子宫内膜腺癌组织vasohibin的异常表达及其生物学意义

目的:探讨vasohibin基因在子宫内膜腺癌(EEC)中异常表达的机制及其临床意义。方法:收集正常增生期子宫内膜组织10例,分泌期子宫内膜组织10例,EEC组织49例。荧光定量PCR和蛋白质印迹方法检测上述组织中vasohibin基因的表达;甲基化PCR方法检测vasohibin基因启动子的甲基化。结果:EEC组织中vasohibin基因mRNA表达量为(2.35±0.55)×103 copy/μg RNA,明显低于PE〔(3.39±0.65)×103 copy/μgRNA,P<0.001〕和SE组织〔(3.22±0.74)×103 copy/μg RNA,P<0.001〕。EEC组织中vasohibin蛋白表达的相对含量(0.87±0.18)明显低于PE(1.12±0.13,P=0.002 5)和SE组织(1.09±0.21,P=0.007 4)。Vasohibin基因表达与EEC的组织学分级(P=0.106)、肌层浸润(P=0.086)、有无淋巴结转移(P=0.160)和手术病理分期(P=0.440)无关。部分EEC中存在vasohibin基因启动子甲基化。甲基化EEC组织中vasohibin基因mRN...     

BRCA1基因甲基化及甲硫氨酸合成酶与乳腺癌发病的关系

背景与目的:启动子异常甲基化是肿瘤发生的早期事件,肿瘤组织中存在的DNA甲基化异常可以概括为广泛低甲基化伴局部高甲基化.甲硫氨酸合成酶(methionine synthase,MS)是参与甲基供体生成的关键酶,为DNA的甲基化提供甲基.本研究探讨抑癌基因BRCA1 mRNA在乳腺癌组织中的表达及启动子区甲基化状态,及MS基因mRNA表达与BRCA1基因甲基化的关系.方法:应用RT-PCR及甲基化特异性PCR(methylationspecific PCR,MSP)技术检测乳腺癌组织、相应癌旁组织(距癌>3 cm)和乳腺良性病变组织中BRCA1 mRNA的表达及其启动子甲基化状态,并检测MS mRNA的表达水平.结果:乳腺癌组织、癌旁组织及良性病变组织BRCA1mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05);乳腺癌组织中BRCA1基因启动子区甲基化检出率明显高于癌旁组织和良性病变组织(χ2=7.631,P<0.05),BRCA1基因启动子区甲基化与散发性乳腺癌组织学分级、雌激素受体(estrogen receptor,ER)相关(P<0.05).乳腺癌组织MS基因表达量明显低于乳腺良性病变及乳腺癌旁组织(P<0.05).MS mRNA的表达与BRCA1基因甲基化的发生有相关性(r=0.419,P<0.05).结论:BRCA1甲基化能够增加乳腺癌的患病风险,MS基因可能通过影响部分肿瘤相关基因发生甲基化而调控其表达.     

食管鳞状细胞癌组织Bin1基因启动子甲基化状态及其临床意义

目的:探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell cancer,ESCC)患者的食管鳞癌组织、癌旁组织中Bin1基因启动子甲基化状态及其mRNA的表达及其临床意义.方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测58例经病理证实的ESCC患者的食管鳞癌组织、癌旁组织中Bin1基因mRNA的表达情况;用甲基化特异性PCR(MSP)检测上述食管鳞癌组织中Bin1基因启动子甲基化状态,比较ESCC患者Bin1甲基化状态与临床病理分期的关系.结果:ESCC组织中Bin1基因启动子甲基化率明显高于癌旁组织(58.62％ vs 25.86％,x2=12.76,P＜0.01),Bin1甲基化状态与患者TNM分期、肿瘤侵润深度、分化程度、淋巴结转移相关(均P ＜0.05).ESCC组织中Bin1 mRNA的表达水平明显低于癌旁组织[(0.78 ±0.05) vs (1.03±0.03),t=9.643,P＜0.01)];发生Bin1甲基化的组织中Bin1 mRNA表达水平明显低于未发生甲基化的组织[(0.68±0.04) vs (0.85±0.07),t=2.476,P＜0.05].结论:Bin1基因启动子区甲基化状态可能与ESCC的发生密切相关,它是ESCC中Bin1 mRNA低表达或缺失的机制之一,且与ESCC进展和淋巴结转移有关.     

