青蒿琥酯联合甲氨蝶呤对类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度的青蒿琥酯（ART）和甲氨蝶呤（MTX）对类风湿关节炎（RA）滑膜细胞增殖和凋亡的影响。方法收集RA关节液标本25例,体外分离培养滑膜细胞,以生长良好的3～5代滑膜细胞进行试验,调整细胞浓度,分为对照组和不同质量浓度ART组、MTX组。用四甲基偶氮唑盐比色法测定不同质量浓度的MTX和ART单独或联合作用于滑膜细胞对滑膜细胞增殖的影响;用流式细胞术检测不同质量浓度的MTX和ART单独或联合作用于滑膜细胞对滑膜细胞凋亡的影响。结果ART对滑膜细胞的增殖具有显著的抑制作用。ART质量浓度在3.125～50μg/mL范围内均可抑制RA滑膜细胞生长,且抑制作用随质量浓度增大而增强,具有剂量依赖性;ART12.5μg/mL＋MTX20μg/mL组的抑制作用最强,与其他药物组比较,P〈0.05。各药物作用于滑膜细胞24h后,早期凋亡细胞率与对照组比较,有显著差异（P〈0.05）;ART质量浓度在3.125～25μg/mL范围内作用于滑膜细胞24h后,早期凋亡细胞率与未用ART处理的对照组比较,有显著差异（P〈0.05）,并呈剂量依赖性;当ART的质量浓度达到50μg/mL时,早期凋亡细胞率降低,坏死细胞率却升高（P〈0.05）;ART12.5μg/mL＋MTX5μg/mL组的早期凋亡细胞率较其他药物组显著升高（P〈0.05）,而坏死细胞率却较低（P〈0.05）。结论ART和MTX单独或联合作用均可显著抑制RA滑膜细胞的增殖,诱导其凋亡。     

白藜芦醇体外诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的实验研究

目的探讨白藜芦醇(Res)体外对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞的增殖抑制作用及其对细胞凋亡的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法检测Res对RA滑膜细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞光度分析术(FCM)检测细胞凋亡率及细胞周期时相分布,同时进行细胞的形态学观察。结果MTT的检测结果显示药物浓度和细胞增殖抑制率间具有正相直线相关关系(P<0.01),Res体外作用类风湿关节炎滑膜细胞24 h对滑膜细胞的IC50为365μmol.L-1。FCM检测和细胞形态学观察结果显示Res可阻滞滑膜细胞于S期并诱导细胞凋亡,但细胞凋亡率并不完全与药物浓度成正相关。作用24 h时Res诱导类风湿关节炎滑膜细胞发生凋亡的最佳浓度是在200~400μmol.L-1。结论Res对类风湿关节炎滑膜细胞具有较强的增殖抑制作用,在一定药物浓度范围内,随药物浓度的增加Res可使细胞凋亡率升高,但超过一定作用浓度,药物的细胞毒作用增强,细胞凋亡率则成下降趋势。     

类风湿关节炎细胞凋亡的研究现状

类风湿关节炎是一种自身免疫病，有关类风湿关节炎细胞凋亡的研究成为近年来的研究热点，本探讨了类风湿关节炎滑膜细胞的凋亡异常和影响其凋亡的因素如凋亡基因和细胞因子等，并简要阐述了与类风湿关节炎滑膜细胞凋亡有关的信号转导途径，了解此方面内容的研究进展必将有助于类风湿关节炎的治疗和新药开发。     

类风湿关节炎滑膜细胞信号转导机制研究进展

滑膜细胞因子IL 1、TNF α、EGF、TGF β、PDGF、IGF 1在RA发病过程中可活化细胞内两条重要的信号通路 :受体蛋白酪氨酸蛋白激酶 Ras MAPK途径和非受体蛋白酪氨酸蛋白激酶 JAK STAT途径 ,其中受体蛋白酪氨酸蛋白激酶 Ras MAPKs信号转导路径异常是RA慢性滑膜炎的典型特征。研究G蛋白 AC cAMP信号转导通路及该通路与酶偶联受体 Ras MAPKs信号转导通路间的交互联系将具有十分重要的意义。     

