土贝母苷甲对RANKL诱导破骨细胞分化的影响与作用机制研究

目的:探讨土贝母苷甲对破骨细胞分化的影响及其可能的分子机制。方法:通过剂量依赖性破骨细胞分化实验观察土贝母苷甲0.5、1、2μmol/L组对核因子κB受体活化因子配体(Receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)诱导的破骨细胞分化的影响。荧光素酶报告基因实验及Western blot法检测土贝母苷甲对核转录因子κB及核转录因子κB抑制因子α(Inhibitor of NF-κBα,IκBα)的影响。Micro-CT评估土贝母苷甲对去卵巢(OVX)模型小鼠骨质疏松的作用。结果:土贝母苷甲呈剂量依赖性抑制RANKL诱导的破骨细胞分化,且能抑制NF-κB转录活性及IκBα降解;体内实验表明土贝母苷甲1 mg/kg组对OVX小鼠骨组织有保护作用。结论:土贝母苷甲通过抑制破骨细胞的分化对OVX小鼠骨质疏松有保护作用,其机制可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

土贝母提取物对人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型的抗肿瘤作用评价

目的:建立绿色荧光蛋白标记的人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型,研究中药土贝母提取物对转染GFP基因的人乳腺癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型的抗肿瘤活性。方法:应用原位移植方法,建立绿色荧光蛋白标记的人乳腺癌MDA-MB-231-GFP模型。通过比较阴性对照组(口服0.9%氯化钠溶液)、阳性对照组(腹腔注射紫衫醇20mg/kg)、低剂量组(口服土贝母提取物10mg/kg)和高剂量组(口服土贝母提取物50mg/kg)的肿瘤抑制率,评价土贝母提取物对肿瘤生长的影响。结果:阴性对照组与各治疗组小鼠给药前后体质量变化比较,差异均无统计学意义,一般状况良好。低剂量组和阴性对照组间比较,肿瘤大小和体质量的改变差异无统计学意义;高剂量组和阳性对照组肿瘤较阴性对照组明显缩小(P<0.05,P<0.01)。结论:经口服投予较高剂量的土贝母提取物,对人乳癌MDA-MB-231-GFP裸鼠模型有明显的抑制作用。     

土贝母皂苷对转染绿色荧光蛋白基因人乳腺癌细胞MDA-MB-231(GFP)、MCF-7(GFP)的作用

目的观察土贝母皂苷对转染绿色荧光蛋白(GFP)基因的人乳腺癌细胞MDA-MB-231、MCF-7的体外抗肿瘤活性。方法采用倒置光学显微镜观察土贝母皂苷作用下转染GFP基因的乳腺癌细胞MDAMB-231、MCF-7形态学变化,MTT法检测土贝母皂苷对两种乳腺癌细胞的生长抑制作用。结果土贝母皂苷作用24h后,两种人乳腺癌细胞均表现出典型凋亡形态改变;MTT结果显示土贝母皂苷对两种乳腺癌细胞的生长具有强抑制作用,MDA-MB-231(GFP)、MCF-7(GFP)经土贝母皂苷作用48h后的IC50分别为(17.03±3.22)、(27.96±0.34)μg/ml。结论土贝母皂苷对两种人乳腺癌细胞均有较强的抑制作用。     

土贝母甙甲的定量分析方法

<正> 前文已经报告土贝母抗癌有效成分的分离提取、抗肿瘤作用及其临床前药理试验结果,我们又从土贝母中分离出水溶性强,且具有良好的抗炎、抗癌和强抗促癌活性的土贝母甙甲(tubeimoside l,以卞简称甙甲)。其     

土贝母皂苷体外抗乙型肝炎病毒的药效研究

目的观察土贝母皂苷体外抗乙型肝炎病毒(HBV)效果。方法以2.2.15细胞为靶细胞,给药后通过检测细胞表面及培养液中HBsAg,HBeAg和HBV-DNA,观察土贝母皂苷抗HBV效果。结果土贝母皂苷各浓度组对HBsAg,HBeAg表达均有抑制作用,但以0.1 mg/m l作用48 h时最强,分别为43.46%和54.52%(P<0.01);对HBV-DNA的抑制作用以1 mg/m l组显著(P<0.05)。结论土贝母皂苷在体外有抗乙型肝炎病毒(HBV)作用。     