miR-204启动子甲基化作为结直肠癌表观遗传生物标志物的临床研究

目的 探讨miR-204启动子甲基化在结直肠癌(CRC)中的临床意义。方法 收集2018年1月至2020年3月于我院就诊的69例CRC患者血浆样本、肿瘤组织标本和癌旁正常结肠黏膜组织标本；另外招募68例健康志愿者作为正常对照组，采集血浆样本。使用肿瘤基因图谱计划(TCGA)数据库与基因芯片数据(Methyl450K)分析肿瘤和正常组织中识别的CpG位点的甲基化水平。采用定量甲基化特异性PCR法(qMSP)和实时荧光定量PCR法(qPCR)检测样本中miR-204启动子区甲基化状态和基因表达量。结果 TCGA数据表明miR-204表达与宿主基因TRPM3的表达协调下调，并确定了miR-204启动子周围的两个CpG岛。与癌旁组织比较，CRC组织中miR-204启动子甲基化参考百分比(PMR)升高[1.78(0.35,16.61)vs. 1.51(0.45,2.98),P<0.001],且与miR-204表达量呈负相关(r=-0.324,P=0.007),与DNA甲基转移酶1 mRNA呈正相关(r=0.502,P<0.001)。此外，与正常对照组比较，CRC患者血浆cfDNA中m...     

同源异型盒基因HOXD10在乳腺癌组织中的表达及其临床病理意义

背景与目的：乳腺癌是威胁女性健康最常见的恶性肿瘤之一,从分子水平深入研究其癌变机制,对寻找新的标志基因具有重要意义.本研究探讨同源异型盒基因HOXD10基因在乳腺癌发生、发展进程中的可能作用.方法：以18s rRNA基因作为参照,采用荧光实时定量RT-PCR技术,以相对定量方法检测44例乳腺癌组织及16例乳腺良性病变组织中HOXD10 mRNA表达情况.结果：HOXD10在乳腺癌中的表达显著低于乳腺良性病变组织.组织学分级为Ⅲ级的乳腺癌标本中H0XD10 mRNA的表达显著低于组织学Ⅰ、Ⅱ级标本.H0XD10 mRNA的表达与淋巴结转移、肿瘤大小、TNM分期之间相关性不显著.结论：HOXD10基因在乳腺癌中呈低表达甚至表达缺失,由于这种基因可能为乳腺癌发生发展的抑制因素,因此对其我们应给予更多关注.     

子宫内膜样腺癌APC基因表达和甲基化的初步研究

背景与目的:子宫内膜癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一。在我国,近年来其发病率亦显著上升。APC基因是一种抑癌基因,在很多组织中都有表达,其表达与卵巢癌有一定的关系。本实验探讨APC基因的甲基化和表达与子宫内膜样腺癌的发生发展的关系。方法:运用甲基化特异性PCR、RT-PCR、免疫组化方法检测了30例正常的增生期子宫内膜组织、30例不典型增生的子宫内膜组织、60例子宫内膜样腺癌组织中APC基因的甲基化情况以及mRNA和蛋白的表达情况。结果:子宫内膜样腺癌组织中APC基因的甲基化率(65.0%)、mRNA表达率(33.3%)及APC蛋白表达率(30.0%)与不典型增生子宫内膜组织(33.3%、63.3%、50.0%)及正常子宫内膜(23.3%、73.3%、66.7%)相比,差异均具有显著性(P<0.05);而不典型增生子宫内膜组织和正常子宫内膜组织中,APC的甲基化率、mRNA表达率及APC蛋白表达率差异无统计学意义(P>0.05)。在这3种组织中,APC基因的甲基化和mRNA的失表达呈正相关关系。结论:APC的甲基化和表达与子宫内膜样腺癌的发生发展相关。     

