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1.
慢性皮肤溃疡缠绵难愈,治疗棘手,其发生发展与成纤维细胞增殖障碍有关。多年来有关其发病机理以及成纤维细胞的增殖与修复为国内外研究的热点。目的:建立慢性皮肤溃疡创缘成纤维细胞(uHFB)细胞系,观察回阳生肌膏水、醇提取物对成纤维细胞增殖的影响,并探讨c-fbs、c-myc及增殖细胞核抗原(PCNA)表达在回阳生肌膏调控创面愈合中的信号转导作用。方法:组织块法培养并建立uHFB细胞系;alarmar blue摄入法检测回阳生肌膏水、醇提取物对uHFB的增殖作用;免疫细胞化学法检测回阳生肌膏水、醇提取物对uHFB c-fos、c-myc及PCNA表达的影响。  相似文献   

2.
目的: 研究银杏叶提取物对肝星状细胞增殖及细胞因子TGF-β1、CTGFmRNA及蛋白表达的影响,以探讨银杏叶提取物抗肝纤维化的可能机制。方法: 用不同浓度(0、1、10、100、500 mg/L)的银杏叶提取物处理HSC-T6,用MTT及流式细胞仪检测其对肝星状细胞增殖及细胞周期的影响,用RT-PCR及Western blotting检测培养24 h及48 h后各组细胞中TGF-β1、CTGFmRNA及蛋白的表达。结果: 银杏叶提取物10、100、500 mg/L可抑制肝星状细胞的增殖,与空白对照组相比,G0/G1期DNA含量逐渐增加(P<0.05或P<0.01),S期DNA含量则逐渐降低(P<0.01),增殖指数(PI)逐渐降低(P<0.05 或P<0.01);24 h各组TGF-β1mRNA及蛋白表达较对照组分别低(28±4)%、(39±4)%、(45±3)% (P<0.01);(27±4)%、(37±4)%、(41±3)% (P<0.01);48 h组各组TGF-β1mRNA及蛋白表达较对照组分别低(35±4)%、(49±3)%、(54±3)% (P<0.01);(33±4)%、(48±3)%、(52±3)% (P<0.01);4 h各组CTGF mRNA及蛋白表达较对照组分别低(29±6)%、(45±4)%、(56±3)% (P<0.01);(36±4)%、(48±4)%、(49±3)% (P<0.01);48 h组各组CTGF mRNA及蛋白表达较对照组分别低(48±6)%、(57±4)%、(69±3)% (P<0.01);(44±6)%、(58±4)%、(62±3)% (P<0.01)。结论: 银杏叶提取物可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制细胞因子TGF-β1、CTGF基因的表达发挥其抗肝纤维化的作用。  相似文献   

3.
目的: 探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖和凋亡的影响,以及HIF-1α、P-ERK1/2、iNOS蛋白表达变化在其中的作用与意义。方法: 体外培养大鼠PASMC,设计常氧组、低氧组及ADM、L-NAME、PD98059干预组,用MTT比色法和PCNA的免疫组化法测定细胞增殖反应,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用Western blotting法检测HIF-1α、P-ERK1/2、iNOS的蛋白表达。结果: (1)低氧24 h组的A值明显高于常氧组(P<0.01),而PD98059及ADM干预组明显低于低氧组(P<0.01), L-NAME干预组明显高于低氧组和常氧组(P<0.01)。(2)免疫组化表明,低氧24 h组呈阳性表达(P<0.01)。PD98059、ADM抑制了PCNA的表达(P<0.01), L-NAME促进了PCNA的表达(P<0.01)。(3)各组在低氧培养24 h后,凋亡指数差异无显著(均P>0.05)。(4)Western blotting表明常氧组少量HIF-1α、iNOS、 P-ERK1/2表达,低氧4 h后均表达增高(P<0.01),8 h仍维持在高峰(P<0.01),而HIF-1α、P-ERK1/2在低氧24 h后表达下调。L-NAME促进了HIF-1α表达(P<0.01),PD98059部分抑制了HIF-1α、iNOS及P-ERK1/2表达(P<0.01);ADM部分抑制了HIF-1α表达,促进iNOS表达(P<0.01)。结论: 低氧能促进肺动脉平滑肌细胞增殖,对细胞的凋亡无影响;HIF-1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞增殖中起重要作用。  相似文献   

