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1.
目的建立可溶型CD100(sCD100)的微孔板式化学发光检测试剂盒,并初步用于临床脑脊液标本的检测。方法利用空军军医大学免疫学教研室制备的2株抗CD100单克隆抗体(mAb),在夹心ELISA的基础上,优化实验条件,建立sCD100化学发光免疫检测方法;对该方法的灵敏度、精密度进行评价;并检测了18例脑脊液标本的sCD100水平。结果化学发光法检测sCD100在0.098 ng/mL~12.5 ng/mL范围内线性关系良好,检测敏感性能达到0.12 ng/mL。批内变异系数为3.8%~6.6%,批间变异率为6.2%~14.1%。用该方法检测病毒性脑炎患者脑脊液,平均sCD100水平显著升高,2例患者标本分别高出正常均值9.4及13.8倍。结论成功建立了快速、敏感和稳定的sCD100化学发光检测法,可用于脑脊液标本中微量sCD100的定量分析。  相似文献   

2.
目的 探讨不同标本类型及室温放置时间对血液B型钠尿肽(BNP)测定结果的影响.方法 纳入本院住院患者80例,采用BD公司EDTA抗凝管、肝素抗凝管和分离胶血清管同时采集血标本(按EDTA抗凝血测定结果:BNP> 100pg/mL65例;BNP< 100 pg/mL 15例),BNP于1h检测完毕.并配对选取三类标本中BNP水平的高、中、低值各3例,室温闭盖放置,分别测定2h、3h、4h、5h和7h的BNP结果.BNP采用贝克曼库尔特公司DXI800仪器进行检测.结果 肝素抗凝标本的BNP测定值显著高于EDTA标本(588.9±708.4 vs 549.2±639.8,t=-2.184,P=0.32);血清标本显著低于EDTA标本(431.6±517.3 vs 549.2±639.8,t=7.229,P<0.001).以EDTA组测定值为y值,线性回归分析的回归方程分别为Y(EDTA)=0.886X(肝素)+ 27.445(R2=0.962,P<0.001)和Y(EDTA)=1.08X(血清)+82.924(R2=0.763,P<0.001).室温放置对测定结果的影响,EDTA标本高、中值标本7h内的检出率皆高于95%,低值标本5~7h检出率低于95%;肝素标本高值2h检出率低于95%,中、低值3h皆低于95%;而血清标本2~7h的高、中、低值标本检出率皆低于95%.结论 不同标本类型可显著影响BNP测定值;EDTA抗凝标本室温闭盖放置4h内测定值可接受.  相似文献   

3.
目的:探讨人内皮细胞中一种新的可溶型黏附分子sCD226的表达调变规律。方法:用ELISA方法,检测不同浓度的LPS刺激人脐静脉内皮细胞后不同时间点培养上清中sCD226含量的变化;用Greiss法检测上述细胞培养上清中N0含量的变化,并分析两者的线性相关性。加入抗TNF-α中和抗体和iNOS抑制剂后,观察其对LPS诱导sCD226生成的影响。结果:①随着LPS刺激剂量的增加和刺激时间的延长,HUVEC培养上清中sCD226的含量明显增加,100mg/L LPSS刺激3d后sCD226的含量为188.5μg/L。②LPS刺激剂量为100mg/L时,HUVEC培养上清中sCD226和N0的含量呈显著的正相关。③抗TNF—α中和抗体和iNOS抑制剂可显著抑制LPS活化的HUVEC产生sCD226。结论:LPS可诱导HUVEC产生sCD226分子,且sCD226的生成与N0和TNF-α的产生密切相关。  相似文献   

