姜黄素对前列腺癌PC-3M细胞生长抑制和凋亡的影响

为探讨姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞生长抑制及凋亡调控的作用,按姜黄素浓度分成10、20、30、40μmol/L4个处理组和对照组(未加姜黄素),处理PC-3M细胞不同时间后,倒置显微镜观察细胞形态;采用MTT法检测细胞的增殖抑制情况;荧光染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪进行细胞周期时相分析;免疫组化SP法检测细胞内caspase-3蛋白的表达水平。结果表明,与对照组比较,姜黄素处理组可使细胞明显变圆,体积缩小,脱壁细胞增多;MTT法检测显示,姜黄素处理组随着浓度增加和作用时间延长,对PC-3M细胞的增殖抑制作用增强,并呈时间、剂量依赖性(P<0.01);荧光显微镜下部分细胞发生凋亡形态学改变,对照组和4个处理组凋亡率分别为(9.83±1.53)%、(19.50±1.00)%、(24.83±2.52)%、(30.17±2.08)%和(38.50±2.65)%;流式细胞仪显示,处理组停滞在S、G2/M期细胞增加,而G0/G1期细胞减少;免疫组化结果显示,随着姜黄素浓度增加,caspase-3蛋白表达增强,呈剂量依赖性(P<0.01)。结论:姜黄素对人前列腺癌PC-3M细胞的生长具有明显抑制作用,上调caspase-3蛋白的表达,诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

姜黄素对前列腺癌PC-3细胞增殖的抑制作用

目的研究姜黄素对PC-3细胞增殖活性的影响。方法以不同浓度(10、20、40、60、80μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞24h,以中效浓度(40μmol/L)的姜黄素及顺铂作用于体外培养的PC-3细胞4、12、24、48、72h,后用MTT法检测在不同浓度及时间作用下PC-3细胞的抑制率,应用流式细胞仪检测PC-3细胞周期的变化。结果姜黄素对PC-3细胞的增殖抑制作用与顺铂相似(P>0.05),具有剂量时间依赖性,并随着药物浓度及时间的增加,抑制率逐渐增高,流式细胞仪检测显示:姜黄素和顺铂组都能使PC-3细胞生长明显阻滞于G2/M期,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。结论姜黄素可以明显抑制PC-3细胞的增殖,在临床治疗前列腺癌方面有着良好的应用前景。     

姜黄素对前列腺癌PC-3M细胞抗侵袭作用的研究

为探讨姜黄素对前列腺癌PC-3M细胞抗侵袭作用,将0～40μmol/L姜黄素分别处理PC-3M细胞24h后,Westernblot法检测MMP-2和TIMP-2蛋白表达,免疫组化SP法检测细胞内NF-κB蛋白的表达水平。结果表明,姜黄素可下调MMP-2和上调TMP-2的表达,抑制NF-κB的表达。结论：姜黄素通过下调MMP-2和上调TIMP-2的蛋白表达发挥抗侵袭作用,抑制NF-κB的表达可能是抗侵袭作用的机制之一。     

异常甲基化的原钙黏蛋白7对雄激素非依赖性前列腺癌细胞生长的影响

目的探讨异常甲基化的原钙黏蛋白7(PCDH7)对雄激素非依赖性前列腺癌(AIPC)细胞生长的影响。方法培养AIPC细胞系LNCaP-AI,采用甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(AZA)处理细胞24 h,RT-PCR和Western blot法检测PCDH7 mRNA和蛋白的表达水平,CCK-8法检测细胞生长情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell法检测细胞侵袭能力。结果加入AZA后,PCDH7基因启动子片段1甲基化水平为0.00486±0.00144,低于对照组的0.00956±0.00594,片段2甲基化水平为0.00610±0.00171,低于对照组的0.00858±0.00180(P<0.05),且PCDH7 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.01)。加入DNA甲基化转移酶1后PCDH7 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05)。加入AZA后,细胞生长抑制率和细胞凋亡率增加[(15.3%vs.0%)和(5.06%vs.3.44%)](P<0.01),侵袭细胞数下降(P<0.01)。结论异常甲基化的PCDH7在AIPC细胞中表达上调,能够抑...     