土贝母化学成分及药理研究概况

本文对土贝母化学成分和药理作用方面的研究进行了综述。化学成分研究表明,土贝母中含有甙类、麦芽盼,△7,16,25,(26)—豆甾三烯醇等。药理实验证明有抗肿瘤、抗病毒、免疫抑制等作用。     

土贝母皂甙对前列腺增生模型大鼠影响的实验研究

目的:探讨中药土贝母对大鼠前列腺增生(BPH)的影响及作用机理。方法:将40只雄性 SD 大鼠去势7天后皮下注射丙酸睾酮5mg/kg,同时土贝母大、小剂量组分别腹腔注射土贝母注射液4mg/kg、2mg/kg,前列通瘀胶囊组给前列通瘀胶囊溶液100mg/kg。于给药30天后处死大鼠,观察前列腺重量和组织细胞结构改变,并通过免疫组化法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)表达的变化。结果:3个治疗组大鼠前列腺重量、PCNA 指数及 bFGF 表达水平均明显低于模型组,其中尤以土贝母大剂量组最为明显(P<0.01)。土贝母大剂量组与前列通瘀胶囊组比较差异亦有显著性(分别为 P<0.01、P<0.05),而土贝母小剂量组与前列通瘀胶囊组比较差异无显著性。结论:土贝母能明显抑制模型大鼠的前列腺增生,其机理可能是通过抑制前列腺细胞的增殖及减少前列腺组织中 bFGF 的表达而实现的。     

中药土贝母诱导人乳腺癌细胞凋亡的实时成像

目的:采用先进的荧光实时显像技术对中药土贝母植物块茎提取物抗乳腺癌作用进行评价。方法:MDA-MB-231人乳腺癌细胞被设计成为细胞质红色荧光蛋白(RFP)基因表达而细胞核组蛋白H2B绿色荧光蛋白(GFP)基因表达的双色荧光细胞,并分别在2D平面塑料平皿及3D立体明胶海绵块两种不同的培养环境中培养,经土贝母鲜品二氯甲烷提取物(DEFT)干预后,荧光共聚焦显微镜下观察细胞形态及核碎片形成的情况;DNA电泳方法进一步检测细胞凋亡。结果:土贝母鲜品二氯甲烷提取物作用24h后荧光显微镜下即观察到MDA-MB-231细胞出现凋亡的形态学改变;DNA电泳在药物干预48h后检测到凋亡的DNA碎片梯带,72h后更加明显;3D明胶海绵培养的MDA-MB-231细胞经实验药物作用后其形态学改变的效果不如2D环境下明显。结论:土贝母鲜品二氯甲烷提取成分具有抗乳腺癌治疗的潜能。     

土贝母皂甙1诱导人体早幼粒细胞白血病细胞

土贝母皂甙1是一种从假贝母(Bolbostemma paniculatum)中分离的三萜类皂甙。前期研究证明土贝母皂甙1不仅能抑制成神经细胞瘤细胞(GOTO)的生长,而且还具有诱导其表型逆向转化作用。本文研究土贝母皂甙1是否也能影响HL-60细胞的形态和功能变化。 采用硝基四唑氮蓝(NBT)还原能力和酵母多糖微粒吞噬功能评价了土贝母皂甙1对HL-60细胞的分化作用。实验结果:HL-60     

从文献角度探索中药土贝母药用源流

土贝母药用历史悠久,散见于中医历代文献,在漫长的历史进程中与浙贝母等时有混淆。本文试从文献角度,对正名、性味、功效等几个方面进行阐述,梳理古代文献中有关土贝母的内容。唐以前尚无"土贝母"之名,但所载功效与现代所指土贝母更为接近。唐宋时期记载的贝母多与土贝母无关。至明代出现"土贝母"之名,但多指当地所产浙贝母。直至明末《本草征要》始将土贝母分列,其后诸多文献中所载功效主治与土贝母之名相符合。自《中华人民共和国药典》1977年开始,土贝母真正与其他贝母类植物独立开来。土贝母味苦或大苦,性微寒,无毒。其功效范围涉及内外诸科,并逐渐集中于外科疾患,可治疗乳痈、乳岩、疬、痰核、瘰疬、汗斑、鼠疮、手发背、刀割斧砍、夹翦枪箭伤损、毒蛇咬、肿毒初起等多种疾病。     

