蝮蛇毒小分子多肽的分离、纯化及其抗肿瘤作用研究

目的从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis,测定理化性质,研究其对肿瘤细胞的生长抑制作用。方法利用有机溶剂沉淀和Sephadex G-50S、ephadex G-25凝胶过滤色谱等方法分离纯化长白山栖岩蝮蛇蛇毒中的1种小分子多肽Saxis;采用Tricine-SDS-PAGE鉴定;利用Bradford蛋白质测定法测定蛋白质浓度;运用MTT比色法检测该小分子多肽对宫颈癌细胞Hela、肝癌细胞SMMC-7721和胃腺癌细胞SGC-7901的生长抑制作用。结果该小分子多肽Saxis的相对分子质量约为5 200,它能抑制Hela、SMMC-7721和SGC-7901细胞的增殖,并且对这3种肿瘤细胞的抗增殖作用具有药物剂量依赖关系,24 h的IC50分别为66.3,54.5,62.2μg/mL。结论利用有机溶剂沉淀和凝胶过滤色谱法可以从长白山岩栖蝮蛇蛇毒中分离纯化1种小分子多肽Saxis,其对多种肿瘤细胞的生长有抑制作用。     

马粪海胆生殖腺中多糖的纯化方法及其抗肿瘤作用研究

目的 优化马粪海胆生殖腺中多糖的纯化方法,并评价其体外对肿瘤细胞的生长抑制作用.方法 马粪海胆生殖腺经水提取、木瓜蛋白酶结合Sevage法除蛋白、透析后醇沉、干燥制得马粪海胆总多糖,总多糖应用Sephacryl S-300凝胶柱色谱分离纯化;采用苯酚-硫酸法测定多糖含量;通过噻唑蓝(MTT)法测试多糖的体外抗肿瘤作用.结果 马粪海胆生殖腺的水提液应用木瓜蛋白酶结合Sevage法除蛋白效果最佳,木瓜蛋白酶最佳用量为100∶6(海胆脱脂粉与酶质量比),制得总多糖的纯度达90%;总多糖及分离得到的2个多糖体外对人肝癌Bel7402细胞表现出生长抑制作用.结论 该纯化方法步骤简单、易操作,所得多糖理化性质好、易溶于水,适用于马粪海胆生殖腺多糖的纯化.     

雄黄注射液体内外抗肿瘤作用研究

目的:初步探讨雄黄注射液的体内外抗肿瘤作用。方法:采用噻唑蓝(MTT)方法观察雄黄注射液对培养的人白血病细胞株K562,人肝癌细胞株HepG-2,人胃癌细胞株MGC-803,和小鼠Lewis肺癌细胞的增殖抑制作用;建立小鼠S180腹水型肉瘤模型,采用1、2、3mg/kg剂量雄黄注射液作用于小鼠模型,观察雄黄注射液体内抗肿瘤作用。结果:MTT法显示雄黄注射液对人白血病细胞株K562,人肝癌细胞株HepG-2,人胃癌细胞株MGC-803,和小鼠Lewis肺癌细胞增殖有一定的抑制作用;灌胃给予雄黄注射液对小鼠S180腹水型肉瘤生长有一定抑制作用。结论:雄黄注射液能够抑制培养的肿瘤细胞生长,灌胃给药对S180腹水型肉瘤细胞移植的模型小鼠肿瘤增殖有明显的抑制作用。     

高效抗肿瘤抗生素卡里奇霉素的分离纯化与鉴定

目的 研究从一株棘孢小单孢菌高产突变株912-36-2(Micromonospora echinospora 912-36-2)的发酵液中分离纯化抗肿瘤抗生素卡里奇霉素(calicheamicin)的方法,并得到纯品.方法 发酵液通过有机溶剂萃取、硅胶分离、制备HPLC精制等方法分离纯化卡里奇霉素,并用LC-MS方法鉴定卡里奇霉素的各组分.结果从M.echinospora 912-36-2发酵液中分离出一个卡里奇霉素组分,LC-MS检测结果证明其分子量为1367Da,为目标活性组分γ11.结论通过建立卡里奇霉素的分离提取工艺,为该产品的产业化开发提供基础.     

来源于浙江尖吻蝮蛇毒抗肿瘤多肽的纯化与特性

采用超滤和反相色谱法从浙江尖吻蝮蛇毒中分离出3个抗肿瘤活性多肽.结构研究表明它们分别为焦谷氨酰赖氨酰色氨酸(pyroGlu-Lys-Trp)、焦谷氨酰门冬酰胺酰色氨酸(pyroGlu-Asn-Trp)和焦谷氨酰谷氨酰胺酰色氨酸(pyroGlu-Gln-Trp).MTT试验结果显示,在10 μg/ml时,活性多肽对人低分化胃癌细胞BGC-283、乳腺癌细胞MDA-MB-231及人肝癌细胞SMMC-7721有30％～60％的增殖抑制活性.     