棘豆素对人雄激素非依赖性前列腺癌 PC-3细胞的作用研究

【】目的: 研究棘豆素(2′, 4′-dihydroxychalcone,TFC)对人雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞的作用,并探讨其作用机制。方法：CCK-8法检测药物对细胞增殖的影响,Hoechst 33258染色、荧光显微镜观察细胞的形态学变化,流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期的变化, Western blot检测药物对肿瘤细胞中P27kip1和PTEN蛋白表达的影响。结果：TFC能显著抑制PC-3细胞的增殖,细胞呈现凋亡形态学改变,细胞凋亡率明显增加,细胞周期阻滞于G0/G1期。此外,P27kip1和PTEN蛋白表达量明显增加。结论：TFC通过诱导PC-3细胞凋亡抑制肿瘤细胞增殖,可能与其G0/G1细胞周期阻滞,以及PTEN 和P27Kip1蛋白表达上调有关。     

姜黄素对顺铂所致大鼠肾毒性的防护作用

目的研究姜黄素(CMN)对顺铂(CDDP)所致肾损害的防护作用,并探讨其可能机制。方法将42只大鼠按体重随机分6组,分别为对照组、CMN组、CDDP组、CMN(204、0和80 mg/kg) CDDP组。CMN连续给予大鼠灌胃3 d,第2天灌胃后1 h腹腔注射CDDP(5.5 mg/kg)。CDDP处理后,分别在第1、3和5天采血,测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(CRE)。第5天采血后处死动物,测定肾脏系数、肾皮质匀浆丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及肾组织铂(Pt)含量等。同时利用体外实验观察对抗增殖作用的影响。结果CMN预处理可减轻CDDP引起的肾脏系数升高及BUN、CRE水平升高;能抑制CDDP引起的MDA形成增高;并能提升CDDP引起的GSH含量和GSH-Px活力下降。CMN低剂量的上述作用明显(P<0.05或P<0.01)。CMN防护组与CDDP组的人卵巢癌细胞系和膀胱癌细胞系的半数抑制浓度差异无显著性。结论CMN经口给予能防护CDDP所致的肾损害,其机制可能与其抗氧化作用和清除自由基活性有密切关系。较高剂量CMN未见防护CDDP所致肾毒性的作用,其原因可能与其助氧化作用有关。CMN对CDDP抗肿瘤细胞增殖作用无明显影响。     

姜黄素增加HepG2细胞对顺铂敏感性的作用及机制研究

目的　探讨姜黄素对肝癌细胞株HepG2 对顺铂敏感性的影响及其作用机制。方法　采用不同浓度姜黄素（0、2.5、5、7.5、10 μM）及顺铂（10、20、40、80 μM）单用或联用处理HepG2 细胞株后,通过MTT 检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Real-time PCR 技术检测Survivin、Cyto-C、Bcl2、Bax 的基因表达情况;western blot 检测Survivin、Cyto-C、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax 的蛋白表达。结果　姜黄素以浓度依赖性方式抑制HepG2细胞株Survivin 的mRNA 表达和蛋白表达（P<0.05）;姜黄素联合顺铂处理的HepG2 细胞增殖抑制率及细胞凋亡率较单用顺铂处理均明显增加（P<0.05）;姜黄素联合顺铂可显著抑制Survivin 的蛋白表达,降低Bcl-2/Bax 比例,增加Cyto-C、cleaved caspase-3 蛋白表达（P<0.05）。结论　姜黄素可增加HepG2 细胞对顺铂的敏感性,可能与其抑制Survivin 的表达,降低Bcl-2/Bax 比例,增加cleaved caspase-3、Cyto-C 蛋白的表达有关。     

