食管鳞状细胞癌中Rb和p16蛋白表达的免疫组织化学研究

目的探讨与细胞周期调节有关的基因改变在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白过氧化物酶连接法（ＳＰ法），检测７３例食管癌中Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白的表达。结果食管鳞状细胞癌Ｒｂ和ｐ１６蛋白表达阳性率分别为４２５％（３１／７３）和６７１％（４９／７３），Ｒｂ蛋白表达阳性率与食管鳞状细胞癌分级呈显著负相关（Ｐ＜０００５），ｐ１６蛋白表达阳性率与食管鳞状细胞癌分级呈显著正相关（Ｐ＜０００５）。４９例ｐ１６蛋白表达阳性的食管癌中Ｒｂ蛋白表达阴性者３９例，３１例Ｒｂ蛋白表达阳性的食管癌中ｐ１６蛋白表达阴性者２１例，两者呈显著负相关（Ｐ＜０００５）；１０例食管鳞状细胞癌呈Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白共同表达，３例Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白表达呈共同阴性。结论Ｒｂ蛋白和ｐ１６蛋白表达的有无可分别作为食管鳞状细胞癌病理分级参考指标之一，并间接证明Ｒｂ蛋白对ｐ１６蛋白表达具有负性调节的功能。     

HPV_(16),_(18)E_6蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的观察ＨＰＶ１６，１８Ｅ６在人宫颈癌中的表达并说明Ｅ６单抗的应用价值。方法采用Ｓ－Ｐ免疫组化染色法，检测５０例宫颈鳞状细胞癌，３０例慢性宫颈炎及３０例正常宫颈组织中ＨＰＶ１６，１８ Ｅ６蛋白的表达。结果宫颈癌组中Ｅ６表达的阳性率为７０％（３５／５０），慢性宫颈炎组中Ｅ６阳性率为６．７％（２／３０），４例腹股沟淋巴结转移癌Ｅ６阳性率为７５％（３／４），正常宫颈组中Ｅ６表达均为阴性。Ｅ６的表达与肿瘤的分化程度无关（Ｐ＞０．０５），与肿瘤的良恶性有显著差异（ Ｐ＜ ０．０１）。结论 ＨＰＶ１６，１８感染与宫颈癌病因学密切相关，Ｅ６单抗可作为预测ＨＰＶ１６，１８感染及早期诊断宫颈癌的标记之一。     

HPV16感染及其E7蛋白表达与宫颈癌关系的研究

目的：探讨人砂状瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）及其Ｅ７蛋白表达与宫颈癌的关系。方法：运用ＰＣＲ技术探查６７例宫颈中ＨＰＶ１６感染率,并运用免疫组化ＡＢＣ法检测ＨＰＶ１６感染吕颈癌中Ｅ７蛋白表达情况。结果：ＨＰＶ１６在宫颈癌中的检出率为５０．７５％（３４／６７）,ＨＰＶ１６感染与宫颈癌临床分期和病理组织分级无关（Ｐ〉０．０５）,在ＨＰＶ１６感染的宫颈癌中,其Ｅ７蛋白阳民生表达率为８５．３０％（２９／３４     

食管鳞状细胞癌p16和nm23—H1基因蛋白表达及意义

目的;探讨多肿瘤抑制基因ｐ１６蛋白和ｎｍ２３－Ｈ１基因蛋白在人食管癌的表达及与肿瘤生物学行为的关系。方法：应用免疫组织化学方法观察５１例食管鳞状细胞癌及其淋巴结转移癌中ｐ１６蛋白的表达,结合观察转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１的表达。结果：ｐ１６在食管癌鳞状细胞癌中呈低表达（４５．１％,２３／５１）,阳性率显著低于正常食管粘膜及癌旁组织（Ｐ〈０．０１）,阳性率与分化程度相关（Ｐ〈０．０１）,Ⅰ级６６．７     