肝细胞癌ASC基因启动子区甲基化及其mRNA表达研究

目的:探讨肝细胞肝癌(HCC)ASC基因启动子区甲基化与mRNA表达及其临床病理特征的关系.方法:运用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和实时荧光定量PCR技术,检测58例肝细胞癌及其相应癌旁组织、15例肝硬化肝组织、5例慢性病毒性肝炎肝组织和5例正常肝组织中ASC基因启动子区甲基化状态及其mRNA的表达水平.结果:58例肝细胞癌组织中有40例(69.0%)发生ASC基因启动子区甲基化,其相应癌旁组织中有27例(46.6%)发生该基因启动子区甲基化,而在肝硬化、肝炎和正常肝组织中均未检测到该基因启动子区甲基化.ASC基因在肝细胞癌组织中甲基化频率高于其相应癌旁组织(P=0.015).ASC基因启动子区甲基化与肿瘤直径(P=0.001)、生长方式(P=0.003)以及国际抗癌联盟第6版TNM(TNM6)分期(P=0.001)有关.以ASC基因在正常肝组织中的表达量为参照,58例肝细胞癌组织中有33例出现ASC基因mRNA低表达或表达缺失,其相应癌旁组织中有14例出现低表达或表达缺失,而在肝硬化及肝炎肝组织中ASC基因mRNA均呈正常表达.与癌旁组织相比,肝细胞癌组织中ASC基因mRNA表达明显下调(P<0.05).在发生ASC基因启动子区甲基化的40例肝细胞癌组织中有26例出现mRNA低表达.结论:ASC基因启动子区甲基化是肝细胞癌中的频发事件,可能在肝细胞癌的进展中起重要作用.     

荧光定量PCR检测外周血CK20 mRNA对子宫内膜癌微转移的诊断意义

目的:研究子宫内膜癌患者外周血中角蛋白20(CK20)mRNA的表达情况,并探讨荧光定量PCR(FQ-PCR)检测子宫内膜癌微转移的可行性及临床价值。方法:采用FQ-PCR方法对64例子宫内膜癌患者外周血、42例良性子宫病变患者及20位健康女献血员外周血中的CK20 mRNA表达水平进行检测;并同法检测20例术中切除的肿瘤组织的CK20 mRNA。结果:子宫良性病变患者及健康女性外周血中CK20 mRNA表达均<103copies/μL的检测下限;子宫内膜癌组织CK20 mRNA表达水平为(2.08±0.84)×106copies/μL,阳性率为100%。而64例子宫内膜癌患者外周血中CK20 mR-NA表达水平为(5.52±1.14)×104copies/μL,高表达率(阳性率)为40.6%(26/64)。CK20 mRNA表达水平与临床分期差异有统计学意义,P<0.05,与病理分级无关,P>0.05。结论:FQ-PCR可快速、灵敏地定量子宫内膜癌外周血CK20 mRNA的表达,对预测子宫内膜癌微转移以及判断患者预后具有一定指导意义。     

宫颈癌CDX2基因启动子区域甲基化的临床意义

摘 要：［目的］ 研究检测宫颈癌尾型同源盒基因2(caudal-related homeobox 2，CDX2)基因启动子区域甲基化程度的临床意义。［方法］ 选择50例诊断为宫颈癌患者(观察组)和50例宫颈良性病变患者(对照组)，采用甲基化特异性聚合酶链式反应检测组织中CDX2启动子甲基化水平，荧光定量聚合酶链式反应法检测CDX2 mRNA的表达量。根据TNM分期选择治疗方案，记录无瘤生存期、复发率和死亡率。［结果］ 观察组的甲基化率为70.0%(35/50)，对照组为20.0%(10/50) (P＜0.05)。观察组中随肿瘤淋巴结转移分期增加，组织学分级越低及病灶越大，甲基化越高(均P＜0.05)。观察组CDX2 mRNA明显低于对照组(P＜0.05)。观察组中随TNM分期增加、组织学分级越低及病灶越大，CDX2 mRNA表达越低(P＜0.05)。观察组甲基化阳性者无瘤生存期缩短，复发率和死亡率增高。临床分期、组织学分级、病灶大小、CDX2 mRNA和甲基化是宫颈癌生存的独立危险因素(P＜0.05)。 ［结论］ 宫颈癌CDX2基因启动子区域甲基化增加，CDX2蛋白表达降低，导致患者无瘤生存期缩短，复发率和死亡率增高。     