姜黄素对顺铂所致大鼠肾毒性的防护作用及其可能机制

目的 顺铂（Cis-diamminedichloroplatinum，CDDP）是当前临床上应用较广泛的一种肿瘤化疗药物。目前，在国内外多种实体瘤治疗中被推荐为首选药物。CDDP却有诸多令人遗憾的毒副作用，特别是肾毒性。CDDP所致肾毒性的确切机制迄今尚不清楚，但大量最新实验研究表明，CDDP诱导氧化应激可能是其机制之一。姜黄素（curcumin，CMN）是中药姜黄（curcumalonga L）中的酚类色素成分，具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等广泛的药理作用，而且毒性很低。有关研究     

放疗对前列腺癌患者细胞雄激素受体的影响

目的 观察放疗对前列腺癌细胞雄激素受体的影响.方法 培养人前列腺癌细胞株LNCap及CWR22R,每个细胞株各分为两组,即放疗组及非放疗组,培养第3天,每组3个培养皿分别加入75%乙醇1nm（EtoH组,作为阴性对照）,比较放疗本身对细胞株ARmRA的影响）;加入DHT（二氢睾酮）1 nm及10 nm,DHT分别相当去势及正常睾酮水平.培养至第5天,放疗组进行放射治疗,剂量为2.7 Gy/min,持续3 min,放疗后24 h收集细胞;非放疗组不作放射治疗,RT-PCR方法比较每个细胞株组雄激素受体（AR）,PSA表达的改变,并重复试验3次.结果 放射治疗前后,EtoH组的ARmRNA,PSAmRNA差异无统计学意义,DHT1组ARmRNA,PSAmRNA显著下降（P〈0.01）,而DHT10组ARmRNA表达则显著上升（P〈0.01）,PSAmRNA轻度升高（P〉0.05）.结论在睾酮达去势水平的前列腺癌细胞,放疗有效;而在正常睾酮水平的前列腺癌细胞,放疗效果不佳.AR下降可作为放疗有效性的较灵敏指标.     

雄激素非依赖性前列腺癌发生机制相关的信号传导通路研究进展

几乎所有经过内分泌治疗的前列腺癌(prostate cancer,PCa)患者都会发展为雄激素非依赖性前列腺癌(androgen-independent prostate cancer,AIPC),而目前对AIP(尚无有效的治疗手段,因此,探索AIPC可能的发生机制成为基础与临床研究的重点,本文就与AIPC相关的信号传导通路研究进展做一综述.     

雄激素对前列腺癌细胞系PIP表达的影响

目的：探讨PIP在前列腺癌不同细胞系中的表达情况,以及雄激素对其表达的影响。方法：应用不同浓度（0、0.1、1、10、100 nmol/L）双氢睾酮（Dihydrotestosterone,DHT）或睾酮（Testosterone,T）及不同时间（6、24和48 h）对前列腺癌细胞系（LNCaP、PC-3、DU145）进行处理,通过RT-PCR及实时荧光定量PCR法检测PIP 及AR mRNA表达情况。通过Western blot法检测各细胞系（LNCaP、PC-3、DU145、T47D）中PIP蛋白表达情况。结果：实时荧光定量RT-PCR法与Western blot结果显示,雄激素依赖性前列腺癌细胞系LNCaP中有PIP mRNA及蛋白表达,PIP mRNA的表达随DHT或T浓度增加而增加,且于10 nmol/L浓度DHT或T时达到最大峰值。而AR mRNA的表达差异无统计学意义。雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3与DU145中无PIP mRNA及蛋白表达,并且AR表达较少或无AR表达。结论：PIP或许在前列腺癌发生发展中,以及鉴别前列腺癌是否具有雄激素依赖性方面有一定作用。     