HPV16,18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的 观察ＨＰＶ１６,１８Ｅ６在人宫颈癌中的表达并说明Ｅ６单抗的应用价值。采用Ｓ－Ｐ免疫组化染色法,检测５０例宫颈鳞状细胞癌,３０例慢性宫颈炎及３０例正常宫颈组织中ＨＰＶ１６,１８Ｅ６蛋白的表达。结果 宫颈癌组中Ｅ６表达的阳性率为７０％（３５／５０）,慢性宫颈炎组中Ｅ６阳性率为６．７％（２／３０）,４例腹股沟淋巴结转移癌Ｅ６阳性率为７５％（３／４）,正常宫颈组中Ｅ６表达均为阴性。Ｅ６的表达与肿瘤的     

p16和Rb蛋白在胃癌中的表达及其意义

目的 探讨胃癌组织中ｐ１６和Ｒｂ蛋白表达及其与临床病理的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测了４０例胃癌组织中ｐ１６和Ｒｂ蛋白的表达。结果 在胃癌组织中，ｐ１６和Ｂｂ蛋白表达阳性率分别为３５．０％（１４／４０）和７２．５％（２９／４０），ｐ１６蛋白阳性胃癌的Ｒｂ蛋白阳性率明显低于ｐ１６蛋白在中中的表达类型、淋巴结转移密切相关。结论 ｐ１６和Ｒｂ蛋白在胃癌中的表达下降与肿瘤的进展密切相关，ｐ１６蛋白     

骨肉瘤中Rb、p16、CDK4、cyclinD1蛋白的表达及其意义

目的 探讨骨肉瘤中Ｒｂ、ｐ１６、ＣＤＫ４、ｃｙｃｌｉｎＤ１的蛋白表达、相互关系及其意义。方法 应用免疫组化方法对４０例骨肉瘤组织中Ｒｂ、ｐ１６、ＣＤＫ、ｃｙｃｌｉｎＤ１的蛋白表达状况进行检测。结果 ４０例骨肉瘤Ｒｂ、ｐ１６蛋白表达缺失分别为７２．５％（２９／４０和）２２．５％（９／４０）;１１例ｐＲｂ阳性的骨肉瘤中的８例ｐ１６阴性,２９例ｐＲｂ阴性的骨肉瘤中２８例ｐ１６阳性;５２．５％（２１／４０     

p16与Rb蛋白在骨肉瘤中的表达及相关性研究

为探讨骨肉瘤中ｐ１６和Ｒｂ蛋白的表达及其相关性，采用免疫组化ＡＢＣ法，对３２例骨肉瘤手术标本使用抗ｐ１６和Ｒｂ蛋白抗体进行检测。结果显示，ｐ１６和Ｒｂ蛋白阳性表达分别为３７．５％（１２／３２）和５６．３％（１８／３２）。在１２例Ｒｂ蛋白阳性或强阳性表达的骨肉瘤中，ｐ１６蛋白表达阴性或弱阳性表达８例（６６．７％）；相反，在１０例Ｒｂ蛋白阴性或弱阳性表达的骨肉瘤中，ｐ１６蛋白阳性或强阳性表达６例（６０．０％）。结果表明：ｐ１６和Ｒｂ蛋白参与骨肉瘤细胞的增殖过程并与骨肉瘤的进展和预后有关；ｐ１６和Ｒｂ蛋白之间阳性表达的相互抑制，可能是判断骨肉瘤恶性程度的标志之一。     

人乳头瘤病毒16、18型在乳腺癌组织中的表达

目的：探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６、１８型感染与人乳腺癌病因学的关系。方法：采用免疫组化法（ＳＰ）检测ＨＰＶ１６、１８Ｅ６蛋白在１０例正常乳腺组织,４５例乳腺癌组织中的表达并对癌组中１３例ＨＰＶ１６、１８Ｅ６蛋白阳性材料进行ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ原位杂交检测。结果：癌组中ＨＰＶ１６、１８Ｅ６阳性率为５３．３％（２４／４５）,而正常乳腺组织中均为阴性表达。ＨＰＶ１６、１８ＤＮＡ阳性率为３８．５％（     