4.
目的:研究白细胞介素10(IL-10)对精氨酸血管加压素(AVP)诱导大鼠心脏成纤维细胞(CFs)钙调神经磷酸酶(CaN)活性的影响。方法:用培养的新生SD大鼠CFs,四氮唑盐(MTT)比色法检测CFs增殖,流式细胞仪检测细胞周期,分光光度法测定CaN活性。结果:(1)10-7 mol/L AVP组CFs的吸光度(A490)明显高于对照组(P<0.01)。IL-10呈浓度依赖性下调 AVP诱导的CFs的A490值(P<0.05或P<0.01)。IL-10本身对CFs的增殖无抑制作用。(2)10-7 mol/L AVP组CFs的S期百分率及增殖指数均明显高于对照组(均P<0.01);10-6 g/L IL-10+10-7 mol/LAVP组S期百分率及增殖指数均明显低于AVP组(P<0.01)。(3)10-7 mol/L AVP组CaN活性明显高于对照组(P<0.01);10-8、10-7、10-6和10-5g/L +10-7 mol/L AVP组的CaN活性均明显低于AVP组(P<0.01),但仍高于对照组(P<0.01或P<0.05)。IL-10呈浓度依赖性下调 AVP诱导CFs的CaN活性。结论:IL-10具有抑制AVP诱导CFs增殖和下调CFs的CaN活性的作用,这可能对预防和逆转心脏重构有一定的价值。  相似文献   

5.
瑞香狼毒甲醇提取物抗瘤机理研究   总被引:11,自引:0,他引:11  
目的 研究瑞香狼毒甲醇提取物的抗瘤机理。方法 用不同剂量的瑞香狼毒甲醇提取物(简称醇提物),观察其体内对荷瘤鼠和所荷肿瘤生长的作用;MTT法研究其体内对荷瘤鼠脾细胞转化及NK活性,体外对正常鼠脾细胞生长、转化和NK活性以及对3株肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术和透射电镜检测其体外对K562的细胞周期和凋亡及p53、bcl-2和c-myc基因表达的影响;台盼蓝拒染法检测其体外对K562增殖曲线的影响。结果 体内,每天5μg/kg醇提物可抑制肿瘤生长,提高荷瘤鼠免疫功能。体外,0.1~l0μg/ml醇提物可刺激脾细胞增殖和协同最适量和亚适量ConA刺激脾细胞转化,0.1~10μg/ml醇提物可提高脾细胞NK杀伤活性,0.1~l0μg/ml醇提物对K562、S180和YAC-1的增殖均有抑制作用,K562最为敏感。0.5μg/ml醇提物作用的K562,处于G0/G1期的细胞和凋亡细胞显著增加,p53基因表达显著增加,bcl-2和c-myc基因表达显著下降。K562在0.5μg/ml醇提物作用24h后洗去或不洗去培养9d,细胞虽仍存活,但密度却不增加。结论 醇提物在一定剂量范围内可抑制肿瘤细胞生长,提高荷瘤鼠免疫功能。抗瘤机理与其可刺激脾细胞增殖,协同ConA刺激脾细胞转化和提高脾细胞NK杀伤活性及阻滞肿瘤细胞周期,抑制其分裂增殖,促进其凋亡有关。  相似文献   

