邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对雄性大鼠激素相关基因表达水平的影响

目的： 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对雄性大鼠睾丸中激素相关基因表达水平的影响,为研究DEHP生殖毒性提供科学依据。方法：40只5周龄雄性SPF级SD大鼠,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)和DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组10只,每天灌胃染毒1次,每周5次,连续染毒6周。于末次染毒24 h后处死动物,实时荧光定量PCR法测定睾丸组织内类固醇快速调节蛋白(StAR)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)、促性腺激素释放激素(GnRH)及雌激素受体(ERα、ERβ)的基因表达水平。结果：与对照组比较,StAR、3β-HSD基因表达水平在DEHP各剂量组均明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.01或P<0.05);17β-HSD基因表达水平在DEHP高剂量组升高(P<0.01),而低剂量组和中剂量组则无明显改变(P>0.05);ERα基因表达在DEHP高剂量组升高(P<0.01);ERβ基因表达在DEHP低剂量组和中剂量组下降(P<0.01),但在DEHP高剂量组升高(P<0.01);GnRH基因表达水平在DEHP中剂量组和高剂量组均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论：DEHP染毒可引起雄性大鼠激素相关基因表达水平改变,干扰雄性激素的合成,可能导致生殖障碍。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的影响。方法:将80只5周龄SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)、DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组雌雄各10只,每周染毒5 d,每天灌胃染毒1次,连续6周。末次染毒24 h后处死动物,提取睾丸或卵巢组织蛋白,应用Western blot分别检测睾丸组织中3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、促性腺激素释放激素受体(GnRHR)、卵泡刺激素受体(FSHR)及卵巢组织中黄体生成素受体(LHR)和GnRHR的蛋白表达水平。结果:与对照组比较,雄鼠睾丸组织在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量时3β-HSD蛋白表达水平均显著升高(P均<0.01);GnRHR蛋白表达水平在1 500 mg/kg剂量组显著下降(P均<0.01);FSHR蛋白表达水平在500和1 500 mg/kg组显著下降(P<0.05或P<0.01)。雌鼠卵巢组织在DEHP 100 mg/kg剂量组时LHR和GnRHR蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量组LHR表达水平比对照组下降25%~35%,GnRHR下降60%~80%(P<0.05或P<0.01)。结论:DEHP染毒可引起大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的改变,干扰大鼠体内性激素的代谢,推测此作用与DEHP的生殖毒性存在密切关系。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠卵巢组织凋亡基因和癌基因表达水平的影响

目的： 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠卵巢组织凋亡基因和癌基因表达水平的影响,为评价DEHP的雌性生殖毒性提供科学依据。方法：用不同剂量DEHP灌胃染毒雌性SD大鼠6周,设对照组(玉米油)、低剂量组(100 mg/kg)、中剂量组(500 mg/kg)、高剂量组(1 500 mg/kg),利用荧光定量PCR技术检测卵巢组织凋亡基因(Bcl-2、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9)和癌基因(c-fos、k-ras)mRNA表达的变化。结果：Bcl-2 mRNA表达水平在DEHP高剂量组显著降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.01);Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9 mRNA表达水平随DEHP染毒剂量升高呈上升趋势,与对照组比较显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。c-fos mRNA表达量与对照组间的差异无统计学意义(P>0.05),k-ras mRNA表达量在DEHP中剂量组和高剂量组显著高于对照组(P<0.01)。结论：DEHP可能通过线粒体途径激活Caspase通路诱导卵巢细胞凋亡,进而损害大鼠卵巢功能和生殖内分泌功能。且DEHP可激活原癌基因异常表达,具有一定的潜在致癌风险。     