Rb,p16蛋白在大肠癌中的表达及其意义

目的研究Ｒｂ、ｐ１６基因表达的蛋白产物在大肠癌组织中的变化及其意义。方法应用免疫组化ＳＰ法,在４０例原发性大肠癌中检测Ｒｂ、ｐ１６蛋白的表达。结果Ｒｂ蛋白表达阳性率为７２．５％（２９／４０）;ｐ１６蛋白表达阳性率为３７．５％（１５／４０）。２３例ｐ１６蛋白呈阴性或弱阳性表达的大肠癌组织中,Ｒｂ蛋白均显示阳性或强阳性,９例Ｒｂ蛋白呈阴性或弱阳性表达的大肠癌中,ｐ１６蛋白呈阳性或强阳性表达。１５例淋巴结转移的大肠癌中仅２例ｐ１６阳性,而２５例无转移者有１３例ｐ１６阳性。结论大肠癌发生过程中,存在Ｒｂ、ｐ１６蛋白表达的异常,Ｒｂ失活与ｐ１６表达之间存在负相关关系。ｐ１６蛋白表达缺失与大肠癌淋巴结转移有关。     

鼻咽癌组织中CDK4和p16蛋白的表达

目的：为了观察ＣＤＫ４和p１６蛋白在鼻咽癌组织中的表达状态,探讨其与鼻咽癌的发生 、发展关系。方法：应用Ｓ－Ｐ免疫组化法检测ＣＤＫ４和p１６蛋白在６０例鼻咽癌和２ ０例正常鼻咽部粘膜组织中的表达。结果：６０例鼻咽癌中ＣＤＫ４和p１６蛋白表达率分别为６６．７％和２３．３％。高分化鳞癌p１６蛋白的表达率明显高于低分化鳞癌（Ｐ〈 ０．０１）。２１例淋巴结转移阳性组中p１６蛋白的过度表达与p１６蛋白的低表达可能涉     

p53和HPV—16、18E6蛋白在宫颈癌的表达

目的探讨宫颈癌中抑癌基因p53蛋白与HPV-16、18癌基因E6蛋白的表达及其意义.方法采用SP免疫组织化学方法,检测68例宫颈癌和8例慢性宫颈炎上皮组织中p53和HPV-16、18E6蛋白的表达.结果68例宫颈癌中有17例p53蛋白和60例HPV-16、18E6蛋白呈阳性表达,阳性率分别为25.0%和88.2%.p53蛋白阳性表达与组织学类型有关,其阳性率在宫颈腺癌中为83.3%和宫颈鳞癌中为17.2%,有极显著性差异(P＜0.01);p53蛋白表达也与临床分期相关,该蛋白阳性表达率随着临床分期上升而增高.p53表达同肿瘤分化程度,淋巴结转移无关(P＞0.05).HPV-16、18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达同肿瘤分化程度、淋巴结转移、组织学类型和临床分期无关(P＞0.05).在慢性宫颈炎上皮组织中均无p53和HPV-16、18E6蛋白表达.结论p53蛋白阴性和弱阳性表达以及HPV-16、18E6蛋白过度表达与宫颈癌发生有关,但在宫颈腺癌和临床分期升高的宫颈癌组织中,p53蛋白阳性表达的增强可能是p53基因突变的结果,或者与其他细胞蛋白结合,阻止了HPV-16、18E6蛋白对p53蛋白的降解作用,使p53蛋白稳定性增加和阳性表达水平提高.     

p16、Ki-67在宫颈鳞状上皮病变分级诊断中的意义

目的:探讨p16、Ki-67在宫颈鳞状上皮病变分级诊断中的意义.方法:收集我院2013年6月至2015年6月,阴道镜检查并宫颈活检病理127例,进行免疫组化p16、Ki-67检测,整理完整临床和病理资料作为研究对象.结果:根据127例宫颈活检HE染色及p16、Ki-67免疫组化结果修订原诊断.26例诊断为慢性宫颈炎;32例HSIL除1例考虑萎缩性改变,31例诊断HSIL;58例LSIL其中7例诊断为HSIL;1 1例CIN1-2中2例诊断为HSIL,9例诊断为LSIL;所有修订后HSIL,均随访1年.40例HSIL患者行Leep、宫颈锥切治疗,病理诊断除1例表现为p16、Ki-67阴性外(考虑萎缩性改变),与活检病理诊断一致.结论:联合免疫组化p16、Ki-67检测,在宫颈鳞状上皮病变分级诊断、治疗中具有重要意义,p16在肿瘤性病变中过表达更具特异性.     

