影响。方法:参照Pulsinelli四血管阻断法建立大鼠GCIRI模型。大鼠全脑缺血10min后于再灌注的同时分别给予山莨菪碱和长托宁腹腔注射,于再灌注2h、6h、12h和24h通过免疫组化方法检测大鼠大脑皮质和海马区脑组织NF-κB的活化情况,用HE染色法检查脑组织受损情况。结果:GCIRI后脑组织NF-κB在再灌注2h即有明显表达,于再灌注6h达到高峰,以后表达逐渐下降,HE染色光镜下神经细胞变性坏死随再灌注时间延长逐渐加重。长托宁组和山莨菪碱组各时间点NF-κB活化较模型组明显下降,神经细胞受损减轻,且长托宁组与山莨菪碱组比较亦明显下降。结论:长托宁可以明显抑制GCIRI时脑组织NF-κB的活化表达,从而减轻缺血再灌注时脑组织损伤,起到脑保护作用,且较山莨菪碱效果明显。     

阿片受体激动剂对缺血／再灌注心肌保护作用研究的新进展

心肌细胞膜及血管壁上存在大量的阿片受体,以δ和κ为主,这两种阿片受体激动剂在缺血/再灌注过程中可减轻心肌坏死程度并产生抗心律失常的作用;其不仅能模拟缺血预处理,而且对缺血/再灌注心肌有直接保护作用;在缺血后处理的保护作用中也发挥着极其重要的效应.本文对其在缺血/再灌注损伤中的上述三方面保护作用的最新进展进行综述.     

血清S-100B蛋白对新生儿缺血缺氧性脑病诊断及预后的影响

目的 探讨新生儿缺血缺氧性脑病（HIE）患儿血清中S-100B蛋白浓度对诊断及预后的影响.方法 选取HIE患儿50例作为HIE组,正常新生儿50例作为对照组,两组新生儿全部留取24 h静脉血,通过双抗体夹心法测定血清中S-100B蛋白浓度.HIE组与对照组随访6个月后进行发育筛查（DST）测试并根据发育商（DQ）记录正常、可疑及异常三种情况例数.结果 HIE组的血清S-100B蛋白浓度明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.HIE组中重度患儿血清S-100B蛋白浓度最高,轻度次之,对照组最低,差异有统计学意义（P＜0.05）.HIE组DQ可疑及异常两种情况的例数均明显高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.两组中DQ正常的新生儿血清S-100B蛋白浓度明显低于DQ可疑/异常的新生儿,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 新生儿血清中S-100B蛋白浓度可作为HIE诊断的一项客观指标,并且对HIE预后情况的预测有重要的临床应用价值.     

阿片受体拮抗剂对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护效应

近20年来，随着对急性心肌梗死（AMI）溶栓及急诊介入治疗的广泛开展，其病死率已明显降低。然而，血管再通后的再灌注损伤可导致心脏功能障碍，影响患者的生活质量甚至预后。目前已证实再灌注损伤与细胞内钙超载、氧自由基及炎症介质有关，如何防治缺血／再灌注（I／R）损伤已成为目前研究的热点问题。新近一些研究证实，吗啡可通过阿片受体对I／R心肌产生保护效应，但其确切机制尚不清楚。     

东菱迪芙对大鼠局灶性脑缺血再灌注后NF-κB表达的影响

目的 探讨东菱迪芙对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法 72只健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和东菱迪芙组，采用大脑中动脉线栓法（MCAO）建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，在大鼠脑缺血2h再灌注22h时，用免疫印迹法检测海马核因子-κB（NF-κB）、抑制蛋白-κB（IκB）、Bel-2、Bax的活性。用氯化三苯四氮唑染色和原位缺口末端标记（TUNEL）法分别观察脑梗死体积比和凋亡细胞数。结果 脑缺血．再灌注后，NF-κB、Bcl-2、Bax的活性明显升高，IκB的活性明显下降，凋亡细胞数、梗死体积比明显增高。东菱迪芙可明显降低NF-κB的活性、Bax的表达、凋亡细胞数、梗死体积比，增加IκB和Bcl-2的表达。结论 东菱迪芙对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用，抑制IκB的降解及NF-κB的活性，从而减轻脑细胞凋亡是其脑保护机制之一。