两种吗啡依赖模型大鼠脑内单胺神经递质的变化以及青藤碱的调节作用

目的 探讨吗啡依赖大鼠催促戒断模型与条件性位置偏爱模型大鼠脑内单胺类递质的变化以及中药活性成分青藤碱对其的影响.方法 采用剂量递增法复制吗啡依赖大鼠模型,经纳洛酮催促,引发躯体戒断症状.连续给予吗啡(5 mg/kg,sc)6d,采用倾向性训练程序训练大鼠,建立大鼠条件性位置偏爱模型.两个模型分别给予青藤碱低、高两个剂量(30 mg/kg,60 mg/kg,im)治疗.下丘脑去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)和多巴胺(DA)含量采用荧光分光光度法测定.结果 1.吗啡依赖大鼠经纳洛酮催促后,戒断评分值明显升高,同时伴有下丘脑NE和5-HT水平升高[分别为(7.07±1.41)μg/g脑组织和(1.15±0.35)μg/g脑组织],与空白对照组Ⅰ[分别为(3.34±0.97)μg/g脑组织和(0.49±0.21)μg/g脑组织]比较,差异有显著性(P<0.01).大鼠脑内DA水平下降[(0.28±0.12)μg/g脑组织],与空白对照组1[(0.39±0.14)μg/g脑组织]比较,差异有显著性(P<0.05).2.在吗啡诱导的大鼠条件性位置偏爱模型,大鼠脑内DA和5-HT水平升高[分别为(1.13±0.36)μg/g脑组织和(1.23±0.34)μg/g脑组织],与空白对照组Ⅱ[分别为(0.43±0.11)μg/g脑组织和(0.47±0.18)μg/g脑组织]比较,差异有显著性(P<0.01).NE则无明显改变[(3.28±1.10)μg/g脑组织],与空白对照组Ⅱ[(3.57±1.17)μg/g脑组织]比较,差异无显著性(P>0.05).青藤碱连续用药可显著抑制催促戒断症状和吗啡引起的位置偏爱的形成,对脑内单胺神经递质水平有明显的降低作用.结论 吗啡依赖的形成和戒断与脑内单胺神经递质有密切关系,吗啡的躯体戒断症状与NE和5-HT升高的关,而位置偏爱效应主要与DA水平升高有关.青藤碱能抑制纳洛酮催促戒断症状,消除吗啡诱导的大鼠位置偏爱的形成,对脑组织单胺类神经递质水平的紊乱具有调节作用.     

盐酸戊乙奎醚对吗啡依赖大鼠戒断症状及位置偏爱的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对吗啡依赖大鼠戒断症状及条件性位置偏爱效应的影响.方法 (1)48只雄性SD大鼠,随机分为吗啡依赖组(MOR组),纳洛酮促戒断组(NAL组),PHC治疗组(PHCl,2,3组),对照组(NS组),每组8只.剂量递增法连续5 d皮下注射吗啡(10～50mg/kg,每日2次)及纳洛酮催促戒断(5 mg/kg),建立吗啡躯体依赖大鼠模型.实验第6天上午,纳络酮催促戒断前30min腹腔注射不同剂量的PHC(0.5,1.0,1.5 mg/kg).观察各组大鼠在20 min内的体质量丧失情况及戒断症状.(2)40只雄性SD大鼠,随机分为吗啡诱导组(MOR组),PHC治疗组(PHC1,2,3组),对照组(NS组),每组8只.连续7d交替皮下注射吗啡(10mg/kg,每天1次)或生理盐水,诱导大鼠的吗啡位置偏爱效应.实验第8天停用吗啡,NS组与MOR组腹腔注射等体积的生理盐水;PHC治疗组则分别腹腔注射PHC 0.5,1.0,1.5 mg/kg.各组大鼠行CPP测试.结果 (1)PHC治疗组能明显缓解吗啡依赖大鼠的催促戒断症状,其体质量丧失[(8.53±1.20)g、(7.36±1.06)g、(5.40±1.79)g,(12.63±2.22)g,F=83.16,P＜0.01]和戒断症状评分[(25.36±3.11)分、(21.38±3.50)分、(17.06±1.78)分,(31.69±2.76)分,F=256.56,P＜0.01)]明显低于NAL组,且呈剂量依赖性.(2)PHC治疗组的灰区停留时间与MOR组比较显著缩短[(529±83)s、(460±107)s、(418±97)s,(643±111)s,F=13.22,P＜0.01],且呈剂量依赖性.结论 PHC急性治疗能剂量依赖的抑制吗啡依赖大鼠戒断症状和条件性位置偏爱的表达.     