膀胱移行细胞癌HPV-16/18感染与p53基因改变的关系

目的初步探讨膀胱移行细胞癌(TCC)中HPV-16／18感染与p53基因改变的关系。方法选择已确定为HPV-16／18感染的18例膀胱TCC患者(其中HPV-16／18E7片段阳性者13例，HPV-16／18E7阴性者5例)，采用微卫星方法检测肿瘤组织内与p53基因紧密连锁的TP53位点杂合性缺失(LOH)情况，并采用免疫组织化学方法检测p53蛋白表达情况。结果18例TCC组织中TP53位点杂合率为83．33％(15／18)，其LOH率达46．67％(7／15)；p53蛋白阳性率为50．00％(9／18)。其中，HPV-16／18E7 DNA阳性和p53基因改变[包括TP53位点LOH和(或)p53蛋白阳性]并存者11例，占61.11％(11／18)；仅HPV-16／18E7 DNA阳性或p53基因改变[包括TP53位点LOH和(或)p53蛋白阳性]者5例，占27．78％(5／18)；两者均阴性者2例，占11．11％(2／18)。结论HPV-16／18感染可能通过p53基因改变在TCC的发生发展过程中发挥作用，这种p53基因改变可以是LOH和(或)蛋白异常表达。     

p16INK4a免疫细胞化学检测在筛查宫颈癌中的作用

目的 探讨p16^INK4a免疫细胞化学检测在筛查宫颈癌及其癌前病变中的作用。方法 选择220例宫颈液基细胞学剩余标本,制作液基薄片进行p16^INK4a 免疫细胞化学检测,随访组织活检结果,并与高危人乳头瘤病毒（HR—HPV）DNA检测结果进行对照。结果 p16^INK4a在宫颈细胞学诊断的鳞状细胞癌（SCC）、鳞状上皮内高度病变（HSIL）、鳞状上皮内低度病变（LSIL）、非典型鳞状细胞-小除外上皮内高度病变（ASC—H）和非典型鳞状细胞-不能明确意义（ASC—US）病例的阳性表达率分别为100．0％（7／7）、92．2％（107／116）、24．3％（17／70）、100．0％（14／14）和36．4％（4／11）。150例p16^INK4a阳性者中,111例有组织活检诊断,其中宫颈上皮内瘤变（CIN）2级及以上病变者97例（87．4％）;70例p16^INK4a阴性者中,18例有组织活检诊断,无一例CIN2及以上病变。p16^INK4a在CIN2及以上病变与在CIN1之间的阳性表达率差异有统计学意义（P〈0.01）,而HR-HPV DNA的阳性率在两者之间差异无统计学意义。结论 p16^INK4a在宫颈HSIL及以上病变中高表达,有利于高危病例的筛选。     

High-risk human papillomavirus E7 oncoprotein detection in cervical squamous cell carcinoma.

PURPOSE: Persistent infections by high-risk human papillomavirus (HPV) types are the main etiologic factor for cervical cancer. The objective of this study was to evaluate whether high-risk E7 oncoprotein is adequate as a marker for the detection of cervical cancer. EXPERIMENTAL DESIGN: HPV typing was done in biopsies from 58 cervical carcinoma and 22 normal cervical squamous epithelia. The HPV-16 E7, HPV-18 E7, and HPV-45 E7 oncoprotein levels were monitored by immunohistochemistry and compared with those of p16(INK4a) and Ki67. RESULTS: Fifty-five (94.8%) tumors were high-risk HPV-DNA-positive (46 HPV-16, 2 HPV-16 and HPV-18, 4 HPV-18, 1 HPV-33, and 2 HPV-45). HPV-DNA could not be detected in three tumors (5.2%). High HPV E7 oncoprotein levels were shown in 57 cervical cancers (98.3%), without correlation between expression levels and tumor stages. CONCLUSION: This is the first study which systematically analyzes the levels of the major HPV oncoproteins in cervical carcinomas demonstrating that the high-risk HPV E7 proteins are regularly expressed in these cancers. This suggests that high-risk E7 oncoproteins are necessary for cervical cancers and apparently essential as tumor marker.     

