白细胞介素22及其受体在慢性鼻—鼻窦炎发病中的作用

<正>慢性鼻一鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)是鼻腔鼻窦黏膜的慢性气道炎性疾病。CRS分为2种亚型,不伴鼻息肉型(chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP)和伴息肉型(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP),2种亚型均以鼻黏膜的增殖性炎性反应为特征。CRSsNP是以纤维化为主的组织重塑,CRSwNP则是水肿为主伴有黏膜增厚、炎性细胞浸润,导致上皮组织结构损伤,最终鼻息肉形成。CRS     

CC类趋化因子在慢性鼻窦炎的表达

目的 研究趋化因子CCL2[单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1）]、CCL3[巨噬细胞炎性反应蛋白-1α（macrophage inflammation protein 1α,MIP-1α）]、CCL4（MIP-1b）、CCL5（RANTES）、Eotaxin在慢性鼻窦炎（chronic rhinosinusitis,CRS）组织中的表达并观察上述趋化因子与炎性细胞标志物和其他细胞因子的相关性.方法选择94例鼻息肉组织（chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP）,33例慢性鼻窦炎组织（chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP）和24例对照鼻甲黏膜.采用组织匀浆,ELISA检测CCL2（MCP-1）、CCL3（MIP-1a）、CCL4（MIP-1b）、CCL5（RANTES）和Eotaxin,同时采用ELISA检测组织中的嗜酸性阳离子蛋白（eosinophilic cationic protein,ECP）、髓过氧化物酶（MPO）、白细胞介素-5（IL-5）、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、IL-6、IL-8.结果 CCL2（MCP-1）、CCL3（MIP-1a）、CCL4（MIP-1b）和Eotaxin在鼻息肉组织（chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP）中的表达高于对照组和鼻窦黏膜组织（chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP）,并且CCL4和Eotaxin在嗜酸性粒细胞型鼻息肉（Eos CRSwNP）组织中的表达明显高于中性粒细胞型鼻息肉（Neu CRSwNP）组织.而CCL5（RANTES）在各组间差异无统计学意义.结论趋化因子在鼻息肉发病机制中可能发挥重要作用.     

IL-23在慢性鼻窦炎中的表达和作用

目的 探讨IL-23因子在慢性鼻窦炎中的表达和对辅助性T细胞17（T helper cell 17,Th17）免疫反应的调节作用。方法 募集15例受试者（正常对照组）,14例慢性鼻窦炎不合并鼻息肉（chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP）患者（CRSsNP组）和37例慢性鼻窦炎合并鼻息肉（chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP）患者（CRSwNP组）。取正常对照组受试者的下鼻甲,CRSsNP组患者的筛窦黏膜和CRSwNP组患者的鼻息肉（nasal polyps,NP）组织制备组织匀浆,检测组织匀浆中白细胞介素-23（interleukin-23,IL-23）、髓过氧化物酶（myelo-peroxidase,MPO）和IL-17蛋白的浓度;计数组织中性粒细胞数目和外周血中性粒细胞数目和百分比。取NP组织消化成单个细胞悬液,IL-23体外刺激24 h,然后检测NP组织单个细胞悬液中Th17相关因子的浓度。结果 与正常对照组相比,IL-23因子在CRSsNP和CRSwNP组患者中的表达均没有差别。但是,IL-17+CRSwNP亚组中IL-23的表达显著高于正常对照组和IL-17-CRSwNP亚组。鼻黏膜组织IL-23浓度与鼻黏膜组织MPO浓度正相关,但是与外周血和组织中的中性粒细胞数目不相关。IL-23体外刺激NP组织单个细胞悬液能够促进Th17相关因子IL-17和IL-1β的生成,但是对Th17相关因子IL-8和粒细胞集落刺激因子（granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF）生成没有影响。结论 IL-23因子在IL-17+CRSwNP中通过增强Th17反应发挥作用。     