青风藤及青藤碱对吗啡依赖小鼠位置偏爱效应和脑内组胺水平的影响

目的探讨中药青风藤及其有效成分青藤碱对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱(CPP)及脑内组胺(HA)水平的影响。方法采用位置偏爱箱法,连续皮下注射吗啡(9mg/kg·b.w.)6d,引起小鼠产生显著的条件性位置偏爱效应。实验分空白对照组、吗啡模型组(9mg/kg·b.w.)、青风藤醇提液组(10g/kg·b.w.)、青藤碱组(60mg/kg·b.w.)、苯海拉明组(30mg/kg·b.w.)、CP48/80组(5mg/kg·b.w.)和L-组氨酸组(750mg/kg·b.w.),后5个给药组分别在位置偏爱训练的第4天开始给药,连续用药3d。脑内组胺含量采用荧光分光光度法测定。本实验同时检测青风藤、青藤碱、苯海拉明、CP48/80及L-组氨酸对小鼠的奖赏效应或厌恶效应。结果吗啡模型组小鼠在伴药箱中停留的时间明显延长,小鼠脑内HA水平显著升高(P<0.01)。青风藤或青藤碱连续用药可显著抑制吗啡引起的小鼠位置偏爱的形成,降低脑内的HA含量。青风藤、青藤碱及L-组氮酸对正常小鼠脑内组脑水平有升高作用(P<0.01),但3药本身并不使小鼠产生奖赏或厌恶效应。CP48/80能使正常及吗啡依赖小鼠脑内组胺含量明显减少(P<0.01),但该药对CPP无明显影响。结论吗啡诱导的小鼠位置偏爱效应与脑内HA水平升高、中枢组胺能神经系统激活有关。青风藤及青藤碱能消除吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱的形成,对脑内组胺水平的改变具有调节作用。     

电针对吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱效应的作用研究

目的　观察电针是否能够消除吗啡依赖大鼠条件性位置偏爱效应 ,探讨电针控制戒断后焦虑症状的神经生物机制是否与苯甲二氮卓结合抑制因子 (DBI) m RNA表达有关。方法　 2 4只 SD大鼠建立条件性位置偏爱模型后 ,随机分为正常对照组、吗啡依赖组和电针干预组 ,予以电针干预 ,干预后第 5 d和第 10 d,检测条件性位置偏爱 ,并处死大鼠 ,提取脑内 RNA,进行 RT- PCR。结果　第 5 d和第 10 d检测结果显示电针干预组偏爱时间明显减少 ,与吗啡依赖组比较有统计学差异 (P<0 .0 5 ) ,电针干预组 DBI m RNA表达明显少于吗啡依赖组 (P<0 .0 5 ) ,而正常对照组与电针干预组没有统计学差异。结论　电针能消除吗啡依赖大鼠的条件性位置偏爱效应 ,其控制戒断后焦虑症状的神经生物机制可能与电针影响 DBI m RNA表达相关。     

舒必利对小鼠的吗啡所致奖赏及cAMP水平的影响

为了解多巴胺D2受体阻滞剂舒必利对吗啡奖赏特性及其与中枢cAMP水平的效应,采用条件性位置偏爱试验及放射免疫测定观察小鼠对吗啡所致奖赏的行为及中枢cAMP水平变化。结果显示：吗啡组小鼠在吗啡搭配箱体中停留时间及其中枢cAMP水平较盐水组及舒必利加吗啡组显著增加(P＜0.05),而盐水组与舒必利加吗啡组之间无差异(P＞0.05),说明舒必利对吗啡的奖赏特性有对抗作用,该作用是通过舒必利抑制中枢cAMP水平所致。     

