外周血循环滤泡辅助性T 细胞及IL-21 在银屑病中的表达及意义

目的:探讨外周血循环滤泡辅助性T 细胞(Follicular helper T cells,Tfh)及相关细胞因子IL-21 在银屑病患者中的表达水平及其与疾病活动度的关系。方法:收集38 例银屑病患者及32 例健康对照者,流式细胞术检测外周血循环CD4+CXCR5+ Tfh 和CD4+ CXCR5+ ICOS+ Tfh 细胞比例以及Th17 细胞比例;ELISA 检测血清IL-21 浓度;分析这些指标间及与银屑病疾病活动度评分PASI 间的相关性。结果:与健康对照者相比,银屑病患者外周血循环CD4+ CXCR5+ Tfh 和CD4+ CXCR5+ ICOS+Tfh 细胞比例更高,血清IL-21 浓度和Th17 细胞比例亦显著高于对照组(P<0.05);IL-21 浓度与CD4+ CXCR5+ Tfh 和CD4+CXCR5+ ICOS+ Tfh 细胞比例均显著正相关,而与Th17 细胞比例间无显著相关性(P>0.05);且CD4+ CXCR5+ ICOS+ Tfh 细胞比例和血清IL-21 与银屑病疾病活动度PASI 评分显著正相关,而CD4+ CXCR5+ Tfh 则与之无显著相关性(P>0.05)。结论:银屑病患者外周血循环Tfh 比例、IL-21 浓度上调与银屑病患者疾病活动度密切相关,提示Tfh 可能参与银屑病的发生发展过程,这一效应可能是通过分泌高水平IL-21 实现;IL-21 浓度与Tfh 细胞比例相关,而与Th17 细胞比例无相关性提示银屑病患者IL-21可能主要由Tfh 细胞分泌。     

急性期川崎病患儿滤泡辅助性T细胞改变观察

目的 探讨滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)在儿童川崎病(Kawasaki disease,KD)中的数量变化及其可能机制.方法 急性期川崎病患儿20例,采用流式细胞术检测外周血CD4+CXCR5+ICOS+T细胞(Tfh)的比例,采用real-time PCR检测转录调节因子Bcl-6、Blimp-1 mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测血浆中IL-4和IL-21浓度;20例同龄健康儿童作为对照组.结果 (1)急性期KD患儿Tfh细胞比例明显高于正常对照组[(2.6±0.6)％vs(1.8±0.7)％,P＜0.05];(2)Tfh细胞转录因子Bcl-6 mRNA表达较正常对照组明显增高(P＜0.05),其拮抗因子Blimp-1 mRNA表达降低(P＜0.05);(3)血浆IL-21和IL-4蛋白浓度明显高于正常对照组(P＜0.05).结论 Tfh细胞过度活化可能参与了KD免疫发病机制,Bcl-6/Blimp-1表达失衡,IL-4和IL-21细胞因子微环境改变可能与Tfh细胞异常活化有关.     

外周血CD4+CXCR5+滤泡辅助性T细胞与慢性乙型肝炎患者高球蛋白血症相关

目的 检测外周血CD4+ CXCR5+滤泡辅助性T细胞(Tfh细胞)的频率及其表面标志,分析与慢性乙型肝炎(乙肝)患者高球蛋白血症的关系.方法 收集健康人、乙肝患者及乙肝高球蛋白血症患者的外周血,分离血浆及外周血单个核细胞(PBMC),ELISA检测血浆中IL-21、CXCL13和IFN-γ水平,流式细胞术检测PBMC中CD4+ CXCR5+ Tfh细胞的频率及其表面PD-1、ICOS及CD40L的表达情况.结果 乙肝高球蛋白血症患者外周血CD4+ CXCR5+ Tfh细胞占CD4+T细胞的百分比(22.6±4.7)％明显高于普通慢性乙肝患者(11.9±3.9)％及健康志愿者(6.8±3.9)％,CD4+ CXCR5+ Tfh细胞上PD-1和CD40L的表达水平升高,血清IL-21及CXCL13水平升高,而IFN-γ水平降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 外周血CD4+ CX-CR5+ Tfh细胞与乙肝高球蛋白血症的发病相关.     