Analysis of transforming growth factor β signaling in chronic rhinosinusitis

Background It has been reported that there is a significant difference in the local tissue concentration of transforming growth factor （TGF）-β1 between chronic rhinosinusitis without nasal polyps （CRSsNP） and chronic rhinosinusitis without nasal polyps （CRSwNP） patients. TGF-β has been reported to play an important role in regulating epithelial cell repair in lower airway remodeling and may be a critical factor involved in the remodeling process of chronic rhinosinusitis （CRS）. Methods Ethmoidal mucosal samples collected from CRS and healthy control patients were analyzed for TGF-β1, TGF-β receptor I, TGF-βreceptor II, Smad3, phospho-Smad3, Smad7, and Smad anchor for receptor activation by Western blotting analysis. The proliferation of sinonasal epithelial cells at baseline and after TGF-β1 and/or EGF stimulation was evaluated by the MTT assay. Results In CRSsNP, TGF-β1, TGF-β receptor I, TGF-β receptor II, and Smad3 protein levels were significantly higher than controls. In CRSwNP, TGF-β1, Smad3, and pSmad3 protein levels were significantly lower than controls. Smad7 protein was significantly higher in CRS than controls. In vitro experiments demonstrated that the baseline proliferation levels of sinonasal epithelial cells were lower in CRS than controls. Conclusions CRSwNP is characterized by a lower level of TGF-signaling compared with the control, In CRSsNP, although the upstream signaling of TGF-β was enhanced, the high Smad7 protein expression may restrain the downstream signaling components （e.g., pSmad3） and the TGF-β antiproliferative effect on sinonasal epithelium. The difference in the local tissue concentration of TGF-β1 between CRSsNP and CRSwNP patients did not result in significant differences in epithelial proliferation.     

Features of airway remodeling in different types of Chinese chronic rhinosinusitis are associated with inflammation patterns

Background The remodeling patterns in different types of chronic rhinosinusitis (CRS) have rarely been compared, particularly the difference between eosinophilic and noneosinophilic CRS with nasal polyps (CRSwNP). Moreover, whether there is a link between remodeling and inflammation remains controversial.Objective To directly compare the remodeling features of different CRS and to explore their relationship with inflammation in Chinese patients.Methods Histologic characteristics of surgical samples were analyzed in 33 controls, 72 eosinophilic and 76 noneosinophilic CRSwNP, and 72 CRS without nasal polyps (CRSsNP) patients. Tissue samples from 38 controls, 26 eosinophilic and 26 noneosinophilic CRSwNP, and 32 CRSsNP patients were measured for mRNA and/or protein expression of profibrotic growth factors,metalloproteinases (MMPs), tissue inhibitor of metalloproteinases (TIMPs), hypoxia-inducible factor (HIF)-1α, interleukin (IL)-8,eosinophil cationic protein (ECP), and myeloperoxidase (MPO).Results The amount of collagen decreased, whereas the edema scores increased, from CRS sNP to noneosinophilic CRS wNP and to eosinophilic CRSwNP. Transforming growth factor (TGF)-β2 protein levels were enhanced in CRSsNP compared with CRSwNP. TIMP-4 protein levels decreased in eosinophilic CRSwNP compared with noneosinophilic CRSwNP and CRSsNP.The number of neutrophils decreased from CRSsNP to noneosinophilic CRSwNP and to eosinophilic CRSwNP. ECP levels were only up-regulated in eosinophilic CRSwNP. ECP levels and neutrophil number correlated positively with the severity of edema and fibrosis, respectively. Neutrophils were the major sources of TGF-β2 in CRSsNP and noneosinophilic CRSwNP.Conclusion Distinct remodeling patterns are revealed for different types of CRS, particularly for eosinophilic and noneosinophilic CRSwNP.Tissue remodeling associates with inflammation in CRS.     