吗啡依赖大鼠海马CA1区突触界面结构变化的易感性差异

目的 通过研究高、低吗啡条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)大鼠海马CA1区突触界面结构参数的变化,为吗啡依赖易感性差异提供形态学依据.方法 将雄性SD大鼠随机分为实验组(130只)和生理盐水对照组(30只).实验组按剂量递增法腹腔注射吗啡建立吗啡依赖模型.分别对2组大鼠进行CPP训练和测评,根据测评值将实验组大鼠再次分为高、中、低偏爱组,中偏爱组淘汰.于末次吗啡注射后3h、戒断后3d和14d将高、低偏爱组和对照组各选取8只大鼠处死,取海马CAI区按照标准程序制成电镜样本,电镜观察摄像,图像分析软件分析测量突触界面结构参数.结果 ①预测试时3组大鼠CPP值之间的差异无显著性(F=0.78,P=0.47);处理因素终止后3h、3d、14d 3组大鼠CPP值差异有极显著性(P<0.01);两两比较显示高偏爱组CPP值高于低偏爱组,差异有极显著性(P<0.01).②在3h和3d时,3组大鼠PSD厚度(突触后致密物质厚度)、突触间隙宽度差异有极显著性(P=0.01～0.03),并且高偏爱组的PSD厚度[(15.20±3.65)nm]小于低偏爱组[(17.63±6.61)nm],差异具有显著性(P<0.05);高偏爱组间隙宽度[(5.77±2.08)nm]大于低偏爱组[(4.92±1.65)nm],差异具有显著性(P<0.05);在14d时,3组大鼠PSD厚度差异有极显著性(P=0.00),并且高偏爱组的PSD厚度[(16.22±4.93)nm]小于低偏爱组[(18.42±3.78)nm],差异具有显著性(P<0.01).结论 高偏爱组大鼠海马CA1区突触间隙宽度的测量值大于低偏爱组,PSD厚度的测量值小于低偏爱组,上述变化可能是吗啡依赖易感性差异的突触界面结构基础.     

伏隔核与腹侧被盖区毁损对药物诱导大鼠吗啡觅药行为的影响

目的:研究定向毁损伏隔核(nucleusaccumbens, NAc)与腹侧被盖区(ventraltegmentalarea,VTA)对药物诱导 戒断大鼠吗啡觅药行为的影响,分析NAc和VTA在大鼠成瘾 行为中的作用.方法:雄性SD大鼠通过吗啡强化形成条件性 位置偏爱后,使用直流电分别毁损NAc与VTA.15d后给予 sc吗啡诱导大鼠恢复位置偏爱行为,测量并比较毁损组与对 照组的位置偏爱得分.结果:NAc毁损组和与VTA毁损组大 鼠在注射吗啡诱导下未恢复对吗啡的条件性位置偏爱[NAc 毁损组(471±52)s,NAc对照组(673±53)s;VTA毁损组 (482±49)s,VTA对照组(700±46)s].结论:毁损NAc和 VTA能阻断注射吗啡诱导戒断大鼠恢复觅药行为.在成瘾药 物诱导戒断动物觅药行为中,NAc和VTA起重要作用.     

甲基苯丙胺诱导的斑马鱼位置偏爱模型研究

目的 建立甲基苯丙胺诱导的斑马鱼条件性位置偏爱模型.方法 根据药物依赖实验研究中的条件性位置偏爱(CPP)原理,设计斑马鱼位置偏爱箱.根据斑马鱼的天然位置偏爱特性,决定其偏爱侧与非偏爱侧.模型组斑马鱼腹腔注射甲基苯丙胺后,放于非偏爱一侧(伴药箱);注射生理盐水后,放于偏爱一侧(非伴药箱),共训练5d,观察甲基苯丙胺诱导的斑马鱼位置偏爱效应.结果 空白对照组造模前后斑马鱼在伴药箱的活动时间无明显变化[分别为(287.5 ±80.18)s,(276.3±85.04)s],差异无显著性(P＞0.05).模型组经5d训练,斑马鱼在伴药箱的活动时间明显延长[(465.5±113.49)s],与造模前[ (247.9±95.62)s]相比,差异有显著性(P＜0.01);与空白对照组[(276.3±85.04)s]相比,差异也有显著性(P＜0.01).结论 甲基苯丙胺能诱导斑马鱼形成条件性位置偏爱效应,本实验建立的斑马鱼位置偏爱模型可作为一种新的药物依赖动物模型.     

