糖基化终产物对心肌微血管内皮细胞表达MCP-1和ICAM-1的影响及机制研究

目的：观察体外孵育的牛血清白蛋白（BSA）非酶促糖基化终末产物（AGEs）对心肌微血管内皮细胞细胞间黏附分子（ICAM-1）和单核细胞趋化因子-1（MCP-）表达的影响及机制．方法：取50g／L牛血清白蛋白（BSA）、500g／LD-葡萄糖,于37℃孵箱内避光孵育12wk,制备外源性AGEs-BSA．体外培养大鼠心肌微血管内皮细胞（CMECs）．分设不同浓度梯度的AGEs实验组、BSA对照组,采用ELISA法测定MCP-1的表达,流式细胞术测定ICAM-1的表达,Western Blot法测定糖基化终末产物受体蛋白（RAGE）的表达,RT-PCR检测RAGE mRNA的表达．结果：100,200,400mg／L AGEs可显著增加心肌微血管内皮细胞ICAM-1（13．2％,14．5％,38．1％）,MCP—1[（52．5±5．5）,（116．0±3．1）,（139．6±8．7）μg/L]的表达（与对照组相比较,P〈0．05）,且在蛋白水平及mRNA水平均明显增加RAGE的表达（P〈0．05）,并呈浓度依赖性．结论：AGE—BSA可刺激心肌微血管内皮细胞过量表达ICAM-1和MCP-1,从而加速心肌微血管炎症的发生与发展．其机制可能是AGEs上调了心肌微血管内皮细胞RAGE的表达．也进一步证实了AGEs—RAGE信号系统的起动是糖尿病心肌微血管病变发生发展一个重要原因．     

晚期糖基化终末产物受体在胰腺癌细胞增殖及 成瘤过程中的作用

目的 探讨晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products, RAGE）对胰腺癌PANC-1细胞增殖及转染后接种裸鼠在成瘤过程中的作用。方法 构建RAGE 短发夹RNA （shRNA),即shRNA RAGE -1、-2、-3质粒,转染胰腺癌PANC-1细胞后,采用八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测shRNA RAGE 对细胞增殖、RAGE表达的影响,筛选干扰效果最好的shRNA RAGE 质粒;将转染了shRNA RAGE 质粒的PANC-1细胞接种于裸鼠皮下,观察成瘤时间,并测量计算肿瘤体积;采用RT-PCR和Western blot检测shRNA RAGE 对RAGE、基质金属蛋白酶 (matrix metalloproteinase, MMP)2和9（MMP-2和MMP-9）、核因子-κB（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells, NF-κB）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF ）的mRNA及蛋白表达的影响,并采用免疫组化方法对肿瘤进行微血管计数,计算微血管密度。结果 转染shRNA RAGE 24 h后CCK-8检测细胞的吸光度（A）值低于对照组（ P<0.05）,且在转染48 h时最明显。RT-PCR和Western blot检测显示,shRNA RAGE -2质粒转染后下调RAGE表达效果最好。转染shRNA RAGE -2质粒的PANC-1细胞接种于裸鼠后,裸鼠成瘤时间、肿瘤体积低于shRNA RAGE -1,-3,裸鼠肿瘤组织RAGE 、MMP-2、 NF-κB、 MMP-9、 VEGF mRNA及蛋白表达低于shRNA RAGE -1,-3（ P<0.05）,其微血管密度也低于shRNA RAGE -1,-3（ P<0.001）。结论 RAGE参与了胰腺癌的发生发展过程。RAGE可影响胰腺癌肿瘤生长及微血管形成。     

AGEs-RAGE相互作用促进巨噬细胞摄取胆固醇的研究

目的观察糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs) 及其受体(receptor of advanced glycation end products, RAGE)对巨噬细胞胆固醇摄取功能的影响。方法 培养THP-1细胞株,用PMA诱导分化使其成为巨噬细胞,以100μg/ml的氧化LDL(oxidized LDL, oxLDL)孵育细胞使其转化为泡沫细胞。分别以浓度为300、600μg/ml的AGEs对细胞进行刺激,应用用浓度为10μg/ml的抗RAGE抗体对细胞进行预处理,采用油红O染色测定细胞内脂质含量,通过RT-PCR及Western印迹法来检测各组巨噬细胞RAGE表达以及与胆固醇摄取相关因子SRA2、CD36表达变化,将干预后的巨噬细胞与荧光标记的oxLDL共同孵育,动态观察巨噬细胞在不同干预条件下胆固醇摄取功能的变化。结果 高浓度AGEs诱导后,巨噬细胞内脂质含量增加,RAGE表达增加,SRA2、CD36表达增加,巨噬细胞胆固醇摄取能力增加。应用抗体阻断RAGE轴后,AGEs引起的改变均有明显恢复。结论 AGEs-RAGE相互作用可以促进巨噬细胞摄取胆固醇,增加细胞内脂质累积,从而易于形成泡沫细胞。     