邻苯二甲酸二丁酯亚慢性染毒对大鼠睾丸Insl3 mRNA表达的影响

背景与目的:观察邻苯二甲酸二丁酯(DBP)亚慢性染毒对青春期大鼠睾丸间质细胞功能标志物胰岛素样因子3(Insl3)mRNA表达水平的影响。材料与方法:青春期健康雄性SD大鼠72只,随机分为3组:溶剂对照组(玉米油),DBP 50 mg/kg和250 mg/kg剂量的染毒组,每组24只。隔日染毒,等体积灌胃,连续染毒90 d。分别于染毒后30、60和90 d各组随机选取8只大鼠处死。取睾丸、附睾、心、肝、脾、肾称重并计算脏器系数,放免法检测血清睾酮含量,实时荧光定量PCR法检测睾丸Insl3 mRNA表达。结果:DBP 250 mg/kg组染毒90 d肝脏系数显著大于对照组(P<0.05);50 mg/kg组染毒60 d大鼠血清睾酮水平较对照组显著升高(P<0.05),而250 mg/kg组比50 mg/kg组显著下降(P<0.01);各染毒组大鼠睾丸Insl3 mRNA表达水平较对照组显著下调(P<0.01),染毒30 d、60 d时DBP 250 mg/kg剂量组较DBP 50 mg/kg组显著下调(P<0.05),各染毒组睾丸Insl3 mRNA表达水平均随处理时间延长先下调而后上调,60 d较30 d显著降低(P<0.05),90 d较60 d显著升高(P<0.01)。结论:青春期大鼠DBP亚慢性暴露可干扰血清睾酮及睾丸Insl3 mRNA表达水平,对肝脏可能有潜在毒性。     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠卵巢病理和超微结构的影响

目的： 探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠卵巢病理和超微结构的影响,评价DEHP对雌性大鼠的生殖毒性作用。方法：SPF级5周龄雌性SD大鼠40只,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)和DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组10只,每天灌胃1次,每周5次,连续染毒6周。染毒结束后称量大鼠体质量及卵巢质量,计算卵巢脏器系数;光镜下观察大鼠卵巢病理改变;电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构的变化。结果：各染毒组大鼠体质量与对照组比较差异均无统计学意义(P均>0.05),高剂量组卵巢质量和脏器系数较对照组明显增加(P<0.01);普通光学显微镜检查发现DEHP处理后卵巢组织卵泡结构受损,电镜观察发现DEHP处理后颗粒细胞线粒体肿胀、线粒体嵴减少、胞浆空泡化、核染色质完全凝聚、出现凋亡小体、细胞变性坏死。结论：DEHP对大鼠卵巢毒性明显,影响卵泡发育,引起颗粒细胞凋亡。     

邻苯二甲酸二辛酯亚慢性暴露对SD大鼠血细胞的影响

目的：探讨邻苯二甲酸二辛酯（DEHP）对大鼠血细胞的影响。方法：SD大鼠设对照组（饲喂基础饲料）、4个DEHP染毒组（分别为5、50、500和2 500 mg/kg）,每组20只,雌雄各半,连续饲喂染毒90 d。染毒结束后,取大鼠全血测定各类血细胞的变化。结果：与对照组相比,白细胞参数中,2 500 mg/kg组雄性大鼠嗜酸性粒细胞显著减少（P < 0.01）,雌性大鼠白细胞总数显著降低（P < 0.05）;500和2 500 mg/kg组雌性大鼠淋巴细胞显著增加（P < 0.05）。红细胞参数中,2 500 mg/kg组雄性大鼠红细胞总数、血红蛋白（HGB）和红细胞压积（HCT）显著下降（P < 0.01）;雌性大鼠500和2 500 mg/kg组血红蛋白（HGB）显著下降（P < 0.05）;500和2 500 mg/kg组的平均血红蛋白含量（MCH）显著下降（P < 0.05或P < 0.01）;2 500 mg/kg组的平均血红蛋白浓度（MCHC）和直接测定的血红蛋白浓度（CHCM）显著下降（P < 0.05或P < 0.01）。未发现DEHP对雌雄大鼠血小板各指标产生影响。结论：一定剂量条件下,DEHP可对大鼠白细胞和红细胞相关指标产生影响。     

邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯长期暴露对成年雄鼠甲状腺激素水平的影响

目的：探讨邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）长期暴露对成年雄性大鼠甲状腺激素水平产生的影响。方法：将36只健康的成年雄性Wistar大鼠按体质量随机分为4组，分别为对照组以及150、300、600 mg/kg DEHP暴露组。对照组大鼠正常饮食和饮水，暴露组大鼠连续灌胃给予DEHP 3个月。处死大鼠前称取大鼠体质量并计算各组织脏体比，检测尿碘含量，血清甲状腺激素含量及血清TTR、TRH、TSAb水平。采用单因素方差分析法分析各指标的组间差异，进一步的多重比较采用SNK检验。结果：经过3个月的DEHP暴露，大鼠体质量无明显变化。与对照组相比，各剂量组大鼠甲状腺湿重和脏体比无显著性差异。150、300、600 mg/kg剂量组大鼠肝脏脏体比增加并呈剂量-效应关系（P < 0.05）。600 mg/kg剂量组大鼠尿碘水平显著降低（P < 0.05）。600 mg/kg剂量组血清FT4（血清游离甲状腺素）水平降低（P < 0.05）。结论：DEHP 3个月的暴露期对大鼠体质量未产生明显影响，对甲状腺、肝脏脏器系统功能产生一定的影响。DEHP的暴露可抑制大鼠体内TSH的合成、分泌及转运，扰乱甲状腺激素水平。     