舒必利对大鼠的吗啡所致奖赏及cAMP水平的影响

为了解多巴胺Ｄ２受体阻滞剂舒必利对吗啡奖赏特性及其与中枢ｃＡＭＰ水平的效应,采用条件性位置偏爱试验及放射免疫测定观察小鼠对吗啡所致奖赏的行为及中枢ｃＡＭＰ水平变化。结果显示：吗啡组小鼠在吗啡搭配箱体中停留时间及其中枢ｃＡＭＰ水平较盐水组及舒必利加吗啡组显著增加（Ｐ〈０．０５）,而盐水组与舒必利加咖啡组之间无差异（Ｐ〉０．０５）,说明舒必利对吗啡的奖赏特性有对抗作用,该作用是通过舒必利抑制中枢ｃＡＭ     

二陈汤对吗啡依赖小鼠位置偏爱效应的影响

目的：探讨二陈汤对吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱（CPP）的影响。方法：连续给予小鼠吗啡（9 mg/kg,sc,7 d）,使小鼠产生显著的条件性位置偏爱效应。将小鼠随机分为正常对照组、吗啡组、二陈汤低剂量、中剂量、高剂量五组,正常对照组注射等体积生理盐水,吗啡组注射吗啡,二陈汤组注射吗啡,同时给予三种不同剂量的二陈汤灌胃,并且检测对小鼠的奖赏效应或厌恶效应。结果：吗啡组小鼠在伴药箱中停留的时间明显延长,二陈汤可抑制吗啡引起的小鼠位置偏爱的形成。结论：二陈汤能在一定程度上抑制吗啡诱导的小鼠条件性位置偏爱效应。     

脑深部电刺激双侧伏核对吗啡成瘾大鼠复吸行为的影响

目的 研究脑深部电刺激双侧伏核核心部对吗啡成瘾大鼠复吸行为的影响.方法 手术前筛选大鼠,筛选后大鼠随机分为空白组、空白电刺激组、吗啡组、吗啡假手术组、吗啡电刺激组.电极植入7d后采用隔日递增原则皮下注射吗啡(5mg/kg起始,每次递增5mg/kg,至20mg/kg稳定)建立大鼠吗啡成瘾模型.通过改进后的DBS电路进行电刺激,刺激参数为130Hz、150A、60s、1 h/d、14d.干预前后变化由条件位置偏爱实验检测.复吸行为采用小剂量吗啡(3 mg/kg)诱导,24h后再次检测CPP.数据统计采用two-way ANOVA,组间比较用Bonferroni方法.结果 ①完成CPP训练后,吗啡组、吗啡假手术组、吗啡电刺激组三个组的CPP评分为(155.87±20.45)s、(107.33 ± 18.10)s、(135.45±22.09)s,与前两组均有明显差异[与空白组(-70.34±15.40)s比较t值和P值分别为:t=9.45,P＜0.01;t=6.94,P＜0.01;t=8.04,P＜0.01].②7天DBS后,吗啡电刺激组大鼠CPP评分与吗啡组(t=4.21,P＜0.01)、吗啡假手术组(t=1.10,P＜0.05)差异明显.14d DBS后差异更加明显(t=5.15,P＜0.01;t=3.92,P＜0.01).③给予小剂量吗啡诱导复吸后,吗啡电刺激组CPP评分小于吗啡组(t=4.04,P＜0.01)和吗啡假手术组(t=4.13,P＜0.01)组,且与空白组(-53.50 ± 11.10)s(t=2.60,P＞0.05)差异无显著性,但与空白电刺激组(t=3.70,P＜0.01)仍差异有显著性.结论 DBS双侧伏核核心部不仅可以干预吗啡成瘾大鼠的CPP行为,而且能抑制小剂量吗啡诱导的复吸行为.