慢性鼻-鼻窦炎伴或不伴鼻息肉的细菌培养分析

目的：研究慢性鼻-鼻窦炎中细菌的分布,比较慢性鼻-鼻窦炎伴和不伴鼻息肉患者及正常对照患者中鼻道分泌物的细菌学特征。方法：回顾性分析72名慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP)患者、65名慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(chronic rhinosinusitis with nasal polyps,CRSwNP)患者和40名正常对照者鼻道分泌物中细菌培养的阳性率和分布。结果：细菌经培养后,CRSwNP,CRSsNP及对照组的阳性率分别为81.9%,80.0%和82.5%,3组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。需氧菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、链球菌属、棒状杆菌属,厌氧菌主要为梭杆菌属,3组间比较差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论：CRSsNP,CRSwNP和对照组培养出的细菌分布没有明显的差异。细菌感染并非是慢性鼻-鼻窦炎伴或不伴鼻息肉发病机制中的唯一因素。     

组蛋白去乙酰化酶1在慢性鼻窦炎上皮细胞中的表达及其对鼻黏膜上皮间质转化的影响

背景 慢性鼻窦炎是耳鼻喉科常见的慢性炎症性疾病.通常不伴鼻息肉的慢性鼻窦炎(chronic rhinosinusitis without nasal polyps,CRSsNP)更常见,其病因及发病机制尚不清楚.目的 研究组蛋白去乙酰化酶1(sirtuin 1,SIRT1)在CRSsNP上皮细胞中的表达,并探讨其对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导鼻黏膜上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响.方法 采用免疫组织化学染色、Real-time PCR、Western blot观察SIRT1在CRSsNP和正常对照筛窦黏膜上皮中的表达情况.对正常鼻黏膜上皮细胞进行原代培养,并予TGF-β1处理,通过Western blot检测SIRT1过表达对EMT相关蛋白(E-cadherin、α-SMA、N-cadherin、Vimentin)表达的影响.结果 与对照组相比,CRSsNP组SIRT1表达减少(P<0.001).TGF-β1下调鼻黏膜上皮中SIRT1的表达,同时E-cadherin表达减少,α-SMA、N-cadherin、Vimentin表达增加,这一效应可被SIRT1过表达所逆转.结论 SIRT1抑制TGF-β1诱导的鼻黏膜上皮EMT,可能在CRSsNP的病理生理过程中起重要作用.     

慢性鼻窦炎患者鼻窦黏膜上皮中TGF-β信号通路分析

背景 研究发现,CRSsNP和CRSwNP患者的鼻窦黏膜组织之间存在TGF-β1表达量的显著不同。而在下气道疾病的研究中发现,TGF-β通过调节气道黏膜上皮细胞增殖能力从而影响下气道黏膜重塑。TGF-β可能作为一个关键的因素参与了慢性鼻窦炎的鼻窦黏膜上皮重塑过程。 方法 通过Western Blot 分析CRS患者和正常对照组中筛窦黏膜组织中TGF-β1, TGF-β 受体I, TGF-β 受体 II, Smad3, 磷酸化的Smad3, Smad7 及 SARA差异。 以TGFβ1、EGF及相应抑制剂分别或共同作用于原代培养的鼻窦黏膜上皮细胞,通过MTT法测定各刺激组间细胞增殖水平的差异。 结果 在CRSsNP组, TGF-β1, TGF-β受体I, TGF-β 受体II和 Smad3 蛋白水平显著高于正常对照组。在 CRSwNP组, TGF-β1, Smad3 及 磷酸化的Smad3 蛋白水平 显著低于正常对照组. Smad7 蛋白在各CRS组均显著高于正常对照组.体外细胞培养实验中。各CRS组的鼻窦黏膜上皮细胞增殖能力均显著低于正常对照组。 结论 与正常对照组相比,CRSwNP 患者有着TGF-β 信号通路信号的显著低水平表达。在CRSsNP ,尽管TGF-β上游信号为高表达,负性调节因子Smad7蛋白的高表达可能抑制了TGF-β信号通路。从而,在CRSsNP 及 CRSwNP 患者中不同表达的TGF-β1并未显著影响鼻窦黏膜上皮增殖能力。     