人外周血和扁桃体中Tfh细胞与其他Th细胞亚群之间的关系

目的比较观察人外周血和扁桃体Tfh细胞的表型以及与Th1、Th17、Th22细胞亚群之间的关系。方法分离正常人PBMC及扁桃体单个核细胞,利用anti-CD3+anti-CD28或PMA+ionomycin刺激后,采用ELISA和流式细胞术(FCM)检测其细胞因子的产生,分析Tfh与Th1、Th17、Th22细胞亚群之间的关系。结果与PBMC中CD4+T细胞不同,扁桃体CD4+T细胞高表达CXCR5和CD45RO,低表达CCR7和CD62L;与PBMC中CD4+T细胞相比,扁桃体CD4+T细胞IL-21和IL-17产生水平较高,IFN-γ产生水平较低,IL-22水平无显著差异;外周血和扁桃体CD4+T细胞中均存在一定比例的IL-21+IL-17+双阳性、IL-21+IL-22+双阳性、IL-21+IFN-γ+双阳性细胞,IL-21单阳性细胞在扁桃体CD4+T细胞中所占比例明显高于外周血;外周血和扁桃体CD4+CXCR5+细胞除表达IL-21外,还表达IL-17、IL-22和IFN-γ。结论扁桃体中存在较多数量的Tfh细胞,大多数Tfh细胞是不同于Th1、Th17和Th22的细胞亚群。     

滤泡辅助性T 细胞( Tfh) 在乳腺癌中的作用

滤泡辅助性T细胞(Tfh)是一种特殊类型的辅助性T细胞,位于生发中心的Tfh细胞表达CXCR5、Bcl-6、IL-21、CXCL13等分子,通过协助B细胞的分化在体液免疫应答过程中发挥关键作用。借助于流式细胞术、免疫组化等方法,发现Tfh细胞也存在于乳腺癌肿瘤组织中,其表型为PD-1~(hi)CXCR5-ICOS~(int)Bcl-6~(int)IL-21~+CXCL13~+,提示其参与了抗肿瘤免疫。Tfh细胞相关基因,特别是CXCL13基因的表达对乳腺癌预后判断有一定的价值。位于乳腺癌淋巴结中的Tfh细胞呈CXCR5~+Bcl-6~+Foxp3~-,可能接受其他CD4~+T细胞的调控或与其协同作用,影响体液免疫应答。目前对乳腺癌Tfh细胞的功能特征和预后价值尚缺乏系统和深入的研究,以乳腺癌Tfh细胞为靶点的进一步研究将有助于加深对乳腺癌肿瘤微环境的认识,同时也有可能为今后乳腺癌的免疫干预提供潜在的靶点。     

ILC2及Tfh的活性与肺腺癌免疫抑制状态的相关性研究

为探讨ILC2和滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell, Tfh）是否协同促进并维持肺腺癌免疫抑制状态,选择肺腺癌患者为研究对象,采用FACS检测患者外周血中ILC2和Tfh的比例;qRT-PCR检测外周血ILC2及Tfh相关因子的表达水平,并对ILC2及Tfh进行相关性分析。结果显示,与对照组比较,肺腺癌患者外周血中ILC2的比例及其相关因子IL-33、IL-25、胸腺基质淋巴细胞生成素（thymic stromal lymphopoietin,TSLP）、IL-13、IL-5及IL-4 mRNA的表达水平均升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXC趋化因子受体5（CXC chemokine receptor 5, CXCR5）⁺T细胞及PD-1⁺CXCR5⁺Tfh的比例升高（P<0.05）,CD3⁺CD4⁺CXCR5^-T细胞的比例下调（P<0.01）,Tfh相关...     