RECK和MMP-9在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中RECK(reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs)mRNA和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)mRNA的表达情况,探讨两者在子宫内膜癌中的临床意义。方法:选取2009年3月至2010年11月在滨州医学院附属医院妇科接受手术的子宫内膜癌患者组织标本42例,应用定量PCR法检测RECK mRNA及MMP-9 mRNA在子宫内膜癌中的表达情况,分析其相关性和临床意义。结果:在正常增生期子宫内膜、子宫内膜不典型增生、子宫内膜癌组织中RECK mRNA表达水平依次降低[(6.30±0.34)、(4.29±0.36)、(0.24±0.18),F=427.35,P<0.05],MMP-9 mRNA依次升高[(0.08±0.82)、(5.04±0.30)、(6.22±0.32),F=1117.52,P<0.05],RECK和MMP-9 mRNA的表达与子宫内膜癌临床分期、分化程度、淋巴转移关系密切(P<0.05),在子宫内膜癌中,MMP-9mRNA和RECK mRNA之间存在负相关(r=-0.478,P<0.01)。结论:定量PCR检测RECK mRNA和MMP-9 mRNA对子宫内膜癌早期诊断及预测癌前病变风险有一定参考价值。     

食管胃交界部腺癌中MGMT基因启动子区甲基化状态对预后的影响北大核心CSCD

目的检测食管胃交界部腺癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O^6-methylguanineDNA methyltransferase,MGMT)基因启动子区甲基化状态以及蛋白表达情况,评价其与临床参数及预后的关系。方法选取107例食管胃交界部腺癌患者,应用甲基化特异性聚合酶链反应(methylmion specific PCR,MSP)检测MGMT基因甲基化情况,免疫组织化学法检测MGMT蛋白表达情况,分析两者与临床特征及生存时间的关系。结果癌组织中MGMT基因启动子区甲基化率显著高于癌旁正常组织;癌组织中MGMT蛋白阳性率显著低于癌旁正常组织。Spearman等级相关分析表明MGMT基因启动子区甲基化与MGMT蛋白表达呈负相关。MGMT基因启动子甲基化及蛋白表达与淋巴结转移、pTNM分期之间具有相关性。多因素Cox回归分析,MGMT基因启动子区甲基化、MGMT蛋白表达及pTNM分期是影响患者生存的独立预后因素。结论 MGMT基因启动子甲基化、MGMT蛋白表达与pTNM分期是影响食管胃交界部腺癌患者预后的独立影响因素。     

子宫内膜息肉及子宫内膜癌组织中雌激素受体β的甲基化与表达研究

目的检测正常子宫内膜、子宫内膜息肉及子宫内膜癌中雌激素受体β（estrogenreceptor—β,ER—β）基因启动子区CpG岛的甲基化状态及ER—β蛋白的表达,同时分析ER—β启动子甲基化与ER—β的表达间的关系,以探讨子宫内膜息肉的发病机制。方法采用免疫组化ELIVISON二步法检测40例正常子宫内膜、40例子宫内膜息肉及26例子宫内膜癌组织中ER—β蛋白的表达,同时运用甲基化特异性PCR（MSP）检测上述组织中ER—β的甲基化情况。结果正常子宫内膜中ER—β的表达较子宫内膜息肉及子宫内膜癌显著增高（均P〈0．01）,子宫内膜息肉与子宫内膜癌则无显著差异（P〉0．05）。正常子宫内膜及子宫内膜息肉组织中ER-β基因甲基化率较子宫内膜癌显著降低（均P〈0．05）。正常子宫内膜、子宫内膜息肉及子宫内膜癌组织中ER—β的阳性表达与ER—β基因启动子甲基化状态均呈负相关。结论子宫内膜组织中ER-β的基因甲基化可能与子宫内膜息肉乃至子宫内膜癌的发生和复发密切相关。     