6.
目的:观察尾叶香茶菜二萜类化合物B(DB)对小鼠前列腺癌细胞株RM-1细胞周期的影响并分析其机制。方法:MTT法观察不同时间、不同剂量的DB对RM-1 细胞增殖率的影响;相差显微镜观察对RM-1细胞形态影响;流式细胞术分析细胞周期变化;RT-PCR和Western blotting分别观察DB作用后RM-1细胞p53、GRIM-19、STAT3 和细胞周期相关因子CHK1、CDK2 mRNA和蛋白水平的表达。结果:(1)MTT结果:DB可抑制RM-1 细胞的增殖,呈时间、剂量依赖性;(2)形态学观察和流式细胞术检测:经DB处理后的RM-1细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在G1期;(3)RT-PCR结果: DB (2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L) 分别作用RM-1细胞12 h、24 h、48 h后,p53、CHK1、GRIM-19 mRNA的含量明显高于对照组,CDK2、STAT3 mRNA的含量明显低于对照组(P<0.05);(4)Western blotting 结果:DB (2 mg/L,4 mg/L,8 mg/L) 分别作用RM-1细胞12 h、24 h、48 h后,P53、GRIM-19 蛋白表达水平高于对照组,而CDK2蛋白表达水平则低于对照组。结论:DB可抑制RM-1细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关基因p53的上调,CDK2表达下降有关,影响了G1期进入S期,同时GRIM-19-STAT3-CDK2途径可能也参与G1期阻滞的过程。  相似文献   

7.
目的: 体外模拟慢性创面缺氧、低营养环境,观察成纤维细胞在该状态下增殖及细胞周期的变化及对外源性生长因子(bFGF)的反应,探讨低氧、低营养条件下成纤维细胞的病理生理变化。方法: 单纯缺氧环境采用厌氧培养箱,通入混合气,氧分压(PO2)分为27 mmHg和44 mmHg 2个水平;低营养环境则控制培养液新生牛血清(NCS)浓度。用MTT法检测细胞活性以及其对外源性生长因子的反应,用流式细胞仪检测细胞周期。结果: PO2 44 mmHg时细胞增殖速度较同期对照组无明显差异;PO2 27 mmHg时,细胞增殖速度较同期对照组明显减慢(P<0.01),细胞被阻滞于G0期,S期细胞比例明显减少,bFGF未显示促增殖作用。NCS浓度为0.5%的低营养状态下细胞增殖速度较同期对照组明显减慢(P<0.01),细胞被阻滞于G0-G1期(P<0.01);bFGF能明显改善低营养状态下的增殖减慢(P<0.01),使G2-M期细胞比例增加(P<0.05)。结论: 27 mmHg PO2或NCS浓度为0.5%的低营养环境使细胞阻滞于G0-G1期,影响成纤维细胞增殖;bFGF可以改善低营养条件下细胞增殖减慢的状态,但对极度缺氧条件下的成纤维细胞增殖障碍无明显作用。  相似文献   

8.
目的 观察孕酮(P)对人子宫内膜癌内膜高分化腺癌细胞株Ishikawa细胞内survivin蛋白表达的影响,探讨孕激素治疗子宫内膜腺癌的机制。方法 体外培养人子宫内膜高分化腺癌细胞株Ishikawa细胞,MTT法观察细胞的增殖;流式细胞仪(FCM)检测细胞周期和细胞凋亡率;链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法测定Ishikawa细胞survivin蛋白的表达。结果 P呈剂量依赖性抑制Ishikawa细胞增殖(P<0.01)。P组G0/G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,凋亡率上升,并出现细胞凋亡峰(P<0.01)。survivin在Ishikawa细胞中有强表达, P处理24h后,明显下调survivin的表达,(P<0.01)。结论 孕酮调解调亡抑制蛋白Survivin的表达可能是调节细胞凋亡的机制之一。  相似文献   

9.
目的: 研究粗江蓠多糖(GHPS)对正常大鼠胸腺和脾淋巴细胞周期的影响。方法: 采用体外培养淋巴细胞的方法,通过流式细胞术,研究不同浓度的GHPS(1.0、3.0、6.0 g/L)对大鼠淋巴细胞周期的调节作用。结果: 1.0、3.0、6.0 g/L的GHPS能降低G0/G1期和G2/M期胸腺细胞百分率,增加S期胸腺细胞百分率;1.0、3.0、6.0 g/L的GHPS可以增加G0/G1期脾细胞百分率,减少S期和G2/M期脾细胞百分率。结论: 一定浓度的GHPS可以促进胸腺细胞增殖,抑制脾细胞的增殖。  相似文献   