过敏性哮喘患者外周血CXCR5~+CD4~+T细胞的变化及其细胞因子表达研究

本研究旨在探讨过敏性哮喘患者外周血CXCR5~+CD4~+T细胞数量、表型变化及其细胞因子的分布特征。选取25例过敏性哮喘患者、25例非过敏性哮喘患者及27例性别和年龄相匹配的健康对照作为研究对象,流式细胞术检测外周血中CXCR5~+CD4~+T细胞数量及表型,胞内细胞因子染色方法检测细胞因子分布情况。结果显示过敏性哮喘和非过敏性哮喘组外周血CXCR5~+CD4~+T细胞比例均高于健康组[(19.24±5.39)vs(8.24±1.68),P0.01;(17.79±4.01)vs(8.24±1.68),P0.01],而患病两组间无明显差异(P0.05)。患病两组患者外周血CXCR5~+CD4~+T细胞表面PD-1[(15.82±2.71)vs(7.64±1.87),P0.01;(14.28±3.68)vs(7.64±1.87),P0.01]、ICOS[(9.82±2.27)vs(4.98±1.76),P0.01;(10.53±2.08)vs(4.98±1.76),P0.01]表达均高于健康组,而患病两组间差异无统计学意义(P0.05)。患病两组CXCR5~+CD4~+T细胞胞内IL-21的表达均显著高于正常对照组(P0.01)。而CXCR5~+CD4~+T细胞胞内IL-4仅在过敏性哮喘患者中高表达(P0.01)。CXCR5~+CD4~+T细胞胞内IL-17、IFN-γ的表达在三组之间无差异(P0.05)。过敏性哮喘组患者IL-4+CXCR5~+CD4~+T细胞、IL-21+CXCR5~+CD4~+T细胞比例与血清总IgE水平呈正相关(r=0.652,P=0.003;r=0.523,P=0.021)。研究结果表明过敏性哮喘和非过敏性哮喘两种表型哮喘在外周血CXCR5~+CD4~+T细胞数量、表型上未见差异,一群高表达IL-4的CXCR5~+CD4~+T细胞可能在过敏性哮喘疾病机制中具有重要意义。     

PGE_2在CIA中的表达及其与Tfh的相关性分析

研究前列腺素E_2(prostaglandin E_2,PGE_2)在胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)小鼠体内的表达,并分析其与滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell,Tfh)之间的相关性。结果显示,与对照组相比,CIA小鼠血清前列腺素E代谢物(prostaglandin E metabolite,PGEM)浓度显著升高,小鼠脾脏和淋巴结中CD4~+CXCR5~+ICOS~+Tfh的比例、CD4~+Bcl-6~+Tfh的比例、CD4~+IL-21~+T细胞的比例均明显增高,且PGEM与上述细胞比例均呈正相关。该研究表明,CIA中PGE_2的表达与Tfh的比例存在正相关性。     

IL-21在滤泡辅助性T细胞分化发育及功能中的作用

抗原刺激B细胞产生抗体需要T细胞辅助,近年来人们逐渐认识到一个命名为滤泡辅助性T细胞(Tfh)的CD4+T细胞亚群在B细胞诱导的免疫应答中具有重要作用.Tfh细胞的主要特征包括表达趋化因子受体与(CXCR5),迁移定位于B细胞滤泡辅助B细胞产生抗体.Tfh细胞产生的细胞因子IL-21能够促进B细胞分化为抗体形成细胞,这种辅助性细胞因子在Tfh细胞的分化发育、效应发挥及Tfh细胞功能失调相关的疾病中具有重要意义.     