胃癌组织runt相关转录因子3基因表达与其甲基化状态的关系

目的 探讨胃癌组织中DNA甲基化调控机制对runt 相关转录因子3(Runx3)基因表达的影响.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测70例胃癌组织及其配对的正常胃黏膜组织中Runx3 mRNA表达,Westen blot法检测Runx3蛋白表达,甲基化特异性PCR(MSP)法检测Runx3基因启动子的甲基化状态;应用RT-PCR法检测 DNA甲基转移酶1(Dnmt1)mRNA表达,分析Runx3基因甲基化与Dnmt1 mRNA表达之间的相关性. 结果胃癌组织中Runx3 mRNA表达(0.5740±0.3580)明显低于其配对的正常胃黏膜组织(1.7250±0.4080, P<0.05),胃癌组织Runx3蛋白表达亦明显低于其配对的正常胃黏膜组织(P<0.05).在Runx3 mRNA表达下调的56例胃癌组织中,有28例(50.0%)呈启动子高甲基化状态.胃癌组织中,Runx3甲基化阳性者的Dnmt1 mRNA表达量明显高于Runx3甲基化阴性者(P<0.05),Runx3基因启动子甲基化与Dnmt1转录表达呈正相关(r＝0.64,P<0.05).结论 Runx3基因启动子高甲基化是其基因表达下调的原因之一,可能参与胃癌的发生发展;Dnmt1高表达可能影响Runx3启动子区域甲基化改变.     

子宫内膜癌组织的FNDC10水平及临床意义

目的探讨子宫内膜癌(EC)组织的Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白10(FNDC10)水平及临床意义。方法采用GEPIA分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中EC组织的FNDC10水平,实时定量PCR(QPCR)检测97例EC组织、67例不典型增生子宫内膜组织和42例正常子宫内膜组织的FNDC10水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线以评估组织FNDC10水平诊断EC的效能和最佳阈值,进一步分析FNDC10水平与EC临床病理特征的关系,通过Kaplan-Meier Plotter数据库在线分析FNDC10水平与EC预后的关系。结果GEPIA在线分析显示,174例EC组织的FNDC10水平高于13例正常组织(P<0.05);QPCR结果显示,97例EC组织、67例不典型增生子宫内膜组织和42例正常子宫内膜组织的FNDC10水平依次为2.788±1.253、1.874±0.759和1.041±0.541,EC组织的FNDC10水平高于其余子宫内膜组织,而不典型增生子宫内膜组织的FNDC10水平也高于正常子宫内膜组织,以上差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析显示,组织FNDC10水平诊断EC的曲线下面积为0.900(95%CI:0.850~0.951,P<0.05),当以1.911为最佳诊断阈值时对应的约登指数最大,敏感度和特异度分别为73.20%和97.62%。FNDC10水平与年龄和病理类型无关(P>0.05),而与组织学分级、FIGO分期、肌层浸润深度和淋巴结转移有关(P<0.05)。Kaplan-Meier Plotter在线分析显示EC组织FNDC10水平与总生存期(OS)有关,其中高水平的中位OS为36.03个月,短于低水平的103.73个月(HR=1.98,95%CI:1.31~3.00)。结论EC组织的FNDC10水平升高且促进了该恶性肿瘤的病情进展,与预后有关,其水平有助于判断EC的组织学分级、FIGO分期、肌层浸润深度和淋巴结转移情况,在EC诊治和预后判断上有重要价值。     

MicroRNA-335的表遗传学调控机制及其与胃癌患者临床病理特征的关系

目的:探索miR-335基因启动子区甲基化状态对胃癌组织及细胞系中miR-335表达水平的影响,以及miR-335基因启动子区甲基化状态与胃癌患者临床病理特征以及预后的关系。方法:收集2012年7月1日-2014年7月1日中国医科大学附属第四医院就诊经病理诊断为原发性胃癌并行根治性手术的108例新鲜胃癌组织及配对癌旁组织,1株永生化的胃黏膜上皮细胞系(GES-1)和4株胃癌细胞系(SGC-7901、MKN-45、BGC-823和AGS)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胃癌细胞株及108例胃癌患者肿瘤组织中miR-335的表达水平。甲基化特异性PCR(MSP)方法检测胃癌细胞系及胃癌患者肿瘤组织中miR-335的基因启动子区甲基化状态。分析miR-335基因启动子区甲基化状态对胃癌患者临床病理特征的影响。结果:qRT-PCR检测结果显示,miR-335在胃癌细胞株中的表达水平显著低于正常胃黏膜上皮细胞株GES-1［MKN-45,0.154±0.016-fold(P＜0.01);SGC-7901,0.138±0.013-fold(P＜0.01);BGC-823,0.432±0.076-fold(P＜0.01);AGS,0.749±0.072-fold(P=0.01)］。miR-335在108例胃癌组织中的表达水平较癌旁组织存在明显下降,差异显著（P＜0.001）。MSP的实验结果表明,MKN-45、SGC-7901、AGS和BGC-823细胞株均存在基因启动子区异常高甲基化状态。miR-335基因启动子区的高甲基化状态与肿瘤大小(P=0.004)、淋巴结转移(P=0.046)、淋巴管浸润(P=0.001) 和miR-335 低表达 (P<0.001) 显著相关。结论:miR-335启动子区的高甲基化状态抑制了miR-335在胃癌细胞中的表达,miR-335的基因启动子区异常高甲基化状态与胃癌患者的肿瘤大小、淋巴结转移以及淋巴管浸润显著相关。     