青蒿琥酯抗肿瘤作用的实验研究

目的：探讨青蒿琥酯的抗肿瘤作用。方法：采用体内试验以荷瘤小鼠实体瘤重、抑瘤率为实验指标评价青蒿琥酯对S180移植性肉瘤的抑制作用；以荷瘤小鼠存活时间为实验指标评价青蒿琥酯对H22移植性腹水癌的抑制作用。结果：青蒿琥酯能明显抑制实体瘤重，并延长荷瘤小鼠存活时间。结论：青蒿琥酯对S180、H22诱发的移植性肿瘤具有一定的抑制作用。     

蛇毒抗肿瘤作用及其机制研究进展

目的总结蛇毒抗肿瘤作用及其机制研究进展,为蛇毒抗肿瘤成分的开发研究提供参考。方法查阅国内外文献资料进行整理和归纳。结果蛇毒具有直接杀伤肿瘤细胞,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制血管形成,提高人体免疫力等作用。结论对蛇毒抗肿瘤作用机制进行深入研究,其在抗肿瘤方面有相当大的发展空间。     

参莪汤相关物质基础抗肿瘤作用研究进展

目的探索参莪汤相关物质基础抗肿瘤作用研究现状,明确参莪汤抗肿瘤作用机制,为进一步实验研究参莪汤的抗肿瘤作用提供文献依据和研究思路。方法对近15年有关于参莪汤相关物质基础抗肿瘤作用文献进行归纳、分析和总结。结果参莪汤的抗癌物质基础主要通过诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤血管生成、端粒及端粒酶的稳定性、抑制癌基因的表达、促进抑癌基因的表达等多个环节抑制肿瘤的发生、发展与转移,而且方中许多中药可以同时作用于上述多个环节。结论目前从天然药物中寻找新的抗肿瘤药已经成为世界医药界的研究热点,细胞和分子水平的研究指标在实验中的广泛应用,为中药治疗胃癌提供了更可靠的依据。     

半边旗抗肿瘤有效成分5F的纯化及其体外增效作用

目的　寻找半边旗中二萜类有效成分之一 5F纯化的新方法 ,研究 5F对常用抗肿瘤药物的体外增效作用。方法　应用结合了AgNO3的普通层析用硅胶来纯化 5F ,应用台盼蓝拒染法测定药物对细胞的抑制率。结果　纯化后所得到的产品中 5F的含量达到 99%以上 ,是迄今为止纯度最高的产品。较低浓度的 5F分别与氟尿嘧啶 (5 Fu)、顺铂 (CD DP)及长春新碱 (VCR)合用可以增强它们对HL 60、K562细胞株的杀伤作用。结论　结合了AgNO3的普通硅胶可有效地分离纯化 5F。 5F可增强上述几种药物对HL 60、K562细胞的杀伤作用 ,可能与几种药物对细胞周期影响不同有关     

纯化雄黄体内外抗肿瘤作用

目的:研究纯化雄黄的体内外抗肿瘤作用.方法:建立移植瘤小鼠S180肉瘤模型,观察纯化雄黄高、中、低剂量(2,1,0.5 g·kg-1,灌胃,qd)连续给药14 d对荷瘤小鼠的瘤重、胸腺指数和脾脏指数的影响,实验同时设溶媒对照组和环磷酰胺阳性对照组(CTX,100 mg·kg-1,腹腔注射1次).另外制备荷瘤小鼠含药血清和正常大鼠的含药灭活血清,通过血清药理学研究方法观察含药血清对人食管癌细胞株Ec9706的体外增殖抑制作用.结果:纯化雄黄可抑制小鼠S180肉瘤的生长,高、中、低剂量组抑瘤率分别为39.1%,29.2%和21.1%,对胸腺指数和脾脏指数无明显影响;荷瘤小鼠含药血清及正常大鼠的含药灭活血清均可抑制人食管癌细胞株Ec9706生长,且在48 h抑制作用达到最强,抑制率分别为42.9%和27.7%.结论:纯化雄黄在体内和体外均有明显的肿瘤抑制作用.     