植物药对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的研究

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种常见的致残性风湿性疾病，目前尚无根治的方法。植物药在RA的治疗中发挥了一定作用，多年来许多学者在植物药治疗RA机制方面进行了研究，为临床应用提供了理论依据。     

类风湿关节炎与痛风性关节炎的滑膜对比

目的探讨类风湿关节炎与痛风性关节炎的滑膜差异性。方法选取2012年1月～2013年6月经超声诊断仪初步确诊为类风湿关节炎患者42例及痛风性关节炎患者45例,并采用关节镜探查术对两种关节炎患者患病关节作进一步检查,对比两种关节炎患者关节镜和超声表现。结果两种关节炎患者在滑膜厚度、滑膜动脉阻力指数比较中差异无统计学意义（P〉0．05）。关节镜下,痛风性关节炎患者主要表现为滑膜增生,白色结晶沉积,而类风湿关节炎患者主要表现为滑膜厚度增厚,与滑膜囊积液之间存在明显的分界,厚薄不均,绒毛状结构突起。结论类风湿关节炎与痛风性关节炎滑膜厚度及滑膜动脉阻力指数并无明显差异,但两种关节炎患者滑膜关节镜表现差异明显,因此关节镜对鉴别诊断类风湿关节炎与痛风性关节炎具有较高的参考价值。     

三氧化二砷诱导人类风湿性关节炎滑膜细胞凋亡研究

目的：研究三氧化二砷（arsenic trioxide，As2O3）对体外培养的人类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）滑膜细胞凋亡诱导作用。方法：酶消化法进行人关节滑膜细胞原代培养，MTT法研究As2O3对RA滑膜细胞活力影响；用光镜、电镜、DNA凝胶电泳等方法检测As2O3诱导RA滑膜细胞凋亡。结果：成功体外培养人关节滑膜细胞。MTF法显示As2O3可抑制RA滑膜细胞活力；光镜、电镜下发现As2O3作用于RA滑膜细胞可出现凋亡表现；DNA凝胶电泳显示有凋亡梯带出现。结论：As2O3可以诱导RA滑膜细胞凋亡。     

鱼腥草素钠抗类风湿关节炎滑膜增殖作用的实验研究

目的研究鱼腥草素钠(SH)抗类风湿关节炎(RA)的滑膜增殖作用。方法 Wistar大鼠随机分成5组:对照组、模型组、SH 130 mg·kg-1组、SH 260 mg·kg-1组、SH 520 mg·kg-1组。建立大鼠胶原诱导的类风湿关节炎(CIA)模型,计数方法测定大鼠关节炎指数(AI),称重法比较大鼠的体重变化,HE染色法光镜观察关节病理形态学变化,酶联免疫法(ELISA)检测血清中细胞因子白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、PKA、c AMP水平及免疫组化检测滑膜细胞凋亡情况。结果SH干预组关节炎指数较模型组低,体重降低不明显,关节破坏较模型组轻,细胞因子水平较模型组明显减低,滑膜细胞凋亡较模型组明显(P<0.01)。结论 SH可以增加RA滑膜细胞的凋亡,降低CIA大鼠的AI及炎症因子的水平。     

miR-214-5p靶向SEMA4 C基因调控类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和侵袭的分子机制

目的 研究miR-214-5p对类风湿性关节炎滑膜成纤维细胞(RA-FLSs)增殖和侵袭的影响和潜在的分子机制.方法 根据转染物将RA-FLSs细胞分为miR-NC组、miR-214-5p组、si-NC组、si-SEMA4C组、anti-miR-NC组、anti-miR-214-5p组、miR-214-5p+pcDNA...     