AGEs-RAGE相互作用对巨噬细胞胆固醇流出功能影响的研究

目的 观察糖基化终末产物(advanced glycation end products, AGEs)及其受体(receptor of advanced glycation end products, RAGE)对巨噬细胞胆固醇流出功能的影响。方法 培养THP-1细胞株并用佛波酯诱导分化使其成为巨噬细胞,与100μg/ml的氧化LDL(oxidized LDL, oxLDL)孵育细胞使其转化为泡沫细胞。分别以浓度为300μg/ml的AGEs、600μg/ml的AGEs对细胞进行刺激,用浓度为10μg/ml的抗RAGE抗体对细胞进行预处理,通过油红“O”染色测定来反映细胞内脂质含量,通过RT-PCR及Western Blot的方法来检测各组巨噬细胞RAGE表达以及与胆固醇流出相关因子ATP-结合盒转运子(ATP-binding cassette, ABC)G1、ABCA1及肝X受体-α(Liver X Receptor-α, LXR α的表达变化),通过将干预后的巨噬细胞与荧光标记的oxLDL共同孵育,并加入HDL及载脂蛋白A1(apolipoprotein A1, apoA1)介导胆固醇流出,测定细胞培养基中的荧光强度,动态观察巨噬细胞在不同干预条件下胆固醇流出功能变化。结果 经AGEs诱导后,巨噬细胞内脂质含量增加,RAGE表达增加,ABCG1表达下降,巨噬细胞胆固醇流出能力减弱。AGEs效应呈浓度依赖性。应用抗体阻断RAGE功能后,AGEs引起的改变均有明显恢复。结论 AGEs-RAGE相互作用可以抑制巨噬细胞流出胆固醇,增加细胞内脂质累积,从而易于形成泡沫细胞。     

N-乙酰半胱氨酸对AGEs诱导的微血管内皮细胞VCAM-1表达的抑制作用

用流式细胞仪测定晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products，AGEs)刺激及N—乙酰半胱氨酸(NAC)干预前后小鼠心脏微血管内皮细胞血管细胞黏附分子1(VCAM—1)的表达，同时用放免法测定培养上清中TNF—α水平。结果发现AGEs刺激后微血管内皮细胞VCAM—1表达增加，TNF—α水平升高；NAC干预组VCAM—1表达降低，TNF—α水平下降并具有剂量依赖性。提示NAC能抑制AGEs诱导的微血管内皮细胞VCAM—1的表达，TNF—α的介导是可能的机制之一。     

通心络对糖尿病大鼠心肌RAGE、NF-κB的影响

目的研究通心络对糖尿病大鼠心肌组织糖基化终末产物受体(RAGE)及核转录因子(NF-κB)表达的影响,探讨其对糖尿病大鼠心肌的保护作用及机制。方法雄性W istar大鼠60只,随机选出15只作为正常对照组(C组,n=15),剩余45只尾静脉注射0.1%链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,成模大鼠40只,随机分为糖尿病模型组(DM组,n=20)和糖尿病通心络治疗组(TXL组,n=20),通心络500m g/(kg.d)。喂养24周后,各组大鼠存活数为C组12只、DM组9只、TXL组13只,处死大鼠迅速心脏穿刺取血,测空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)及糖基化终末产物(AGEs)等指标。RT-PCR及W estern b lot法测定大鼠心肌组织中RAGE和NF-κB的表达。结果与C组相比,DM组大鼠血清中AGEs水平及心肌组织中RAGE和NF-κB的表达显著升高(P均<0.05)。经通心络治疗后,TXL组大鼠血清中AGEs的水平与DM组无统计学差异(P>0.05),但心肌组织中RAGE和NF-κB的表达较DM组显著降低(P均<0.05)。结论通心络可能通过抑制糖尿病大鼠心肌组织RAGE及NF-κB的表达而对糖尿病大鼠心肌组织起到一定的保护作用。     