鼻腔中央区变应性疾病研究进展

鼻腔中央区变应性疾病（central compartment allergic disease，CCAD）是国际上新近命名的一种慢性鼻窦炎（chronic rhinosinusitis，CRS）亚型，其特征在于吸入性变应原在鼻腔中央区域黏膜产生2型炎症反应。早期可表现为局限于中鼻甲、上鼻甲及鼻中隔后上部位的黏膜水肿和息肉样变，进展后可导致邻近窦口发生阻塞，形成弥漫性鼻窦炎伴鼻息肉（diffuse sinus- itis with nasal polyps，CRSwNP），给治疗带来了更多挑战。文章就CCAD临床症状、内镜和影像学表现、致敏特点及组织病理学特征做一综述，总结CCAD与其他类型CRS的本质区别，为优化临床诊疗策略提供一定参考。     

流式细胞术微球阵列法在慢性鼻-鼻窦炎细胞因子临床检测中的应用

目的 检测慢性鼻-鼻窦炎伴有鼻息肉(CRSwNP)和不伴鼻息肉(CRSsNP)患者细胞因子的表达,探讨免疫因素在其发病中的作用.方法 采用流式细胞术微球阵列法(CBA)检测20例CRSwNP患者、17例CRSsNP患者及13例正常对照组织样本及血清中IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、TNF、IFN-γ六种细胞因子水平.结果 CRSwNP组织中IL-4、IL-5、IL-10、IFN-γ,CRSsNP组织中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ表达显著高于血清；CRSwNP组织中IL-5、IL-10的表达明显高于对照且IL-5明显高于CRSsNP; CRSsNP组织中IFN-γ、IL-10的表达明显高于对照和CRSwNP.结论 CRSsNP以高表达IFN-γ为代表的Th1细胞因子为主,而CRSwNP主要表现为以高水平的IL-5为代表的Th2细胞因子,CBA技术具有一定优势,能够比较全面反应免疫因素在此两型慢性鼻-鼻窦炎(CRS)中的差异,从而为应用细胞因子抗体等治疗CRS提供科学依据.     

变应性因素与慢性鼻窦炎及鼻息肉的相关性研究

回顾性分析218例慢性鼻窦炎患者术前变应原皮肤点刺试验( SPT)结果,并将SPT阳性出现的比例分别与慢性鼻窦炎伴或不伴鼻息肉进行比较。变应原阳性患者中变应原在各组分布规律相同;慢性鼻窦炎伴息肉组变应原阳性率高于慢性鼻窦炎不伴息肉组,差异有统计学意义(P <0．05),慢性鼻窦炎不伴息肉组变应原阳性率高于鼻中隔弯曲组,差异无统计学意义;慢性鼻窦炎伴鼻息肉组复发率高于慢性鼻窦炎不伴鼻息肉组,变应原阳性患者复发率高于阴性者,两组差异有统计学意义。     

MIP-1α和MMP-9在鼻息肉中的表达及其临床意义

目的：检测鼻息肉患者中MIP-1α和MMP-9的表达情况及其在鼻息肉发生发展中的作用及意义。方法：选择40例鼻息肉患者的鼻息肉组织和20例鼻中隔偏曲患者需要部分切除的下鼻甲黏膜组织,采用免疫组织化学技术检测鼻息肉组织和下鼻甲组织中MIP-1α和MMP-9的表达情况并进行相关性分析,同时光镜下观察分析两组标本的组织病理学特征。结果：鼻息肉组织中MIP-1α和MMP-9的表达均明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。在病例组MIP-1α水平与MMP-9成正相关。结论：MIP-1α和MMP-9在鼻息肉中的高表达,提示两者可能参与了鼻息肉的发病。     