类风湿关节炎滑膜液对体外诱导树突细胞的影响

目的了解树突细胞(DCs)在类风湿关节炎(RA)发病机制中的作用,对RA滑膜液是否能影响DCs的活化状态进行了研究。方法体外诱导外周血单个核细胞转化成为非活化的DCs,用此诱导的DCs再经RA滑膜液培养48h,然后用流式细胞仪对细胞表面表达的人类白细胞抗原(HLA)-DR和共刺激分子CD80进行分析。结果经滑膜液培养的DCs表达CD80为(45±13)%高于对照组的(26±6)%,差异有统计学意义;经滑膜液培养的DCs表达HLA-DR为(67±16)%高于对照组的(60±4)%,差异无统计学意义。结论 RA滑膜液在体外能诱导DCs活化。     

基于RhoA/ROCK通路探讨桔梗提取物对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖及转移的影响

目的 探讨桔梗提取物(PGE)对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法 将成纤维样滑膜细胞MH7A细胞分为对照组、PGE-L组(25 mg·L^-1 PGE)、PGE-M组(50 mg·L^-1 PGE)、PGE-H组(100 mg·L^-1 PGE)、PGE+血管紧张素(Ang)Ⅱ组[100 mg·L^-1 PGE+100 nmol·L^-1 Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho激酶(ROCK)通路激活剂AngⅡ],给予相应的处理。采用CCK-8法、流式细胞术、Transwell实验分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭情况,Western blot法检测相关蛋白表达水平,GST-pull down法检测细胞中RhoA活性。结果 与对照组比较,PGE-L组、PGE-M组、PGE-H组的吸光度值(PGE处理24、48、72h)、迁移及侵袭细胞数目、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、ROCK1、ROCK2蛋...     

雷公藤甲素对类风湿关节炎患者滑膜成纤维样细胞增殖的体外抑制作用研究

目的:研究雷公藤甲素(TP)对体外培养的类风湿关节炎(RA)患者成纤维样滑膜细胞(FLS)增殖的影响。方法:从5例RA患者的膝关节置换术或滑膜切除术中获得滑膜组织,经分离、培养、鉴定得到FLS后分别与0(空白对照)、50、100、200 nmol/ml TP共孵育24、48、72 h。采用MTT法检测TP对FLS增殖的影响,计算增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果:50、100、200 nmol/ml TP对FLS的增殖抑制率为17.46%~52.56%,且抑制作用与药物浓度呈正相关。与空白对照组比较,100、200 nmol/ml TP作用后G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,差异有统计学意义(P<0.05);200 nmol/ml TP可诱导细胞凋亡。结论:TP对RA患者体外培养的FLS具有一定的增殖抑制作用并可诱导其凋亡,这可能是TP治疗RA的机制之一。     

lncRNA EGFR-AS1靶向miR-577对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响

摘要：目的:研究长链非编码RNA（lncRNA） EGFR-AS1对微小RNA-577（miR-577）的靶向关系及对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR（q PCR）检测卵巢癌组织中lncRNA EGFR-AS1和miR-577表达。Lnc Base Predicted v.2预测和双荧光素酶报告实验分析lncRNA EGFR-AS1与miR-577的靶向关系。卵巢癌细胞SKOV3中转染si-EGFR-AS1或miR-577,噻唑蓝（MTT）和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡,蛋白质印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、p21、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）表达。si-EGFR-AS1和anti-miR-577共转染,观察抑制miR-577表达在干扰lncRNA EGFR-AS1表达诱导的SKOV3细胞增殖和凋亡中的作用。结果:卵巢癌组织中lncRNA EGFR-AS1表达量显著高于癌旁组织,miR-577表达量显著低于癌旁组织（P<0.01）。lncRNA EGFR-AS1与miR-577具有靶向结合位点,转染miR-577的WT-EGFR-AS1细胞荧光素酶相对活性显著低于转染miR-NC组（P<0.01）。干扰lncRNA EGFR-AS1表达明显降低SKOV3细胞24,48,72 h的吸光度（A）值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达量,显著增加细胞凋亡率及p21、Bax蛋白水平（P<0.05或P<0.01）。miR-577过表达显著降低SKOV3细胞48和72 h的A值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平,显著提高细胞调亡率及p21、Bax蛋白表达量（P<0.05）。与si-EGFR-AS1和anti-miR-NC共转染比较,si-EGFR-AS1和anti-miR-577共转染显著减少SKOV3的细胞凋亡率及p21、Bax蛋白表达量,显著提高24,48,72 h的A值及Cyclin D1、Bcl-2蛋白水平（P<0.05）。结论:lncRNA EGFR-AS1在卵巢癌中表达上调,干扰lncRNA EGFR-AS1表达可抑制卵巢癌细胞增殖,并诱导凋亡,其作用机制与靶向调控miR-577表达有关。     