糖基化终末产物诱导心肌细胞老化的机制

目的:研究糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)诱导心肌细胞老化的机制?方法:AEGs?抗AGE受体(RAGE)抗体干预乳鼠心肌细胞48 h?通过Western blot和β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色分别检测老化相关蛋白p53?p16的表达及SA-β-Gal活性;采用JC-1?DCFH-DA分别测定线粒体膜电位?细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS);通过Western blot检测自噬相关蛋白LC3?Beclin1?结果:AGEs干预细胞48 h后与对照组相比,AGEs组SA-β-Gal活性明显增高,p53?p16的表达量明显增加(P < 0.01),同时伴随线粒体膜电位的降低(P < 0.01)及细胞内ROS水平增加(P < 0.01),LC3与Beclin1表达量明显增加(P均 < 0.01);给予抗RAGE抗体干预后与AGEs组相比,SA-β-Gal活性降低,p53?p16的表达量明显降低(P < 0.01),线粒体膜电位增高(P < 0.01),细胞内ROS减少(P < 0.01),LC3与Beclin1表达量降低(P < 0.05和P < 0.01)?结论:AGEs与其受体RAGE作用可能通过氧化应激及线粒体损伤与自噬诱导心肌细胞老化?     

可溶性糖基化终末产物受体对缺血再灌注泛素-26S蛋白酶体系统活性的影响

【目的】建立动物心脏缺血再灌注模型,观察缺血再灌注模型中泛素-26 S蛋白酶体系统活性及总泛素蛋白表达的变化,检测s RAGE对缺血再灌注泛素-26 S蛋白酶体系统活性及总泛素蛋白表达的影响。【方法】复制C57BL/6J小鼠心脏缺血再灌注模型,Evans blue/2,3,5-triphenyltetrazolium chloride(TTC)双染色检测心肌缺血范围;检测泛素-26 S蛋白酶体系统活性:糜蛋白酶样、半胱天冬酶样、胰蛋白酶样;通过Western blotting检测总泛素蛋白的表达。【结果】与假手术组比较,缺血再灌注组梗死区面积/危险区面积%明显增加(I/R:36.3%±2.3%vs.Sham:0%),泛素-26 S蛋白酶体系统活性明显降低(半胱天冬酶样:0.74±0.04 vs.1.00±0.07;胰蛋白酶样:0.61±0.05 vs.1.00±0.02;糜蛋白酶样:0.63±0.06 vs.1.00±0.07),总泛素蛋白表达水平明显升高(2.73±0.14 vs.1.00±0.05);与缺血再灌注组比较,s RAGE预处理能够明显降低梗死区面积/危险区面积%(I/R+s RAGE:18.0%±1.1%vs.I/R:36.3%±2.3%),明显升高缺血再灌注的泛素-26 S蛋白酶体系统活性(半胱天冬酶样:1.25±0.09vs.0.74±0.04;胰蛋白酶样:1.05±0.06 vs.0.61±0.05;糜蛋白酶样:1.12±0.06 vs.0.63±0.06),同时明显抑制缺血再灌注诱导的总泛素蛋白表达水平(2.17±0.09 vs.2.73±0.14)。【结论】s RAGE能够抑制缺血再灌注诱导的泛素-26 S蛋白酶体系统活性降低及总泛素蛋白表达的增加。     

胰岛素抵抗大鼠血管AGEs水平及其损伤机制和吡格列酮的保护作用

目的  探讨胰岛素抵抗大鼠血管AGEs水平及其损伤机制和吡格列酮的保护作用。方法  选6~8 周龄Wistar大鼠随机分为对照组（NC组,n=10）、胰岛素抵抗组(IR组,n=13)和吡格列酮组(PIO组,n=13)。后两组建立胰岛素抵抗模型,模型成功后PIO组给予吡格列酮［10mg/(kg·d)］干预,12周后采用免疫荧光技术检测血管壁AGEs表达;应用RT-PCR法检测RAGE 、NADPH氧化酶 p47phox mRNA 的表达;免疫组织化学技术检测RAGE、磷酸化NF-Кb蛋白的表达。结果  与IR组比较,PIO组AGEs的表达减弱,而两组明显高于NC组;IR组和PIO组RAGE、NADPH氧化酶P47phox mRNA表达较NC组明显升高(P< 0.01),而PIO组上述指标表达较IR组减弱（P<0.05）;PIO组RAGE、磷酸化NF-Кb蛋白表达较IR组减弱（P<0.05）,但两组均明显强于NC组（P<0.01）。结论  胰岛素抵抗大鼠血管AGEs及RAGE表达增多,继而促进氧化应激及炎症反应导致血管损伤;吡格列酮能通过减少AGEs、RAGE生成而抑制氧化应激及炎症反应,改善血管损伤。     