土贝母鲜品脂溶性提取物体外抗乳腺癌细胞活性研究

目的:通过体外试验研究土贝母鲜品脂溶性提取物的抗肿瘤活性。方法:采用薄层色谱法对该提取物进行成分分析,并对该提取物进行体外抗乳腺癌活性测试。结果:脂溶性成分主要为甾醇类化合物,且对4种乳腺癌细胞均有细胞毒作用。结论:为鲜土贝母开发研究提供数据参考。     

土贝母皂甙注射液治疗疣病552例观察

<正> 中药土贝母为《百草镜》记载之名。今中国药典列为正名,又称土贝,《本草纲目拾遗》名为大贝母,《陕西中草药》别名假贝母,地苦胆、草贝。原植物为葫芦科土贝母属土贝母[Bolbostemma Paniculaturn(Maxin)Franquet]的地下块茎,属攀援性蔓生草本。祖国医学应用于“散结毒、消痈肿,治乳痈、瘰疬、痰咳、疮疹肿毒……”。我们从土贝母中提取分离出一种新的五环三萜衍生物,为治疣的活性成分,经抗病毒试验,对单纯疱疹病毒Ⅰ型有显活抑制作用,配成土贝母皂甙注射液称消疣灵注射液(Inj for treating Warts),应用于治疗各种疣病532例,收到显著疗效。一般资料:本组男性149例。女性383例。年龄最大58岁,最小3.5个月,以20—39岁占多数。532例中380例扁平疣,108例传染性软     

四神茶对小鼠脾虚的预防与治疗作用的研究

目的 :探讨四神茶对小鼠脾虚的预防和治疗作用。方法 :用番泻叶致小鼠脾虚模型 ,观察四神茶对小鼠脾虚模型的预防和治疗作用 ;观察了四神茶对正常小鼠和肠功能亢进小鼠小肠推进功能的影响。结果 :四神茶可明显对抗番泻叶致脾虚小鼠的小肠推进功能减弱和体重减轻 ,明显增强脾虚小鼠的小肠推进功能和恢复体重 ,对小鼠脾虚出现的便溏、泄泻、纳呆、畏寒等症也有较好的预防和治疗作用 ;可明显增强正常小鼠的小肠推进功能 ,抑制新斯的明致小鼠小肠推进功能亢进。结论 :四神茶对小鼠脾虚有较好的预防和治疗作用。     

乳疾散治疗乳腺增生症83例

采用乳疾散调膏外敷(郁金、王不留行、穿山甲、山慈菇、土贝母等)治疗乳腺增生病83例,总有效率97.6％。提示本方有舒肝通络、活血化瘀,软坚散结,消除肿块的作用。     

土贝母皂苷Ⅱ对诱导性肝癌大鼠肝细胞周期的影响

目的观察土贝母皂苷Ⅱ对诱导性肝癌大鼠肝细胞周期的影响。方法以诱导性肝癌大鼠为材料,采用流式细胞仪检测土贝母皂苷Ⅱ对诱导性肝癌大鼠肝细胞DNA含量,并分析细胞周期。结果经土贝母皂苷Ⅱ治疗的动物肝S期细胞较模型组明显减少,而G1/G0期细胞增多,几乎恢复到正常水平。结论土贝母皂苷Ⅱ可以阻止肝细胞从G1期向S期进程,使DNA合成受到抑制和阻断,造成G1期细胞的堆积。     

