B族Ⅰ型清道夫受体与丙型肝炎病毒感染

SR-BI是一种细胞表面糖蛋白,属于清道夫受体家族,主要在肝脏和非胎盘期类固醇生成组织中表达.除了其天然配体HDL外,还可与天然LDL、化学修饰的LDL以及阴离子磷脂等结合,主要介导HDL胆固醇酯的选择性摄取,为类固醇生成组织提供胆固醇.新近发现人SR-BI在体外也能特异结合丙型肝炎病毒(HCV)的E2蛋白,提示SR-BI可能是该病毒的一种新受体.本文就SR-BI分子的结构分布、生物学活性以及与HCV感染之间的关系作一综述.     

B族I型清道夫受体与丙型肝炎病毒感染

SR-BI是一种细胞表面糖蛋白,属于清道夫受体家族,主要在肝脏和非胎盘期类固醇生成组织中表达。除了其天然配体HDL外,还可与天然LDL、化学修饰的LDL以及阴离子磷脂等结合,主要介导HDL胆固醇酯的选择性摄取,为类固醇生成组织提供胆固醇。新近发现人SR-BI在体外也能特异结合丙型肝炎病毒(HCV)的E2蛋白,提示SR-BI可能是该病毒的一种新受体。本文就SR-BI分子的结构分布、生物学活性以及与HCV感染之间的关系作一综述。     

B族Ⅰ型清道夫受体与丙型肝炎病毒感染

SR-BI是一种细胞表面糖蛋白，属于清道夫受体家族，主要在肝脏和非胎盘期类固醇生成组织中表达。除了其天然配体HDL外，还可与天然LDL、化学修饰的LDL以及阴离子磷脂等结合．主要介导HDL胆固醇酯的选择性摄取，为类固醇生成组织提供胆固醇。新近发现人SR-BI在体外也能特异结合丙型肝炎病毒（HCV）的E2蛋白，提示SR-BI可能是该病毒的一种新受体。本文就SR-BI分子的结构分布、生物学活性以及与HCV感染之间的关系作一综述。     

清道夫受体A基因的表达和调控研究进展

A类清道夫受体(SR-A)的表达具有巨噬细胞特异性,这与SR-A启动子上的PU.1/Spl-1识别位点有关。SR-A具有广泛的配体结合活性,在机体的防御、细胞粘附及信息转导等过程中起重要作用,对修饰脂蛋白的介导、内吞可能是动脉粥样硬化斑块形成的重要原因。     

清道夫受体与动脉粥样硬化

巨噬细胞或血管平滑肌细胞向泡沫细胞转化是动脉粥样硬化形成的关键。泡沫细胞的形成有赖于细胞表面的清道夫受体（ＳＲ），ＳＲ可结合并摄取修饰的脂蛋白，还具有粘附功能，其表达可受多种因素的影响     

IL-10对小鼠肺泡巨噬细胞清道夫受体及CD14表达的影响

本研究旨在观察IL-10对肺泡巨噬细胞（AM），清道夫受体（SR），CD14表达的影响。探讨IL-10在内毒素血症时防止AM由免疫防御向炎症效应转变中的作用。分离培养小鼠AM，以不同剂量（0,0.01,0.1,1,10,100μg/L）IL-10刺激细胞16h或以100μg/LIL-10刺激细胞不同时间（0,2,4,6,8,12,16h)，采用免疫细胞化学及RT-PCR方法观察SR，CD14表达变化。结果显示低至10μg/LIL-10刺激16h或100μg/LIL-10刺激12-24h能显著增强SRmRNA并抑制CD14mRNA表达，SR蛋白表达也显著增强，但CD14蛋白表达无明显变化，IL-10刺激下对SR蛋白表达的增强能降低AM对LPS的反应性，在内毒素血症时防止AM由免疫防御型向炎症效应型转变中发挥重要作用。     

TNF-α对小鼠肺泡巨噬细胞CD14和清道夫受体表达的影响

本研究旨在通过观察TNF-α对肺泡巨噬细胞(AM)清道夫受体(SR)、CD14表达的影响，探讨TNF-α在内毒素血症时AM由早期防御性(清除、灭活内毒素)向后期效应性(释放大量的致炎与抗炎因子)转变中的作用。分离培养小鼠AM，以不同剂量TNF-α(0，0．001，0．01，0．1，1，10，100μg／L)刺激细胞16h或以100μg／L TNF-α刺激细胞不同时间(0，2，4，6，8，12，16，24h)，采用免疫细胞化学及RT-PCR方法观察SR、CD14表达变化。结果显示，以低至0．1μg／L TNF-α刺激16h或100μg／L TNF-α刺激6h以上就能显著增强CD14并抑制SR蛋白的表达，实验同时显示，CD14mRNA、SRmRNA表达也显著增强，SRmRNA表达变化与SR蛋白表达趋势不一致。研究结果提示，TNF-α能通过增强CD14蛋白表达并抑制SR蛋白表达而在内毒素血症时小鼠AM由免疫防御型向炎症效应型转变中发挥重要作用。     