重组干扰素-α增强口蹄疫重组疫苗诱导滤泡辅助性T细胞的研究

目的通过观察重组干扰素-α(IFN-α)佐剂在口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)重组疫苗免疫应答中对滤泡辅助性T细胞(follicular T helper cells,Tfh细胞)的免疫调节作用,为IFN-α佐剂免疫调节的新机制提供实验依据。方法 6周龄雌性Balb/c小鼠分为3组,实验组联合免疫表达猪IFN-α的重组腺病毒(r Ad5po IFN-α)和表达FMDV VP1的重组腺病毒(r Ad5VP1),另设2对照组,分别注射r Ad5VP1和空载体腺病毒(Advirus)。免疫后7 d,应用流式细胞术检测脾脏淋巴细胞中Tfh细胞(CD4+CXCR5+PD-1+)和生发中心(germinal center,GC)B细胞(B220+GL-7+)的增殖分化;real-time PCR技术检测Tfh细胞转录因子Bcl-6m RNA的表达水平;ELISA方法检测血清中细胞因子IL-21蛋白的表达水平。结果与单独免疫r Ad5VP1组相比,联合免疫r Ad5po IFN-α和r Ad5VP1能明显促进FMD重组腺病毒疫苗诱导小鼠Tfh细胞和GC B细胞的增殖分化;重组IFN-α能明显促进FMD重组腺病毒疫苗诱导小鼠Bcl-6 m RNA的表达,提高小鼠血清中IL-21蛋白的分泌水平。结论重组IFN-α能有效增强FMD疫苗诱导小鼠Tfh细胞免疫,为IFN-α佐剂免疫调节作用的新机制提供了理论依据。     

滤泡辅助性T细胞(T_(fh))的研究进展

T细胞辅助B细胞抗体的生成是体液免疫应答的中心环节.但直到最近,科学家们才对T细胞辅助B细胞的细胞及分子机制有了更清楚的认识.滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh)是最近明确的一种新的CD4+T细胞亚群,其主要功能是辅助B细胞参与体液免疫.Tfh的表型和功能与其他CD4+T细胞亚群有所不同,包括趋化因子受体的表达(如CXCR5)、定位和迁移(Tfh存在于B细胞滤泡)及其辅助B细胞的功能.Tfh产生的细胞因子IL-21在Tfh功能中处于核心地位,通过与其受体IL-21R结合,可有效地刺激B细胞分化成抗体形成细胞.因此Tfh细胞相关分子(如ICOS或IL-21)的高表达或低表达,很可能与某些自身免疫性疾病或免疫缺陷疾病的发病有关.     

IL-21在滤泡辅助性T细胞分化发育及功能中的作用

抗原刺激B细胞产生抗体需要T细胞辅助,近年来人们逐渐认识到一个命名为滤泡辅助性T细胞（Tfh）的CD4^＋T细胞亚群在B细胞诱导的免疫应答中具有重要作用。Tfh细胞的主要特征包括表达趋化因子受体与（CXCR5）,迁移定位于B细胞滤泡辅助B细胞产生抗体。Tfh细胞产生的细胞因子IL-21能够促进B细胞分化为抗体形成细胞,这种辅助性细胞因子在Tfh细胞的分化发育、效应发挥及Tfh细胞功能失调相关的疾病中具有重要意义。     

流式细胞术鉴定人外周血滤泡辅助性T细胞

目的:用免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)鉴定正常人外周血单个核细胞(PBMC)中滤泡辅助性T(Tfh)细胞, 以便对其功能进行进一步研究.方法:密度梯度离心法分离人PBMC, 采用不同荧光素标记的抗CXCR5、 CD4及CD19抗体进行染色FCM分析, 鉴定出表型为CD4+CXCR5+的T细胞亚群.结果:外周血可以检测到CD4+CXCR5+T细胞亚群, 占CD4+T淋巴细胞百分比为(11.09±0.38)%, MFI值为25.78±0.72, 低于B细胞膜表面CXCR表达水平(MFI值为99.6±8.1).结论:健康人外周血存在一定比例的Tfh细胞, 应用FCM可以成功鉴定Tfh细胞, 为进一步研究其功能提供了良好的技术平台.     