卵巢癌组织中Vasohibin基因表达与启动子区域甲基化的关系

目的探讨卵巢上皮性肿瘤中Vaso-hibin基因mRNA表达与临床特征及其启动子甲基化的关系。方法用RT-PCR检测10例良性卵巢上皮性肿瘤、8例交界性卵巢上皮性肿瘤及30例卵巢癌组织中VasohibinmRNA表达;用甲基化特异聚合酶链反应方法(MSP)检测Vasohibin启动子甲基化。结果各组标本中都有VasohibinmRNA表达,3组Vasohib-in表达的相对值良性卵巢上皮性肿瘤为0.65±0.11,交界性卵巢上皮性肿瘤为0.47±0.13,卵巢癌为0.34±0.14。卵巢癌组织中Vasohibin的表达量较交界性卵巢上皮性肿瘤组织显著降低,t=2.479,P=0.029;交界性卵巢上皮性肿瘤组织的表达量较良性卵巢上皮性肿瘤显著下降,t=3.198,P=0.006。在卵巢癌组织中,Vasohibin的表达与不同临床分期、不同分化程度以及有无淋巴结转移无关。良性卵巢上皮性肿瘤中未发现Vasohibin基因启动子甲基化;交界性卵巢上皮性肿瘤中2例发生启动子甲基化,卵巢癌中11例发生启动子甲基化,甲基化率36.7%。卵巢癌中启动子甲基化组织较未甲基化组织VasohibinmRNA表达显著降低,t=4.671,P=0.000。结论Vasohibin与卵巢癌发生存在明显相关性。Vasohibin启动子甲基化与其mRNA表达抑制密切相关,可能是Vasohibin在卵巢癌中低表达的最主要因素之一。     

卵巢肿瘤组织CXCL1基因表达与临床病理的相关性探讨

目的:探讨趋化因子联接因子1(CXCL1)基因mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达及其与临床病理的相关性。方法:Trizol一步法提取卵巢肿瘤患者卵巢组织总RNA,实时荧光定量PCR技术对80例卵巢恶性肿瘤、40例卵巢良性病变及20例正常卵巢组织中CXCL1基因表达进行定量分析,并分析其与临床病理的相关性。结果:CXCL1 mRNA在卵巢肿瘤组织中表达量比在卵巢良性病变组织中明显升高,P=0.000;卵巢恶性肿瘤晚期(Ⅲ~Ⅳ期)患者组织CXCL1表达量显著高于早期(Ⅰ~Ⅱ期)患者,P=0.005。但Kaplan-Meier生存曲线显示,肿瘤组织中CXCL1基因表达与其预后无关。Cox比例风险模型分析未显示CXCL1表达量是独立判断卵巢恶性肿瘤患者预后的因素。结论:卵巢癌患者肿瘤组织CXCL1 mRNA高表达可能与恶性肿瘤的发生、发展有关。     