10.
 目的: 研究雷公藤内酯醇在体外是否具有抗淋巴瘤细胞增殖和迁移的效应。方法: 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测雷公藤内酯醇对Raji细胞增殖的作用;采用Annexin V/PI双标流式细胞术检测雷公藤内酯醇对Raji细胞凋亡的影响;采用流式细胞仪检测雷公藤内酯醇对Raji细胞表面CXCR4受体表达的影响;并采用Transwell微孔隔离室迁移实验观察雷公藤内酯醇对Raji细胞体外迁移作用的影响。结果: ①雷公藤内酯醇能以时间和剂量依赖方式抑制Raji细胞的增殖,24 h和36 h的 IC50值分别为43.06 nmol/L和25.08 nmol/L。② 随雷公藤内酯醇药物浓度的增加和作用时间的延长,Raji细胞凋亡率逐渐增高,且呈时效和量效关系。③ Raji细胞经不同浓度雷公藤内酯醇(12.5、25、50 nmol/L)处理后,CXCR4表达率(34.66%±4.34%、23.74%±1.87%、18.10%±1.18%)明显低于对照组(72.47%±7.28%,P<0.01),此抑制效应呈剂量依赖性;④ Transwell趋化活性分析显示雷公藤内酯醇能抑制rhSDF-1α对Raji细胞的趋化作用,此抑制效应也呈量效关系。结论: 雷公藤内酯醇具有抗淋巴瘤细胞增殖和诱导凋亡的效应,并能阻断Raji细胞的体外迁移,其机制与其对SDF-1/CXCR4生物学轴的抑制效应有关。  相似文献   

11.
目的: 研究PAR-2激动剂对人肝癌HepG2细胞增殖及细胞内Ca2+浓度([Ca2+]c)的影响。方法: 培养人肝癌细胞HepG2, 分别利用PAR-2激动剂SLIGKV-NH2及反PAR-2激动肽VKGILS-NH2干预肝癌细胞生长,用Fura-2荧光法测定肝癌细胞内[Ca2+]c,用MTT法检测对肝癌细胞增殖能力的影响,流式细胞术(FCM)检测细胞周期改变情况,RT-PCR法检测cyclinD1 mRNA表达变化。结果: 50 μmol/L SLIGKV-NH2刺激HepG2细胞后,[Ca2+]c迅速短暂升高(P<0.01);G0/G1期比例明显降低,S期和G2/M期细胞比例和细胞增殖指数(PI)明显提高(P<0.01);cyclinD1 mRNA的表达显著增加(P<0.01)。SLIGKV-NH2在1-50 μmol/L时可以促进HepG2细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.01或P<0.05)。而VKGILS-NH2组与对照组相比差异无显著(P>0.05)。结论: PAR-2激动剂在体外能通过激活PAR-2,诱导HepG2细胞内[Ca2+]c升高,上调cyclinD1 mRNA的表达,加速HepG2细胞周期进程,促进DNA合成,促进肝癌细胞增殖。  相似文献   