滤泡辅助性T细胞在原发性干燥综合征中的研究进展

滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell, Tfh)是辅助B细胞的主要CD4⁺T细胞亚群,其特点是表达转录因子B细胞淋巴瘤6(B-cell lymphoma 6,Bcl-6)以及趋化因子受体5(C-X-C chemokine receptor type 5,CXCR5)、诱导性共刺激分子(inducible co-stimulator, ICOS)、PD-1等表面分子和产生细胞因子IL-21。Tfh的分化是一个多步骤、多因素参与的过程。原发性干燥综合征(primary Sj?gren’s syndrome, pSS)是一种以外分泌腺局灶性淋巴细胞浸润为特点的全身性自身免疫性疾病。越来越多的研究表明,Tfh参与pSS的发病过程,是pSS的潜在生物标志物,一些治疗pSS的药物可影响Tfh从而缓解病情。该文对近年来Tfh在pSS中的研究进展进行综述。     

SLE患者外周血中CD4~+CXCR5~+T细胞表达ICOS和PD1的相关性研究

本研究检测ICOS、PD-1在SLE患者外周血CD4+CXCR5+T细胞上的表达水平并分析其与SLE临床特征的相关性。采用流式细胞仪检测60例SLE患者及40例健康对照组外周血中CD4+CXCR5+T细胞占CD4+T细胞的比例,同时检测CD4+CXCR5+T细胞上ICOS、PD-1的表达水平,并分析其与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、SLE肾脏损害及临床指标之间的相关性。结果显示,SLE患者外周血中CD4+ICOShighT细胞、CD4+ICOShighCXCR5+T细胞、CD4+PD1highCXCR5+T细胞比例显著高于健康对照组(P0.05);CD4+ICOShighCXCR5+T细胞比例与SLE患者的抗dsDNA抗体水平呈正相关(P0.05),与SLEDAI评分、免疫球蛋白、C3、C4、ESR、CRP无相关性(P均0.05);SLE患者血清IL-21水平较健康对照组显著升高(P0.05)。提示,循环外周血中生物标志分子高表达的CD4+CXCR5+T细胞异常,可能参与SLE的发病。     

外周血滤泡辅助性T细胞与B细胞在酒精性股骨头坏死患者中的作用

目的:探讨酒精相关性股骨头坏死患者外周血滤泡辅助性T细胞、B细胞、白细胞介素(IL)-21的表达水平与疾病临床相关指标的相关性及其在酒精性股骨头坏死发病机制中的作用。方法:流式细胞仪测定酒精性股骨头坏死患者和健康对照组外周血中Tfh和B细胞的水平;ELISA法检测患者和健康对照血清中IL-21的表达水平。结果:酒精性股骨头坏死患者外周血CD19+B细胞、CD86+CD19+B细胞、CD95+CD19+B细胞Tfh细胞、PD-1+Tfh细胞和IL-21+Tfh细胞百分率高于对照组;外周血Tfh细胞百分率与CD19+B细胞百分率呈正相关,外周血IL-21+Tfh细胞百分率与CD86+CD19+B细胞百分率呈正相关,CD27+CD19+B细胞较对照组明显减少,CD86+CD19+B细胞百分率与股骨头坏死评分呈正相关。结论:酒精性股骨头坏死患者外周血Tfh细胞及B细胞水平显著增高,CD86+B细胞与疾病进展具有相关性,且Tfh细胞与B细胞的变化在疾病中具有显著的相关性,提示Tfh-B细胞相互作用在酒精性股骨头坏死的发病过程中发挥着重要作用。     