子宫颈鳞状细胞癌人类乳头状瘤病毒16／18、p16及Her-2的表达及其临床意义

 目的　研究子宫颈鳞状细胞癌癌变过程中高危型人类乳头状瘤病毒（HPV）、 p16及Her-2的表达及临床意义。方法　利用组织芯片技术结合显色原位杂交、免疫组织化学和荧光原位杂交（FISH）技术检测60例子宫颈鳞状细胞癌、61例子宫颈上皮内瘤变（CIN）以及21例正常子宫颈组织中HPV16／18 、p16及Her-2的表达及Her-2基因扩增的情况。结果　在正常子宫颈组、CINⅠ~Ⅱ组、CINⅢ组、子宫颈鳞状细胞癌组中,HPV16／18和p16的阳性率均逐渐升高,分别为0（0／21）、9.68 %（3／31）、46.67 %（14／30）、71.67 %（43／60）;0（0／21）、19.35 %（6／31）、93.33 %（28／30）、96.67 %（58／60）,HPV16／18除正常组子宫颈组与CINⅠ~Ⅱ组间、p16除CINⅢ组与子宫颈鳞状细胞癌组间的差异无统计学意义（P＞0.05）,其余各组阳性率差异均有统计学意义（P＜0.05）;Her-2表达的阳性率在CIN Ⅲ组与子宫颈鳞状细胞癌组分别为13.33 %（4／30）和31.67 %（19／60）,Her-2基因扩增率分别为3.33 %（1／30）和21.67 %（13／60）,正常子宫颈组与CINⅠ~Ⅱ组Her-2阳性率和Her-2基因扩增率均为0,子宫颈鳞状细胞癌组与CIN组、正常子宫颈组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。Her-2蛋白表达及Her-2基因扩增与子宫颈鳞状细胞癌的分化程度、分期及淋巴结转移呈正相关（P＜0.05）。结论　HPV感染是子宫颈鳞状细胞癌发生的触发因素之一;p16蛋白的表达与Her-2基因的扩增可能参与调控了子宫颈鳞状细胞癌的发生、发展过程,其高表达预示子宫颈鳞状细胞癌的不良预后。     

P16蛋白在子宫颈上皮内瘤变中表达意义与高危型HPV感染的相关性分析

  目的  研究P16蛋白在宫颈上皮内瘤变（CIN）中表达的意义, 探讨其与高危型人类乳头状瘤病毒（HPV）感染的相关性, 以期用P16蛋白的表达预测CIN进展。  方法  收集大连大学附属医院2009年1月至2011年5月宫颈活检及手术切除标本137例, 免疫组织化学方法检测P16蛋白的表达并评分, HC2方法检测高危型HPV-DNA, 并对数据进行分析。  结果  P16蛋白表达在慢性子宫颈炎伴鳞状上皮化生中均阴性（0/40）, CINⅠ阳性90.91%（20/22）, CINⅡ阳性为95.00%（19/20）, CINⅢ阳性为100.00%（25/25）, 浸润性鳞癌阳性为100.00%（30/30）。在慢性子宫颈炎伴鳞化中高危型HPV阳性1例, CINⅠ12例, CINⅡ14例, CINⅢ22例, 浸润性鳞癌29例。CIN中感染高危型HPV的病例, P16蛋白均呈阳性表达。  结论  P16蛋白可作为区分子宫颈癌及癌前病变与良性反应性增生的标记物, 其表达的分层现象能够很好的反映出CIN的分级, P16蛋白阳性表达的评分有助于区分出有高危发展倾向的CIN。