12.
目的 观察顺铂和阿霉素联合作用对人舌鳞癌Tca8113细胞生长的抑制作用,以及对细胞周期和凋亡的影响.方法 不同浓度顺铂、阿霉素及两者联合作用于人舌鳞癌Tca8113细胞,用MTT法观察细胞增殖情况以及药物对细胞生长的抑制效应.用流式细胞仪观察细胞凋亡和细胞周期.结果 顺铂(r=0.538,P<0.01)和阿霉素(r=0.642,P<0.01)呈剂量和时间依赖性抑制Tca8113细胞生长.单独用1.25 μmol/L阿霉素作用24 h,对Tca8113细胞的生长无显著影响.不同浓度顺铂(2~10mg/L)单独作用24 h,仅10 mg/L浓度可显著抑制Tca8113细胞的生长(P<0.01).1.25 μmol/L阿霉素与顺铂联合应用24h后,4、6、8、10mg/L顺铂均可显著抑制Tca8113细胞生长,且与相应浓度的单独用药组比,差异均有统计学意义(均为P<0.001).1.25 μmol/L阿霉素、6 mg/L顺铂以及阿霉素1.25 μmol/L+顺铂6 mg/L均显著改变G_0~G_1期(50.00±0.32%,43.53±2.026%.50.77±3.83%)和s期(36.5±1.05%.40.8±2.52%,30.87±2.65%)细胞百分比(均为P<0.01),联合用药的作用较单一用药组更显著(P<0.05).上述药物对细胞凋亡的作用均不明显,联合用药后坏死细胞比例明显增加.结论 顺铂和阿霉素联合作用,可显著地抑制人舌鳞癌细胞分化增殖,并增强药物的细胞毒性作用.  相似文献   

13.
目的: 观察古尼虫草、花脸香菇、冬虫夏草和巴西革耳4种食药用真菌粗提物对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖活性的作用,筛选具有保护内皮细胞活性的有效菌菇并探讨其对HUVECs细胞周期及活性氧簇(ROS)水平的影响。方法: 体外培养HUVECs,分为对照组 (M199正常培养液)、高糖组(33 mmol/L高糖培养液)、4种食药用真菌(古尼虫草、花脸香菇、冬虫夏草和巴西革耳)粗提物干预组 (每种粗提物以终浓度12.5、25、50、100 mg/L+高糖培养液),以四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期及细胞内ROS水平。结果: 与对照组相比,高糖组HUVECs 的MTT吸光度值显著下降,G0/G1期的细胞百分率明显增加,S+G2/M期的细胞百分率明显下降,且ROS水平亦增加(均P<0.05)。与高糖组相比,花脸香菇和巴西革耳粗提物干预降低了细胞吸光度值(P<0.05),且抑制效应呈剂量依赖性增强,而古尼虫草粗提物对其无影响。冬虫夏草粗提物(12.5~50 mg/L)显著提高了HUVECs的增殖活性(P<0,05),减少了G0/G1期细胞百分率,提高了S+G2/M期的细胞百分率(P<0.05),降低了细胞内ROS水平(均P<0.05),且效应呈剂量依赖性增强。结论: 4种食药用真菌粗提物经MTT比色法筛选后,仅冬虫夏草粗提物对高糖诱导的HUVECs有显著保护作用,其可能通过促进内皮细胞增殖、进入细胞周期及降低细胞内活性氧水平途径。  相似文献   

14.
目的:体外观察几种常用外用中药有关成分对血管内皮细胞增殖作用的影响,初步探讨其对创伤愈合的可能作用。方法:采用MTT比色法观察中药人参皂苷Rg1、Rh1、黄芪多糖、鹿茸多肽、川芎嗪、麝香酮、桂皮醛和乳香水提物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响。结果:9.75mg/L-2.5g/L的黄芪多糖对HUVEC未表现出增殖促进作用;1.94mg/L-0.5g/L的人参皂苷Rh1促进HUVEC的增殖(P<0.05或P<0.01),31mg/L的人参皂苷Rg1抑制细胞增殖(P<0.05);1mg/L-0.5g/L的鹿茸多肽明显促进HUVEC的增殖,以10mg/L作用最明显(P<0.01),桂皮醛2g/L时促进HUVEC的增殖(P<0.05);1g/L的麝香酮明显抑制HUVEC的增殖(P<0.01);0.5kg/L-2.5kg/L(生药)乳香水提物明显抑制HUVEC的增殖(P<0.01),抑制增殖率为35.56%-55.56%。川芎嗪0.125g/L-0.5g/L明显抑制HUVEC的增殖(P<0.01)。结论:益气温阳药物人参(Rh1)、鹿茸(鹿茸多肽)、肉桂(桂皮醛)促进HUVEC增殖;通络活血药物麝香(麝香酮)、乳香(乳香水提物)、川芎(川芎嗪)抑制HUVEC增殖。  相似文献   