Abstract：

Objective To investigate the influence on the behavior of withdrawal and relapse after deep brain stimulation of bilateral nucleus accumbens in morphine-dependent rats. Methods The rats with a strong unconditioned preference were discarded in preconditioning test, the selected rats were distributed into five groups randomly. After operation,morphine hydrochloride was injected subcutaneously into SD rats for 12 days (once every day,initial 5 mg/kg,increasing by 5 mg/kg per time,stable in 20 mg/kg ). A modified electrical circuit was used to procedure the DBS,the parameter was 130 Hz,150 A,60 s,l h/d,14 d. CPP test was used to exam the effect of DBS. A minor morphine dose (3 mg/kg) was injected to induce the behavior of relapse, and CPP was tested again after 24 h. Two-way ANOVA was performed on the data with Bonferroni posttest. Result ①After CPP training,CPP score of group morphine, morphine + sham and morphine + DBS was ( 155. 87 ± 20. 45 ) s, (107.33 ± 18.10)s,(135.45 ±22.09)s,and had significant difference with group of control( ( -70.34 ± 15.40) s)(t = 9.45,P＜0.01; t = 6.94,P＜0.01;t = 8.04,P＜0.01).②After 7 days' DBS,the CPP score in group of morphine + DBS reduced significantly compared to group of morphine( t = 4.21, P＜0.01) and morphine + sham( t=1.10, P＜0.05).0n the 14th day,there was more pronounced reduction ( t = 5. 15, P＜0.01; t = 3.92, P＜ 0.01). ③ 24 hours after the minor morphine dose was injected,the CPP score in morphine + DBS didn't increase significantly, and had significant difference with group of morphine ( t = 4.04, P＜0.01) and morphine + sham ( t= 4. 13, P＜0.01). Conclusion DBS bilateral nucleus accumbens in morphine-dependent rats can interfere the behavior of morphine-induced CPP and relapse.     

脑深部电刺激伏核对吗啡成瘾依赖大鼠学习记忆的影响

目的 探讨脑深部电刺激(DBS)伏核对吗啡成瘾依赖大鼠学习记忆的影响.方法 通过DBS电极刺激吗啡成瘾依赖大鼠双侧伏核,于吗啡注射第10天和刺激结束后第1天,进行Morris水迷宫实验比较假刺激组、DBS组、生理盐水组(NS组)大鼠学习记忆能力的变化.结果 刺激前3组间的平均潜伏期总体比较差异有显著性(F=7.49,P=0.0077),吗啡依赖组大鼠的平均潜伏期明显长于NS组(P<0.01);刺激后3组间的平均潜伏期总体比较差异有显著性(P=7.76,P=0.0069),刺激后DBS组大鼠的平均潜伏期缩短,与假刺激组相比差异具有显著性(P=0.014),较NS组差异无显著性(P=0.43);假刺激组与NS组相比差异具有显著性(P=0.0056).刺激前NS组(51.94±3.06)与吗啡依赖组穿越Ⅱ象限时间差异有显著性(P=0.001);刺激后NS组[(48.53±2.29)s]较假刺激组[(20.74±2.13)s]差异有显著性(P=0.001),较DBS组[(38.34±1.68)s]差异无显著性(P=0.062).结论 脑深部电刺激伏核改善了已被吗啡损害的大鼠的学习记忆功能.     

场景熟悉度对慢性吗啡处理诱导小鼠行为敏化的影响

目的 探求场景熟悉度对慢性吗啡处理诱导小鼠行为敏化的影响.方法 (1)实验一:分别在新颖场景(测试箱)和熟悉场景(鼠笼)中连续7天给予小鼠吗啡处理(10 mg/kg,皮下注射,1次/d);撤药后第7天,在测试箱中给予10 mg/kg吗啡点燃后观察其行为敏化效应.(2)实验二:连续7天给予小鼠吗啡处理(10 mg/kg,皮下注射,1次/d);撤药后第7 d,检测行为敏化的表达,其中配对组检测场景为伴药场景,非配对组检测场景为非伴药场景.结果 (1)实验一:吗啡注射与新颖场景配对能够诱导小鼠行为敏化,而与熟悉场景配对不能诱导小鼠行为敏化.(2)实验二:吗啡注射与新颖场景配对诱导的敏化行为只在吗啡配对的新颖场景中表达而在非配对的新颖场景中不表达.结论 小鼠行为敏化的建立与吗啡注射配对场景的熟悉度相关,并且其表达是场景依赖性的.     