4.
为提高临床利用多重微球流式免疫荧光法检测细胞因子结果的准确性,收集临床患者的外周血标本,比较血清、血浆、不同保存条件以及干扰物质对12种细胞因子(IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70、IL-17、IFN-γ、IFN-α和TNF-α)检测结果的影响。结果显示,血浆和血清中IFN-α、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-10、IL-12p70和IL-17水平差异无统计学意义(P>0.05),而IL-6和IL-8在血清中的水平显著高于血浆(P<0.05); EDTA-K2抗凝全血在4℃保存24 h对部分细胞因子浓度有一定影响,而离心获得的血浆在4℃保存48 h细胞因子水平显著降低(P<0.05);对检测过程中微球丢失或微球荧光信号异常增强的血浆标本经小鼠免疫球蛋白预处理后,检测信号与分析结果均恢复正常。该研究提示,临床检测细胞因子建议采用EDTA-K2抗凝的血浆标本,且细胞因子在4℃保存24 h较稳定;对于检测过程中出现微球丢失或荧光信号异常增强的标本,...  相似文献   

5.
目的:检测强直性脊柱炎(AS)患者血清中可溶性CD137(sCD137)的表达水平并探讨其在强直性脊柱炎发病中的意义。方法:选择AS患者57例,健康体检者30例作为正常对照组,用ELISA检测AS患者、健康体检者血清sCD137水平,同时测定AS患者的红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、人类白细胞抗原B27(HLA-B27)。用统计学分析各组血清中sCD137的变化及其与相关临床指标的相关性。结果:初治组患者血清sCD137水平显著高于正常组及治疗组(P<0.05),治疗组患者血清sCD137水平与正常对照组无显著性差异(P>0.05)。按骶髂关节CT结果进行分组:Ⅰ、Ⅱ级AS患者血清sCD137水平高于正常对照组(P<0.05),Ⅲ级AS患者血清sCD137水平与正常对照无显著差异。按Bath强直性脊柱炎活动指数(BASDAI)进行评价分组,活动组患者血清sCD137水平显著高于正常对照组(P<0.05),静止组患者血清sCD137水平与正常对照组无显著性差异。HLA-B27阳性患者与HLA-B27阴性患者血清sCD137表达水平无显著差异。AS患者血清sCD137与ESR、CRP呈正相关(P<0.05)。AS患者年龄及性别与患者血清sCD137无明显相关性。结论:AS患者血清中sCD137的水平显著升高,提示sCD137在AS患者病情活动判定上具有一定的意义,可能参与了AS发病过程。  相似文献   

6.
目的:探讨妊娠期女性凝血、抗凝和纤溶系统功能检测的临床价值。方法:选择2019-01—2019-04期间本院进行产前检查的女性927例(观察组),选取同期本院体检的健康女性270例作为对照组,对以上两组凝血、抗凝和纤溶指标[血浆凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、抗凝血酶原-Ⅲ(AT-Ⅲ)和D二聚体(D-D)]进行检测分析并比较组间差异。结果:观察组血浆PT、APTT、TT、AT-Ⅲ水平均明显低于对照组,而FIB和D-D浓度明显高于对照组(P均0.01),APTT、FIB、AT-Ⅲ和D-D四项指标异常率明显高于对照组(P均0.01),而PT和TT两项指标异常率与对照组差异无统计学意义(P0.05)。结论:妊娠期女性血液呈高凝状态,加强孕妇凝血、抗凝和纤溶系统功能的监测,对及时了解孕妇凝血状态,提升孕妇安全,防治并发症有重要指导意义。  相似文献   

7.
目的 研究慢性乙型肝炎患者血清中sCD40水平及其临床意义.方法 采用酶联免疫方法 检测176例慢性乙型肝炎患者血清中sCD40浓度,分析患者血清中sCD40浓度与临床轻重程度及肝组织不同炎症坏死分级的关系.结果 慢性乙型肝炎患者血清中sCD40浓度明显高于健康人,临床病情越重、肝组织炎症坏死越明显,sCD40浓度越高;在ALT低于80 IU/L的患者中,sCD40浓度大于80 pg/ml的患者中肝组织炎症坏死G2以上的占65.85%,明显高于sCD40浓度低于80 pg/ml的患者.结论 血清中sCD40水平与肝组织炎症坏死的程度呈正相关,可作为用于辅助判断乙肝患者病情的免疫学指标.  相似文献   