15.
Leishmaniasis is a public health problem that has been increasing year by year, with the further difficulty that an efficient control system is not available. Therefore, it is necessary to search for less contaminating and dangerous alternatives for controlling Leishmania transmitting sandflies. The purpose of this study was to evaluate the activity of Monticalia greenmaniana (Asteraceae) extracts and essential oil as an adulticide against Lutzomyia migonei (Diptera: Psychodidae) females, from a laboratory colony, in experimental conditions. Dry aerial parts of M. greenmaniana (Hieron) Jeffrey were used. Methanolic and aqueous extracts were prepared, and essential oil was obtained by hydrodistillation. Adulticide tests in pots, adulticide tests in cages, and knocked-down effects were determined. The results obtained demonstrated that methanolic and aqueous extracts produced adulticide activity. The essential oil from M. greenmaniana was proved to be the most toxic against L. migonei, with a 95 % death rate at a concentration of 0.01 mg/ml during a 1-h exposure. The essential oil showed a DL50?=?0.0050 and DL98?=?0.0066 mg/ml. The methanolic extract was DL50?=?0.130 and DL98?=?1.016 mg/ml, and the aqueous extract, DL50?=?0.487 and DL98 10.924 mg/ml. The knocked-down effect for the M. greenmaniana oil showed a KDTL50?=?48.6 and KDTL98?=?90.1 min. It was concluded that the essential oil from M. greenmaniana showed a strong insecticide effect against L. migonei females, which encourages us to continue these studies in search for control alternatives against sandflies.  相似文献   

16.
目的:探讨11,12-环-二十碳三烯酸(11,12-EET)对缺氧大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响。方法:采用贴块法体外培养大鼠主动脉VSMC,将细胞分为常氧对照组(Con组),缺氧模型组(H组),EET组(EET组)和EET-缺氧组(EET-H组),以MTT法测定VSMC的增殖率,以流式细胞术观察VSMC细胞周期及凋亡率,Western blot方法检测Bax的表达。结果:与Con组比较,H组VSMC增殖率升高(P<0.01),EET组VSMC存活率降低(P<0.01);EET-H组细胞增殖率低于H组(P<0.01)。与Con组相比,H组G0/G1期VSMC细胞比例减少(P<0.05),S期细胞比例增加(P<0.05);EET组较Con组G0/G1期细胞比例增加(P<0.05);与H组相比,EET-H组G0/G1期细胞比例增加(P<0.05),S期和G2/M期细胞比例减少(P<0.05)。EET-H组VSMC凋亡率高于H组(P<0.05)、Con组(P<0.05)及EET组(P<0.05)。EET组Bax的表达高于Con组(P<0.05);与H组比较,EET组及EET-H组Bax的表达均升高(P<0.01)。结论:外源性给予11,12-EET有抑制缺氧VSMC增殖和促进缺氧VSMC凋亡双重作用。11,12-EET可能通过对VSMC增殖和凋亡的调控,影响血管损伤后血管重构。  相似文献   

17.
Aqueous phase and butanol phase extracts of group A1, O, M. N, P1 and P2 human erythrocytes prepared by extraction of red cell stromata with n-butanol were examined for the presence of blood group substances in inhibition of agglutination experiments using antisera and test cells of human origin. Group A substance was recovered in both aqueous phase and butanol phase extracts, M and N substances in aqueous phase extracts only, and P1 substance only in butanol phase extracts. Use of high concentrations of extract resulted in detection of P1 activity in aqueous phase extracts and of N specific inhibition in the aqueous phase extracts of group M erythrocytes. Distilled water appeared to be superior to digitonin and hypotonic phosphate buffer solutions for preparation of stromata for the reccvery of group A and M substances in the butanol extracts but not for group N and P1 substances.  相似文献   