吗啡诱发的大鼠强迫性觅药动机及中脑神经元活动性改变

目的 考察不同剂量吗啡用药模式下大鼠的行为敏感化表达是否受到前期用药环境的调控,探索行为敏感化表达不受前期用药环境影响的动物模型及其中脑区域神经元的活动性改变.方法 按吗啡给药方式将大鼠分为3组:累加大剂量吗啡前处理组(HD组)、固定小剂量吗啡前处理组(LD组)和盐水前处理组(S组).戒断后,在"非用药环境"中考察大鼠经吗啡点燃后的水平运动和刻板运动.随后进行腹侧被盖区(VTA)和黑质(SN)的Fos蛋白和酪氨酸羟化酶(Tyrosine hydroxylase,TH)双重免疫组织化学染色.结果 10mg/kg吗啡点燃后,HD组水平运动和刻板运动均显著高于S组(水平运动和刻板运动,HD组:26907±2003和129.6±6.5;S组:14962±1888和89.9±10.9,均P＜0.01).与S组比较,HD组在SNr整体及SNr外侧部Fos蛋白阳性神经元均显著增高(SNr和SNr外侧部Fos阳性神经元,HD组:29.14±5.27和9.83±2.84;S组:17.29±1.51和2.06±0.45;均P＜0.05).结论 相对于固定小剂量吗啡用药,累加大剂量吗啡用药诱导的大鼠行为敏感化不受前期用药环境调控;SNr尤其是其外侧部的神经元活动性增加与累加大剂量吗啡用药大鼠的觅药动机表达有重要关系.     

丁丙诺啡、东莨菪碱与异丙嗪联合使用对大鼠位置偏爱的影响

目的 通过观察丁丙诺啡、东莨菪碱与异丙嗪三药联合使用(俗称"1+1")对大鼠位置偏爱的影响,探索"1+1"对实验大鼠的精神依赖性潜力.方法 161只雄性SD大鼠随机分成9组,分别采用丁丙诺啡、丁丙诺啡+东莨菪碱、丁丙诺啡+异丙嗪、丁丙诺啡+东莨菪碱+异丙嗪、东莨菪碱、异丙嗪、东莨菪碱+异丙嗪、吗啡、以及生理盐水等进行腹腔内注射,同时进行药物匹配CPP训练,共10d,比较各组大鼠训练前后以及训练后各组大鼠之间在药物训练侧(简称伴药侧)停留时间的差异,探索各处理因素的精神依赖性潜力及其差异.结果 注射吗啡、丁丙诺啡、丁丙诺啡+东莨菪碱、丁丙诺啡+异丙嗪、丁丙诺啡+东莨菪碱+异丙嗪等5组大鼠均形成了明显的CPP;组间比较发现丁丙诺啡+东莨菪碱+异丙嗪组大鼠训练前后在非自然偏爱侧停留时间增加(378.6±120.8)s,明显高于丁丙诺啡组(302.2±133.9)s,差异有显著性(F=62.9,P=0.03),但与吗啡组(419.8±146.4)s比较,差异无显著性(F=14.3,P=0.63).结论 丁丙诺啡、东莨菪碱与异丙嗪之间可能存在协同作用而增加了丁丙诺啡的滥用潜力.     

大鼠配对前吗啡成瘾及戒断对子代焦虑样行为和学习记忆的影响

目的 研究大鼠配对前经历吗啡成瘾及戒断对其子代焦虑样行为和学习记忆的影响.方法 8周龄健康Sprague-Dawleyda大鼠24只,雌雄各半. 12只大鼠(雌雄各半)腹腔内注射盐酸吗啡10 d,2次/d,起始剂量为5 mg/kg,逐日递增5 mg,至第10天为50 mg/kg,另12只大鼠用相同方式注射同剂量的生理盐水.戒断后第21天,雌雄大鼠配对分组,1组:成瘾雄鼠+成瘾雌鼠;2组:成瘾雄鼠+生理盐水雌鼠;3组:生理盐水雄鼠+成瘾雌鼠;4组:生理盐水雄鼠+生理盐水雌鼠.每组内雌雄各3只,按上述分组配对合笼.各组所产子代鼠8周时,对其进行高架十字迷宫、旷场行为和水迷宫测试.结果 高架十字迷宫测试,1,2,3组雌雄子代在开放臂停留时间百分比[分别为(2.49±0.91)%,(0.45±0.10)%、(3.34±1.12)%,(5.51±1.60)%、(3.15±0.52)%,(2.09±0.70)%]低于4组雌雄子代(10.41±2.64)%,(9.32±1.63)%,差异具有显著性( P <0.01);旷场行为测试,1,2,3组雌雄子代在中央格停留时间百分比[分别为(3.91±0.82)%,(2.63±0.41)%、(4.31±0.62)%,(2.75±0.72)%、(3.71±0.41)%,(2.04±0.39)%]低于4组雌雄子代(13.97±0.61)%,(7.71±0.21)%,差异具有显著性( P <0.01).水迷宫测试,每组子代找到平台的平均潜伏期、在目标象限的时间均差异无显著性( P >0.05).结论 亲代经历吗啡成瘾及戒断后会导致子代产生焦虑样行为,但对学习记忆无明显影响.     