8.
目的 探讨4种真空采血管对常规生化检测结果的影响.方法 选择2021年1月至6月于佳木斯传染病院的100例健康志愿者作为研究对象,利用常规血清分离胶真空采血管以及分别添加肝素锂、乙二胺四乙酸钾和枸橼酸钠的抗凝真空采血管于清晨空腹收集志愿者血液标本.采用全自动生化分析仪对生化项目检测,检测项目包括三酰甘油、白蛋白、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、肌酸激酶、葡萄糖、尿素,对检测结果进行统计学分析与比较.结果 与血清生化检测值比较,肝素锂抗凝血浆的葡萄糖(glucose,Glu)水平明显升高(P<0.05);乙二胺四乙酸钾抗凝血浆的天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平明显降低(P<0.05);枸橼酸钠抗凝血浆的尿素(urea anhydride,UREA)、AST、肌酸激酶(creatine kinase,CK)和白蛋白(albumin,Alb)水平均明显降低(P<0.05).结论 含有不同抗凝剂的真空采血管对生化检测结果有一定影响,应根据检测项目不同采用不同抗凝血浆代替血清,添加肝素锂抗凝剂的真空采血管在急诊生化检测中具有一定可行性.  相似文献   

9.
目的为了探索病理性凝血血浆间相互作用的微观机制,设计内源性凝血接触激活实验,研究促凝性表面诱发的内源性凝血的条件以及诱发的主要因素。方法本文采用了干净的玻璃珠和硅烷化玻璃珠,从而得到亲水性能不同的促凝颗粒表面,来确定因子Ⅶ的激活与亲水性的关系;利用缓冲液PBS冲洗促凝剂表面,再与乏血小板血浆反应,对比各凝血时间的变化,研究血浆蛋白对凝血时间的影响。结果 (1)在亲水表面FⅫ-FⅫa的激活表现出特异性,在疏水表面的活化反应相对明显减弱(P0.0001),FⅫ与疏水促凝剂接触激活获得更多FⅫa;(2)在疏水表面FⅫ的激活率和产物都是显著衰减,但是活化FⅫ与疏水表面结合紧密(P0.0001),与蛋白质和疏水表面黏附更紧密的结论一致;(3)FⅫ与500mm~2促凝表面在孵育30min时凝血时间和FⅫ的活化产物更为稳定。结论促凝剂表面能量依赖"催化潜力"促使FⅫ-FⅫa的激活;凝血表面积相同的情况下,PPP血浆内FⅫ的活化率及活化量在疏水促凝剂表面明显低于亲水性表面;与蛋白质和疏水表面更易吸附活化相反,在含疏水促凝剂表面的全血浆中FⅫ的活化明显比亲水性的慢,从而产生了一种表面能依赖的催化潜力的外观。  相似文献   

10.
目的探究原发性肝癌患者血浆中可溶性免疫检查点的表达水平及其在原发性肝癌患者预后中的意义。方法采用液相芯片技术检测58例肝癌患者和30例健康对照者血浆中sCD28、sCD80、sCD137、sCD27、sGITR、sTIM3、sCTLA4、sHVEM、IDO、sLAG3、sBTLA、sPD1、sPDL1及sPDL2的表达水平并作对比分析, 同时分析可溶性免疫检查点水平与肿瘤复发的关系。结果 sCD28和sCD80在巴塞罗那肝癌分期(Barcelona Clinic Liver Cancer, BCLC) 0/A、B期患者中的水平高于健康对照和C期患者, 差异有统计学意义(P<0.05), 而sCD27和sHVEM在BCLC C期水平较0/A、B期明显下降, 甚至低于健康对照者水平。BCLC 0/A、B期患者血浆sCD137、IDO、sPD1水平高于健康对照者, sPDL1和sPDL2在各期肝癌患者中的水平均高于健康对照者, 从0/A、B到C期维持高水平状态, 不同分期肝癌患者间差异无统计学意义。介入治疗24个月后, 复发肝癌患者术前血浆中sCD28水平低于未复发肝癌患者(t=2.8...  相似文献   