2,4-二氯苯氧乙酸对初断乳SD大鼠生殖器官发育的影响及相关机制

目的：研究2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）对初断乳SD大鼠生殖器官发育的影响及相关机制。方法：3周龄SPF级SD大鼠80只,随机分为溶剂对照组（1%羧甲基纤维素）和18.125、36.25、72.5 mg/kg 3个染毒组,每天经口灌胃1次,连续染毒28 d。试验期间观察并记录动物一般行为,体质量变化及阴道开口时间等指标。染毒结束后,取睾丸、附睾、子宫、卵巢计算湿质量及脏器系数;采用全自动生化仪检测血清中卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、睾酮（T）和胆固醇的含量;采用苏木精-伊红染色法（HE）对大鼠睾丸、附睾、卵巢、子宫进行病理学检测。结果：与对照组比较,至染毒28 d结束时,36.25 mg/kg染毒组雄鼠、72.5 mg/kg组雄鼠和雌鼠体质量均明显降低,差异均有统计学意义（P均 < 0.05）;36.25 mg/kg 2,4-D染毒组阴道开口时间提前,72.5 mg/kg 2,4-D染毒组阴道开口时间延迟且阴道开口率较低,差异具有统计学意义（P < 0.05）;72.5 mg/kg染毒组血清T水平降低,差异有统计学意义（P < 0.05）;72.5 mg/kg组雌性SD大鼠胆固醇含量增加,差异有统计学意义（P < 0.05）;36.25 mg/kg组雌性大鼠血清中E2含量明显增加,而72.5 mg/kg组中E2含量下降,差异均具有统计学意义（P < 0.05）;光镜下,雄鼠附睾组织曲系精管内（层数）生精细胞较少,72.5 mg/kg 2,4-D染毒组大鼠子宫腔较大,子宫壁较薄。结论：在本实验条件下,2,4-D可干扰大鼠生殖器官的发育,雌性大鼠较雄性明显,其机制可能是抑制胆固醇合成睾酮从而抑制性激素的合成,进而影响生殖系统发育。     

硒干预对DEHP暴露下SD大鼠血细胞参数的作用

目的：探讨不同剂量邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）染毒后硒对大鼠外周血血细胞参数的影响。方法：将77只健康清洁级雄性SD大鼠,随机分为7组,即对照组、3个不同浓度（300、600、900 mg/kg）DEHP染毒组、1 mg/kg Se+不同剂量（300、600和900 mg/kg）DEHP染毒干预组,连续饲喂90 d,试验期间观察大鼠中毒状况（精神亢奋、被毛蓬松、局部脱毛现象）,试验期末称取大鼠体质量并取全血测定各类血细胞参数的变化。结果：与对照组比较,900 mg/kg DEHP染毒大鼠体质量明显下降（P < 0.05）,600和900 mg/kg DEHP染毒组大鼠出现中毒体征比例分别为63.63%（7/11）和100%（11/11）,均较对照组0（0/11）显著升高（P均 < 0.05）。与相同剂量DEHP染毒组比较,1 mg/kg Se干预后大鼠体质量均明显增加,差异均有统计学意义（P均 < 0.05）;300、600 mg/kg DEHP染毒组大鼠中毒体征明显降低（P均 < 0.05）。白细胞参数中,与对照组比较,600和900 mg/kg DEHP染毒组大鼠白细胞数（WBC）明显降低、单核细胞（MONO）显著升高,差异均有统计学意义（P均 < 0.05）。与相同剂量DEHP染毒组比较,1 mg/kg Se+600 mg/kg DEHP干预组白细胞数（WBC）明显升高、单核细胞（MONO）显著降低（P < 0.05）。红细胞参数中,与对照组比较,DEHP染毒后大鼠平均血红蛋白量（MCH）、血红蛋白含量分布宽度（HDW）均明显升高;600、900 mg/kg DEHP染毒组大鼠红细胞数（RBC）、红细胞压积（HCT）明显降低（P < 0.05）。与相同剂量DEHP染毒组比较,1 mg/kg Se干预后大鼠红细胞参数未见显著差异。血小板参数中,未发现DEHP染毒与Se干预对SD大鼠血小板各参数产生显著影响。结论：300~900 mg/kg DEHP染毒可对大鼠某些红细胞和白细胞参数产生影响,硒的干预在300~600 mg/kg DEHP染毒条件下可保护某些血细胞功能。     