怀牛藤总皂甙抗生育作用及其机理

给小鼠灌服怀牛藤总皂甙（ABS）75，150，300mg／kg，表明ABS具有明显的抗着床、抗早孕作用，且呈剂量依赖性关系，其ED50分别为96±27和145±51mg／kg。ABS的抗早孕作用，可被外源性黄体酮、人绒毛膜促性腺激素和泰必利部分拮抗。ABS300mg／kg可显著抑制假孕小鼠和去卵巢小鼠的子宫蜕膜细胞反应，但无雌激素样作用和抗雌激素样作用。     

牛膝中牛膝甾酮25位异构体构型的确定及其抗肿瘤活性的研究

目的牛膝 (AchyranthesbidentataBl.)中牛膝甾酮 2 5位异构体的分离、鉴定、构型确定以及肿瘤抑制活性的测定。方法利用硅胶吸附柱色谱和HPLC法进行分离 ,利用理化性质和波谱分析对化合物进行鉴定 ;利用体外实验法测定其活性。结果 2个非对映异构体化合物分别鉴定为 2 5 R牛膝甾酮 (2 5 Rinokosterone ,1)和 2 5 S牛膝甾酮 (2 5 Sinokosteone ,2 )。化合物 1具有一定的肿瘤抑制活性。结论 2个化合物均为首次从牛膝中分离得到 ,首次确定了其绝对构型 ,并首次对牛膝甾酮 2个 2 5位异构体进行了1H NMR、13 C NMR数据归属。牛膝中发挥肿瘤抑制作用的成分主要应为皂苷类成分。     

Preclinical evaluation of a pulmonary delivered paclitaxel-loaded lipid nanocarrier antitumor effect

Lung cancer remains a leading cause of death due to the low efficacy of chemotherapy, mainly related to the administration route used. Therefore, alternative administration routes are needed. Paclitaxel (PTX) is an insoluble anticancer drug active against solid tumors, such as those found in lung cancer, that has stimulated an intense research effort over recent years. Solid lipid nanoparticles (SLNs) are potential carriers for poorly soluble drugs, being biodegradable systems that served as alternatives to the usual colloidal carriers. That system was used to deliver PTX to the lungs and seem to fulfill the requirements for an optimum particulate carrier. Furthermore, PTX-loaded SLN pulmonary administration provided a target administration, which is expected to avoid high concentration of the drug at nontarget tissues, reducing toxicity, and increasing the drug's therapeutic index. The rationale of this study was to deliver a colloidal system to the lung lymphatics through a pulmonary route for cancer therapy. FROM THE CLINICAL EDITOR: Paclitaxel-loaded solid lipid nanoparticles were used to target tumors in a murine lung cancer model enabling high PTX concentration in the target with reduced systemic toxicity and increased therapeutic index.     

核苷二磷酸激酶A亚基的纯化、鉴定及其对顺铂抗癌作用的增强

目的　了解核苷二磷酸激酶A亚基 (NDPK A)能否提高顺铂的抗癌效果。方法　利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和Western印迹杂交来监测和鉴定目标蛋白NDPK A ,利用离子交换、亲和层析结合高效液相色谱纯化分离目标蛋白 ;MTT比色法测定药物对细胞生长抑制率的影响。结果　获得NDPK A单体蛋白 ,酶比活为 8mmol·min- 1·g- 1蛋白质 ;细胞生长抑制率显示 ,NDPK A单独处理细胞时未见明显的细胞毒性 ,但与顺铂联合处理却能大大加强后者对鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep 2的细胞毒性。结论　NDPK A与顺铂联用能增强顺铂对体外培养的鼠肺腺癌细胞LA795和人喉癌细胞Hep 2的杀伤作用     

眼镜蛇毒细胞毒素CTX-d的分离纯化及抗肿瘤活性

目的 分离纯化眼镜蛇毒细胞毒素,测定其体内外抗癌作用.方法 应用柱层析及RP-HPLC,从眼镜蛇毒粗毒中分离纯化细胞素素(CTX).体内外抗癌作用利用噻唑兰(MTT)法及对荷瘤小鼠U14瘤的抑瘤作用.结果 分离纯化获得的CTX-d不混有PLA2,在体内外实验中显示明显的抗肿瘤作用.结论 结合阳离子交换层析和RP-HPLC可从眼镜蛇毒中高效分离获得不含PLA2的CTX.     