鼻内镜Messerklinger中鼻甲成形术对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者鼻腔功能及炎性应激反应的影响

目的探究鼻内镜Messerklinger中鼻甲成形术对慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）患者鼻腔功能及炎性应激反应的影响。方法选取CRSwNP患者117例作为研究对象，按照随机数字表法分为观察组（59例）、对照组（58例）。观察组采取鼻内镜Messerklinger中鼻甲成形术，对照组采取鼻内镜中鼻甲部分切除术。比较两组临床疗效、手术前后症状改善情况、鼻腔功能［鼻腔容积（NCV）、鼻腔最小横截面积（NMCA）、鼻腔最小横截面至前鼻孔距离（DCAN）、气道阻力］、嗅觉功能、鼻黏膜形态、炎性应激反应［鼻黏膜白细胞介素-5（IL-5）、人软骨糖蛋白-39（YKL-40）、转化生长因子-β1（TGF-β1）］水平。并随访6个月，统计对比两组复发率。结果观察组总有效率94.92%（56/59）高于对照组79.31%（46/58）（P<0.05）；术后3个月，观察组流脓涕、鼻塞、咳嗽、头晕评分低于对照组（P<0.05）；观察组术后3个月NCV、NMCA高于对照组，DCAN、气道阻力低于对照组（P<0.05）；术后3个月，观察组嗅觉功能、Lund-Kennedy评分低于对照组（P<0.05）；观察组术后3个月鼻黏膜IL-5、YKL-40、TGF-β1低于对照组（P<0.05）；随访6个月，观察组脱落3例，对照组脱落2例。观察组复发率7.14%（4/56）与对照组4.35%（2/46）相比，差异无统计学意义（P>0.05）。结论鼻内镜Messerklinger中鼻甲成形术治疗CRSwNP患者疗效显著，可明显减轻临床症状，改善鼻腔功能、嗅觉功能及鼻黏膜形态，还可降低鼻黏膜炎性应激反应程度，且不增加复发风险。     

Clinical and histopathologic features of biofilm-associated chronic rhinosinusitis with nasal polyps in Chinese patients

Background  Biofilms have given new insights to the understanding of pathogenesis of chronic rhinosinusitis (CRS). However, the link between biofilms formation and local inflammatory response remains poorly defined in CRS with nasal polys. The aim of this study was to determine the potential association of the presence of biofilms in the nasal mucosal tissues with clinical features in Chinese patients, which had CRS with nasal polyps (CRSwNP).

Methods  A total of 19 patients with CRSwNP and 12 patients with non-CRS were subjected to endoscopic surgery and their nasal mucosal tissue specimens were examined histologically and by scanning electron microscopy (SEM). Their demographic and clinical features were recorded.

Results  Thirteen (68.4%) out of the 19 specimens from patients with CRSwNP, but none from control patients, were positive for biofilms that displayed typical characteristics of bacterial and fugal structures. The presence of biofilms in the nasal mucosal tissues was associated with significantly greater values of purulent nasal discharge and preoperative Lund-Kennedy scores, higher levels of serum total IgE and percentages of subjects with endoscopic surgery (ESS) history in patients with CRSwNP, and more severe inflammation in the nasal mucosal tissues of patients with CRSwNP.

Conclusion  Our study demonstrated the presence of biofilms in the nasal mucosal tissues of many patients, contributing to the understanding of the pathogenic process of CRSwNP in Chinese patients.