11.
目的 :建立一种检测可溶型CD2 2 6 (sCD2 2 6 )的双mAb夹心ELISA ,并用于临床标本的检测。方法 :确定包被mAbLeoA1和HRP mAbFMU3的最佳工作浓度及最佳稀释液后 ,建立双mAb夹心ELISA ,并对方法的特异性、敏感性和稳定性进行鉴定。再以建立的方法检测临床标本。结果 :包被mAbLeoA1的最佳工作浓度为 2 .5mg/L ,HRP mAbFMU3的最佳工作浓度 1∶4 0 0 ,标准品及HRP mAb的最佳稀释液分别为 1g/LBSA 1mL/LTween2 0 PBS和 30 g/LPEG PBS .建立的双mAb夹心ELISA ,其特异性 (与人IgG无交叉反应 ,阻断实验中阻断效应呈剂量依赖性 )、敏感性 (检出下限为 110ng/L标准品CD2 2 6 /Fc融合蛋白 )及稳定性 (CV <10 .2 % )均较良好。对部分临床标本的检测中 ,发现 6例类风湿关节炎(RA)患者血清sCD2 2 6的水平升高 ,与正常人血清sCD2 2 6水平相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :建立一种特异性高、重复性好、较敏感的检测sCD2 2 6的双mAb夹心ELISA ,初步证明可用于临床标本的检测  相似文献   

12.
目的 分析标本采集量不足对凝血检测项目结果的影响.方法 收集采集量不足及足量采血的对照组标本共23对,分别检测凝血酶原时间(PT),活化部分凝血活酶时间(APTT),凝血酶时间(TT),纤维蛋白原(FIB),D-二聚体(D-Dimer)和纤维蛋白/纤维蛋白原降解产物(FDP)的含量.结果 采血量不足组与对照组相比PT、APTT、TT显著延长,FIB和D-Dimer含量显著降低,而FDP含量没有明显变化.结论 凝血标本采集量不足会影响检测结果的准确性.  相似文献   

13.
血清sCD44s及sCD44v6变化与乳腺癌的初步研究   总被引:1,自引:1,他引:1       下载免费PDF全文
目的:测定血清中sCD44s和sCD44v6含量并探讨其在乳腺癌中的临床意义。方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测38例乳腺癌患者及15例乳腺良性疾病患者和40例正常人血清中可溶性CD44s(sCD44s)和可溶性CD44v6(sCD44v6)的水平。结果:乳腺癌患者血清sCD44s和sCD44v6水平明显高于正常人和乳腺良性疾病患者(P<0.01)。Ⅲ、Ⅳ期患者血清sCD44s和sCD44v6明显高于Ⅰ、Ⅱ期(P<0.05);乳腺癌手术后1周sCD44v6明显低于手术前(P<0.05),手术后2周sCD44v6更加明显(P<0.01);手术后2周sCD44s明显低于手术前(P<0.05)。结论:血清sCD44s和sCD44v6水平可作为诊断、治疗乳腺癌的辅助指标;乳腺癌血清中sCD44s和sCD44v6升高及降低与肿瘤负荷有关。  相似文献   

14.
目的:观察腹腔镜手术对患者血液凝固性的影响及其与患者血浆α颗粒膜蛋白(plasma alpha-granule membrane protein 140,GMP-140)、D-二聚体及血管性血友病因子(von Willebrand factor,VWF)表达水平的关系.方法:选取湘西自治州人民医院治疗的无血栓形成危险因素的ASA I~II级妇科患者75例,其中39例行腹腔镜手术治疗,36例行开腹手术治疗.分别在手术前、手术结束即刻、手术结束后24 h采集血液标本,检测血浆凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)、凝血酶时间(thrombin time,TT).患者在采用酶联免疫吸附法定量测定血浆标本中GMP-140,D-二聚体,VWF表达水平.结果:腹腔镜组,与手术前比较,手术结束即刻PT明显延长(P<0.05),术后24 h,患者PT延长,FIB明显升高,TT时间明显缩短(P<0.05).两组患者GMP-140,D-二聚体,VWF表达水平在手术结束后即刻以及术后24 h明显高于术前(P<0.05);其中腹腔镜组3种检测因子的表达水平均明显高于同期的开腹组(P<0.05).结论:腹腔镜手术可导致患者血液凝固性增加,且此状态的产生与GMP-140,D-二聚体及VWF表达水平增加有密切关系.  相似文献   