人清道夫受体A胞外段的原核表达

目的获得具有生物学活性的人清道夫受体A（SRA）胞外段蛋白。方法从人外周血单个核细胞（PBMC）中提取RNA,逆转录为eDNA,采用PCR技术从PBMC．eDNA中扩增出目的基因片段,将其克隆至原核表达载体pET41a（＋）,经PCR、限制性酶切和测序确证后,以IPTG诱导其在大肠杆菌中的表达。包涵体经变性、复性后以Ni—NTA亲和层析柱纯化融合蛋白,以SDS-PAGE、Western blowing进行分析鉴定。FCM及EHSA方法检测SRA胞外段对ConA诱导PBMC细胞增殖及分泌细胞因子IL-2的影响。结果PCR扩增得到长约1100bp的目的基因片段,插入pET41a（＋）载体所获重组表达载体pET41a—SRAECD的酶切图谱和序列与预期的一致。重组子经诱导表达。表达产物主要以包涵体形式存在。以Ni-NTA亲和层析柱纯化获得约75000Mr的SRA胞外段融合蛋白。纯化的人SRAECD蛋白能与抗人SRA单克隆抗体特异性结合并具有活性,可抑制T细胞增殖及细胞因子IL-2的分泌。结论获得了具有生物学活性的人SRA胞外段蛋白．为进一步探索SRA的效应功能提供了实验材料。     

高脂饮食诱导肥胖模型大鼠骨骼肌组织蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B和胰岛素受体底物2的表达

背景：外周组织的胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要病因。 目的：观察高脂饮食诱导的肥胖大鼠骨骼肌中蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B和胰岛素受体底物2的表达。 方法：将20只SD大鼠随机等分为对照组和高脂组,分别给予常规饲料和高脂饲料喂养12周。 结果和结论：与对照组相比,高脂组大鼠胰岛素敏感指数显著降低(P < 0.01),大鼠葡萄糖耐量受损,胰岛素释放试验提示葡萄糖刺激的胰岛素第一时相分泌受损,骨骼肌组织中蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B蛋白表达水平明显增加(P < 0.01),骨骼肌中胰岛素诱导的胰岛素受体底物2磷酸化程度降低(P < 0.01)。提示高脂饮食诱导的肥胖大鼠骨骼肌中蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B蛋白表达量升高,使胰岛素诱导的胰岛素受体底物2磷酸化程度降低,可能是肥胖导致胰岛素抵抗的机制之一。   关键词：肥胖;蛋白酪氨酸磷酸酶1B;胰岛素受体底物2;骨骼肌;胰岛素抵抗 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.20.020     

高脂饮食诱导胰岛素抵抗小鼠胰岛IRc/IRS-1低表达

目的:观察高脂饮食诱导的胰岛素抵抗模型小鼠胰岛上胰岛素受体(IRc)/胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的变化。方法:20只雄性昆明小鼠随机分为高脂饲料模型组和普通饲料对照组,每组各10只。喂养20周后,观察两组小鼠大体情况,称量体重(BW),酶法测空腹血糖(FBG),酶联免疫法测空腹胰岛素(FIns)浓度,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);HE染色观察胰岛组织学变化;免疫组织化学染色分析胰岛IRc/IRS-1的表达。比较两组各检测指标的统计学差异。结果:模型组FBG、HOMA-IR明显高于对照组(P均0.01);胰岛边界欠完整,内部结构紊乱,伴炎性细胞浸润;IRc/IRS-1的表达较对照组明显降低(P均0.05)。结论:高脂饮食可成功诱导小鼠外周胰岛素抵抗,且胰岛上IRc/IRS-1的表达降低。     