神经降压素在雄激素非依赖性前列腺肿瘤动物模型中的表达

【摘要】目的观察神经降压素（NT）在原位前列腺肿瘤动物模型中的表达。方法利用原位种植包埋法和外科手术去势技术对Balbc-nu裸鼠分别构建雄激素依赖、去势3d和雄激素非依赖性原位前列腺肿瘤动物模型;Af? fymetrix基因芯片技术检测NT在3组肿瘤组织中mRNA的表达差异,运用荧光实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）验证结果;HE染色在光镜下观察肿瘤组织病理学改变;ELISA法测定裸鼠血清前列腺特异性抗原（PSA）浓度;免疫组织化学法检测3组肿瘤组织中NT的蛋白相对表达量。结果与雄激素依赖组比较,雄激素非依赖组和去势3d 组NTmRNA表达分别上调5.10和下调0.33;用RT-PCR和qRT-PCR验证其结果,雄激素非依赖组的表达水平较雄激素依赖组分别上调1.41和7.27（P＜0.01）,去势3d组的表达水平分别下调0.78和0.46（P＜0.05）;肿瘤组织HE 染色可见明显的核异型性和瘤节结构;雄激素依赖组PSA和NT结果均分别为（0.48±0.03）μg/L和0.031±0.008,去势3d组均分别为（0.17±0.03）μg/L和0.021±0.004,雄激素非依赖组均分别为（0.87±0.02）μg/L和0.042±0.010;与雄激素依赖组比较,去势3d组表达降低,雄激素非依赖组表达升高（P＜0.01）。结论NT在前列腺肿瘤由雄激素依赖向雄激素非依赖这一变化过程中起着一定的作用,可以作为雄激素非依赖性前列腺肿瘤治疗靶点和特异性诊断指标。     

姜黄素上调前列腺癌细胞LNCaP中maspin基因的表达

目的研究姜黄素对前列腺癌细胞LNCaP凋亡的影响和对maspin基因表达的调控作用。方法利用不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞LNCaP，MTT法和DNA 电泳检测不同时相LNCaP细胞的活性和凋亡情况，RT-PCR和Western blotting检测转录水平和翻译水平maspin基因的表达情况。将包含maspin 5′侧启动子区847 bp(-764～+83)DNA的荧光素酶表达载体pGL3-maspin瞬时转染LNCaP，姜黄素作用细胞48 h后，应用荧光素酶测定系统检测maspin启动子的表达活性作用。结果姜黄素抑制LNCaP细胞的生长活性，诱导LNCaP细胞的凋亡，增强LNCaP细胞中maspin基因的表达。结论姜黄素增强LNCaP细胞中maspin基因的表达是通过促进启动子的转录活性起作用的。     

姜黄素对前列腺特异抗原基因表达的抑制

目的研究姜黄素对前列腺特异抗原(PSA)表达的影响。方法化学发光法检测不同浓度的姜黄素处理前列腺癌细胞株LNCap后PSA含量，利用荧光素酶报告基因pGL-3构建含PSA基因5′侧启动子区640 bp DNA的荧光素酶表达载体pGL3-PSA，并将其转染LNCap细胞，不同浓度姜黄素作用24 h后应用荧光素酶测定系统检测荧光素酶表达活性。Western blotting检测姜黄素处理过的LNCap细胞雄激素受体(AR)的表达。结果姜黄素抑制PSA、荧光素酶和AR受体的表达,并有浓度依赖性。结论姜黄素通过抑制雄激素受体的表达减弱对PSA基因启动子的作用，从而抑制PSA的表达。     