大豆苷元对乳腺癌生长和血管生成的影响

目的： 利用7,12-二甲基苯蒽(DMBA)诱导的大鼠乳腺癌模型,探讨大豆苷元对乳腺癌肿瘤血管生成的抑制作用及机制。方法：建立DMBA诱导的乳腺癌大鼠模型,随机分为对照组、10、25、50和75 mg/kg大豆苷元灌胃组,观察各组肿瘤生长情况,测定肿瘤微血管密度(MVD),并计算各组肿瘤的增殖指数和凋亡指数;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测心脏离心血标本中血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和内皮抑素的水平。结果：与对照组比较,50和75 mg/kg大豆苷元组大鼠瘤体质量显著减轻(P<0.05),75 mg/kg大豆苷元组的凋亡指数增加,其抑制肿瘤血管生成的效果显著(P均<0.05)。与对照组比较,25、50和75 mg/kg大豆苷元组的VEGF水平降低,且呈剂量依赖性(P<0.05),同时50和75 mg/kg大豆苷元组的内皮抑素水平增加,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论：较高剂量(≥50 mg/kg)的大豆苷元能使大鼠乳腺肿瘤的微血管密度下降,可有效抑制乳腺肿瘤生长。     

硒对邻苯二甲酸酯亚慢性暴露雄性大鼠肝脏的保护作用

目的：研究邻苯二甲酸酯（DEHP）亚慢性暴露对雄性大鼠肝脏的影响及硒对大鼠肝脏的保护作用。方法：将77只雄性大鼠随机分为7组,分别设置为对照组（饲喂基础饲料）、3个DEHP染毒组（染毒剂量分别为300、600和900 mg/kg）、3个硒干预组（在相应剂量的染毒组中加入1 mg/kg酵母硒）。染毒8周,染毒期末,大鼠空腹16 h后称量大鼠体质量、采血进行生化检测以及称量肝脏质量。结果：与对照组相比,600和900 mg/kg DEHP染毒组大鼠的平均体质量明显降低（P < 0.05）;900 mg/kg DEHP染毒组大鼠的体质量增量、总摄食量、总食物利用率、明显降低（P < 0.01或P < 0.05）;各DEHP染毒组、硒干预组的肝脏平均质量、肝脏系数均明显降低（P < 0.01）。600 mg/kg DEHP染毒后的硒干预组大鼠体质量增量较相应的染毒组增加（P < 0.05）。生化指标检测结果显示,与对照组相比,600、900 mg/kg DEHP染毒组,300、600 mg/kg DEHP染毒后的硒干预组大鼠ALT浓度明显升高（P < 0.05）;900 mg/kg DEHP染毒组,300、600和900 mg/kg DEHP染毒后的硒干预组大鼠AST浓度明显升高（P < 0.01）;600、900 mg/kg DEHP染毒组大鼠TP浓度明显升高（P < 0.01）;900 mg/kg DEHP染毒组,300 mg/kg DEHP染毒后的硒干预组大鼠ALB浓度明显升高（P < 0.01）;900 mg/kg DEHP染毒组大鼠GLB浓度明显升高（P < 0.01）。900 mg/kg DEHP染毒后的硒干预组大鼠ALT、AST、TP、GLB均明显低于相应的染毒组（P < 0.01或P < 0.05）。结论：DEHP的亚慢性暴露对雄性大鼠的体质量与生长产生一定的影响,可能造成肝脏肿胀,对肝脏功能产生影响;而硒的干预可能在一定程度上缓解DEHP对肝脏的毒性作用。     