RAGE与腹腔注射脂多糖诱导新生大鼠急性肺损伤的相关性研究

目的:通过腹腔注射途径建立脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型,探讨其与肺组织晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end－products,RAGE)的相关性?方法:30只SD新生大鼠随机分为5组,每组6只,根据注射LPS剂量分为0.3?1.0?3.0?9.0 mg/kg组及生理盐水对照组,24 h后观察大鼠的一般情况;ELISA法检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF－α)?可溶性RAGE(sRAGE)含量;Western blot法检测肺组织RAGE蛋白水平;real time－PCR法检测RAGE mRNA表达水平;HE染色下对肺组织进行病理学评估?结果:LPS 9 mg/kg组死亡率高达83.3%,故未计入实验组;其余4组结果显示,TNF－α水平?肺组织RAGE蛋白?mRNA及肺组织损伤评分随梯度剂量的增加而升高,而BALF中sRAGE水平随剂量增加而降低?结论:腹腔注射LPS可以诱导产生新生大鼠的ALI,LPS剂量为3 mg/kg可作为模型最佳诱导剂量;RAGE可作为ALI的敏感指标?     

慢性氟中毒大鼠大脑皮质中AGEs和RAGE的改变

目的：研究慢性氟中毒大鼠大脑皮质中晚期糖基化终末产物（AGEs）及其受体（RAGE）表达,探讨氟中毒神经损害的发病机制。方法：60只SD大鼠按体质量随机分为对照组、小剂量染氟组和大剂量染氟组,采用酶联免疫方法、蛋白印迹方法和实时荧光定量PCR方法分别检测AGEs含量、RAGE的蛋白和mRNA表达水平。结果：染氟大鼠大脑皮质中AGEs含量和RAGE蛋白表达水平比对照组明显增高（P〈0．05）,染氟大鼠大脑皮质中RAGE的mRNA表达较对照组明显升高（P〈0．05）。结论：慢性氟中毒引起大鼠大脑皮质中AGEs含量和RAGE表达明显升高,这些改变可能与氟中毒性神经损伤发生机制有关。     

晚期糖化终末产物受体基因多态性与糖尿病动脉硬化关系的研究进展

糖尿病微血管和大血管并发症是糖尿病患者致死、致残的主要原因,动脉硬化是糖尿病血管病变的主要病理改变。晚期糖化终末产物（AGEs）和晚期糖化终末产物受体（RAGE）相互作用,激活细胞内一系列信号转导途径,是产生和加剧糖尿病动脉硬化的重要机制。RAGE基因定位于染色体6p21．3,包含11个外显子和10个内含子。迄今为止,已经有30多个RAGE基因多态性位点被证实,其中多个RAGE基因多态性位点,特别是-374T／A、-429T／C、G82S-9糖尿病动脉硬化相关。但RAGE基因多态性影响糖尿病动脉的机制尚不清楚。     

糖化终末产物受体在大鼠胰腺星形细胞中的表达

目的研究胰腺星形细胞(PSCs)是否表达糖化终末产物受体(RAGE),并探讨糖化终末产物(AGEs)对RAGE表达的调节作用。方法分离培养SD大鼠PSCs,采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学检测静息和活化的PSCs RAGE在mRNA和蛋白水平的表达,同时用RT-PCR检测AGEs刺激后RAGE表达的变化。结果静息和活化的PSCs均表达RAGE,且活化后表达水平提高;AGEs能上调RAGE的表达。结论静息和活化的PSCs均表达RAGE,活化的PSCs RAGE表达上调,提示PSCs是AGEs作用的靶细胞。     

晚期糖基化终产物对高糖诱导NRK-52E细胞的转分化作用

目的：探讨晚期糖基化终产物（AGEs）对高糖诱导大鼠肾小管导管上皮细胞株NRK-52E的转分化干预作用。方法：大鼠肾小管导管上皮细胞株设空白组（不给葡萄糖）、高糖组（25mmol/L葡萄糖）、AGEs干预组（100mg/LAGEs）、高糖AGEs干预组（100mg/LAGEs＋25mmol/L葡萄糖）,培养72h后,用Westernbolt检测转化因子β1（TGF-β1）、Ⅰ型胶原、金属蛋白酶2（MMP2）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）及甲状旁腺素相关肽（PTHrP）在NRK-52E细胞的表达,活性氧（ROS）含量应用CM2H2DCFDA试剂盒检测。结果：高浓度葡萄糖上调TGF-β1、Ⅰ型胶原、MMP2、α-SMA以及PTHrP表达,AGEs显著上调高浓度葡萄糖状态下TGF-β1、Ⅰ型胶原、MMP2、α-SMA和PTHrP表达,提高ROS含量。结论：AGEs可以促进高浓度葡萄糖诱导肾小管导管上皮细胞转分化。     