土贝母抗癌有效成分肝靶向给药系统的研究

目的:研制中药土贝母抗癌有效成分TBMS的肝靶向给药系统,并考察该给药系统的减毒作用。方法:以α-氰基丙烯酸正丁酯为载体材料,用系统全面反馈动态技术优化纳米粒制备工艺,并进行其制剂学性质及毒理学研究,用透射电镜观察纳米粒的小鼠体内靶向性、XXTX-2000组织病理图象数据自动定量分析管理系统观察其减毒作用。结果:制得D₅₀为0.68μm、大小较均匀的纳米粒,载药量、包封率分别为(37.33±0.19)%,(88.63±0.13)%。体外释放符合Weibull方程,释放达平衡时间与t_1/2分别较注射剂延长26倍和19倍。纳米粒结构主要分布在肝脏组织中,且纳米粒对肺和肝脏的毒性明显较注射剂低。纳米粒的LD₅₀高于注射剂13.5%,同时血管刺激性较TBMS注射剂大大降低。结论:采用肝靶向给药系统的手段,可使土贝母抗癌有效成分TBMS达到肝靶向的目的,同时有望解决阻碍应用于临床的毒性问题,为土贝母抗癌有效成分的进一步研究开发奠定了基础。     

基于UPLC指纹图谱和一测多评法的土贝母药材质量评价

建立土贝母药材UPLC指纹图谱,并采用一测多评法(QAMS)测定其中3种皂苷类成分的含量,为土贝母药材质量评价提供依据。采用Waters Cortecs T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.6μm),乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min~(-1),检测波长203 nm,柱温30℃,进样量1μL,建立土贝母药材UPLC指纹图谱,并采用相似度计算、聚类分析和主成分分析法对指纹图谱进行评价。以土贝母苷甲为内参物,测定土贝母苷乙、土贝母苷丙的相对校正因子,利用相对校正因子计算含量,建立一测多评法,并将一测多评的计算结果与外标法(ESM)测定结果进行比较,从而确定一测多评的准确性及可行性。结果显示,19批土贝母药材指纹图谱有4个共有峰,相似度在0.754～1.000,聚类分析及主成分分析将19批药材分为3类,与相似度评价结果一致;采用一测多评法计算的19批土贝母药材土贝母苷乙、土贝母苷丙的含量与外标法测定的实际含量的相对偏差均小于5.0%,说明2种方法无明显差异。因此,UPLC指纹图谱结合一测多评法可以有效用于土贝母药材的质量评价。     

土贝母中土贝母苷甲及土贝母总皂苷提取工艺研究

目的:优选中药土贝母中土贝母苷甲和土贝母总皂苷的提取工艺。方法:以提取液中的土贝母苷甲和土贝母总皂苷为检测指标,采用正交试验的方法来评价并优选土贝母药材的提取工艺。结果:过20目筛的土贝母颗粒加7倍量70%乙醇,以3mL/min流速渗漉为最佳提取条件。结论:此工艺土贝母中的有效成分土贝母苷甲和土贝母总皂苷提取完全,可以作为土贝母中有效成分的提取工艺。     

土贝母皂苷乙诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡的研究

目的观察土贝母皂苷乙对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用并探讨诱导其凋亡的机制。方法用台盼蓝染色法检测细胞的活力;MTT法检测土贝母皂苷乙对细胞的抑制率;Hoechst33342/PI荧光双染法观察细胞的形态;用流式细胞仪检测土贝母皂苷乙对细胞凋亡率的影响。结果土贝母皂苷乙能显著抑制A549细胞的增殖,24 h的IC50为13.37μg/m L,48 h的IC50为10.99μg/m L,并且呈时间和剂量依赖性。Hoechst33342/PI荧光双染法观察到经土贝母皂苷乙处理的细胞核皱缩、染色体聚集,核破裂形成小体,呈现明显的凋亡现象。FCM分析结果显示,随着药物浓度的增高,细胞的凋亡率依次升高,从4.56%增加至17.62%。该研究表明土贝母皂苷乙能显著促进A549细胞凋亡,且在一定范围内呈现剂量依赖效应。结论土贝母皂苷乙能诱导非小细胞肺癌A549细胞凋亡。     

中药土贝母的现代研究进展

目的 介绍土贝母研究的最新进展,预测其应用前景与新的研发方向.方法 该文查阅了大量关于土贝母研究的中外文献资料,从化学成分、药理活性、制剂开发等方面对其进行比较全面地综述.结果 与结论土贝母含有多种化学成分,具有多种显著的药理作用,配合现代提取、制剂工艺,可开发为抗癌、抗病毒以及治疗白血病和艾滋病等多种新药.