去势抵抗前列腺癌中的非激素信号通路作用机制及其相关药物研究进展

前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见的恶性肿瘤之一,近十年来我国前列腺癌的发病率呈明显上升的趋势。目前,以雄激素阻断为主的内分泌治疗是除根治手术和放疗或化疗之外临床上比较主流的前列腺癌治疗方案,虽然在治疗前期能获得良好的临床收益,但近九成的患者仍会进入去势抵抗阶段,且其中又有近九成的患者会发生骨转移,患者的生活质量随着疾病进程急剧降低。有研究表明在形成去势抵抗的过程中,除雄激素信号通路外还涉及了多种其他分子信号的变化,包括经典的致癌信号通路和免疫炎症致癌信号通路等。了解这些独立于雄激素信号通路的其他信号通路在去势抵抗形成中的作用机制,将有助于了解雄激素阻断治疗在去势抵抗中的脱靶效应以及引入新的治疗靶点和治疗策略,推动去势抵抗摆脱临床"无药可用"的困境。     

油菜花粉脂溶性提取物对人前列腺癌细胞PC-3的体外生长抑制研究

目的探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3的杀伤效应。方法光镜观察用药前后PC-3细胞形态,透射电镜观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BPE对PC-3细胞凋亡的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bax/bcl-2基因表达。结果 BPE对PC-3细胞增殖有抑制作用,PC-3细胞随着BPE浓度的增高其活细胞数下降,呈负相关。透射电镜下可见:核结构破坏,染色质稀疏,有些凝聚成团。随着时间的延长,细胞凋亡率上升,BPE与多西他赛能一同促进PC-3细胞发生凋亡。BPE的作用效应不是通过bax/bcl-2基因。结论 BPE可抑制人前列腺癌细胞PC-3的增殖,诱导细胞的凋亡。     

作用于雄激素受体不同结合位点的前列腺癌治疗药物的研究进展

前列腺癌是最常见的男性泌尿生殖系统的恶性肿瘤。雄激素受体在前列腺癌的发生、发展中起着重要作用。目前,所有治疗前列腺癌的药物(包括第一代的氟他胺、比卡鲁胺、尼鲁米特和第二代的恩扎鲁胺)都与雄激素受体的配体结合口袋结合,并且这些药物有着相似的分子结构,这可能引起药物之间的交叉耐药。为了避免耐药性的产生,研究者们致力于发现雄激素受体上新的药物结合位点。除雄激素受体配体结合位点外,主要对作用于氮端结合位点上的第一活性功能区(AF1)、第二活性功能区(AF2)、AF2附近的第三结合功能区(BF3)和DNA结合位点(DBD)的药物进行综述。     

姜黄素介导微小RNA-199a-3p基因对前列腺癌细胞的影响

目的 探讨姜黄素调控微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)的表达对前列腺癌C4-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 (1)将体外培养的前列腺癌C4-2细胞分为4组:空白组(无药物干预)和低、中、高3个剂量实验组(20,40,80μmol·L-1姜黄素干预),选取对C4-2细胞的增殖抑制最明显姜黄素浓度用于...     

槲皮素联合喜树碱促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡

目的考察槲皮素联用喜树碱对人前列腺癌PC-3细胞凋亡的影响。方法体外培养PC-3细胞,用CCK-8实验、细胞周期检测实验和Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测实验,考察槲皮素联用喜树碱对PC-3细胞增殖凋亡的影响;用Western-Blot实验检测凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、PARP1和Caspase-3)的表达。结果 CCK-8实验结果显示槲皮素和喜树碱都可以一定程度地抑制PC-3细胞增殖,诱导凋亡作用,其中槲皮素和喜树碱联用效果更优。药物作用48 h后其半数抑制浓度(IC₅₀)分别为38.76、2.25、1.88μmol·L^-1。细胞周期实验显示,药物联用组细胞周期处于S期的细胞比例明显高于单用组(P<0.05);细胞凋亡实验显示,药物联用组的细胞凋亡率显著高于单用组(P<0.05);Western-Blot结果显示,药物联用组对凋亡相关蛋白的影响更为明显,使Bcl-2蛋白表达下降为47%,分别使Bax、PARP1和Caspase-3依次增加1.17、0.77和0.69倍(P<0.05)。结论槲皮素联合喜树碱能够显著促进人前列腺癌PC-3细胞的凋亡。