AGEs对人腹膜间皮细胞FN和CTGF的合成和表达作用研究

目的 观察糖基化终末产物（AGEs）对体外培养的人腹膜间皮细胞（HPMC）纤维连接蛋白（FN）和结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响.方法 分别以不同浓度的AGEs（0、200、600、1 000mg/L）刺激HPMC 48h后,用RT-PCR法检测FN的表达情况.同时将体外培养的HPMC分为正常组（未加任何刺激因素）和AGEs组（终浓度为600mg/L）,两组均予刺激HPMC48h后,用RT-PCR及ELISA法检测细胞内FN和CTGF mRNA及蛋白的表达水平.结果 AGEs呈剂量依赖性上调HPMC FN mRNA的水平;AGEs组FN、CTGF mRNA和蛋白表达水平均较正常组明显增加（P＜0.05或0.01）.结论 AGEs可诱导体外培养HPMC的FN、CTGF基因和蛋白高表达.     

痰瘀同治法对糖尿病大鼠心肌微血管病变AGEs/RAGE轴及氧化应激的影响

目的 观察痰瘀同治对高糖诱导心肌微血管内皮细胞损伤的保护作用并从AGEs/RAGE轴探讨其作用机制。方法 利用酶消化法从大鼠心脏中分离出原代心肌微血管内皮细胞（CMECs）,经免疫荧光法鉴定后,培养传代备用。在不同时间段采用不同浓度的葡萄糖对大鼠CMECs进行诱导干预,MTT检测方法发现葡萄糖浓度在33 mmol/L且干预48 h为最佳造模条件;予不同浓度的含药血清,同上法检测得10%含药血清干预48 h为最佳干预方法。将造模成功的CMECs分成5组：模型组（MC）、化痰组（RP）、化瘀组（DBS）、痰瘀同治组（RPDBS）、ALT-711组,予以10%含药血清和ALT-711细胞干预制剂进行干预;另设一组空白对照组（NC）。采用ELISA法检测各组内皮细胞AGEs含量;免疫荧光法、Western blot法和RT-qPCR法检测各组内皮细胞RAGE蛋白及基因表达水平;细胞色素c还原法检测各组内皮细胞还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADPH）氧化酶活性水平;二氢乙锭荧光探针法检测各组内皮细胞活性氧自由基（ROS）活性水平。结果 MC组较NC组,细胞内晚期糖基化终末产物（AGEs）含量、RAGE蛋白及基因表达水平、NADPH氧化酶活性水平和ROS活性水平均升高（P<0.01）。与MC组比较,各治疗组的上述指标均降低（P<0.01）。在降低AGEs含量、RAGE蛋白及基因表达水平和NADPH氧化酶活性水平上,RPDBS组较RP组与DBS组显著下降（P<0.01,P<0.05）;在降低ROS水平上,RPDBS组与DBS组差异无统计学意义（P>0.05）,较RP组显著下降（P<0.01）。结论 痰瘀同治法可能通过抑制AGEs/RAGE轴及氧化应激对高糖损伤的CMECs起到保护作用,从而防治糖尿病心肌微血管病变,且痰瘀同治法优于单独化痰法和单独化瘀法。     