Synthesis and evaluation of novel polyaminocarboxylate-based antitumor agents

Iron depletion, using iron chelators targeting transferrin receptor (TfR) and ribonucleotide reductase (RR), is proven to be effective in the treatment of cancer. We synthesized and evaluated novel polyaminocarboxylate-based chelators NETA, NE3TA, and NE3TA-Bn and their bifunctional versions C-NETA, C-NE3TA, and N-NE3TA for use in iron depletion tumor therapy. The cytotoxic activities of the novel polyaminocarboxylates were evaluated in the HeLa and HT29 colon cancer cell lines and compared to the clinically available iron depletion agent DFO and the frequently explored polyaminocarboxylate DTPA. All new chelators except C-NETA displayed enhanced cytotoxicities in both HeLa and HT29 cancer cells compared to DFO and DTPA. Incorporation of the nitro functional unit for conjugation to a targeting moiety into the two potent non-functionalized chelators NE3TA and NE3TA-Bn (C-NE3TA and N-NE3TA) was well-tolerated and resulted in a minimal decrease in cytotoxicity. Cellular uptake of C-NE3TA, examined using a confocal microscope, indicates that the chelator is taken up into HT29 cancer cells.     

Macrophage stimulation and antitumor effect of Ukrain

It has previously been demonstrated that Ukrain administration (0.5 mg in mice of 20 g, five times) to A/Sn mice results in retardation of HA-1 tumor growth in the liver and a prolongation of lifespan compared with untreated controls. In the present study Ukrain was tested as a macrophage stimulator in intact mice and animals with HA-1 hepatoma. There were no changes to the carbon particles phagocytosis rate in the case of a single administration of Ukrain to intact mice. Significant secretion of procathepsin B into ascitic fluid was shown in tumor mice as well as marker enzyme of macrophages beta-hexosaminidase activity, suggesting an influx of macrophages into ascites. Single Ukrain administration increased this index, and repeated drug injections were followed by a tendency to normalization of secretion. The cytolytic effect of Ukrain against tumor cells (as a result of macrophage stimulation) is the most probable mechanism of its antitumor action, but this suggestion needs further experimental evidence with special attention paid to the balance of proteinases and endogenous proteinase inhibitors.     

牛膝多糖对链佐星诱导性糖尿病小鼠的保护作用(英文)

目的研究牛膝多糖(ABP)对链佐星诱导性糖尿病小鼠的保护作用。方法将雄性ICR小鼠分为正常对照组、糖尿病模型组、ABP50和100mg.kg-1(ip,每天1次,共15d)治疗组。分别于给药前,给药8和15d时用血糖测量仪检测血糖水平,并进行血糖耐受试验。末次给药第2天测量小鼠体重,处死,测量心、肝、脾和肾脏器官重量,同时制备血清,采用放射免疫分析试剂盒检测血清胰岛素水平,比色法测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、钙(Ca)和磷(P)含量及谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)和碱性磷酸酶(ALP)活性。采用ELISA检测血清瘦素、脂联素、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的浓度。结果与正常对照组相比,糖尿病模型组小鼠体重下降,血清胰岛素水平降低,血糖升高(P<0.05,P<0.01)。ABP50和100mg.kg-1在血糖耐受试验中能较好地调节血糖水平,其血糖在15d时分别比模型组下降了27.4%和16.3%(P<0.05,P<0.01)。ABP50mg.kg-1治疗组小鼠脾和肾脏指数,血糖、血清TG和TC浓度,GOT,GPT和ALP活性均显著低于糖尿病模型组(P<0.05),血清瘦素水平下降并接近正常水平,血清脂联素、TNF-α和IL-6水平均显著高于模型组(P<0.05,P<0.01);ABP100mg.kg-1对血清TC和TG水平及ALP和GPT活性无明显作用,对上述其他指标的作用与ABP50mg.kg-1相似。各组血清胰岛素浓度及Ca和P含量均无明显变化。结论ABP对链佐星诱导的糖尿病小鼠具有一定的保护作用。     

顺铂和血管内皮生长因子受体单抗对荷Lewis瘤小鼠联合治疗的实验研究

目的:观察血管内皮生子因子受体单抗和顺铂联合应用治疗荷Lewis瘤小鼠的疗效。方法:将32只C57BL小鼠分成4组(对照组、顺铂组、血管内皮生长因子受体单抗组、血管内皮生长因子受体单抗联合顺铂组),实验结束后分别处死荷Lewis瘤小鼠,测量肿瘤的长、短径,称取瘤重,计算肿瘤体积、抑瘤率,对有肺转移瘤的小鼠进行计数并作肿瘤的病理检查。结果:血管内皮生长因子受体单抗联合顺铂组有明显的抑瘤作用,抑瘤率为78.44％,明显高于顺铂组(40.01％)和血管肉皮生长因子受体单抗组(56.22％);血管内皮生长因子受体单抗联合顺铂组有肺转移瘤的鼠数为2只,明显少于顺铂组(6只)和血管内皮生长因子受体单抗组(5只)。结论:血管内皮生长因子受体单抗和顺铂有良好的协同抗肿瘤作用,可提高疗效,为临床应用提供了科学依据。