糖尿病非酒精性脂肪肝病大鼠肝组织胰岛素受体、瘦素受体 mRNA的表达

目的：观察2型糖尿病大鼠肝脏的病理变化,探讨肝组织胰岛素受体（insulin R）、瘦素受体（leptin R）mRNA表达在糖尿病性非酒精性脂肪肝病（NAFLD）发病机制中的作用。方法：SD大鼠随机分成2组：正常组与2型糖尿病组。2型糖尿病组在以高脂饮食4周后,加小剂量(30 mg/kg)链脲佐菌素（STZ）诱导2型糖尿病性非酒精性脂肪性肝病大鼠模型,继续给予高脂饮食12周。分别采用HE染色、苏丹Ⅲ染色、Masson染色光镜下观察肝脏组织的病理改变;透射电镜观察肝脏超微结构改变;生化法检测血糖、血甘油三酯（TG）、血总胆固醇（TC）、丙氨酸转氨酶（ALT）和天门冬氨酸转氨酶（AST）水平;放免法检测血清胰岛素水平;ELISA法检测血清瘦素水平;RT-PCR法检测肝组织磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶（PEPCK）、葡萄糖-6-磷酸酶（G6Pase）、insulin R、leptin R mRNA表达水平。结果：糖尿病大鼠肝细胞明显脂肪变性、碎片状坏死伴炎细胞浸润及肝纤维化病变,电镜下主要表现为肝细胞核固缩,胞浆内含大量脂滴,狄氏间隙胶原纤维增生;血糖、血胰岛素、TG、ALT、AST水平明显升高（P<0.01）,TC水平升高(P<0.05）,血清瘦素水平明显下降（P<0.01）;肝组织insulin R、leptin R mRNA表达显著升高（P<0.01）,PEPCK、G6Pase mRNA表达无显著变化。结论：2型糖尿病时的胰岛素抵抗是NAFLD发生的根源,由于胰岛素抵抗而致的低血清瘦素水平、肝组织insulin R、leptin R 表达上调参与了NAFLD的发生。     

U937细胞向巨噬细胞分化过程中清道夫受体BI(SR-BI)表达的变化

目的： 研究应用佛波酯使U937细胞向巨噬细胞分化过程中清道夫受体BI (SR-BI)蛋白及mRNA表达的变化。 方法： 用免疫细胞化学法、Western印迹法及RT-PCR法检测U937细胞诱导分化前和100 nmol/L PMA诱导分化24、48和72 h SR-BI蛋白及mRNA的表达。 结果： 诱导分化24、48及72 h，免疫细胞化学法检测的U937巨噬细胞SR-BI表达的平均积分吸光度值分别为15.94±3.56、27.86±4.39 及 9.08±2.37，前两者的平均积分吸光度值明显高于未分化细胞的SR-BI表达(7.76±1.74, P<0.05)；Western印迹法中诱导分化组SR-BI蛋白表达量分别是未分化组的2.08(P<0.05)、3.15(P<0.05)和1.24倍(P>0.05)。 RT-PCR结果显示，未分化组与各分化组SR-BI mRNA相对表达量分别是0.112±0.006、0.235±0.014、0.344±0.140和0.138±0.010。 结论： U937细胞向巨噬细胞分化过程中SR-BI蛋白及mRNA表达随着时间而先升高后降低，这种变化可能与泡沫细胞形成有关。     

姜黄素衍生物B06对2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用

 目的:研究姜黄素衍生物B06对2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用及机制。方法:雄性SD大鼠35只,随机均分成5组：正常对照组、高脂组、高脂治疗组、糖尿病组和糖尿病治疗组。采用高脂饮食加链脲佐菌素诱导2型糖尿病大鼠模型。高脂治疗组及糖尿病治疗组用0.2 mg· kg-1·d-1B06灌胃8周。治疗结束后用光镜和透射电镜观察大鼠肝组织的形态学改变,并用Western blotting方法检测肝脏AMP活化蛋白激酶α（AMPKα）和磷酸化AMPKα（p-AMPKα）蛋白的表达。结果:高脂组及糖尿病组大鼠肝脏显示肝细胞脂肪变性、坏死,炎症细胞浸润,纤维组织增生,2型糖尿病大鼠和高脂血症大鼠肝脏组织p-AMPKα表达降低;经B06干预后,糖尿病大鼠和高脂血症大鼠肝脏的形态学损害明显得到改善,且肝脏组织p-AMPKα的表达水平升高（P<0.05）。结论:B06对2型糖尿病大鼠的肝脏具有保护作用,可能与其上调肝脏p-AMPKα蛋白表达有关。     