吡格列酮对胰岛素抵抗大鼠认知功能及脑组织AGE-RAGE损伤途径的影响

目的探讨吡格列酮（PIO）对高果糖诱发的胰岛素抵抗（IR）大鼠认知功能及脑组织糖基化终末产物（AGEs）-AGEs受体（RAGE）损伤途径的影响。方法45只6～8周龄Wistar大鼠分为正常对照组（NC组）、胰岛素抵抗组（IR组）、吡格列酮组（PIO组）,后两组给予饮用10%的果糖水建立胰岛素抵抗模型,模型成功的PIO组给予吡格列酮干预12周后,采用Morris水迷宫试验检测逃避潜伏期;免疫荧光技术检测脑组织AGEs表达;Western blotting检测脑组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、RAGE、磷酸化核转录因子-κB(Phospho NF κB)的蛋白表达。结果① IR组与PIO组逃避潜伏期较NC组明显延长,差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05);PIO组逃避潜伏期较IR组明显缩短,差异有统计学意义(P＜0.01)。②　免疫荧光检测结果显示,PIO组、IR组AGEs表达较NC组明显增强;与IR组相比,PIO组AGEs的表达较弱。③ 与NC组相比,IR组和PIO组磷酸化NF κB、RAGE的蛋白表达升高(P＜0.01),PPARγ表达降低（P＜0.05）;与IR组相比,PIO组磷酸化NF κB、RAGE的蛋白表达明显下降(P＜0.01);PPARγ表达增加（P＜0.05）。结论胰岛素抵抗大鼠脑组织AGEs RAGE系统活性增强可能是脑损害机制之一,吡格列酮能改善胰岛素抵抗大鼠的认知功能,抑制AGEs RAGE通路活性,发挥脑保护作用。     

丙泊酚长期镇静对大鼠认知功能及海马高级糖基化终末产物受体表达的影响

目的观察丙泊酚长期镇静对大鼠认知功能及海马高级糖基化终末产物受体（RAGE）蛋白表达的影响及认知功能改变与海马RAGE蛋白表达有无关联,为临床提供依据。方法选取成年雄性Wistar大鼠28只,随机分为对照组和丙泊酚组,各14只。预实验找出使大鼠反正反射消失的剂量,丙泊酚腹腔注射30mg／kg,尾静脉穿刺留置静脉导管。在尾静脉再给予丙泊酚组镇静作用的基本剂量即36～72mg/（h·kg）,每日连续输注8h,连续给药5d,对照组给予生理盐水。于完全停药后1d应用Morris水迷宫对两组大鼠开始连续5d的行为学观察,记录逃逸潜伏期和空间探索时间。米次大鼠水迷宫测试lh后,取大鼠海马,用酶联免疫吸附试验（EUSA）法测定RAGE蛋白的表达。结果①定位航行实验结果：与对照组比较,丙泊酚组第1～4日逃逸潜伏期延长（P〈0．05）;②空间探索实验结果：与对照组比较,丙泊酚组空间探索时间缩短、穿越平台次数减少,两组比较的差异均有统计学意义（F=7．04,22．33,P〈0．05）;③ELISA法测定RAGE蛋白结果：与对照组比较,丙泊酚组海马RAGE蛋白表达显著上调（F=5．247,P：0．007）。结论①丙泊酚长期镇静可损害成年大鼠的空间学习记忆能力,可导致成年大鼠认知功能降低,可能与其上调海马RAGE表达有关。     

替米沙坦对AGEs诱导人内皮细胞表达VCAM-1及MCP-1的作用和机制

目的 通过观察替米沙坦对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的人脐静脉内皮细胞表达血管细胞黏附因子-1(VCAM-1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响,研究替米沙坦对AGEs所致动脉粥样硬化(AS)的干预作用和机制.方法 采用胶原酶消化法获取人脐静脉内皮细胞,分为4组:空白对照组,牛血清白蛋白(BSA)对照组,AGEs诱导组(10-4~10-1mg/mL),AGEs+替米沙坦组(1、10、100 nmol/L).活性氧检测试剂盒检测及倒置荧光显微镜观察细胞内活性氧含量,RT-PCR检测VCAM-1、MCP-1及晚期糖基化终末产物受体(RAGE)的mRNA.结果 AGEs组人内皮细胞内活性氧荧光强度增强,替米沙坦干预后降低;AGEs呈浓度依赖性地增强人内皮细胞对VCAM-1和MCP-1基因的转录,与空白对照组相比,AGEs(10-4mg/mL)组VCAM-1和MCP-1 mRNA表达水平显著增高(0.24±0.01 vs 0.07±0.02;0.25±0.01 vs 0.18±0.03,P<0.05);替米沙坦呈浓度依赖性地抑制人内皮细胞对VCAM-1和MCP-1基因的转录,与AGEs诱导组相比,替米沙坦(10 nmol/L)组人内皮细胞的VCAM-1和MCP-1基因转录水平显著降低(0.23±0.01 vs 0.85±0.11;0.62±0.10 vs 1.05±0.04,P<0.05);与AGEs诱导组相比,替米沙坦(1 nmol/L)组人内皮细胞RAGE基因表达水平显著降低(0.64±0.03 vs 1.18±0.10,P<0.05).结论 AGEs增强人内皮细胞表达VCAM-1和MCP-1;替米沙坦可能通过抑制RAGE表达来抑制AGEs诱导的人内皮炎性损伤.