子宫内膜癌组织p16基因甲基化检测及其临床意义的研究

目的:研究子宫内膜癌(endometrial carcinoma, EC)组织中p16基因CpG岛甲基化情况及其临床意义.方法:采用甲基化特异性PCR法(methylation specific PCR, MSP)检测38例EC组织、20例相应癌旁正常内膜组织(adjacent normal endometrium,ANE)和22例正常子宫内膜对照组织(normal controls, NC)中p16基因甲基化状态.结果:ANE和NC组织中不存在p16基因全部甲基化, EC及ANE组织p16基因部分甲基化率分别为26.3%(10/38)及30.0%(6/20),EC组织全部甲基化率为31.6%(12/38).EC、ANE和NC组织p16基因甲基化率(全部甲基化与部分甲基化)分别为57.9%(22/38)、30.0%(6/20)和0,差异有统计学意义,χ2=20.821,P＜0.01.p16基因甲基化率与EC临床分期(χ2=4.716,P＜0.05)及病理分化(χ2=5.739,P＜0.05)密切相关.结论:p16基因甲基化在EC发生和发展过程中可能是一个早期的、逐渐发展的事件,可为EC的早期诊断提供一定的理论基础.     

淋巴瘤中RAS相关区域家族5A基因启动子区甲基化状态及其mRNA表达与患者临床表现的关系

目的:探讨RAS相关区域家族5A(Ras-association domain family 5A,RASSF5A)基因在淋巴瘤患者及正常人外周血中DNA甲基化和mRNA表达状态,并研究其与患者临床表现的关系.方法:应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)及RT-PCR方法检测河北医科大学第四附属医院2013年10月至2015年3月收治的弥漫性大B细胞淋巴瘤患者74例、T细胞淋巴瘤患者42例及健康志愿者42人的外周血中RASSF5A基因甲基化及mRNA表达状态.分析其与临床表现之间的关系.结果:RASSF5A在弥漫性大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤中的甲基化率分别为64.9％ (48/74)和73.8％ (31/42),明显高于正常人的7.1％ (3/42) (P ＜0.05);而其mRNA表达量分别为0.54 ±0.17和0.52 ±0.18,均低于正常人的0.86±0.10(P ＜0.05).弥漫性大B细胞淋巴瘤中RASSF5A基因启动子甲基化阳性的mRNA相对表达量(0.51 ±0.18)低于甲基化阴性的mRNA表达量(0.60 ±0.17) (P ＜0.05).T细胞淋巴瘤中RASSF5A基因启动子甲基化阳性的mRNA相对表达量(0.50±0.15)低于甲基化阴性的mRNA表达量(0.63±0.12) (P ＜0.05).RASSF5A基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的甲基化率与患者的LDH、IPI评分及Ki67相关(P＜0.05);RASSF5A基因在T细胞淋巴瘤中的甲基化率与患者的临床分期、结外累及及Ki-67相关(P＜0.05).RASSF5A基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中mRNA的表达量与患者的IPI评分及结外累及相关(P＜0.05);RASSF5A基因在T细胞淋巴瘤中mRNA的表达量与患者的临床分期和结外累及相关(P＜0.05).结论:RASSF5A基因启动子甲基化可能是弥漫性大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤发生的机制之一,mRNA表达沉默可能是表观遗传学机制之一.RASSF5A基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤和T细胞淋巴瘤中主要可能起抑癌基因的作用,与淋巴瘤的侵袭性、恶性进程及预后有关.     

新疆哈萨克族食管癌survivin启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义

目的： 检测消化道肿瘤早期相关基因survivin mRNA在哈萨克族食管癌组织中的表达及其启动子区CpG岛甲基化状态,并进一步探究survivin启动子甲基化是否参与了食管癌的发生。方法：提取哈萨克族食管癌患者癌组织及远端无癌组织RNA,RT-PCR检测组织中survivin mRNA的表达水平,甲基化特异性PCR (methylation specific PCR,MSP)检测survivin启动子区CpG 岛的甲基化状态。结果：在20对食管癌组织标本中,癌组织中survivin mRNA阳性表达率 (95%)明显高于远端无癌组织 (65%) (P＜0.05)。癌组织及远端无癌组织中survivin基因启动子区CpG岛多为杂合型甲基化,且两种组织间甲基化状态无明显差异 (P＞0.05)。结论：survivin mRNA表达水平的增高在哈萨克族食管癌的发生、发展过程中起到了一定的作用,但其表达与启动子区CpG岛甲基化无关,提示甲基化并未直接调控该基因的表达并促进哈萨克族食管癌的发生发展。