儿童持续性免疫性血小板减少性紫癜患儿滤泡辅助性T细胞改变初探北大核心CSCD

目的：探讨滤泡辅助性T细胞（ T follicular helper , Tfh）在儿童持续性免疫性血小板减少性紫癜（ persistent immune thrombocytopenic purpura , pITP ）免疫发病机制中的可能作用。方法pITP患儿20例,采用流式细胞术检测外周血循环CD4＋CXCR5＋ICOShigh PD-1high T （ cTfh）细胞比例及CD19＋B细胞ICOSL（inducible co-stimulator ligand）的表达,采用实时荧光定量PCR（real-time PCR）检测Bcl-6、c-Maf、IL-21 mRNA及CD19＋B细胞ICOSL mRNA表达,酶联免疫吸附试验检测血浆IL-2、IL-6、IL-21浓度。结果（1）pITP患儿cTfh细胞比例明显高于正常对照组[（17．45±9．04）％ vs （7．57±2．57）％, P＜0．05],地塞米松（DEX）治疗7 d后cTfh细胞比例明显低于治疗前[（5．93±1．64）％vs （17．45±9．04）％,P＜0．05];（2）Tfh细胞转录调节因子Bcl-6及c-Maf表达较正常对照组明显增高（P＜0．05）;（3）pITP患儿CD19＋B细胞ICOSL蛋白和基因表达明显增高（P＜0．05）,DEX治疗后CD19＋B细胞ICOSL表达与治疗前相比无明显改变（P＞0．05）;（4）Tfh细胞相关细胞因子IL-21血浓度和基因表达水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,DEX 治疗后仍显著高于对照组（P＜0．05）,IL-2及IL-6血浆浓度治疗前后与正常对照组相比无明显改变（P＞0．05）。结论 ICOSL和IL-21表达异常所致Tfh细胞过度活化可能与pITP患儿免疫发病机制有关;B细胞持续高表达ICOSL和IL-21持续高水平可能是导致pITP患儿病情反复发作的原因之一。     

Graves患者外周血CD4+ CXCR5+ T细胞的检测及临床意义

Graves病(GD)是一种常见的自身免疫性甲状腺病.近来研究表明CD4+CXCR5+滤泡辅助性T细胞(Tfh)在促进B细胞产生抗体的过程中起重要作用.本研究通过检测GD患者外周血CD4+CXCR5+T细胞及其表面分子表达的变化,探讨其在GD发病中的作用.     

滤泡辅助性T细胞及其相关因子在HIV疾病进展中的变化研究北大核心CSCD

目的通过对不同疾病进展阶段的HIV感染者外周血滤泡辅助性T细胞（follicular helper T cell, Tfh）进行分析,探讨Tfh及其相关因子对HIV感染疾病进程的影响,为进一步研究Tfh在HIV抗病毒治疗和疫苗研究提供科学依据。方法本研究招募HIV-1感染者33例,根据疾病进展情况分为HIV-1长期不进展者（long-term nonprogressors, LTNP）11例、快速进展者（rapid progressors, RP）10例、HIV典型进展者（typical progressors, TP）12例,同时招募11名健康人（normal control, NC）作为对照。分离受试者外周血单个核细胞,用多色流式的方法检测CD4＋CD45RA－CXCR5＋Tfh和CD4＋CD45RA－CXCR3－CXCR5＋PD-1＋Tfh及其表达ICOS、IFN-γ、IL-21因子的水平。此外,对血浆IL-10和CD19＋B细胞频数也进行分析,探讨Tfh与CD4、B细胞的关系。结果两个Tfh亚群比例在HIV-1感染人群均比正常对照高,CD4＋CD45RA－CXCR5＋Tfh在LTNP人群最高,与正常对照比较差异有统计学意义（P〈0.05）。Tfh相关因子ICOS、IFN-γ、IL-21在T细胞刺激剂作用下均有明显升高,ICOS＋Tfh与HIV-1疾病进展呈负相关,与CD19＋B细胞呈正相关（r＝－0.49,P〈0.01;r＝0.60,P〈0.05）。血浆IL-10的浓度在HIV-1感染者中有明显升高,TP组最高,其次为RP组（TP组vs NC组,P〈0.01;RP组vs NC组,P〈0.05）。结论外周血Tfh及其相关因子的表达在HIV-1感染者与健康对照者间差异有统计学意义,特定亚群Tfh与HIV-1疾病进展和B细胞功能密切相关。     

滤泡辅助性T细胞的分化及其与免疫性疾病的关系

初始B细胞迁移至外周淋巴器官后发生一系列的变化,其参与体液免疫应答的过程需要滤泡辅助性T细胞（Tfh）的辅助.Tfh是一类以高水平表达CXCR5为特征的T细胞亚群,其分化除了由转录因子Bcl-6调控外尚有多种因素参与,如IL-21、ICOS、T-B细胞间接触、抗体亲和力等.Tfh细胞在体内正常的免疫应答中起着重要作用,一旦其相关因子表达发生异常,将导致机体免疫功能紊乱,引发多种免疫性疾病和肿瘤.