化学毁损伏隔核对吗啡给药大鼠觅药行为及探索行为的影响

目的探讨双侧毁损伏隔核对吗啡给药大鼠觅药行为及大鼠探索行为的影响,为临床治疗药物依赖提供依据。方法在脑立体仪的引导下,用微量加样器将6-羟多巴胺缓慢注射入所有毁损组大鼠双侧伏隔核,而未毁损组注射等量生理盐水。以条件性位置偏爱实验为评价指标,评价双侧毁损伏隔核对吗啡给药大鼠觅药行为的影响;以场地探索实验为评价指标,评价双侧毁损伏隔核对大鼠探索行为的影响。结果在条件性位置偏爱实验中,单纯给药组实验后第1天、第4天、第7天、第10天在白盒里停留时间的对数平均值分别为5.54±1.30、5.46±1.62、5.64±1.31、5.49±1.32,与毁损给药组、单纯毁损组、对照组相比较差异有显著性(P<0.05),而其他三组之间差异无显著性;在场地探索实验中毁损组A室直立数,直立时间前2天低于对照组,其运动方格数却高于对照组(P<0.05或P<0.01)。而毁损组大鼠进入B室潜伏期却高于对照组(P<0.05或P<0.01),并且毁损组大鼠对新物的探索时间高于对照组(P<0.05)。而第9天撤除新物后毁损组大鼠对新物的探索时间却低于对照组(P<0.05)。结论伏隔核中的多巴胺系统在精神依赖(大鼠表现为条件性位置偏爱)形成过程中起关键性作用;化学毁损伏隔核中的多巴胺系统能够影响吗啡给药大鼠的觅药行为,对大鼠运动探索能力也有一定影响。     

内侧前额叶皮层神经元可塑性改变在吗啡奖赏记忆形成中的作用

目的 观察吗啡诱导的大鼠内侧前额叶皮质（mPFC）神经元可塑性改变对吗啡奖赏记忆形成的影响.方法 40只SD大鼠分为生理盐水对照组和吗啡组,分别腹腔注射生理盐水（2 ml/kg）和盐酸吗啡（10 mg/kg）,注射后0、2、4、8h断头取脑,Western Blot分析mPFC区Arc/Arg 3.1蛋白变化;另取大鼠60只,分别腹腔注射0、5、10或20 mg/kg吗啡,Western Blot（n=5）分析mPFC区Arc/Arg 3.1蛋白变化;免疫组化法（n=5）检测mPFC区Arc/Arg 3.1阳性细胞数量变化;Golgi-cox改良法（n=5）检测mPFC区神经元棘突数量变化;再取大鼠40只,经8天生理盐水、吗啡交替训练建立条件性位置偏爱（CPP）模型,吗啡模型组大鼠在每次吗啡注射前15 min给予mPFC区注射Arc/Arg 3.1基因的反义寡核苷酸（AS,n=10）及其对照（CS,n=10）,观察其对吗啡CPP评分的影响.结果 与生理盐水对照组相比,10 mg/kg吗啡注射后2 h mPFC内Arc/Arg 3.1蛋白水平、Arc/Arg 3.1阳性细胞数、棘突数量[（1.01±0.04） vs （1.58±0.18）,P＜0.01;（42.80±7.63） vs （74.47±8.02）,P＜0.01;（17.27±5.64） vs （39.47±7.56）,P＜0.01]均显著增加;与对照组相比,5、10或20 mg/kg吗啡注射后2h均可诱导mPFC的Arc/Arg 3.1蛋白水平显著增加,无剂量依赖效应;对于吗啡CPP模型组大鼠,与mPFC区注射CS相比（0.74±0.02）,AS显著降低吗啡CPP的评分（0.51±0.01）,差异具有统计学意义（P＜0.01）.结论 单次吗啡注射可以诱导大鼠mPFC区Arc/Arg 3.1蛋白表达增加并伴有神经元可塑性的增强,增加的Arc/Arg 3.1蛋白介导了吗啡奖赏记忆的形成.