乙酰甲胺磷对雌性大鼠氧化损伤及卵巢功能的影响

背景与目的： 研究乙酰甲胺磷对雌性大鼠氧化损伤及卵巢功能的影响。 材料与方法: 30只健康成年SD雌性大鼠,随机分为5组,每组6只。实验组设高(47.25 mg/kg)、中(23.63 mg/kg)、低(11.81 mg/kg)3个不同剂量乙酰甲胺磷染毒组、阴性对照组(蒸馏水)和阳性对照组(雌二醇,0.1 mg/kg)。染毒组和阴性对照组采用经口灌胃,阳性对照组采用腹腔注射染毒。检测大鼠动情周期、血清和卵巢组织中SOD和GST活性、GSH和MDA含量及卵巢组织形态等的改变。 结果: 与阴性对照组比较,乙酰甲胺磷高剂量染毒组大鼠动情周期延长,血清SOD活力升高,GSH含量降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。中、高剂量染毒组大鼠血清MDA含量均高于阴性对照组,高剂量染毒组GST活力显著低于阴性对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。各染毒组卵巢组织匀浆中SOD活力均低于阴性对照组,各染毒组GST活力均高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。低剂量染毒组卵巢组织GSH含量低于阴性对照组,高剂量染毒组MDA含量显著高于阴性对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。高剂量染毒组大鼠卵巢组织的病理改变主要表现为始基卵泡和初级卵泡增多,而次级卵泡和成熟卵泡较少见,且闭锁卵泡增多。 结论： 乙酰甲胺磷对雌性大鼠具有一定的生殖毒性,在高剂量(47.25 mg/kg)染毒下,可引起动情周期的紊乱、卵巢组织的病理学改变,抑制卵巢的抗氧化酶活性,诱导脂质过氧化。     

百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响

目的:探讨百合多糖联合大蒜素对肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤生长及血清细胞因子水平的影响。方法:雄性 BALB/c小鼠腋下注射肝癌H22细胞计数瘤液建立荷瘤模型,分为百合多糖组（100 mg/kg）、大蒜素组（40 mg/kg）、百合多糖低剂量+大蒜素组（50 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖中剂量+大蒜素组（100 mg/kg+40 mg/kg）、百合多糖高剂量+大蒜素组（150 mg/kg+40 mg/kg）、正常组、模型组和环磷酰胺组（30 mg/kg）。处理7 d后,观察小鼠的肿瘤重量,计算抑瘤率;胸腺、脾脏称重,计算胸腺指数和脾脏指数;ELISA法检测血清免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-6水平及促血管生长因子VEGF水平。结果:大蒜素组、百合多糖中剂量+大蒜素组、百合多糖高剂量+大蒜素组抑瘤率分别为27.27%、34.68%和30.64%。百合多糖中剂量+大蒜素组和百合多糖高剂量+大蒜素组胸腺指数明显高于模型组(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-18水平(P<0.01)。百合多糖中剂量+大蒜素组TNF-α水平高于模型组(P<0.05)。百合多糖中剂量+大蒜素组较模型组明显升高IL-2水平(P<0.01)。百合多糖高剂量+大蒜素组较模型组降低VEGF水平(P<0.05)。结论:百合多糖联合大蒜素能抑制肝癌H22荷瘤小鼠肿瘤的生长,提高荷瘤小鼠的胸腺指数,并促进小鼠分泌免疫相关细胞因子IL-18、TNF-α、IL-2,减少分泌VEGF。     

GnRH拮抗剂和雌激素联合应用预防顺铂所致卵巢损害的实验研究

目的:探讨促性腺激素释放激素拮抗剂（GnRH 拮抗剂）和雌激素联合应用对化疗中小鼠卵巢的保护作用。方法:选用40只5～6 周龄、体重（18± 3）g、性成熟的无特殊病原体（SPF）级BALB/c雌性小鼠,随机分为空白对照组、顺铂（DDP ）组、GnRH拮抗剂（西曲瑞克）+ 雌激素（补佳乐）组、西曲瑞克+ 补佳乐+ 顺铂组,每组10只。用药后观察并比较各组小鼠一般状态、体重、卵巢、子宫湿重和卵巢组织结构的变化,比较各组小鼠各级卵泡数量的变化,放射免疫方法测定各组小鼠血清促卵泡生成素（FSH ）、雌二醇（E2）水平。结果:顺铂组小鼠血清FSH 和E2 浓度分别为（1.78± 0.23）IU/L 和（37.65± 1.77）pg/mL,西曲瑞克+ 补佳乐+ 顺铂组分别为（1.22± 0.13）IU/L 和（50.43± 2.70）pg/mL,两组分别比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;顺铂组小鼠卵巢和子宫湿重分别为（8.87± 0.69）mg和（53.80± 13.65）mg,西曲瑞克+ 补佳乐+ 顺铂组分别为（17.19± 0.61）mg和（66.97± 8.30）mg,两组分别比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;顺铂组卵泡总数（471 ± 29.71）个,西曲瑞克+ 补佳乐+ 顺铂组为（815 ± 25.95）个,两者比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论:GnRH 拮抗剂和雌激素联合应用能够降低顺铂多小鼠卵巢功能的损伤,起到保护化疗中小鼠卵巢储备功能。