Caveolin-1在高盐饮食损伤糖尿病大鼠血管中的作用

目的:观察1型糖尿病(DM)大鼠给予高盐饮食后内皮细胞功能障碍的可能机制。方法:SD大鼠(150~180 g)60只,腹腔注射链唑霉素(70 mg/kg),3 d后空腹血糖≥16.7 mmol/L为1型DM大鼠。正常大鼠和DM大鼠分别给予正常饮食和高盐饮食(8%Na Cl)6周。检测肠系膜动脉舒张功能,Western blot技术检测血管中Akt、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、caveolin-1(Cav-1)等蛋白的水平。结果:高盐饮食DM大鼠收缩压显著高于DM组,其肠系膜动脉乙酰胆碱和胰岛素的舒张作用显著下降(P0.01)。Akt、p-e NOS和NO水平均显著低于DM组(P0.01),Cav-1显著增高(P0.01)。结论:1型糖尿病大鼠高盐饮食血管功能障碍可能与抑制内皮细胞Akt激活及增强Cav-1表达导致的e NOS活性下降有关。     

高脂膳食对SR-AⅠ/Ⅱ基因敲除小鼠白色脂肪组织中UCP2 mRNA表达的影响

目的：观察SR-AⅠ/Ⅱ基因敲除（SR-AⅠ/Ⅱ-/-）小鼠白色脂肪组织中UCP2 mRNA的表达，探讨其与SR-AⅠ/Ⅱ-/-小鼠肥胖易感的关系。方法：应用荧光定量 RT-PCR检测小鼠附睾周白色脂肪组织中UCP2 mRNA的表达；图像分析法评估附睾周脂肪细胞形态学变化；酶法检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）血脂水平。结果：经12周高脂饲料喂养，SR-AⅠ/Ⅱ-/-小鼠的体重、血脂（TG、TC、LDL-C）水平、附睾周脂肪垫重量、脂肪细胞面积和直径均大于野生（SR-AⅠ/Ⅱ+/+）对照小鼠（P<0.01）；白色脂肪组织UCP2 mRNA表达量低于SR-AⅠ/Ⅱ+/+小鼠（P<0.01）。结论：SR-AⅠ/Ⅱ-/-小鼠对膳食诱导肥胖（diet-induced obesity, DIO）易感可能与其白色脂肪组织UCP2 mRNA表达异常有关。     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠肝脏糖皮质激素受体表达的影响

目的： 观察银杏叶提取物（EGB）对2型糖尿病大鼠肝脏糖皮质激素受体(GR)表达的影响,并探讨其机制。方法：雄性SD大鼠30只随机均分成3组：正常对照组、糖尿病对照组、EGB干预组。后两组采用高脂饮食4周,按30 mg/kg 腹腔注射链脲佐菌素（STZ） 诱导2 型糖尿病大鼠模型, EGB干预组给予50 mg·kg-1·d-1EGB连续灌胃12周。治疗结束取血生化检测血糖、血脂水平,放免法检测血胰岛素水平,HE染色光镜下观察肝脏组织的形态学改变,以RT-PCR法检测肝组织GR mRNA的表达水平,免疫组化法检测肝组织GR蛋白表达水平。结果：EGB可降低糖尿病大鼠血糖、血脂、血胰岛素水平,减轻肝细胞脂肪变性、坏死、炎细胞浸润,使肝组织GR mRNA的表达与蛋白表达明显减低。结论：EGB具有抑制2型糖尿病大鼠肝脏GR基因mRNA表达与蛋白表达的作用,这可能是其降低2型糖尿病大鼠血糖、血脂水平,改善肝内脂肪沉积的重要机制之一。     

高脂高胆固醇饮食对apoE-/-/LDLR-/-/Leprdb/db小鼠肝组织基因表达差异的影响

目的：研究高脂高胆固醇饮食对三基因突变(apoE-/-/LDLR-/-/Leprdb/db)小鼠肝脏基因表达的影响, 分析这些差异表达基因与血脂代谢紊乱和动脉粥样硬化（AS）的关系。 方法： 利用cDNA表达谱芯片检测普通饮食和高脂高胆固醇饮食喂养的三基因突变小鼠肝脏基因表达差异;分别用COD-PAP,GPO-PAP法测定血浆总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）浓度;并观察了主动脉形态变化。 结果： 在被测的4 000条基因中，高脂高胆固醇饮食组较普通饮食组小鼠上调基因为78条，下调114条，包括脂代谢、糖代谢、细胞骨架蛋白和免疫与炎症等相关基因。高脂高胆固醇饮食组血浆TC和TG水平均高出普通饮食组。5周龄时，两组小鼠均有主动脉内膜损伤，而高脂高胆固醇饮食组重于普通饮食组，并随年龄增长而加重。 结论： 高脂高胆固醇饮食对三基因突变小鼠血脂代谢紊乱乃至AS的发生发展有明显促进作用。     