15.
目的 探讨乳腺癌患者血清可溶性CD146[又称为黑色素瘤细胞粘附分子(MCAM)](sCD146)水平与肿瘤组织MCAM基因甲基化状态及患者临床病理特征之间的关系.方法 收集2019年5月至2020年5月在我院确诊并接受手术治疗的148例原发性乳腺癌患者的新鲜肿瘤组织和癌旁组织以及术前血液样本,另收集30例健康体检人群的血液样本作为正常对照组.采用甲基化定量PCR技术(qMSP)确定组织中MCAM基因甲基化程度,并采用ELISA法检测血清sCD146水平.用Pearson法分析乳腺癌患者两项指标之间的相关性.结果 对于乳腺癌患者,血清sCD146水平高于正常对照组人群(P<0.05),且乳腺癌组织MCAM基因甲基化程度的中位数明显低于相应的癌旁组织(P<0.05).血清sCD146水平与肿瘤组织中MCAM基因甲基化程度呈负相关性(r=-0.461,P<0.001).此外,血清sCD146水平与肿瘤组织中MCAM基因甲基化程度与肿瘤T分期、分级、Ki-67表达及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达有关(P<0.05).而且三阴性乳腺癌患者血清sCD146水平和组织MCAM基因低甲基化率最高,显著高于Luminal A型和Luminal B-HER2-型(P<0.05).结论 乳腺癌患者血清sCD146水平较健康对照人群普遍升高,以三阴性乳腺癌患者升高最明显,这可能与肿瘤组织中MCAM基因发生去甲基化有关;而且血清sCD146水平也随着肿瘤T分期和组织学分级增加而逐渐升高.  相似文献   

16.
目的 探讨不同的血液采集方式对血中髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)含量的影响.方法 同时采集50例普通患者的含肝素钠、EDTA-K2两种抗凝剂的血浆标本和血清标本,分别检测各种标本中的MPO含量,并对各组结果进行配对t检验统计分析和相关性分析.结果 同一患者含肝素钠和EDTA-K2两种不同抗凝剂的血浆标本MPO含量之间均存在显著性统计学差异;含肝素钠抗凝剂的血浆标本与不含抗凝剂的血清标本之间也存在显著性统计学差异.同时,肝素钠组与其余两组间有一定相关性,但不呈高度相关性.结论 不同的血液采集方式对血液中髓过氧化物酶(MPO)含量的检测结果影响较大,建议检测时采用肝素抗凝的血浆样本.  相似文献   

17.
分析老年人(年龄在60岁以上)外周血T细胞膜型CD28(mCD28)及血清中可溶性CD28(sCD28)的表达水平,探讨该分子在老年人免疫功能改变中的意义。分别收集肝素抗凝及不抗凝的老年人外周血,抗凝血经分离获取单个核细胞,间接免疫荧光及流式细胞仪分析,老年人T细胞mCD28的阳性表达率为男性(41.56%±11.23%)及女性(42.97%±12.02%)。与年轻人[男性(61.51%±17.45%)及女性(62.38%±16.22%)]相比,差别具有显著性(P<0.01)。酶联免疫吸附法(ELISA)检测,老年人血清中sCD28的含量为男性(1.08±0.45)及女性(0.98±0.47)ng/ml,与青年人[男性(0.55±0.16)及女性(0.52±0.13)ng/ml]相比,差别具有显著性(P<0.01)。老年人T细胞mCD28的表达水平下降,而血清中sCD28的含量升高。  相似文献   