     

HDAC1、MAPK水平与慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者糖皮质激素抵抗的关系

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶1（HDAC1）、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）水平与慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉（CRSwNP）患者糖皮质激素（GC）抵抗的关系。方法:选取2018年10月—2020年10月收治的CRSwNP患者60例,根据患者是否存在GC抵抗分为GC抵抗组（n=22）和GC敏感组（n=38）。测定两组GC治疗前、后HDAC1 mRNA及细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）、c-Jun N末端蛋白激酶（JNK）、p38MAPK mRNA水平。利用受试者工作特征（ROC）曲线分析HDAC1、p38MAPK、ERK、JNK对CRSwNP患者GC抵抗发生的预测价值。将有差异的单因素纳入Logistic模型,行量化赋值,明确CRSwNP患者GC抵抗发生的危险因素。结果:治疗后,GC抵抗组HDAC1 mRNA表达量显著低于GC敏感组,p38MAPK mRNA、ERK mRNA、JNK mRNA表达量显著高于GC敏感组（t=18.425、19.213、18.721、19.694,均P＜0.05）。经ROC曲线分析,HDAC1 mRNA、p38MAPK mRNA、ERK mRNA、JNK mRNA预测CRSwNP患者GC抵抗发生的曲线下面积分别为0.715（95%CI:0.570～0.860）、0.917（95%CI:0.849～0.985）、0.863（95%CI:0.754～0.971）、0.885（95%CI:0.795～0.973）,均P＜0.05。经多因素Logistic回归分析证实,HDAC1 mRNA＜0.660（OR=1.386,95%CI:1.216～1.580）、p38MAPK mRNA≥0.428（OR=1.647,95%CI:1.342～2.021）、ERK mRNA≥0.571（OR=1.627,95%CI:1.234～2.145）、JNK mRNA≥0.510 （OR=1.897,95%CI:1.342～2.682）是CRSwNP患者GC抵抗发生的危险因素。结论:HDAC1、MAPK水平与CRSwNP患者GC抵抗密切相关。     

成纤维细胞生长因子-2和基质金属蛋白酶-9在鼻息肉表达及其意义

目的研究成纤维细胞生长因子-2（FGF-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在鼻息肉中表达及其意义,探讨其在鼻息肉形成中的作用。方法观察组（30例）经鼻内镜手术治疗的鼻息肉患者的鼻息肉组织;对照组（6例）行鼻中隔矫正术患者（既往无慢性鼻-鼻窦炎病史）,钩突处黏膜作为正常对照。所选患者术前6周未使用全身或局部糖皮质激素及其他鼻用药物,分别用HE染色法和免疫组化法检测两组标本中FGF-2和MMP-9的蛋白表达情况,并对结果进行统计学分析。结果 FGF-2和MMP-9在鼻息肉中表达较正常钩突处黏膜增高。结论 FGF-2和MMP-9在鼻息肉组织中的高表达可能是促进鼻息肉形成和发展的一个重要因素。     

糖皮质激素对鼻息肉中固生蛋白C表达的抑制作

目的 研究糖皮质激素对鼻息肉及呼吸道上皮细胞中固生蛋白C(tenascin C,TNC)表达的影响,探求糖皮质激素抑制鼻息肉组织结构重塑的可能机制.方法 采用ELISA方法 检测经鼻腔吸入糖皮质激素(布地奈德)治疗患者和未治疗患者的鼻息肉组织中TNC和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的蛋白含量;进一步采用细胞培养、实时定量RT-PCR和原位ELISA技术观察布地奈德对人呼吸道上皮细胞系BEAS-2B细胞TNC表达的调控作用.结果 与未治疗组相比,治疗组鼻息肉组织中TNC和TGF-β1的蛋白表达明显减少(P<0.01);鼻息肉组织中TNC和TGF-β1的蛋白水平呈显著正相关(r=0.68,P<0.01).经布地奈德预处理后,TGF-β1诱导的BEAS-2B细胞TNC mRNA和蛋白的表达明显减少(P<0.01).结论 糖皮质激素可以通过抑制鼻息肉组织中TGF-β1的表达及抑制TGF-β1上调呼吸道上皮细胞TNC表达的功能而参与对鼻息肉组织结构重塑的调控.