白细胞介素10基因对未发病非肥胖型糖尿病小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响

背景：研究发现肝脏细胞在给予转入胰-十二指肠同源盒1基因后可合成胰岛素,抗CD20单克隆抗体可抑制产胰岛素的肝脏细胞发生自身免疫反应,但机制尚不明确。 目的：了解腺病毒介导的小鼠白细胞介素10(Adenovirus vector-mediated murine interleukin,Ad-mIL-10)及抗CD20单克隆抗体联合干预未发病非肥胖糖尿病模型小鼠,对其肝脏细胞以及肝脏胰-十二指肠同源盒1表达的影响。 方法：3-5周龄雌性未发病非肥胖糖尿病模型小鼠40只,随机分为抗CD20单克隆抗体组、抗CD20单克隆抗体+白细胞介素10组、白细胞介素10组和对照组,分别于第1,8,15,21天尾静脉注射抗CD20单克隆抗体、抗CD20单克隆抗体+ Ad-mIL-10、Ad-mIL-10和生理盐水。  结果与结论：12周后,与对照组相比,经抗CD20单克隆抗体和/或白细胞介素10治疗的未发病非肥胖糖尿病模型小鼠血糖水平明显降低,而血清和肝脏中胰岛素、白细胞介素10和CD20表达明显增加,同时肝脏中胰-十二指肠同源盒1表达水平增加;且经抗CD20单克隆抗体和白细胞介素10联合对上述指标的影响高于单独应用;但无论是联合干预还是单独干预均对小鼠肝脏炎症病变无明显影响。证实CD20单抗及白细胞介素10基因联合干预为促使非肥胖糖尿病模型小鼠肝脏胰-十二指肠同源盒1表达机制之一。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：肾移植;肝移植;移植;心脏移植;组织移植;皮肤移植;皮瓣移植;血管移植;器官移植;组织工程     

实时FQ-PCR检测链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠模型胰腺survivin基因的表达

目的：研究链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠胰腺survivin基因mRNA表达，了解其在胰岛损伤中的作用。 方法： 小剂量多次注射STZ的方法建立糖尿病小鼠模型，每周测定体重及血糖，并采用实时荧光PCR方法检测胰腺survivin基因mRNA表达水平。 结果： 正常BALB/c小鼠胰腺有survivin基因表达。STZ组体重在4周内无明显改变；血糖在第1周即明显升高；survivin表达水平在3、4周显著升高。对照组体重持续增加，血糖及survivin表达水平各周间无显著差异。 结论： 正常小鼠胰腺有survivin基因表达，STZ注射后survivin表达水平显著升高，可能与胰岛恢复有关。     

RXR/VDR激动剂对糖尿病ApoE-/-小鼠胸主动脉硬化及NF-κB表达的调控

 目的：探讨视黄醇X受体（RXR）激动剂贝沙罗汀（Bex）和维生素D受体（VDR）激动剂骨化三醇（Cal）对链脲佐菌素（STZ）诱导的载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠胸主动脉硬化及NF-κB表达的影响。方法: 动物分6组：C57组、ApoE-/-组、STZ-ApoE-/-组、STZ-ApoE-/-+Bex（10 mg·kg-1·d-1）组、STZ-ApoE-/-+Cal（10 μg/kg）组和STZ-ApoE-/-+Bex+Cal组。STZ腹腔注射复制糖尿病动物模型,Western blotting法及免疫组化法测定小鼠胸主动脉中NF-κB的表达,HE染色观察小鼠胸主动脉斑块的面积。结果：与C57组相比,ApoE-/-组的血糖水平无明显差别,血清总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白（LDL）水平升高（P<005）;STZ-ApoE-/-组的血糖及血清TC和LDL水平较ApoE-/-组明显增高（P<005）,Bex和Cal对小鼠的血糖及血清TC、LDL无影响。与C57组相比,ApoE-/-和STZ-ApoE-/-小鼠胸主动脉的NF-κB蛋白表达显著增加;与STZ-ApoE-/-组相比,Bex和Cal均显著降低NF-κB的水平（P<0.05）,联合用药降低更明显（P<001）。与STZ-ApoE-/-组相比,Bex和Cal可缩小STZ-ApoE-/-小鼠的胸主动脉斑块面积（均P<005）;与Bex组相比,联合组斑块面积缩小的程度有显著差异（P<005）。结论：Bex和Cal可降低STZ-ApoE-/-小鼠胸主动脉粥样硬化斑块面积及NF-κB的表达,联合有协同作用,由此推论Bex和Cal的抗动脉粥样硬化机制可能与其对NF-κB的调节有关。