18.
建立双抗体夹心法CA19-9时间分辨荧光免疫分析(TRFIA),探讨抗凝剂EDTA对其检测结果的影响,并对本法的稳定性和与Abbort Axsym测定结果的相关性等指标进行评价.分别按一步法和二步法对CA19-9进行测定,并比较血清标本和用EDTA处理的血浆标本对CA19-9结果的影响.结果表明本试剂盒的线性范围为0.19~600U/mL,灵敏度为0.19U/mL,批内和批间CV(%)分别为1.1%~5.4%,1.2%~5.6%.对3230份标本用本试剂盒检测与Abbort Axsym试剂盒检测结果相关系数为0.931.一步法中EDTA处理血浆标本的检测结果明显低于血清标本,二步法中两者无显著性差异.本试剂盒各项指标达到规定的要求,可用于临床血清CA19-9检测.使用中采用血清或血浆标本时要用二步法进行测定,以减少EDTA对结果的影响.  相似文献   

19.
关丽 《医学信息》2006,19(5):871-872
目的观察类风湿性关节炎(RA)活动期外周血CT4+T淋巴细胞的表型变化,探讨其免疫病理机制。方法采用ELISA和双标记免疫荧光法检测50例活动期RA患者和50例健康成人外周血CD4+T细胞表面CD154、CD69的表达以及血清、血浆可溶性CD154(sCD154)的含量。结果活动期RA患者的外周血CD4+T细胞CD154(16.8%±7.9%)和CD69(14.1%±8.2%)的表达水平均显著高于健康人,其血清sCD154(18.56±6.32,ng/ml)和血浆sCD154(8.41±3.51,ng/ml)含量亦分别高于健康人血清sCD154(9.56±4.71,ng/ml)和血浆sCD154(2.98±1.13,ng/ml)。结论CD4+T细胞表达的CD154、CD69以及血浆sCD154含量与RA的活动相关,可以作为RA的辅助诊断、疗效评价和预后判断的有价值的实验室参数。  相似文献   

20.
目的观察CD100、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)、MMP9在冠心病患者中的变化,评估MMP2/9对T细胞中CD100的调控在冠心病发病中的作用。方法 24例稳定性心绞痛(stable angina, SA)、22例不稳定性心绞痛(unstable angina, UA)、31例急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI)和18例对照者入组本研究。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆可溶型CD100(sCD100)、MMP2、MMP9水平,流式细胞术检测T细胞中膜型CD100(mCD100)平均荧光强度(MFI)。分选CD4~+和CD8~+T细胞,使用CD100、MMP2/9和抗CD100抗体刺激,ELISA法检测上清中细胞因子水平,实时定量PCR法检测CD4~+T细胞中转录因子T-bet、GATA-3、FoxP3、RORγt和CD8~+T细胞中穿孔素、颗粒酶B mRNA相对表达量。结果 AMI组血浆sCD100、MMP2、MMP9水平高于对照组、SA组和UA组,AMI组CD4~+和CD8~+T细胞中mCD100 MFI低于对照组、SA组和UA组(P0.05)。CD100刺激后CD4~+T细胞分泌干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-17、IL-22水平及T-bet、RORγt mRNA相对表达量升高(P0.05)。CD100刺激后CD8~+T细胞分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)、IFN-γ水平及穿孔素、颗粒酶B mRNA相对表达量升高(P0.05)。MMP2或MMP9单独刺激AMI患者CD4~+T细胞,上清sCD100、mCD100 MFI无明显变化,MMP2+MMP9联合刺激后,上清sCD100升高,mCD100 MFI降低,分泌IFN-γ、IL-17、IL-22水平及T-bet、RORγt mRNA相对表达量升高(P0.05),加入抗CD100抗体后CD4~+T细胞中上述指标较联合刺激组降低(P0.05)。MMP2、MMP9或MMP2+MMP9联合刺激AMI患者CD8~+T细胞,上清sCD100升高,mCD100 MFI降低,TNF-α、IFN-γ水平及穿孔素、颗粒酶B mRNA相对表达量升高(P0.05),加入抗CD100抗体后CD8~+T细胞中上述指标较联合刺激组降低(P0.05)。结论 AMI患者中,高表达的MMP2/9促进T细胞mCD100脱落,上调sCD100水平,诱导T细胞活化。  相似文献   

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