18.
The anti-inflammatory drugs possess many serious side effects at doses commonly prescribed. It is really important to discover novel regulators of inflammation from natural sources with minimal adverse effects. Schinus areira L. is a plant native from South America and is used in folk medicine as an anti-inflammatory herb. For this study, the activity of aqueous extracts on inflammation and the effect on superoxide anion production in mice macrophages were assayed. Aqueous extracts were prepared by soaking herbs in cold water (cold extract), boiling water (infusion), and simmering water (decoction). Cold extract possess an anti-inflammatory activity. Decoction and infusion showed pro-inflammatory activity. Cold extract increased the production of superoxide anion. It has been proposed to use diverse methods to obtain extracts of S. areira L. with different effects. Cold extract, decoction, and infusion could be utilized as extracts or as pharmacological preparations for topical application.  相似文献   

19.
目的 观察海洋真菌新结构先导化合物Bostrycin对A549细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 A549细胞完全随机分为实验组和对照组,实验组用不同浓度不同作用时间的Bostrycin进行处理,而对照组未经Bostrycin处理.用MTT法检测A549细胞增殖率的变化;电镜、流式细胞术检测凋亡;实时定量PCR和免疫印迹法探讨其作用机制.结果 Boatrycin浓度≥10μmol/L时对A549细胞增殖有明显的抑制作用,其24、48和72 h的半数抑制浓度(IC_(50))分别为20.20、14.36和9.42μmol/L.Bostrycin干预后,电镜观察到A549细胞典型的凋亡形态;流式细胞术结果显示其G_0/G_1期比例升高、S期和G_2/M期比例下降,凋亡率增加.实时定量PCR检测到微小RNA(miRNA)一638和miRNA.923的表达较对照组上调.免疫印迹结果显示p110α、p-Akt蛋白表达量下降,p27蛋白表达量升高.结论 Bostrycin对A549细胞增殖有显著抑制作用,该作用可能通过miRNA抑制磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(P13K/Akt)通路进行.  相似文献   

20.
目的 探讨叠氮胸苷(AZT)对TJ905 人胶质母细胞瘤细胞株端粒酶活性、增殖和凋亡的影响及其机制.方法 体外培养TJ905细胞分别经50、100及200 μmol/L叠氮胸苷处理24 h后,用端粒重复扩增法检测端粒酶活性及集落形成效率;继续培养并维持相应叠氮胸苷浓度,取第1、3和6代细胞,利用Western blot检测cyclin A表达水平,用流式细胞术检测细胞周期分布并结合单细胞凝胶电泳检测细胞凋亡,用Ki-67免疫细胞化学染色检测细胞增殖活性.结果 叠氮胸苷可抑制TJ905细胞的端粒酶活性.50和100 μmol/L组cyclin A表达水平均显著低于对照组(P<0.01),并均呈时间和剂量依赖性降低.三个用药组的Go/G1期细胞均显著少于对照组(P<0.05~0.01),S期细胞均显著多于对照组(P<0.05~0.01);在各用药组第1代GO/G1期细胞减少和S期细胞增加均呈剂量依赖性;各用药组S期细胞增加均呈显著的时间依赖性,而Go/G1期细胞减少仅在50 μmol/L组呈时间依赖性.各用药组第1和6代的凋亡细胞数均显著多于对照组(P<0.05~0.01);各用药组第6代的凋亡细胞数随用药浓度升高而相应增加(P<0.05~0.01),且均多于同浓度组的第1和第3代(P<0.05~0.01).各用药组集落形成效率及Ki-67阳性细胞数均显著低于对照组(P<0.01),二者还随用药浓度增加和(或)作用时间延长相应减少.对照组各代间以上各指标的差异均无统计学意义(P>0.05).结论 叠氮胸苷可通过抑制端粒酶活性抑制TJ905细胞cyclin A表达,阻止该细胞从S期向G2期过渡,发挥其抑制增殖和诱导凋亡的作用.  相似文献   

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