lncRNA HOXC13-AS调控miR-204-5p对食管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)同源盒基因C13反义RNA(HOXC13-AS)对食管癌细胞增殖和凋亡的影响,探讨其潜在分子机制.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测食管癌组织和相应癌旁组织中lncRNA HOXC13-AS表达水平.将食管癌细胞Eca-109分为si-NC组、si-HOXC13-A...     

MAPKs信号转导在类风湿关节炎滑膜细胞中作用及其药物的影响

MAPKs信号转导途径的活化是RA慢性滑膜炎的典型特征,通过这一途径诱导滑膜细胞胞浆蛋白磷酸化,进而使转录因子和核蛋白如cfos、cjun、AP1和NFκB等磷酸化,从而促进细胞增殖和活化。上述机制研究对于RA发病机制的深入了解以及研制开发治疗类风湿关节炎的新型药物具有重要的意义。     

荜茇对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的影响

目的:研究筚茇治疗类风湿性关节炎的作用机制。方法:以佐剂性关节炎大鼠(AA)作为实验模型,观察滑膜细胞凋亡的情况。结果:筚茇确能显著地提高AA大鼠滑膜细胞的凋亡率。结论:筚茇可增加滑膜细胞的凋亡率,阻止病变关节部位的破坏,可以提高RA的治疗效果。     

成纤维样滑膜细胞原代培养及其在类风湿关节炎治疗机制研究中的应用进展

目的:综述成纤维样滑膜细胞(FLS)及其在类风湿关节炎(RA)药效作用机制研究中的应用进展。方法:以"成纤维样滑膜细胞""类风湿关节炎""中药单体""滑膜细胞""Arthritis""Fibroblast-like synoviocytes"为关键词,组合检索2006年1月-2015年10月在Pub Med、中国知网、维普等数据库中对FLS原代培养及其在RA治疗机制研究中的应用文献进行总结和归纳。结果:共查阅到相关文献68篇,其中有效文献32篇。FLS原代培养成功率较高,培养方法多样且日趋完善,在RA的治疗机制研究中得到了广泛的应用;同时,中药及化学合成药、激酶抑制剂等可通过NF-κB、Akt等信号通路抑制炎症因子或相关蛋白基因从而达到治疗RA的目的。结论:FLS体外试验在RA相关研究中得到广泛的应用,治疗药物如中药及化学合成药、激酶抑制剂通过细胞分子水平研究在信号通路的介导下都对RA有治疗作用。     

尕代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞及成熟细胞系生长特性的比较

目的通过对原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞及成熟细胞系生长特性进行比较,为类风湿关节炎（RA）研究用细胞提供多重选择。方法分离培养原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞,传至第三代,与成熟细胞系镜下观察细胞形态。此外,以相同细胞数接种,观察细胞增殖速度。结果形态上原代类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞与成熟细胞系有所差别,且增殖速度细胞系快于原代细胞。结论成熟细胞系可在一定程度上反映原代细胞的状态,并用于RA相关疾病研究。